乳宁Ⅱ号方对小鼠Ca761乳腺癌移植瘤细胞周期及p53和ras表达的影响

目的:通过研究乳宁Ⅱ号方对小鼠Ca761乳腺癌移植瘤细胞周期及p53、ras表达的影响,探讨乳宁Ⅱ号方抑制乳腺癌生长的机制.方法:建立小鼠Ca761乳腺癌移植模型,小鼠造模后随机分成生理盐水对照组、环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)治疗组、乳宁Ⅱ号方治疗组及乳宁Ⅱ号方加CTX治疗组,每组12只.用流式细胞术检测经不同方法处理的荷瘤小鼠移植瘤细胞的细胞周期,同时运用免疫组化法测定移植瘤组织中p53和ras癌基因蛋白的表达,并进行组间比较.结果:乳宁Ⅱ号方治疗组、CTX治疗组与乳宁Ⅱ号方加CTX治疗组S期肿瘤细胞与生理盐水对照组比较明显减少(P<0.05);乳宁Ⅱ号方治疗组G0-G1期肿瘤细胞百分比低于CTX治疗组(P<0.05),而G2-M期细胞百分比高于CTX治疗组(P<0.05);乳宁Ⅱ号方治疗组与乳宁Ⅱ号方加CTX治疗组p53的表达均显著低于生理盐水对照组(P<0.05),而CTX对p53表达的影响不显著(P>0.05);乳宁Ⅱ号方治疗组、CTX治疗组与乳宁Ⅱ号方加CTX治疗组ras的表达均低于生理盐水对照组(P<0.05).结论:乳宁Ⅱ号方可通过调控小鼠Ca761乳腺癌移植瘤细胞的细胞周期来影响肿瘤的生长,这一作用与其调控肿瘤组织p53和ras基因表达有关.     

戈舍瑞林对前列腺组织微血管密度及血管内皮生长因子影响的基础研究

目的：探讨戈舍瑞林对前列腺组织微血管密度（ MVD ）及血管内皮生长因子（ VEGF ）影响。方法：随机选取60只雄性SD大鼠,并且随机分成A、B、C、D、E、F六组;A组采取正常的饲养方式,其余各组均进行隔日颈部皮下注射丙酸睾丸酮建立大鼠前列腺增生模型,在第29天时随机选取一组（ B）处死观察模型是否建立成功,并取前列腺组织进行HE染色;剩余各组中,C组灌注生理盐水（15mL／kg）,D、E、F每日给予等量的戈舍瑞林溶液灌胃（1．0mg／kg）,分别持续1～3周后处死,观察各组前列腺增生例数、前列腺重量、VEGF 在前列腺组织中的表达、MVD在前列腺组织中的表达差异。结果：A、B、C、D、E、F六组大鼠中,A组正常饲养,结果大鼠前列腺没有发生增生,B、C、D、E、F五组均有不同程度的前列腺增生,并且每组10只老鼠全部发生增生。 B、C、D、E、F五组前列腺增生重量分别于A组比较,发现重量均明显高于A组,差异具有统计学意义（ P＜0．05）,五组之间采用单因素方差分析及组间比较差异不具有统计学意义（ P＞0．05）;C、D、E、F四组前列腺增生模型大鼠中,C组未采用戈舍瑞林灌胃,其VEGF阳性细胞面积、MVD均显著高于D、E、F三组,差异具有统计学意义（ P＜0．05）;D、E组间VEGF阳性细胞面积、MVD间差异不具有统计学意义（ P＞0．05）;D、E两组的VEGF阳性细胞面积、MVD均明显高于采用戈舍瑞林灌胃时间更长的F组,且差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论：前列腺增生模型大鼠的前列腺组织微血管密度（ MVD）及血管内皮生长因子（ VEGF）表达水平明显增高,戈舍瑞林能够有效降低MVD、VEGF的表达水平。     

乳宁Ⅱ号对乳腺癌MA—891细胞株生长转移的影响

为探讨乳宁Ⅱ号对乳腺癌MA－891细胞株生长转移的影响，将60只雄性小鼠按经典方法复制肿瘤模型后，分为4组：模型（A1）组、乳宁Ⅱ号（B1）组、环磷酰胺（C1）组和三苯氧胺（D1）组。3周后所观察的抑瘤率B1为37．3％、C1为86．2％；两对肿瘤转移的抑制率分别为65．4％、43．9％。进一步观察乳宁Ⅱ号药物血清（灌胃3日后所得的大鼠血清）对MA－891细胞的杀伤作用。结果：乳宁Ⅱ号大、中、小剂量组在体外对MA－891细胞均有杀伤作用，杀伤率分别为27．46％、24．25％、14．13％，显优于正常大鼠血清及三苯氧胺组血清（P＜0．05），其中乳宁Ⅱ号大剂量组、环磷酰胺组血清MA－891细胞的杀伤作用相似（P＞0．05）。提示，乳宁Ⅱ号对MA－891细胞株有较强的杀伤作用。     

NO与AngⅡ的调节对大鼠心肌缺血的作用及VEGF表达的影响

目的:探讨氧化亚氮(NO)与血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的调节对大鼠心肌缺血的作用及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:将30只SD大鼠随机分成5组(每组均为6只):A:对照组(COL)、B:异丙肾上腺素组(ISO)、C:异丙肾上腺素 氯沙坦组(LOS)、D:异丙肾上腺素 硝基左旋精氨酸组(L-NNA)、E:异丙肾上腺素 氯沙坦 硝基左旋精氨酸组(LOS L-NNA).由异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌缺血模型;选用硝基左旋精氨酸(L-NNA)阻断氧化亚氮合酶(NOS),氯沙坦(LOS)阻断Ang Ⅱ选择性受体AT1;BL-420F生物信号处理系统监测心功能指标;生物化学方法检测心肌NO、血清肌酸激酶(CK),HE染色观察心肌细胞损伤情况,免疫组化染色分析VEGF及eNOS的蛋白表达,RT-PCR半定量检测VEGF、eNOS在心肌中mRNA表达.结果:C组心功能与B、D、E组相比得到明显改善(P＜0.01),心肌细胞损伤明显减轻;C组NO释放量与B、D、E组相比明显升高(P＜0.01);C组心肌VEGF mRNA及蛋白表达与其他各组相比均增加(P＜0.01);C和E组eNOS mRNA和蛋白表达与B和D组相比明显增加(P＜0.01).结论:阻断AT1受体可上调大鼠心肌VEGF的表达,大鼠心肌缺血过程中NO和AngⅡ-AT1受体信号转导通路对VEGF表达起重要调节作用.氯沙坦可部分通过对心肌eNOS、VEGF的表达以及NO的调节对心肌有保护作用.     

辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠血管生成的实验研究

目的 观察辣椒素对Lewis 肺癌小鼠血管生成的影响,并探讨其可能的机制。方法 复制Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组,辣椒素低、中、高剂量组,以及阳性对照组5 组,每组9 只。各组连续用药20 d,于末次给药后处死全部小鼠,比较各组小鼠瘤体积、瘤重、抑瘤率及微血管密度（MVD）。采用免疫组织化学法检测CD34 阳性细胞率;采用Western blot 和实时荧光定量聚合酶链反应检测缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和mRNA 表达的变化。结果 与模型组比较,辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠瘤体积、瘤重、MVD 和CD34 阳性细胞率（P <0.05）;与模型组比较,辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠HIF-1α、VEGF 蛋白和mRNA 的表达（P <0.05）。结论 辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠肿瘤生长和血管生成,其机制可能与抑制HIF-1α 和VEGF 的表达有关。     

血管内皮抑素转基因口服制剂联合5-Fu、IFN-α 2a治疗结肠癌的实验研究

目的探讨血管内皮抑素转基因双歧杆菌口服制剂（ETB-2，E）联合5-Fu（F）、IFN-α 2a（I）对裸鼠结肠癌的治疗效应，并探讨其作用机制。方法将人结肠癌细胞LoVo接种于BALB／c裸鼠皮下建立动物模型，随机分为6组，每组6只动物，除对照组用等量生理盐水灌胃外，余分别给予E、F、I、E＋F、E＋I等药物。6组均于接种后第22天处死动物，计算抑瘤率。观察病理变化，用免疫组化法检测微血管密度（MVD）、增殖细胞核抗原指数（PCNA指数）和血管内皮生长因子（VEGF）阳性率．用RT-PCR法检测VEGFmRNA、TGF-β1 mRNA，用DNA原位末端标记（TUNEL）法检测凋亡率。结果（1）对照组抑瘤率为0，E组、F组、I组、E＋F组、E＋I组抑瘤率分别为47．26％、60．69％、34．68％、71．23％、63．09％，E＋F组、E＋I组抑瘤率分别与E组、I组相比，差异有显著性（P〈0．05）。（2）E＋F组和E＋I组MVD与对照组相比，差异有显著性（P〈0．05）；E＋F组、E＋I组VEGF阳性率分别与对照组、F组相比，差异有显著性（P〈0．05）；PCNA指数各治疗组有降低趋势，但各组间比较，差异无显著性（P〉0．05）。（3）E＋F组、E＋I组VEGFmRNA、TGF-β1 mRNA较对照组、E组、F组、I组明显降低（P〈O．05）。（4）E组、I组、E＋F组、E＋I组凋亡率与对照组相比．差异均有显著性（P〈0．05）。（5）常规病理检查发现，E组血管明显减少，E＋F组和E＋I组则坏死较为严重，血管明显减少。结论ETB-2分别联合5．Fu、IFN-α 2a可更有效地抑制裸鼠结肠癌的生长。具有协同作用。     

联合低剂量化疗对小鼠Lewis肺癌抗血管生成和抗肿瘤作用的研究

目的观察低剂量环磷酰胺（CTX）、紫杉醇（PTX）联合化疗的抗血管生成作用、抑瘤作用及毒副反应。方法建立小鼠Lewis肺癌模型，将40只C57BL／6小鼠随机分为四组：生理盐水对照组、CTX单药组（170mg／kg，q6d）、PTX单药组（10mg／kg，q7d）、CTX＋PTX联合治疗组。分别测定小鼠肿瘤体积、平均瘤重、抑瘤率，免疫组化法检测微血管密度（MVD），免疫组化图像分析法半定量检测血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果低剂量CTX＋PTX联合治疗组的肿瘤体积、平均瘤重低于各单药治疗组（P〈0．005），抑瘤率高于各单药治疗组（P〈0．005）；联合治疗组肿瘤组织MVD数和VEGF表达均低于各单药治疗组（P〈0．005）。紫杉醇单药治疗组毒副反应最小，其他各治疗组毒副反应无差异，可耐受。结论低剂量CTX、PTX两药联合治疗比单药治疗具有更强的抑制血管生成及抑制肿瘤生长作用，毒副作用可被耐受。     

黄蘑多糖对H22荷瘤小鼠肿瘤生长及其VEGF表达的影响

目的：观察黄蘑多糖对H22（小鼠肝癌细胞系）荷瘤小鼠的抑制肿瘤效果,并探讨该机制是否与提高机体免疫力和抑制肿瘤血管生成有关。方法：采用腋下接种癌细胞悬液建立荷瘤小鼠模型,造模成功24 h后灌胃给药,连续给药12 d后,处死动物,剥离瘤块、胸腺、脾脏并分别称重,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数;眼球取血计数有核细胞数;以冰冻切片免疫组织化学法检测各组瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）表达程度。结果：黄蘑多糖各组的肿瘤重量均低于模型组,其中,中、高剂量组的抑瘤效果显著（P〈0.05）,且各项免疫指标显著高于环磷酰胺组（CTX组）和模型组（P〈0.01或P〈0.05）;黄蘑多糖各组的VEGF表达率显著低于模型组（P〈0.01）,黄蘑多糖低、中剂量组VEGF的表达与CTX组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,高剂量组与CTX组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：黄蘑多糖对H22移植瘤的生长有一定抑制作用,可降低瘤组织中VEGF的表达,亦可作为生物反应调节剂,通过增强机体免疫功能等作用达到抗肿瘤的功效。     

哮喘小鼠肺脏组织肾素-血管紧张素系统相关组分表达 及AT1R拮抗剂对其影响

目的：探讨肾素-血管紧张素系统（RAS）与哮喘发生的关系,为哮喘发病机制的研究和治疗提供理论依据。方法：复制小鼠哮喘模型,小鼠分为对照组、模型组、坎地沙坦低剂量组及高剂量组,采集小鼠血清,测量血清中血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)与血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)的含量;通过Western blotting和RT-PCR观察RAS中血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ 1型受体（AT₁R）和2型受体（AT₂R）在各组小鼠肺组织中的表达。结果：模型组小鼠血清AngⅡ含量较对照组增高（P<0.05）,坎地沙坦组与模型组比较无明显变化（P>0.05）。各组小鼠血清中AngⅠ含量比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组小鼠AT1R和ACE蛋白表达较对照组明显增加（P<0.05）,坎地沙坦组AT₁R表达与模型组比较明显降低(P<0.05),ACE无明显变化（P>0.05）。AT₂R蛋白表达各组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组小鼠ACE mRNA表达较对照组明显增加（P<0.05）,坎地沙坦组与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组小鼠AT1R mRNA表达较对照组明显增加（P<0.05）,坎地沙坦组较模型组明显降低（P<0.05）。模型组AT2R mRNA较对照组明显降低（P<0.05）,坎地沙坦组较模型组明显增加（P<0.05）。各组AGT mRNA表达无明显变化（P>0.05）。  结论：在小鼠哮喘发病过程中,RAS活化参与了哮喘的发病过程,并且AT₁R拮抗剂坎地沙坦可以逆转ACE、AT₁R和AT₂R表达的改变。     

毛兰素通过调节HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路抑制恶性黑素瘤细胞血管生成

目的 探究毛兰素通过调节缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子（VEGF）/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路对恶性黑素瘤细胞血管生成的影响。方法 不同浓度毛兰素处理B16F10细胞筛选合适的药物作用浓度。体外培养B16F10细胞、人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）并随机分为对照组、毛兰素低、高剂量组、空载组、毛兰素高剂量+HIF-1α过表达组，分组处理后，提取B16F10细胞条件培养基，酶联免疫吸附反应（ELISA）测定B16F10细胞培养基中VEGF水平；并用提取的B16F10细胞条件培养基按上述分组处理HUVECs，小管形成实验检验各组HUVECs细胞成管长度。建立B16F10移植瘤小鼠模型并按上述分组进行处理，免疫组化染色检测各组移植瘤微血管密度（CD31表达）及VEGF表达；免疫印迹检测各组B16F10细胞及其移植瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路蛋白表达。结果 与对照组相比，毛兰素低、高剂量组B16F10细胞培养基中VEGF水平、HUVECs细胞成管长度、移植瘤CD31及VEGF阳性细胞比例、B16F10细胞及其移植瘤小鼠肿瘤...     

"一个目标"和"三个改进"--关于提高德育课教学效果的思考

德育课作为学校对学生进行德育的专设课程，有着不同于一般文化课程教学的特殊规律和方法．在教学内容已作系统规定的情况下，教学效果的好坏，往往取决于对这些规律和方法的运用。笔者以为，提高德育课的教学效果，应着力于树立“一个目标”和在“三个改进”上下功夫。     

“直”与“真”的思考

《小儿药证直诀》一书为我国现存第一部儿科专著,作者对书名中"直"怀有疑问,思考后提出三个假设。通过查阅文献得出结论,书名"真"因避讳制度改为"直"的可能性大。     

关于“病证与症状”“辨证与辨病”的思考

本文主要讨论"病证与症状的关系""临床上如何确立病证""辨证与辨病相结合的必要性"三大议题;得出了依标本辨病机、遵缓急立先后,在此基础上参照西医诊断的结论;旨在说明在现代中医临床中,确立病名、辨析病证、把握病机三者应在中医理论的指导下有机结合,不可偏废。在关于"辨病"的讨论中,本文着重论述了作为现代中医,如何看待相关辅助检查结果及西医诊断等问题,指出了应在灵活借鉴、为我所用原则下衷中参西,以减少误诊、漏诊;在中医理论指导下参照西医诊断进而扩展临床思路以提高疗效。     

试论黄景仁诗的“哀情”与“豪气”

黄景仁的诗具有“哀情”与“豪气”系于一体的艺术风格。他的“哀情”是由慨然用世的“豪气”在现实社会中得不到舒张转化而致 ,这种“豪气”即使在“哀情”始终缠绕于心的时候也没有消弭 ,因而黄景仁诗的“哀情”与“豪气”固然时有偏重、篇有偏重 ,却往往是相对相生 ,相融相彰的。黄景仁以其独特的艺术风格在清代中叶诗坛“一扫三大家之庸音” ,当属难能可贵