肺炎克雷伯菌老年人分离株氨基糖苷类修饰酶和I类整合酶基因研究

目的 了解肺炎克雷伯菌(KPN)老年人分离株氨基糖苷类修饰酶和I类整合酶基因存在状况.方法 对80株PKN菌进行2种氨基糖苷类修饰酶基因和I类整合子的遗传标记-I类整合酶基因检测.结果 80株KPN菌中aac(3)-Ⅱ阳性60株(75%)、aac(6)-Ⅰb阳性5株(6.3%),共有60株检出氨基糖苷类修饰酶基因(75%),intll基因阳件62株(77.5%),与庆大霉素、妥布霉素、奈替米星、阿米卡星耐药率分别为75%、80%、65%和60%.结论 该80株老年人分离株PKN菌氨基糖苷类抗菌药物耐药与产氨基糖苷类修饰酶及I类整合酶基因密切相关.     

多重耐药大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶与Ⅰ类整合酶基因的研究

目的 探讨本地区临床分离多重耐药大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)的氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合子基因存在情况.方法 纸片扩散法(K-B法)测定71株大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性,应用PCR技术对E.coli进行氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因的检测.结果 71株大肠埃希菌对庆大霉素、左氧氟沙星、头孢噻肟、头孢他啶的耐药率分别分为66.20％、63.38％、59.15％、18.31％,其中23株为多重耐药株(32.39％).氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅱ阳性40株(56.34％),aac(6′)-Ⅰ阳性22株(30.99％),ant(3″)-Ⅰ阳性14株(19.72％),未检出aac(6′)-Ⅱ阳性株,氨基糖苷类修饰酶基因总检出率为74.65％;Ⅰ类整合酶基因(intI1)阳性53株(74.65％).多重耐药与非多重耐药大肠埃希菌中aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ、总氨基糖苷类修饰酶基因、intI1的阳性率有统计学差异(P＜0.05).结论 本地区多重耐药E.coli的氨基糖苷类修饰酶基因、Ⅰ类整合酶基因携带率高.     

肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因检测的临床应用

目的评价应用检测氨基糖苷类修饰酶基因判断肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药性。方法对61株肺炎克雷伯菌采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,再采用聚合酶链反应检测氨基糖苷类修饰酶基因并比较分析。结果61株肺炎克雷伯菌对AMK、GEN、TOB、NET耐药率分别为52.4%、86.9%、91.8%、78.7%;氨基糖苷类修饰酶基因检出率（56/61）91.8%,其中aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ检出率分别为13.1%、60.7%、55.7%、4.0%、6.6%、26.2%。结论采用聚合酶链反应法检测肺炎克雷伯菌氨基糖苷类修饰酶基因判断耐药与K-B纸片扩散法高度一致,灵敏度高,特异性强,是筛选氨基糖苷类抗菌药物耐药的可靠方法。     

鲍曼不动杆菌氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因研究

目的了解我院鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii，AB）氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因存在情况。方法根据美国CLSI／NCCLS2004年版要求进行抗菌药物敏感性试验，应用PCR技术对AB菌进行氨基糖苷类修饰酶和Ⅰ类整合酶基因检测。结果AB菌对13种抗菌药物耐药严重。27株AB菌中氨基糖苷类修饰酶基因aac（3）-I阳性23株（85．2％）、aac（6′）-I阳性18株（66．7％）、ant（3″）-I阳性22株（81．5％）。氨基糖苷类修饰酶基因总检出率为85．2％。Ⅰ类整合酶基因（intI1）阳性23株（85．2％）。结论我院AB菌不仅具有多重耐药性，而且氨基糖苷类修饰酶基因、Ⅰ类整合酶基因携带率高。     

肺炎克雷伯菌（ESBLs）氨基糖苷类修饰酶基因的研究

目的了解临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌的耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法对临床分离的35株产ESBLs肺炎克雷伯菌采用聚合酶链反应技术（PCR）检测6种氨基糖苷类修饰酶aac（3）-Ⅰ,aac（3）-Ⅱ,aac（6）-Ⅰ,age（6’）-Ⅱ,ant（3″）-Ⅰ,ant（2″）-Ⅰ。结果该35株肺炎克雷伯菌检出：aac（3）-Ⅰ阳性4株（11．8％）,aac（3）-Ⅱ阳性7株（20．6％）,aac（6’）-Ⅰ阳性13株（37．1％）,aac（6’）-Ⅱ阳性7株（20％）,ant（3″）-Ⅰ阳性11株（31．4％）,ant（2″）-Ⅰ阳性12株（34.3％）。共有26株（74．3％）检出AMEs。同一菌株可产生两种或两种以上的氨基糖苷类修饰酶基因。结论临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯茵氨基糖苷类修饰酶基因携带率高。     

耐氨基糖苷类铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的了解广州地区耐氨基糖苷类抗生素铜绿假单胞菌的氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因和甲酰化酶基因的存在情况。方法用聚合酶链反应(PCR)测定临床分离的196株氨基糖苷类抗生素耐药的铜绿假单胞菌7种主要的AMEs基因和2种甲酰化酶基因。结果广州地区铜绿假单胞菌的AMEs基因携带率较高(93.37%),其修饰酶基因检出率分别为ant(3")-I(54.59%),aac(3)-II(44.89%),aac(6’)-II(43.37%),aac(6’)-I(36.73%),ant(2")-I(32.14%),aph(3’)-IV(19.90%),aac(3)-I(0);同时携带2种或2种以上AMEs基因的菌株占70.92%;未检测到甲酰化酶基因阳性的菌株。结论广州地区铜绿假单胞菌中AMEs基因携带率较高,已出现多型别流行趋势,同一菌株携带多个不同的AMEs基因现象较多;尚未发现有甲酰化酶的流行。     

aac(6')-II和qacE△1-sull基因在非发酵革兰阴性杆菌烧伤分离株中流行

目的 研究非发酵革兰阴性杆菌烧伤分离株携带的氨基糖苷类耐药基因和整合子、转座子遗传标记.方法:测定分离自烧伤患者的铜绿假单胞菌(Pa)和鲍曼不动杆菌(Ab)各20株对20种抗菌药物的敏感性,PCR检M95种氨基糖苷类修饰酶基因(aac(3)-II,aac(6')-Ib,aac(6')-II,ant(3"),-I、ant(2")-I)、3种16S rRNA甲基化酶基因(rmtA、rmtB、rmtD),1种I类整合子遗传标记(gacEA l-sull)和1种转座子遗传标记(merA).结果 40株非发酵菌对阿米卡星、庆大霉素及妥布霉素等氨基糖苷类抗生素耐药率达到95%-100%,38株(95%)非发酵菌携带aac(6)-II基因,39株(97.5%)非发酵菌携带gacEA l-sull基因.20株铜绿假单胞菌检出rmtB基因.结论 本组非发酵菌烧伤分离株对氨基糖苷类抗生素耐药严重,aac(6')-II和qacEAI-sull基因在非发酵菌烧伤分离株中流行.     

鲍曼不动杆菌老年患者分离株中发现16S rRNA甲基化酶基因新亚型

目的了解鲍曼不动杆菌老年患者分离株16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因型。方法采用PCR检测20株鲍曼不动杆菌老年患者分离株12种16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果7株检出16SrRNA甲基化酶基因（armA），19株检出氨基糖苷类修饰酶基因[其中aac（3）-I阳性率为95％，ant（3″）-I为95％，aac（3）-II为40％，aac（δ′）-Ib为15％）]。6号株armA基因测得序列翻译成氨基酸序列与美国核酸库（GenBank）已登录的armA氨基酸不同，为新亚型。结论本组鲍曼不动杆菌老年患者分离株95％携带16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。     

阴沟肠杆菌质粒介导氨基糖苷类耐药基因检测及同源性分析

目的 了解贵阳某三甲医院阴沟肠杆菌的氨基糖苷类耐药机制及其之间的同源性,指导本院阴沟肠杆菌感染的抗菌治疗。方法 采用PCR方法检测110株阴沟肠杆菌的7种氨基糖苷类修饰酶基因AMEs(aph(3')-VI、aac(3)-I、aac(3)-II、aac(3)-III、aac(6')-Ib、ant(2')-I和ant(3')-I),2种16SrRNA甲基化酶基因(armA、rmtB)和整合子基因intI,并分析其与耐药表型之间的相关性;用ERIC-PCR方法分析110株阴沟肠杆菌间的同源性。结果 110株阴沟肠杆菌共检出5种AMEs基因,aac(6')-Ib检出率最高,未检出aph(3')-VI和aac(3)-I,AMEs基因总阳性率为46.36%(51/110),16S rRNA甲基化酶基因总阳性率为8.18%(9/110),intI的阳性率为47.27%(52/110);10株阿米卡星耐药株中有9株检出aac(3)-III,庆大霉素耐药株和妥布霉素耐药株均以aac(6')-Ib检出率最高;82.73%的菌株基因型与耐药表型相符;110株阴沟肠杆菌被分为20个型别。结论 本院阴沟肠杆菌氨基糖苷类耐药基因与氨基糖苷类抗生素的耐药表型间符合率高,部分菌株间存在克隆播散现象。     

1株携带多种抗生素灭活酶基因的铜绿假单胞菌临床分离株

目的了解铜绿假单胞菌携带多种抗生素灭活酶基因的情况和有关机制。方法应用聚合酶链式反应（PCR）法对多重耐药的铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因和oprD2基因检测与分析。结果PCR结果显示CARB和TEM型β-内酰胺酶基因。aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ、ant（2′）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ氨基糖苷类修饰酶基因扩增阳性。oprD2基因扩增检测呈缺失型。CARB和TEM型β-内酰胺酶基因扩增产物经测序、BLASTn比对分析为blacARB-3和blaTEM-1。结论铜绿假单胞菌可携带多种抗生索灭活酶基因，多重耐药铜绿假单胞菌（MDRP）的逐渐增多，严重威胁临床的抗感染治疗。