薯蓣丸对5/6肾切除慢性肾衰大鼠血清Cr BUN及MMP-9 TIMP-1影响的实验研究

目的:观察薯蓣丸对5/6肾切除慢性肾衰(CRF)大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)的影响,探讨薯蓣丸对CRF的疗效及可能机制。方法:选取70只重为180~220g的SD雄性大鼠,其中10只仅分离皮下组织和肌肉,露出左肾,不行手术切除,为空白组;其余都采取5/6肾切除造模,造模后随机抽取10只大鼠血清检查其肾功,证明其造模成功后,再将造模成功的大鼠随机分为3组(造模时,死亡24只,其中麻醉时死亡4只,术中死亡8只,术后感染死亡12只),每组12只,即薯蓣丸组、包醛氧淀粉组、模型组。包醛氧淀粉组和薯蓣丸组分别用包醛氧淀粉2g/kg·d,薯蓣丸1.8g/kg·d,每天定时定量灌胃,共治疗40天,空白组和模型组采用等量生理盐水灌胃。实验结束后,观察各组大鼠的一般状态,检测各组大鼠Cr、BUN,用ELISA法测血清TIMP-1和MMP-9。结果:模型组与空白组Cr、BUN比较,差异显著(P0.01),说明造模成功;薯蓣丸组降低CRF大鼠Scr、BUN水平与模型组比较,差异显著(P0.01);包醛氧淀粉组降低CRF大鼠Scr、BUN水平与模型组比较,差异显著(P0.01),薯蓣丸组降低Scr、BUN水平优于包醛氧淀粉组,两者比较(P0.05)。造模组大鼠血清TIMP-1/MMP-9比值明显高于空白组,两者比较差异显著(P0.01),薯蓣丸组降低TIMP-1/MMP-9比值与造模组比较,差异有显著性意义(P0.01);薯蓣丸组降低TIMP-1/MMP-9比值优于包醛氧淀粉组,两者比较(P0.05)。结论:薯蓣丸可保护肾功能,延缓肾功能恶化,其可能机制是通过降低CRF大鼠血清中TIMP-1/MMP-9比值来实现的。     

加味薯蓣丸对腺嘌呤所致慢性肾功能衰竭大鼠血清BUN、SCr及TNF-α的影响

目的：观察加味薯蓣丸对腺嘌呤所致慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法：将60只雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、预防组、加味薯蓣丸组、尿毒清颗粒组,每组12只大鼠,除空白组给予等量生理盐水灌胃外,其余组用腺嘌呤250mg／（kg·d）连续灌胃21天制作大鼠CRF模型,预防组同时给予加味薯蓣丸治疗,造模结束后,处死预防组大鼠,并检测空白组、预防组及模型组大鼠的血清BUN和SCr,观察预防性治疗效果并讧明造模成功,再分别用加味薯蓣丸、尿毒清颗粒灌胃治疗31天（模型组及空白组给予等量生理盐水灌胃）。实验结束后,观察各组大鼠一般状态,检测大鼠血清BUN、SCr,用放射免疫法测大鼠血清TNF-α含量。结果：模型组与空白组BUN、SCr比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）,说明造模成功;预防组与模型组比较,BUN、SCr有所降低（P〈0．01）,说明预防组预防性治疗有效。加味薯蓣丸组在降低CRF大鼠血清BUN、SCr方面与模型组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）;尿毒清颗粒组在降低CRF大鼠血清BUN、SCr方面与模型组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）,加味薯蓣丸组降低血清SCr的疗效优于尿毒清颗粒组,2组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。模型组大鼠血清TNF-α含量明显高于空白组,差异有非常显著性意义（P〈0．01）,加味薯蓣丸组大鼠血清中TNF-α的含量降低,与模型组比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）,加味薯蓣丸组降低TNF-α的含量的疗效优于尿毒清颗粒组（P〈0．05）。结论：加味薯蓣丸可延缓CRF的进展、保护肾功,其疗效机制可能是通过降低血清TNF-α．含量来实现的。     

软肾散对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1及α—SMA的影响

目的：观察软肾散对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质纤维化（RIF）的影响及可能的作用机制。方法：将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利治疗组和软肾散治疗组,后3组建立UUO大鼠模型。治疗结束后测定大鼠肾功能、行HE染色观察肾组织病理变化,计算肾小管间质病理积分,用免疫组化方法测定肾TGF—β1、α-SMA的表达情况。结果：两治疗组大鼠BUN、SCr低于模型组（P〈0．01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P〉0．05）;肾间质病理积分显示两治疗组显著低于模型组（P〈0．01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P〉0．05）;免疫组化结果表明,两治疗组TGF—β1和α—SMA的表达均低于模型组（P〈0．01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：软肾散能一定程度上减轻UUO大鼠RIF程度,其作用机制可能与下调TGF—β1和α-SMA表达有关。     

银杏叶联合依那普利对单侧输尿管梗阻肾间质纤维化的影响

目的观察银杏叶联合依那普利对肾间质纤维化的防治作用及其效果。方法将75只雄性SD大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、依那普利组、银杏叶组及依那普利加银杏叶组,每组15只。除假手术组外,采用单侧输尿管梗阻（UUO）建立肾间质纤维化模型。银杏叶组、依那普利组、依那普利组加银杏叶组分别给予银杏叶300mg／（kg·d）、依那普利粉末10mg／（kg·d）及银杏叶加依那普利联合灌胃,每日1次,假手术组及模型组给予等容积0．9％氯化钠注射液灌胃治疗。于实验第3、7、14d分批处死大鼠,各组每次处死5只。留取大鼠结扎侧肾组织进行形态学和免疫组织化学观察。观察指标：肾组织经HE染色观察梗阻侧肾组织病理学的改变,用免疫组织化学SP方法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF—β1、）、核因子KB（NF—KB）、仪平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况及肾组织中胶原蛋白与肾质量之比。结果与假手术组相比,模型组中肾间质水肿,单个核细胞浸润,肾间质纤维组织相对面积显著扩大,TGF—β1、NF—κB、α-SMA的表达及肾组织中胶原蛋白含量表达明显上调（P〈0．05）。药物干预后,上述上调指标均被显著抑制（P〈0．05）,其中依那普利组加银杏叶组与依那普利组、银杏叶组比较差异有统计学意义（P〈0．05）,而依那普利组与银杏叶组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论银杏叶片能够减少UUO大鼠肾间质炎性细胞浸润,减少肾间质胶原蛋白的含量,有防止UUO大鼠肾间质纤维化的作用,银杏叶和依那普利两者合用抗RIF有协同作用。     

虎潜丸对去卵巢大鼠骨密度和TGF-β2表达的影响

目的：观察虎潜丸对去卵巢大鼠骨密度和转化生长因子-B2（TGF-β2）的影响,探讨“肾主骨”理论与去卵巢大鼠模型骨密度和TGF-β2的相关性。方法：将40只SD大鼠按随机原则分为虎潜丸组、雌激素组、模型组、假手术组,每组10只。对除假手术组外的其余3组大鼠行卵巢摘除手术,术后7d各组予相应药物灌胃治疗。干预12周后,观察比较各组大鼠离体第5腰椎骨骨密度和大鼠腰椎松质骨、肾组织中TGF-β2的表达强度。结果：虎潜丸组和雌激素组大鼠骨密度、腰椎骨及肾组织中TGF-β2表达水平均高于模型组,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）。结论：虎潜丸能提高去卵巢大鼠模型腰椎骨骨密度,并上调腰椎松质骨、肾组织中TGF-β2的表达。     

尿毒康对慢性肾衰竭阳虚大鼠肾组织纤维化的影响

目的：观察尿毒康对慢性肾衰阳虚型模型大鼠肾纤维化的影响。方法：40只SD雄性大白鼠随机抽取10只作为正常对照组,其余30只采用5／6肾切除改良法配合丙基硫氧嘧啶灌胃制成慢性肾衰阳虚模型。造模成功后,再随机分为慢性肾衰阳虚组以及尿毒康组各15只。8周后处死大鼠取肾脏进行免疫组织化学染色,检测Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子β1（TGFβ1）、基质金属蛋白酶-2（MMP2）在肾组织中的表达。结果：与正常对照组比较,慢性肾衰阳虚组Ⅳ型胶原、FN、TGFβ1均表达较强（P〈0．01）,而MMP2表达较弱（P〈0．01）;与慢性肾衰阳虚模型组比较,尿毒康组Ⅳ胶原、FN、TGFβ1的表达均明显较弱（P〈0．05,P〈0．01）,MMP2表达较强（P〈0．05）。结论：尿毒康能减轻慢性肾衰阳虚型大鼠肾纤维化,作用机制可能与上调MMP2的表达及降低TGFβ1表达有关。     

贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织TGFβ-Smads 表达的影响

目的：观察贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β（TGF -β1）信号通路分子 mR-NA 表达的影响,探讨其防治肺纤维化的作用及机制。方法：气管内滴入博来霉素（5mg/kg）建立大鼠肺纤维化模型。将40只 Wistar 大鼠随机分为四组（每组10只）：对照组、肺纤维化模型组、强的松组和贝丹益肺胶囊组。 HE 染色检测肺组织病理改变,原位杂交技术检测肺组织 Smad4 mRNA 表达,实时荧光定量 RT -PCR 技术检测 TGF -β1mRNA 表达。结果：胶原纤维染色显示模型组大鼠肺内胶原纤维表达显著高于对照组和贝丹益肺胶囊治疗组（P ＜0．05）。大鼠肺内 TGF -β1及 Smad4 mRNA 表达在模型组显著高于对照组（P ＜0．01）,在贝丹益肺胶囊治疗组显著低于模型组（P ＜0．05）。结论：贝丹益肺胶囊能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度,其作用机制主要是通过抑制 TGF -β1及 Smad4 mRNA 表达上调,从而干扰 TGF -β1/Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的。     

保元排毒丸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏Wnt/β-catenin 信号通路的影响

目的：观察保元排毒丸对单侧输尿管梗阻（Unilateral Ureteral Obstruction UUO）模型大鼠肾脏病理的影响及对Wnt/β-catenin信号转导通路的调控。方法：48只健康清洁级雄性SD大鼠,随机分为假手术组、UUO组、厄贝沙坦组（12.5g·kg-1/天）、保元排毒丸低、中、高剂量组（1.25g·kg-1/天、2.5g·kg-1/天、5.0g·kg-1/天）,每组8只;除假手术组只分离输尿管不结扎外其余均制备右侧输尿管梗阻肾纤维化模型,造模第二天开始予相应的药物灌胃,假手术组和UUO组给予自由进食和生理盐水灌胃,共灌14天。末次灌胃24小时后取右肾进行HE 染色观察肾脏病理改变,Masson 染色观察肾组织胶原沉积情况;Western Blot 法测肾组织E-cadherin、Collagen I、β-Catenin表达水平;Real-time PCR检测Wnt4、β-catenin mRNA表达。结果：与假手术组比较,UUO组和各给药组肾小管、肾间质病变重、肾纤维化重（P＜0.01）;与UUO组比较,保元排毒丸低、中、高剂量组和厄贝沙坦组肾小管、肾间质病变明显减轻、肾纤维化减轻（P＜0.01）;UUO组E-cadherin表达较保元排毒丸各剂量组、厄贝沙坦组和假手术组明显减少（P＜0.01）;保元排毒丸各剂量组和厄贝沙坦组Collagen I、β-Catenin表达明显少于UUO组（P＜0.01）;UUO组Wnt4、β-catenin mRNA表达明显高于假手术组（P＜0.01）,保元排毒丸各剂量组和厄贝沙坦组Wnt4、β-catenin mRNA表达明显低于UUO组（P＜0.01）。结论：保元排毒丸有改善肾脏纤维化的作用,其机理可能与调控Wnt/β-catenin信号转导通路有关。     

地龙、乌梢蛇对系膜增生性肾炎模型大鼠肾组织TLR4、TGF—β1表达的影响

目的观察地龙、乌梢蛇对系膜增生性肾炎（MsPGN）大鼠的治疗作用及对Toll样受体4（TLR4）、转化生长因子B,（TGF—β1）表达的影响。方法选用SPF级Wistar大鼠60只,采用改良慢性血清病法复制MsPGN模型并分组,各治疗组大鼠分别予不同剂量地龙、乌梢蛇颗粒制剂灌胃,正常对照组、模型组予等量生理盐水灌胃。治疗8周,检测各组大鼠24h尿蛋白定量,HE染色观察各组大鼠肾组织病理改变;免疫组化（SABC）法检测,TLR4、TGF-β1在各组大鼠肾组织的表达。结果模型对照组24h尿蛋白定量明显高于正常对照组（P＜0．01）,地龙、乌梢蛇各治疗组尿蛋白定量明显低于模型对照组（P〈0．05）,TLR4、TGF—β1的表达模型组较正常组增多（P＜0．01）,各治疗组较模型对照组明显减少（P＜0．01）。结论地龙、乌梢蛇能减少（MsPGN）模型大鼠蛋白尿,改善。肾脏病理变化,这可能与抑制。肾脏组织中TLR4、TGF—β1的过度表达有关。     

肺痹汤对肺纤维化大鼠肺组织中p38分裂原激活蛋白酶及转化生长因子β1的影响

目的 探讨肺痹汤防治肺纤维化作用及其机理。方法 SD大鼠随机分为假手术组，模型对照组，肺痹汤高、中、低剂量组。西药对照组，每组10只。用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型后，肺痹汤高、中、低剂量组每天灌服肺痹汤，西药对照组灌服醋酸强的松，28天后处死大鼠，比较各组大鼠肺组织中p38分裂原激活蛋白激酶（p38 MAPK）以及转化生长因子（TGF—β1）的表达。结果 模型对照组大鼠肺组织中p38 MAPK及TGF—β1表达均明显高于假手术组及各给药组（P〈0．05），肺痹汤能明显减少大鼠肺组织中p38 MAPK以及TGF—β1表达，与模型对照组比较差异具有显著性意义（P〈0．05）。结论 肺痹汤能明显减少博莱霉素所致的大鼠肺组织中p38 MAPK及TGF—β1表达，这可能是其防治肺纤维化的作用机理。．     

基于ICP-MS法的桂枝茯苓胶囊中无机元素分析

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立桂枝茯苓胶囊(GFC)中29种无机元素(Li、Be、B、Na、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sn、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb、Bi)的测定方法。方法 GFC样品以浓硝酸为消解试剂经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法测定其中29种无机元素含量。结果待检测的29种无机元素在各的自线性范围内线性关系良好,r≥0.999 4;各元素的检出限在0.012~4.105μg/L,定量限在0.045~14.500μg/L,平均加样回收率在79.88%~105.76%,RSD≤4.55%。测定的12批样品中Ca、Na、Mg含量较高,均超过300μg/g;Fe、Mn、Sr含量也相对较高,而有害元素Be、As、Cd、Sb、Hg、Tl、Bi含量相对较低,均在0.030μg/g以下。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于GFC中无机元素的测定。     

10 Jahre Akupunktur mit Stoßwellen

In 2002, an already available shock wave device was modified according to my suggestions to enable its use for the stimulation of acupuncture points. Since then, the device has been used in the treatment of more than 1 000 patients.     

基于ICP-MS法的麝香保心丸中26种无机元素分析

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立麝香保心丸中26种无机元素(Li、Na、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb、Bi)的测定方法。方法麝香保心丸样品以浓硝酸为消解试剂经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法测定其中26种无机元素的量。结果待检测的26种元素线性关系良好,相关系数r≥0.999 4,各元素的检出限在0.010~2.987μg/L,定量限在0.035~10.000μg/L,回收率在79.88%~105.76%,RSD≤4.55%。测定的12批样品中Ca、Mg、Na、Fe量较高,均超过1.000 mg/g;Mn、Cu、Zn、Al、Ga量也相对较高,而Sb、Hg、Tl、Bi量相对较低,均在0.050μg/g以下。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于麝香保心丸中无机元素的测定。     

基于ICP-MS法分析九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素(Li、Mg、Cd、Sn、Al、Mn、Fe、Ti、V、Co、Zn、Ga、Cr、Ni、Tl、Pb、Cu、As、Be、B、Sb、Ba、Sr、Hg、Bi)的测定方法。方法九味熄风颗粒样品经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法进行测定。结果检测的25种元素线性关系良好,相关系数R2≥0.999 2,各元素的检出限在0.009~16.051μg/L,回收率在70.75%~107.66%,RSD≤6.44%。测定的6批样品中Cr、Sn、Hg、Pb均未检出,Tl、Cd、As、Cu的量均较低或未检出,Cd≤0.011μg/g,Cu≤0.373μg/g,Tl≤0.021μg/g,As≤0.571μg/g。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于九味熄风颗粒中重金属及微量元素的测定。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定脉络宁注射液中25种矿物质元素

目的建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)直接稀释测定脉络宁注射液中25种矿物质元素(Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Al、B、Ba、Co、Cr、K、Li、Mo、Na、Ni、P、Pb、Sr、Th、Ti、V、As、Cd和Hg)的方法。方法分别对微波消解条件和测试条件进行考察;样品经微波消解后,采用电感耦合质谱仪测定25种矿物质元素,并对测定方法学进行考察。结果确定最佳消解条件为3步缓慢升温:400 W 80℃升温10 min,保留5 min;600 W 120℃升温10 min,保留5 min;900 W 200℃升温20 min,保留20 min;25种矿物质元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.999 6,精密度、稳定性和重复性试验的RSD均符合定量分析要求;加标回收率为94.7%~106.1%,RSD在0.34%~2.79%。脉络宁注射液中检测出Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Al、B、Ba、Co、Cr、K、Li、Mo、Na、Ni、P、Pb、Sr、Th、Ti、V,未检出As、Cd和Hg。结论该方法简便、迅速、准确,适用于脉络宁注射液中25种矿物质元素的同时测定。     

蜂蜜炼制前后黄酮类成分种类和含量变化分析

目的研究中药辅料蜂蜜炼制前后黄酮类成分变化。方法参考《中药药剂学》,对不同来源的6种蜂蜜进行炼制。供试品经固相萃取法富集黄酮类成分。采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-TQ-MS)法测定,Thermo Accucore RP-MS色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L/min,柱温30℃。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式,多反应监测模式(MRM)扫描分析。结果蜂蜜中共检测到12种黄酮类成分,包括黄酮苷元、二氢黄酮苷元和异黄酮苷元。黄酮苷元有8种:槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、高良姜素和白杨素;二氢黄酮苷元有3种:短叶松素、柚皮素和乔松素;异黄酮苷元染料木素。不同蜜源蜂蜜所含黄酮类成分种类和含量存在明显差异。6个蜂蜜样品炼制后,都发现了蜂蜜中没有报道过的芦丁和芸香柚皮苷,12种检测到的蜂蜜黄酮类成分在炼制后其量都有不同程度的变化,椴树蜜的槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、乔松素和白杨素量均有增加,短叶松素、柚皮素和高良姜素量没增加反而还有下降的;洋槐蜜中除芹菜素量增加不明显外,其余均有所增加,尤其是槲皮素和桑黄素增加的较为明显;百花蜜和枣花蜜12种黄酮类成分量均显著增加。结论炼制可造成蜂蜜中黄酮类成分的种类和含量发生改变。     

5th Asia Pacific ISSX Meeting Held on May 9-12, 2014, in Tianjin,China

正The 5th Asia Pacific ISSX Meeting was organized by International Society for Study of Xenobiotics(ISSX)and Chinese Society for Study of Xenobiotics(CSSX)and co-organized by Tianjin Institute of Pharmaceutical Research and Committee of Pharmaceutical Engineering of Chinese Pharmaceutical Association(CPECPA).Professor Changxiao Liu was a co-Chair of     

State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine(Macau University of Science and Technology)

正The State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine(Macau University of Science and Technology)was fbrmally established on January 25,2011 upon approval from the Ministry of Science and Technology of China.It is so far the only State Key Laboratory(SKL)specifically ill the field of TteditiMial Chinese Medicine(TCM)over the country.It is It also is also thejoined-laboratory the joined-labo]partner of the State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs at the Peking     

基于ICP-MS法分析银杏叶系列品种中25种无机元素

目的建立银杏叶制剂中25种无机元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,并对不同剂型银杏叶制剂中无机元素量进行比较分析。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定25种无机元素量,绘制无机元素指纹谱图,并进行方法学考察。结果 25种无机元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.950 0,精密度、稳定性和重复性试验的RSD值均符合定量分析要求;加样回收率为91.35%～108.86%,RSD在0.05%～4.45%。银杏叶制剂中检测了25种无机元素量,并绘制无机元素指纹图谱,发现其谱图具有一定的特征性;银杏叶片中元素Hg、Al、Cr的量较高,有害无机元素的量超标应引起关注。结论通过无机元素在银杏叶制剂中的组成分布及其量的变化规律研究,为银杏叶制剂的质量控制及安全性评价提供依据,同时为临床使用提供一定参考。