野生型组织型纤溶酶原激活剂工程细胞株生物学特性分析

组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是体内丝氨酸类蛋白酶。它能激活纤维蛋白溶酶原生成纤溶酶，后者将不溶性的纤维蛋白降解为可溶性肽段，使血栓溶解，血管再通。而且由于它与纤维蛋白有高亲和力，只激活血栓表面纤溶酶原，溶解局部血栓，因而引起全身出血倾向小。目前，...     

从SDS－PAGE中提纯t－PA及其抗原特性分析

从ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中提纯ｔ－ＰＡ及其抗原特性分析陈琳，徐秀英，刘士辉，朱恒奇，黄培堂（北京军事医学科学院生物工程研究所北京１０００７１）组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是一种蛋白类溶栓药。与尿激酶、链激酶相比，ｔ－ＰＡ以其与纤维蛋白有特异亲和力，能高...     

t－PA、PAI与缺血性脑血管疾病

ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ与缺血性脑血管疾病武警新疆总队医院内一科李卫综述吴宣富审校（乌鲁木齐８３００００）关键词组织型纤溶酶原激活剂，纤溶酶原激活剂抑制剂，缺血性脑血管疾病缺血性脑血管疾病（ＩＣＶＤ）的主要病理基础是动脉粥样硬化（ＡＳ），凝血与纤溶系统平衡紊...     

He—Ne激光血管内照射对家兔纤维蛋白溶解功能影响的实验研究

为探讨低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光（６３２．８ｎｍ）血管内照射治疗缺血性心、脑血管病的机制，设计了形成颈动脉血栓的家兔模型，观测对此模型组进行三次低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光耳静脉血管内照射（每天１次，平均剂量６７２．３Ｊ／ｃｍ２）前后，血浆中纤维蛋白溶解酶原（简称纤溶酶原）、纤溶酶原激活剂抑制物、组织型纤溶酶原激活剂活性与Ｄ－二聚体和纤维蛋白原含量的变化，并与对照组比较。结果表明：低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光血管内照射对纤溶系统的激活与血液高凝状态的缓解有促进作用，可能是由于低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光血管内照射循环血液，对血液系统的调制作用所致     

运动与纤维蛋白溶解系统

所有存在于血液、尿液和体液中与纤维蛋白分解或分解抑制有关的各种蛋白质的总体称为纤维蛋白溶解系统。纤维蛋白溶解作用是正常人体的重要生理功能,它在清除血管和腺体排泌管道内形成和沉积的纤维蛋白、保证管道畅通、防止血栓形成、排除伤口或炎症病灶内的纤维蛋白、促进伤口愈合等方面起重要作用。研究表明,纤溶活性低下是冠心病的高危因素,且组织纤溶酶原激活物抗原（ｔＰＡａｇ）和纤溶酶原激活抑制剂－１（ＰＡＩ－１）是心血管疾病的独立危险因子。１纤溶系统生理纤溶系统的外激活途径如下图所示。纤溶酶原激活系统（ＰＡ）是丝氨…     

血浆中可溶性纤维蛋白复合物的免疫放射分析及临床应用

血浆中可溶性纤维蛋白复合物（ＳＦＣ）是反映机体凝血和纤溶的敏感指标，其含量与ＤＩＣ和血栓性疾病的发生发展密切相关．我们分别以抗纤维蛋白单抗ＳＺ－５８和抗纤维蛋白原单抗ＳＺ－６５作固相和标记抗体，建立了ＳＦＣＩＲＭＡ，其批内、批间ＣＶ分别为５．８％和９．４％，平均回收率为９６％，可测范围为０．１～１００ｍｇ／Ｌ．正常人血浆中ＳＦＣ的含量为５０．５±２６．１ｍｇ／Ｌ（±２ｓ，ｎ＝２０），糖尿病、急性脑梗塞和急性早幼粒细胞白血病患者分别为４１５±２０８ｍｇ／Ｌ（ｎ＝１３）、４２７±１７５ｍｇ／Ｌ（ｎ＝９），５６４±２０２ｍｇ／Ｌ（ｎ＝７），显著高于正常人（Ｐ＜０．０１）．表明此方法可较准确地反映凝血和纤溶状况，有助于高凝状态和血栓性疾病的诊断．     

纤溶酶原激活剂及其活性测定

纤溶酶原激活剂（plasminogen activator,PA）是一种特异性的蛋白水解酶，它能将无活性的酶前体转变为纤溶酶（plasmin）。纤溶酶是一种有效的非特异性的蛋白水解酶，能够裂解血液内的纤维蛋白凝块使其成为可溶性的多肽。本文描述了纤港酶原激活系统的一些生化特征，及对纤溶酶原激活剂活性的测定方法。纤溶酶原激活剂在血栓性疾病和出血性疾病的诊断具有潜在应用价值。     

用于血栓检测的放射性药物(续)

血纤维蛋白溶酶血中血纤维蛋白溶酶的主要作用是溶解新生栓塞.Back等的一项研究表明血纤维蛋白溶酶的血栓亲和力在纤维蛋白分解系统各组分中是最高的一个.自从Alkjaersig等发现被网着的纤维蛋白溶酶原被激活为血纤维蛋白溶酶,并在血栓中溶解纤维蛋白.对于其作用机理仍有争议.因此,人们怀疑外源的标记由纤维蛋白溶酶与血栓结合的量是否足以能得到外部显像结果.此外,血液中含有高浓度的血纤维蛋白溶酶抑制物,它会在血纤维蛋白溶酶刚注入体内就与其形成复合物,阻止其与血栓结合.一些临床试验报告了应用~(99m)Tc-血纤维     

纤溶酶原激活剂及其活性测定

纤溶酶原激活剂 (plasminogen activator,PA)是一种特异性的蛋白水解酶 ,它能将无活性的酶前体转变为纤溶酶 (plasmin)。纤溶酶是一种有效的非特异性的蛋白水解酶 ,能够裂解血液内的纤维蛋白凝块使其成为可溶性的多肽。本文描述了纤港酶原激活系统的一些生化特征 ,及对纤溶酶原激活剂活性的测定方法。纤溶酶原激活剂在血栓性疾病和出血性疾病的诊断具有潜在应用价值。     

用于血栓检测的放射性药物

从两方面详尽地介绍了用于特异性血栓检测的放射性药物:①针对纤维蛋白的放射性药物.其中包括纤维蛋白原,可溶性纤维蛋白,抗纤维蛋白单克隆抗体,片段E_1,血纤维蛋白溶酶,血纤维蛋白溶酶原激活剂,肝素,纤维连接蛋白等;②针对血小板的放射性药物.其中包括标记的血小板和抗血小板单克隆抗体等.文中用于标记上述药物的放射性核素有~(125)I、~(123)I、~(99m)Tc、~(67)Ga、~(111)In等.另外,还介绍了放射性核素静脉造影技术的发展状况.     

重度心肌挫伤早期血栓前状态的实验研究

目的：探讨重度心肌挫伤早期是否存在血栓前状态及其变化特征，为临床早期诊断和妥善处理提供理论依据．方法：应用兔分级心肌挫伤模型，对重度心肌挫伤新西兰兔伤后（或伪撞击后）２４０分钟内血液流变学，血浆组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）及其抑制物（ＰＡＩ）活性的动态变化和病理学改变进行了观察．结果：（１）低切变率下全血粘度以及红细胞聚集指数于伤后３０分钟明显升高，伤后２４０分钟仍维持在高于正常水平（Ｐ＜０．０５）；（２）ｔ－ＰＡ活性在伤后３０分钟下降，而ＰＡＩ活性则上升，但改变均不明显．伤后１２０分钟，ｔ－ＰＡ活性明显下降，而ＰＡＩ活性明显上升．伤后２４０分钟，上述变化更明显；（３）病理学改变符合重度心肌挫伤表现，并发现冠脉内皮损伤．结论：重度心肌挫伤早期存在血栓前状态．血栓前状态可能是重度心肌挫伤及其并发症发生发展的病理生理基础之一     

抗细胞间粘附分子—1单抗对异丙肾上腺素所致心肌损害的保护 …

为探讨抗细胞粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）单抗对异丙上腺素（异丙肾）所致ＳＤ大鼠心肌损害的保护作用，在光镜下观察了经抗ＩＣＡＭ－１单抗预处理和未预处理，均通过多次大剂量民划丙肾导致的大鼠心肌损害（ＨＥ染色）的程度。结果：心肌损害程度处理组（多为Ⅱ级，５／６只）与对照组（多为Ⅲ级，６／７只）之间比较，差异有非常显著性意义，另外还发现，处理组心肌损伤区的粒细胞聚集明显轻于对照组，提示抗ＩＣＡＭ－１单抗对     

鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低分子量尿激酶融合蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达

目的：构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低分子量尿激酶融合基因,并在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中高效表达。方法：应用重组ＤＮＡ 技术,将编码尿激酶原信号肽的ＤＮＡ 片段,与鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低分子量尿激酶基因融合在一起,并插入真核表达载体ｐＭＪＫ３ 中,构建成重组质粒ｐＭＪＫ３Ｄ。通过细胞电击穿孔法,将该重组质粒转染到中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株（ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－ ）中,转染细胞经选择培养基筛选,并采用ＭＴＸ加压扩增培养。结果：得到了高效表达融合蛋白的细胞株,表达水平为３００ Ｕ／（１０６ 细胞·ｄ）。通过ＥＬＩＳＡ 和溶解圈方法鉴定,该融合蛋白可与Ｄ－二聚体结合,并具有激活纤溶酶原溶解纤维蛋白的活性。结论：成功构建并获得高效表达双功能融合蛋白的细胞株,为进一步研究这一双功能融合蛋白的体内外特异溶栓活性以及评价其作为新型导向溶栓制剂奠定了基础。     

凝血酶上调人肾小球系膜细胞PAI-1表达的细胞内信号转导研究

为探讨转录因子活化子蛋白１和相关的信号转导分子在凝血酶诱导人肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物１表达中的作用,采用纤维蛋白平板法。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,凝胶电泳阻滞实验和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交方法,分别检测凝酶刺激培养的人肾小球系膜细胞ＰＡＩ－１蛋白质活性和ｍＲＮＡ表达情况,以及ＡＰ－１ ＤＮＡ连接活性和ＡＰ－１组成蛋白质ｃ－Ｊｕｎ,ｃ－Ｆｏｓ量的变化。     

组织型纤溶酶原激活剂与慢性硬膜下血肿的关系

慢性硬膜下血肿（ＣＳＤＨ）的病因中局部纤溶亢进起重要作用，组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是纤溶系统中的关键成份。笔者对ＣＳＤＨ病例静脉血、血肿液及引流液的ｔ－ＰＡ含量进行了测定：静脉血为２．７１±０．７３ｎｇ／ｍｌ；血肿液６．２４±２．７８ｎｇ／ｍｌ；引流液０．９２±０．２２ｎｇ／ｍｌ。ＣＳＤＨ外膜中血窦和毛细血管的内皮细胞中富含ｔ－ＰＡ，当ｔ－ＰＡ适当分泌入血肿腔时，硬膜下血肿可被吸收，当ｔ－ＰＡ过度分泌时，局部发生纤溶亢进和毛细血管出血，致血肿逐渐扩大。     

重组人尿型纤溶酶原激活剂的冻干及其稳定性观察

由血栓引起的心血管系统疾病严重威胁着人类健康，临床上急需一种溶栓效果好、副作用小的药物。尿型纤溶酶原激活剂（ｕ－ＰＡ）作为一种有前景的溶栓药物已受到国内外普遍重视，我所构建的表达重组人ｕ－ＰＡ的ＣＨＯ工程细胞（ＣＬ－１１Ｇ株）培养上清经纯化可获得含约...     

尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂PAI—1mRNAs的表达与人肝 …

对探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ的表达变化与人肝细胞癌浸润,转移间接关系,应用Ｎｏｒｈｅｒｎ印迹交技术对３０例新鲜活检肝组织作ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ表达的研究。     

带节育环妇女宫腔液血纤维蛋白溶酶原激活物的测定

用溶解圈法对带节育环妇女宫腔液血纤维蛋白溶酶原激活物(PA)进行测定,并经抗尿激酶(UK)血清及抗组织型血纤维蛋白溶酶原激活物(t-PA)血清中和抑制试验鉴定 PA 类型(UK 或 t-PA)的特异性。结果证明,上环妇女宫腔液中 PA 的阳性率及PA 含量均高于未上环组,特别是上环1、2个月与未上环者差别显著,以后各组逐渐下降,1年以后接近未上环组,PA(UK 及 t-PA)是溶血栓类物质,上环妇女宫腔液中 PA物质的增高有可能是导致月经过多的主要原因。     

^99Tc^m—抗人活化血小板单抗SZ—51对犬冠状动脉血？…

目的 用＾９９Ｔｃ＾ｍ－抗人活化血小板单抗ＳＺ－５１对犬冠状动脉血栓模型进行放射免疫显像（ＲＩＩ）研究。方法 杂种犬４条，透视下自右侧股庳 管，将自制螺旋钢圈置入左冠状动脉前降支或回旋支，用造影证实其血栓模型制作的可行性。其中３条犬完全冠状动脉血栓模型制作后行活体和离体心脏血栓ＲＩＩ。结果 犬冠７状动脉血栓模型制作成功，共制作５处血栓，３条犬注射＾９９Ｔｃｍ－ＳＺ－５１后１～６ｈ显像，３处血栓显影     

99mTc-抗D-二聚体单抗对实验动物陈旧性血栓的放射免疫显像研究

目的研究^99Tc标记的抗D-二聚体单抗在陈旧性动脉血栓和静脉血栓靶向定位诊断中的应用。方法采用机械损伤血管内膜的方法复制家兔股动脉血栓和股静脉血栓模型，血栓形成后3d将^99Tc标记的抗D-二聚体单抗注入动物血管内，以放射免疫显像检测技术观察放射性核素在血流和血栓部位的分布。结果血栓处放射性^99Tc的分布较健侧明显增多，而单纯钳夹血管组及正常对照组未见局部放射性物质的堆积。注入^99Tc标记的单抗后，动物未见不良反应，主要脏器未见病理改变。结论^99Tc标记的抗D-二聚体单抗可以作为血栓导向示踪剂，用于陈旧性动脉血栓和静脉血栓的定位诊断。