Ph染色体bcr/abl融合基因在诊断慢性粒细胞白血病中的意义

目的 慢性髓系白血痛(CML)的细胞遗传学特征是具有Ph染色体,即t(9;22)(q34;q11),其结果在分子水平上形成bcr/abl融合基因探讨慢性髓性白血病Ph染色体及bcr/abl融舍基因检测对CML早期诊断、分型诊断及指导治疗的临床意义.方法 用直接法或24h短期培养法常规G显带后分析,观察有无Ph染色体,PCR方法检测bcr/abl融合基因,结合形态学特征对51例CML进行分型诊断.结果 51例患者中Ph+/bcr/abl+或Ph-/bcr/abl+共48例诊断为典型慢性粒细胞白血病(CGL)占94%,其中1例为妊娠合并慢拉白血病;Ph-/bcr/abl-3例占6%,其中2例为非典型慢性粒细胞白血病(a-CML),1例为慢性粒单棱细胞白血病(CMML).结论 Ph染色体及ber/abl融合基因检测将CML患者进一步区分为三型:典型(Ph+/ bcr/abl+或Ph-/bcr/abl+)慢性粒细胞白血病(CGL)、非典型(Ph-/bcr/abl-)慢性粒细胞白血痛(a-CML)、慢性粒单核细胞白血病(CMML).对慢性髓系白血病的明确诊断、早期有效治疗具有重要的临床意义.     

102例慢性粒细胞白血病的遗传学诊断分析

目的 :观察Ph染色体 ,bcr/abl融合基因与慢性粒细胞白血病 (CML)的诊断指标。方法 :染色体制备采用骨髓细胞直接法和短期培养法 ,bcr/abl融合基因分析用RT -nest-PCR法。结果 :10 2例病例中 ,91例Ph染色体及bcr/abl融合基因均为阳性 ,Ph-、bcr/abl+6例 ,Ph-、bcr/abl-5例。结论     

聚合酶链反应技术对慢性粒细胞白血病进行分子学诊断和监测

慢性粒细胞白血病(CML)是一种起源于造血多能干细胞的肿瘤性疾病。Ph染色体是CML的标记染色体,其分子基础是第9号染色体上的原癌基因c—abl易位至第22号染色体,并与bcr基因5’端相连接,形成bcr/abl融合基因。为从分子水平探讨bcr/abl融合基因在CML诊断及微量残留病(MRD)监测等方面的意义,我们应用筑巢法逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)技术,对20例CML患者外周血白血病细胞的     

双色双融合荧光原位杂交探针检测慢性髓系白血病Bcr/Abl基因重排的研究

本研究探讨双色双融合荧光原位杂交技术(DC-DF-FISH)在慢性髓系白血病(CML)中的应用价值,应用常规R-显带技术、DC-DF-FISH、RT-PCR技术检测41例CML患者的染色体核型及bcr/abl融合基因.结果表明,对于初诊CML的18例患者,R-显带显示Ph染色体阳性检出率为94.4%(17/18),DC-DF-FISH阳性检出率也为94.4%(17/18),对于治疗后CML的18例患者,R-显带显示14例有可分析分裂相,其中有11例存在Ph染色体,阳性检出率为78.6%(11/14);而用DC-DF-FISH检测治疗后患者的阳性率为94.4%(17/18);移植后的5例患者R-显带均未检出Ph染色体,而FISH检测出1例bcr/abl基因阳性,RT-PCR证实了FISH的检测结论,但在移植患者中,RT-PCR无阳性发现.结论:双色双融合荧光原位杂交技术具有高度的准确性、可靠性,是检测CML患者bcr/abl基因重排的可靠方法,适用于CML的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测.     

两例Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病患者具有少见型bcr/abl融合基因

目的　研究 2例Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病慢性期 (CML CP)患者异常的bcr/abl融合基因结构。方法　分别采用常规的M 及 μ 型bcr/abl融合转录子特异性引物进行逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,对RT PCR扩增产物测序进行序列同源性分析 ,以确定扩增产物的成分及bcr/abl融合转录子类型 ,其中 1例根据测序结果设计引物并通过PCR研究其DNA水平bcr与abl基因融合方式。结果　 2例患者临床表现均符合典型CML CP特征 ,RT PCR扩增后均未见典型的M 及 μ 型扩增带 ,而分别出现一条异常的条带 ,产物大小分别介于M 及 μ bcr/abl之间及小于M bcr/abl。经序列分析证明RT PCR产物均含有bcr及abl基因序列 ,例 1的bcr基因断裂发生在第 18外显子 (e18)内部 ,abl基因融合位点为常见的外显子 2 (a2 )处 ,它们之间插入了 4 0bp的部分abl基因内含子 1b序列 ,为一种新型的符合阅读框架结构的bcr/abl融合转录子e18 int a2。经PCR证明该融合发生在DNA水平。例 2的融合转录子中缺失典型M bcr/abl(b2a2 )融合基因中abl基因外显子 2 (a2 ) ,为e13a3(b2a3)型。结论　少见型bcr/abl融合基因可见于典型Ph染色体阳性CML患者并产生异常的RT PCR扩增带。     

慢性髓细胞白血病患者染色体分析及bcr/abl融合基因转录本定量的临床意义

目的探讨慢性髓细胞白血病(CML)患者染色体分析与bcr／abl融合基因定量的临床应用价值。方法17例CML患者采用骨髓细胞短期培养法制备染色体,应用G、R显带技术进行染色体分析,同时采用实时定量RT-PCR技术进行bcr／abl融合基因定量检测,并对其中的9例患者进行了跟踪观察。结果全部患者均检出Ph染色体及表达bcr／abl融合基因,阳性患者之间19cr／abl表达水平差异很大。常规药物治疗后稳定于慢性期的4例患者,bcr／bal表达水平轻度上升或下降,未发现新的染色体异常;进入急变期的3例患者bcr／abl表达平均上升了9．06倍,均出现新的附加染色体异常;2例异基因骨髓移植的患者bcr／abl表达水平随临床治疗而发生变化;bcr／abl变化趋势相同而细胞遗传学结果不同的患者,对药物治疗的反应不同,预后也不一样。结论染色体分析结合bcr／abl基因定量较为全面地反映了CML患者的生物学特性,与疾病进展密切相关,对CML的诊断、疗效评价、预后判断反映白血病细胞负荷有较大的临床价值。     

格列卫对慢性粒细胞白血病病人Ph染色体和bcr／abl融合基因表达影响

目的探讨格列卫治疗Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病病人后骨髓Ph染色体及bcr／abl融合基因表达的变化。方法采用R显带和半定量RTPCR分别检测11例慢性粒细胞白血病病人服用格列卫前后骨髓标本中Ph染色体和bcr／abl基因的表达。结果用药后9例慢性期慢性粒细胞白血病病人,7例分别在用药3～24个月后染色体检查为Ph染色体阴性,1例用药1个月后其Ph染色体仍为阳性,后失访;1例用药2个月后Ph染色体阳性率为30％;1例急变期慢性粒细胞白血病病人用药6个月后其Ph染色体阳性率为70％;1例加速期慢性粒细胞白血病病人用药12个月后Ph染色体阳性率为60％。服用格列卫的CML病人Ph染色体转阴后仍能检测到bcr／abl基因的表达,但其表达水平较用药前明显降低,差异有显著性（t=3．77、5．13,P〈0．01）,随着用药时间的延长bcr／abl基因表达逐渐降低。结论格列卫能有效治疗Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病病人,并且对其预后具有重要的意义。     

自身淬灭荧光定量PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/abl mRNA

目的利用自身淬灭探针技术建立一种能检测慢性粒细胞白血病（CML）bcr／abl融合基因mRNA的实时荧光定量PCR方法，为CML的诊断、疗效观察以及微量残留白血病（MRD）的监测提供有效手段。方法用逆转录PCR方法（RT—PCR）扩增K562细胞的bcr／abl融合基因，A-T克隆法构建定量标准模板；设计自身淬灭荧光引物（探针），建立自身淬灭荧光定量逆转录PCR方法（FQ—RT—PCR），并对该方法的线性检测范围、灵敏度、重复性、稳定性进行检测；然后检测临床白血病患者骨髓标本bcr／abl mRNA。结果建立的FQ—RT—PCR方法可检测10copies／μl的bcr／abl重组质粒，并能从10^5个正常细胞中检出1个白血病细胞，该方法的批内、批间变异系数（CV）分别为2．1％、6．1％，线性检测范围为10^2-10^9copies／μl。25例CML患者bcr／abl融合基因mRNA表达量中位数为4．50×10^4[（0．45—89．00）×10^4]copies／μg RNA，其中11例慢性期初诊患者bcr／abl mRNA表达量中位数为5．45×10^4[（2．95—19．30）×10^4]copies／μg RNA，6例急变期患者bcr／abl mRNA表达量中位数为13．00×10^4[（4．10～89．00）×10^4]copies／μg RNA，8例慢性期治疗后复查患者bcr／abl mRNA表达量中位数为2．35×10^4[（0．45—5．12）×10^4]copies／μg RNA，CML急变期患者bcr／abl融合基因表达水平与慢性期患者之间差异有统计学意义（q=3．41，P〈0．05）。PCR产物经电泳分析，其中21例CML患者为b3a2型，4例CML患者为b2a2型；3例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中，1例有bcr／abl mRNA表达，为b2a2型。结论所建立的基于自身淬灭探针技术的实时荧光定量PCR检测方法灵敏、特异、重复性好，结果用拷贝数表示，准确可靠，利于标准统一。可广泛用于CML的诊断、疗效观察以及MRD的监测。     

慢性粒细胞白血病患者Ph染色体变异易位的细胞遗传学特征与荧光原位杂交研究

本研究探讨慢性粒细胞白血病(CML)中变异Ph染色体易位的细胞遗传学特征并比较双色单融合(DC-SF)与双色双融合(DCDF)bcr／abl探针荧光原位杂交技术(FISH)在变异易位CML中的应用价值。应用常规细胞遗传学方法分析我院42例CML变异Ph易位患者，其中9例进行DC-SF-FISH和1l例进行DC-DF-FISH研究。结果表明：在642例Ph阳性CML中变异易位42例(6.5％)，简单变异易位42.9％(18／42)，复杂变异易位54.8％(23／42)，遮蔽的或隐匿的Ph易位1例。除4，6号染色体外，其余染色体均被累及。4种类型变异易位分别出现于至少2个病例中。变异易位伴附加异常15例(35.7％)。FISH检测bcr／abl阳性19例(95％)，阴性1例。DC-DF-FISH显示除1例患者部分细胞(8.8％)能检测到abl／bcr融合信号外，其他患者皆缺乏该融合信号。但在易位后的9号和参与变异易位的另外染色体上分别可以见到abl和bcr基因信号。DC-SF-FISH不能观察到信号的变异特征。结论：CML变异Ph易位广泛累及除9，22外其他染色体。部分类型属重现性异常；FISH检测能给予精确的分子诊断．而DC-DF-FISH可提供直观的、准确的分子变异特征分析。     

慢性髓性白血病异基因造血干细胞移植后M-bcr/abl及m-bcr/abl融合转录子追踪观察

为研究慢性髓性白血病 (CML)异基因造血干细胞移植 (SCT)后M bcr/abl及m bcr/abl融合转录子表达特征 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定 72例CML患者SCT后不同时间骨髓M bcr/abl及m bcr/abl融合转录子的表达。结果显示 ,CML患者移植后 <6个月M bcr/abl阳性率 (79.2 % ,4 2 /5 3)显著高于 6 - 12个月(34.3% ,11/32 )及≥ 12个月 (35 .1% ,13/37) (P <0 .0 0 1) ,各时间段M bcr/abl阳性患者的临床复发率分别为1 9% (1/5 3) ,0 (0 /32 )及 16 .2 % (6 /37) ;6例临床复发患者中有 5例复发时M bcr/abl与m bcr/abl同时阳性。 14例遗传学缓解患者移植 6个月后M bcr/abl阳性的 17份标本无 1例m bcr/abl阳性。结论 :多数CML患者移植后M bcr/abl仍为阳性 ,一般在 6个月内转阴 ,移植后M bcr/abl阳性的患者不一定复发 ,同时追踪观察M bcr/abl及m bcr/abl融合转录子可能会有助于监测残存白血病。     

儿童遗传性心律失常的诊治进展

回顾在遗传性心律失常领域最新发表的相关研究,主要关注与儿童心源性猝死关系密切的离子通道病,包括长QT综合征（LQTS）、短QT综合征（SQTS）、Brugada综合征（BrS）和儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速（CPVT）,总结它们在发病机制及诊治方面的进展。     

The acoustic characteristics of the skull

Many investigators have stated that the difficulties of imaging with acoustical energy through the skull result from the marked attenuation of the energy by the skull. In the literature measurements of total attenuation have been confused with those for absorption.Measurements made by us show that absorption by compact bone varies between 2–3 dB cm^?1 MHz^?1 and, in the low megaHertz region appears to be directly proportional to frequency.It has also between shown that the convoluted inner surface of the ivory bone of the inner table of the skull may degrade the collimation and directionality of the beam by refraction.Cancellous bone, such as is present in the dipole of the skull, greatly attenuates the energy. It is postulated that this largely results from scattering. It is also postulated that the energy propagates through cancellous bone as two components, one in the soft tissues and the other partly in the bony spicules. Observations suggest that attenuation due to scattering much more markedly affects the latter of these components and scatters more greatly the higher frequencies in a pulse of broad bandwidth.The energy in each component has varying propagation paths so that the later cycles in the pulse of each component are subject to increasing interference as a result of the variations in propagation times. The two components moreover may have different propagation times so that interference may occur between the pulses of each component as well.All of these phenomena degrade the collimation, coherence, directionality, beam width, pulse length, frequency and other properties of the ultrasonic energy upon which imaging through the skull depends.The interference effects described above are least for the first cycle in the pulse which usually is not the cycle of highest amplitude. Since, in the free field, most of the energy is concentrated around the beam axis, most of the energy in the field which is deflected from its normal propagation path is deflected away from the beam axis. Thus the directionality of the beam is least degraded in the beam axis. The effects of the skull in degrading the properties of the ultrasonic pulse would therefore be lessened if the amplitude of the first cycle of the pulse and the directionality of its energy could be used for imaging.     

家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症1例并文献复习

目的加强对家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（familially hemophagocytic lymphohistiocytosis,FHL）的认识。方法报道确诊为FHL的新病例1例,结合国内外报道的FHL的病例,对该病的临床特点进行汇总分析。结果FHL2常与PRF1基因突变相关,约20%~40%的患者存在穿孔素基因突变。结论对于有阳性家族史,基因诊断明确,应尽早行化疗或者造血干细胞移植。若无家族史,未发现与继发性HLH相关的原发病因,可考虑行基因筛查以明确是否存在FHL的可能。     

甲状旁腺功能减退性心肌病的系统综述

目的 甲状旁腺功能减退（甲旁减）性心肌病是一种罕见的心脏疾病,为扩张型心肌病中少数可逆转的一种,常被误诊为不明原因或难治性心力衰竭。本文旨在探寻甲旁减性心肌病的规律性特征。方法 检索Pubmed、SinoMed、万方数据库中符合标准的甲旁减性心肌病病例,采用统计分组法对纳入研究的文献进行分析,依据系统综述和meta分析优先报告条目（PRISMA声明）进行报告。结果 在我们筛查出的41例患者中,女性居多（68.29%）,平均年龄为45.5岁,各年龄段均有发病。甲旁减性心肌病最常见的病因为特发性甲旁减（78.05%）,颈部手术导致的甲旁减性心肌病次之（17.07%）。患者均以心力衰竭就诊,伴不同程度的低钙血症。51%的患者有神经肌肉兴奋性增加的病史,90%的患者左心室射血分数降低。该病误诊漏诊率较高,仅36%的患者于入院后即明确诊断为甲旁减性心肌病。低血钙的纠正是治疗的关键,90%的患者心脏功能在血钙浓度正常化后恢复至正常。结论 对所有不明原因或难治性心力衰竭患者都应警惕甲旁减性心肌病的可能。     

动态心电图临床操作标准化方法

动态心电图,又称Holter或Holter检查,是一种评价各种心脏病患者心电图异常的简便、高效、准确、安全的无创检查,广泛用于心律失常的相关症状评价,心肌缺血的诊断,心脏病患者的预后和日常生活能力评估,药物疗效评价,起搏器等埋藏式心脏电治疗装置监测等领域。目前动态心电图已广泛用于于临床各级医疗机构,为了更好地发挥其作用,有必要对该项技术进行规范化培训。本文参考相关指南、共识及专家建议,结合作者经验,撰写动态心电图临床操作标准化方法供临床使用时参考。     

Burkitt's lymphoma of maxillary gingiva: A case report

Burkitt's lymphoma(BL) is an aggressive form of nonHodgkin's B-cell lymphoma with three variants namely endemic, sporadic, and immunodeficiency-associated types. It is endemic in Africa and sporadic in other parts of the world. While the endemic form is widely reported to occur in early childhood and commonly involves the jaw bones, the sporadic form typically presents as an abdominal mass. This presentation reports a rare case of sporadic form of BL clinically manifesting as a generalized gingival enlargement in an immunocompetent adult male which demonstrated an aggressive behavior. The patient reported with a prominent anterior gingival swelling of 6 mo duration which slowly enlarged in size and associated with multiple lymph node involvement. Microscopic examination of the lesion using H, E and immunohistochemical diagnosis confirmed the diagnosis as BL. The patient succumbed to the disease before any therapy could be instituted. Since a wide array of causes can be attributed to gingival enlargements, it is necessary to consider malignancies as one of the important differential diagnosis so as to facilitate the need for appropriate diagnosis and prompt treatment.     

Effects of intravenous anesthetic agents on middle cerebral artery blood flow velocity during induction of general anesthesia

Objective. Our objective was to quantify the effects of intravenous anesthetics on values measured by or derived from transcranial Doppler sonography (TCD) during induction of general anesthesia.Methods. We recorded blood flow velocity in the middle cerebral artery (V-MCA) before, during, and after induction of general anesthesia in six groups of young patients without intracranial pathology (n=10 each) using TCD. Patients were randomized to receive either 2 mg/kg propofol, 1.5 mg/kg methohexital, 5 mg/kg thiopental, 0.3 mg/kg etomidate, 2 µg/kg fentanyl and 0.15 mg/kg midazolam, or 1.5 mg/kg ketamine and 0.15 mg/kg midazolam intravenously. At 2 min after injection, each patient was intubated and given isoflurane 0.8% and nitrous oxide 66% in oxygen. Ventilation was set to achieve an end-tidalPco ₂ of 40 mm Hg. V-MCA, arterial blood pressure, heart rate, hematocrit, andPco ₂ (venous samples) were measured before and 1, 3, 5, 10, and 30 min after induction of anesthesia.Results. The preinduction data were not different between groups. At 1 min after injection, propofol, thiopental, methohexital, and etomidate significantly decreased V-MCA. TCD values were only slightly affected following fentanyl/midazolam. Ketamine/midazolam induced a modest rise in V-MCA. After endotracheal intubation, V-MCA increased in all groups, and slowly declined thereafter.Conclusions. Under the circumstances of our study, values derived from TCD measurements responded differently to the agents used to induce general anesthesia in nonneurosurgical patients.     

吗啡、氯胺酮联合用于术后镇痛临床观察

目的 :比较吗啡、氯胺酮联合与吗啡单独使用用于术后镇痛的临床效果。方法 :30例ASAⅠ～Ⅱ的腹部手术全麻病人随机分为两组 ,术后使用吗啡静脉自控镇痛并分别加氯胺酮静脉输注 (氯胺酮组 )和生理盐水静脉输注(生理盐水组 )。观察两组的视觉模拟评分 (VAS) ,吗啡消耗量和发生的     

达芬奇机器人和传统胸腔镜手术治疗肺部疾病的疗效

目的 评价达芬奇机器人手术（robot assisted thoracic surgery, RATS）和胸腔镜手术（video assisted thoracic surgery, VATS）治疗肺部疾病的疗效。方法 对收治的218例行达芬奇机器人和传统胸腔镜手术诊治肺部疾病的临床资料进行回顾性分析。患者自愿选择手术方式,其中RATS组98例,VATS组120例。结果 RATS组手术时间较VATS组长（P<0.01）,手术费用（P<0.05)和住院总花费（P<0.01）较VATS组多。RATS组术中失血量更少（P<0.01）,术后住院时间更短（P<0.05）。两组在中转开胸手术、总引流量、术后引流时间差异均无统计学意义（P>0.05）。肺癌患者中RATS组术后住院时间更短（P<0.01）,住院总花费更高（P<0.01）。非肺癌患者RATS组手术时间更长（P<0.01）,住院总花费更高（P<0.01）;RATS组术中失血量更少（P<0.05）,术后住院时间更短（P<0.05）。结论 达芬奇机器人辅助胸腔镜手术是安全有效的,其在术中出血量和术后住院时间具有明显的优势,而其他指标在机器人手术中无明显优势。     

经颅黑质超声诊断帕金森病的临床评价

目的 通过对帕金森病患者及正常对照组进行经颅超声(transcranial sonography,TCS)检查,结合帕金森病患者的Hoehn Yahr（H Y）分级及帕金森病统一评分量表评分结果,了解我国大陆地区帕金森病患者有无黑质(substantia nigra, SN)回声增强表现。方法 对入选对象进行TCS检查,并对检查结果进行评价。结果 帕金森病患者 SN阳性率明显高于正常对照者（P＜0.05）。帕金森病SN异常组 H Y 分期明显高于帕金森病SN正常组(P＜0.05),表明帕金森病患者SN高回声面积与H Y分期相关。TCS检查对帕金森病的敏感性为80.5%,特异性为79.9%。结论 我国帕金森病患者SN强回声检出率显著高于对照组,说明我国帕金森病患者也存在SN回声增强这一现象,与国内外报道相一致。TCS检查对帕金森病的诊断具有一定的意义,敏感性及特异性较高。