MYCN与神经母细胞瘤相关性研究进展

神经母细胞瘤是起源于神经嵴细胞的恶性肿瘤，发病率居儿童恶性肿瘤第四位，仅次于白血病、脑瘤、淋巴瘤。MYCN 是MYC家族成员，参与多种生理和病理过程，包括细胞生长和凋亡、新生血管形成和肿瘤浸润与转移等，MYCN 在肿瘤的发生发展过程中所起的作用正日益受到重视。本文对MYCN与神经母细胞瘤的关系作一综述。     

荧光定量RT-PCR 检测神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA的表达

目的：MYCN基因表达对神经母细胞瘤的治疗及预后评估有指导意义,目前国内对于MYCN基因mRNA的定量检测未见报道,该研究拟采用SYBR 绿色荧光染料Ⅰ(SYBR GREEN Ⅰ) 实时检测的逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞 MYCN基因mRNA的表达,并对其可行性及实用性进行研究,力争探索出微量瘤标本的MYCN基因mRNA定量检测的可行方法。方法：提取神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 细胞总RNA,采用SYBR GREEN I 实时检测的RT-PCR检测其MYCN基因mRNA的表达,并用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照,将MYCN基因的mRNA拷贝数与GAPDH的拷贝数相除,结果为单细胞MYCN基因mRNA的表达水平。结果：反应标准曲线有良好的相关性( R2>0.99), PCR 产物特异, 神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达水平为17.4±1.2。结论：只要严格控制PCR 反应条件,SYBR GREEN Ⅰ定量RT-PCR 法可以作为一种良好的定量PCR方法对神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达进行检测,此方法为临床微量神经母细胞瘤瘤组织的MYCN基因mRNA的定量检测提供了可能。［中国当代儿科杂志,2007,9（1）：47-50］     

苦参碱抑制神经母细胞瘤LA-N-5细胞增殖及MYCN基因mRNA的表达

目的：神经母细胞瘤是4岁以下儿童最常见的恶性实体肿瘤,MYCN基因的高表达导致预后更加恶劣。苦参碱作为中药苦参的重要成分对多种肿瘤有治疗作用,该实验拟应用苦参碱作用神经母细胞瘤细胞(LA-N-5),对肿瘤细胞增殖及MYCN基因mRNA表达受抑制情况进行初步研究,希望可以为神经母细胞瘤的治疗开拓新的思路。方法：以终浓度为0.25 mg/mL,0.50 mg/mL,0.75 mg/mL,1.00 mg/mL苦参碱作用神经母细胞瘤LA-N-5细胞, MTT法检测LA-N-5细胞增殖情况变化,采用SYBR 绿色荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR检测MYCN基因mRNA表达受抑制情况。结果：苦参碱对LA-N-5细胞增殖的抑制呈明显的剂量、时间依赖性,随剂量的增加,作用时间的延长,抑制效果逐渐加强。1.00 mg/mL作用72 h后肿瘤细胞增殖抑制效率达36.3%,单细胞MYCN基因mRNA表达9.7±0.35拷贝,抑制效率达44.6%。结论：应用苦参碱在体外环境作用LA-N-5细胞,可以有效抑制该细胞的增殖、原癌基因MYCN mRNA的表达,为临床上神经母细胞瘤的治疗开拓了新的思路。     

RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞MYCN基因的初步研究

目的对RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞（LAN-5）MYCN基因表达进行初步研究。方法体外化学合成针对MYCN基因的小干扰RNA（siRNA），经脂质体Lipofectamine 2000包裹后转染神经母细胞瘤细胞，以无关siRNA和未转染的细胞为对照，采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR检测siRNA的抑制效果。结果脂质体转染siRNA效率可达84.83％，化学合成的siRNA可抑制神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA表达，转染72h后抑制率达58．3％。结论化学合成的siRNA可以有效抑制神经母细胞瘤MYCN基因的表达，为神经母细胞瘤基因治疗开辟了新的途径。     

MYCN基因监测在儿童恶性实体瘤中的临床研究进展

恶性实体瘤在儿童中发病率不高,却是儿童主要死亡原因.MYCN基因扩增是神经母细胞瘤的独立的不良预后因素,参与神经母细胞瘤肿瘤形成,是分层治疗的重要依据.同时MYCN基因扩增在其他儿童恶性实体瘤中亦可检测到,并与髓母细胞瘤的不良病理表现、肾母细胞瘤和肺泡型横纹肌肉瘤的不良预后有关.该文比较MYCN基因的各种检测方法,总结其与儿童实体瘤的临床关系,探讨分子特异性治疗提高儿科实体瘤治愈率的可能.     

两种腹腔镜手术路径治疗儿童肾上腺区神经母细胞瘤的经验总结CSCD

目的评估两种腹腔镜手术路径治疗儿童肾上腺区神经母细胞瘤的可靠性及安全性。方法回顾性分析2018年2月至2020年8月江西省儿童医院9例腹腔镜下行手术治疗的肾上腺区神经母细胞瘤患儿临床资料,其中男6例,女3例;年龄1个月至5岁5个月,平均年龄22个月。6例为右侧肾上腺区神经母细胞瘤,3例为左侧肾上腺区神经母细胞瘤。临床表现:2例为腹痛,1例为血尿,1例为腹泻,1例为腹胀,4例为体检发现。结果9例术前经增强CT及彩超检查诊断为肾上腺区肿瘤,与周围脏器无浸润,下腔静脉无瘤栓;8例无淋巴结及远处转移,1例肝脏转移;内分泌检查均为无功能性肿瘤。9例中7例经腹腔途径手术,2例经腹膜后途径手术;9例均顺利、完整切除肿瘤,无一例中转开放手术,平均手术(腹腔镜操作)时间137 min,平均出血16.3 mL(5~40 mL),1例输血100 mL,肿瘤平均直径4.3 cm(2.5~5.4 cm)。术后病理检查结果:5例神经母细胞瘤,3例节细胞神经母细胞瘤,1例节细胞神经瘤。术后均恢复良好,Ⅰ期病例未行化疗,Ⅳ期肝脏转移病例术后予化疗,平均随访时间8.6个月(2~35个月),无一例复发。结论两种腹腔镜手术路径切除儿童肾上腺区神经母细胞瘤均安全、有效,腹膜后途径在显露及血管处理上更具优势,腹腔途径在操作空间上更具优势。     

两种腹腔镜手术路径治疗儿童肾上腺区神经母细胞瘤的经验总结

目的评估两种腹腔镜手术路径治疗儿童肾上腺区神经母细胞瘤的可靠性及安全性。方法回顾性分析2018年2月至2020年8月江西省儿童医院9例腹腔镜下行手术治疗的肾上腺区神经母细胞瘤患儿临床资料,其中男6例,女3例;年龄1个月至5岁5个月,平均年龄22个月。6例为右侧肾上腺区神经母细胞瘤,3例为左侧肾上腺区神经母细胞瘤。临床表现:2例为腹痛,1例为血尿,1例为腹泻,1例为腹胀,4例为体检发现。结果9例术前经增强CT及彩超检查诊断为肾上腺区肿瘤,与周围脏器无浸润,下腔静脉无瘤栓;8例无淋巴结及远处转移,1例肝脏转移;内分泌检查均为无功能性肿瘤。9例中7例经腹腔途径手术,2例经腹膜后途径手术;9例均顺利、完整切除肿瘤,无一例中转开放手术,平均手术(腹腔镜操作)时间137 min,平均出血16.3 mL(5~40 mL),1例输血100 mL,肿瘤平均直径4.3 cm(2.5~5.4 cm)。术后病理检查结果:5例神经母细胞瘤,3例节细胞神经母细胞瘤,1例节细胞神经瘤。术后均恢复良好,Ⅰ期病例未行化疗,Ⅳ期肝脏转移病例术后予化疗,平均随访时间8.6个月(2~35个月),无一例复发。结论两种腹腔镜手术路径切除儿童肾上腺区神经母细胞瘤均安全、有效,腹膜后途径在显露及血管处理上更具优势,腹腔途径在操作空间上更具优势。     

Eg5蛋白靶向抑制剂S-Trityl-L-Cysteine对神经母细胞瘤增殖和分裂的影响

目的 研究驱动蛋白Eg5在神经母细胞瘤中表达及其靶向抑制剂S-三苯甲基-L-半胱氨酸(S-Trityl-L-Cysteine,STLC)对神经母细胞瘤的诱导作用.方法 通过免疫荧光及Western-blot检测Eg5蛋白在神经母细胞瘤中的表达水平,通过相差显微镜观察STLC对细胞形态学的影响,采用CCK-8法、流式细胞术检测STLC对细胞增值、凋亡及周期的影响,采用FISH法检测STLC对原癌基因MYCN扩增的影响,并经DAPI细胞核染色实验观察STLC对细胞核形态变化的影响.结果 免疫荧光及Western-blot结果显示Eg5蛋白在神经母细胞瘤中稳定表达.细胞形态学观察结果表明,细胞经不同浓度的STLC诱导,当浓度≥5μmol/L,诱导时间为72 h时,细胞形态变圆,出现大量凋亡样小体.CCK-8细胞增殖能力检测及流式细胞术分析结果显示,STLC具有促进细胞凋亡,抑制细胞分裂与增殖的作用,将细胞周期阻滞在G2/M期,且其诱导作用呈时间剂量依赖性.FISH实验证实STLC对MYCN基因扩增无影响.结论 神经母细胞瘤组织及细胞株中均表达Eg5蛋白,STLC通过抑制Eg5,影响神经母细胞瘤细胞的分裂及增值,从而促进细胞凋亡.结果表明Eg5有望作为神经母细胞瘤分子治疗的靶点.     

利用microRNA芯片技术筛选神经母细胞瘤发病相关微小RNA

胚胎发育相关性是小儿肿瘤区别于成人肿瘤的显著特点.神经母细胞瘤是小儿肿瘤的典型代表,许多研究表明神经母细胞瘤的发生和胚胎发育异常密切相关[1].微小RNA(microRNA,miRNA)目前被认为是在机体的胚胎发育过程和肿瘤发生中起到重要作用的内源性调控分子,具有诱导分化肿瘤细胞和胚胎十细胞分化的作用[2].本研究通过应用microRNA基因芯片技术,筛查参与胚胎发育和神经母细胞瘤发生的microRNA,从而探索神经母细胞瘤的发病机制.     

Hisense计算机辅助系统辅助腹腔镜精准手术治疗儿童肾上腺区巨大肿瘤

目的探讨计算机辅助手术系统(computer-aided system,CAS)对于腹腔镜手术切除肾上腺巨大肿瘤(瘤体直径≥5 cm)的指导价值。方法回顾性分析青岛大学附属医院2015年9月至2018年6月收治的13例肾上腺区巨大肿瘤病例,13例术前均完善相关辅助检查并行Hisense CAS三维重建,依据三维重建结果指导完成腹腔镜手术。结果13例肾上腺区巨大肿瘤患儿术前和术中在Hisense CAS三维重建结果的指导下均顺利完成腹腔镜手术。术后病理检查:神经母细胞瘤7例,节细胞性神经母细胞瘤2例,节细胞神经瘤1例,嗜铬细胞瘤2例,肾上腺皮质癌1例。结论Hisense计算机辅助系统能够清晰显示肿瘤位置及其与周围重要脏器结构的毗邻关系,可用于指导手术治疗儿童肾上腺区巨大肿瘤。     

Age-dependency of alpha- and beta-adrenoceptors on thrombocytes and lymphocytes of asthmatic and nonasthmatic children

Among the possible mechanisms which may cause wheezing or asthmatic episodes a genetically determined -adrenoceptor blockade and a hyperresponsiveness of -andrenoceptors has been postulated. Evidence to support this hypothesis stems from an increased bronchial sensitivity to -blockers, a reduced formation of cyclic AMP in response to -adrenergic stimulation and enhanced -adrenergic responses in asthmatic subjects. The recent development of techniques for measuring the specific, high-affinity binding of radiolabeled -and -adrenergic antagonists made it possible to study - and -adrenoceptors in vitro. Based upon the assumption that a change in the number and/or affinity of adrenergic receptors might be a general phenomenon, we have performed - and -receptor binding studies on lymphocytes and platelets from wheezing infants and asthmatic children as well as of infants, children, and adults not suffering from these diseases.Using ¹²⁵[I]-cyanopindolol (ICYP) and ³[H]-yohimbine (HYOH) as highly specific ligands for - and -adrenoceptors, the following results were obtained: (1) Lymphocytes and platelets from control subjects and asthamatics bound similar amounts of ICYP and HYOH and thus showed no differences either in the number or the affinity of - and -adrenoceptors. Lymphocytes and platelets of wheezing and nonwheezing infants also bound the same amounts of the radioligands. (2) In asthmatic children receiving 4×2 puffs salbutamol -adrenoceptor were down-regulated and this may mimic -adrenoceptor blockade. (3) When subjects were divided into four categories according to age (0–5, 5–10, 10–20 years, adults) the number of -adrenoceptor binding sites showed an age-dependent increase. The number and affinity of -adreneceptor binding sites on platelets was neither influenced by age nor disease.It is concluded that the - and -adrenoceptors of wheezing infants and asthmatic children at least on blood cells are normal. However the -adrenoceptors show an age-dependent maturation process, which may account for an unresponsiveness to -adrenoceptor agonists in wheezing infants.Supported by a grant from the Ministerium für Wissenschaft und Forschung, NRWPresented at the 19th Workshop for Pediatric Research, University of Göttingen, March 10–11, 1983     

Specifics of histopathological and genetical diagnosis and classification of lymphomas in children and adolescents

Malignant lymphoma along with leukemias account for nearly half of all malignancies arising in childhood and adolescence. The correct tissue-based histopathological diagnosis of lymphomas results from a close interdisciplinary exchange between pediatric oncologists and hematopathologists. We describe here relevant features of lymphoma subtypes arising in the young age group, Burkitt lymphoma, precursor/lymphoblastic lymphomas, anaplastic large cell lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma as well as primary mediastinal B-cell lymphoma and the rare pediatric follicular lymphomas. Special focus is put on specific diagnostic difficulties as well as new insights into biological features of pediatric lymphomas in comparison with their adult counterpart. In addition the relevance of newly defined lymphoma entities of the WHO-classification 2008, e.g. greyzone lymphomas, will be discussed for the young age group.     

感知觉、行为发育与儿童进食

在儿科医生的临床实际工作中,常常遇到儿童的进食行为问题。这些问题往往被家长,甚至儿科医生误认为“缺乏营养素”、“厌食”、“食欲不振”或“消化吸收不良”等等。实际上,儿童期的进食行为问题可追朔到婴儿期喂养或断奶方法不当。认识这些问题,需要理解正常消化系统的解剖生理、神经调节基础,以及与感知觉、行为发育的关系。     

小阴茎、小睾丸的诊断与治疗

小阴茎、小睾丸的病因复杂,临床诊断较为困难。下丘脑-垂体-性腺轴及雄激素合成和转化过程中任何一个环节出现异常,皆会影响阴茎和睾丸的发育。治疗应在明确诊断的基础上予以个体化方案。提倡重视小青春期内的早期诊断,以期早期治疗,使病变的危害降至最低。