钩藤碱与育亨宾对肾上腺素α_1,和α_2受体激动剂效应的影响

钩藤碱(rhychophylline, Rhy)与育亨宾(yohimbin, Yoh)化构极为相似。本文用离体犬隐静脉条片,比较了二者对α_2受体激动剂可乐定(Clo)和α_1受体激动剂苯肾上腺素(Phe)所致收缩的影响。结果表明,Rhy～100μmol/L使Clo的量效曲线右移,并使最大反应降低,呈非竞争性对抗。而Yoh0.1和1μmol/L则使Clo的量效曲     

大鼠抗人血红蛋白单克隆抗体的制备及其特性定鉴

将人血红蛋白(Hb)免疫LOU/M(IgK-1a)大鼠,取脾细胞与IR983F大鼠骨髓瘤细胞融合,制备了3株大鼠抗Hb单克隆抗体(McAb)2A10、9B5,4F12杂交瘤细胞株。3种McAb腹水效价分别为1:16×10~4、1:3.2×10~4、1:323×10~4。培养上清效价分别为1:256、1:16、1:8。亚类测定分别为IgM、IgG2_a、IgG2_4、染色体记数2A10为60±5,9B5为72±6。3种McAb的亲和常数分别为1.28×10~6M~(-1)、6.35×10~7M~(-1),3.64×10~8M~(-1)。特异性检测表明3种McAb与人Hb及人红细胞的亲和力明显高于其它种类动物的红细胞,与无关蛋白无结合活性。用这些McAb检测Hb最低可测到1υg水平,检测人红细胞可检测到4～8个RBC/ml(相当于90～190ngHb/ml)。大大高于目前临床常用的测定潜血方法。     

胰岛素对杂交细胞生长的影响

培养基中的胰岛素浓度明显地影响CAN181杂交瘤细胞的集落效率(P<0.05)。当浓度为1.0×10~(-2)u/ml或1.0×10~(-3)u/ml时,集落效率最高(39％)。用含有5.0×10~(-3)u/ml胰岛素的RPMI 1640完全培基培养融合细胞,其杂交细胞生长率和阳性孔的比率比未加胰岛素者有明显的提高(分别为P<0.001,P<0.05)。这些结果表明,在培基中添加一定量的胰岛素能有效地促进杂交细胞的生长。     

抗心绞痛药-尼可地尔强化异丙肾上腺素引起大鼠主动脉松驰作用:与cGMP抑制性cAMP磷酸二酯酶的关联

作者观察了尼可地尔对异丙肾上腺素(ISO)引起的大鼠主动脉环松弛作用的影响;发现:ISO(10~(-9)～3×10~(-6)mol/L)可以使苯肾上腺素(3×10~(-7)mol/L)引起收缩的大鼠主动脉环松弛。用尼可地尔(3×10~(-7)mol/L～3×10~(-6)mol/L)进行预处理,ISO的作用被强化,而克罗卡林则无此作用。尼可地尔亦能加强佛司可林(3×10~(-9)mol/L～10~(-6)mol/L)及双丁酰环磷腺苷(3×10~(-6)mol/L,3×10~(-4)mol/L)的血管     

阿霉素、柔红霉素对CFU-GM和L-CFU细胞毒作用的比较

我们用微量液体克隆形成法比较了阿霉素(ADM)及柔红霉素(DNR)对正常人粒单系细胞克隆形成细胞(CFU-GM)及急性非淋巴细胞白血病患者白血病克隆形成细胞(L-CFU)的细胞毒作用。结果:ADM-IC_(90)(IC_(90)即抑制90％克隆形成时的药物浓度)分别为4.12±0.57×10~1ug/ml(24小时作用法)、4.25±0.55×~(-3)ug/ml(168小时作用法,X±SD),相应的DNR-IC_(90)分别为2.08±0.44×10~(-1)ug/ml、1.98±0.33×10~(-3)ug/ml,即DNR     

去血管内皮对猪离体肺、冠状动脉缺氧性收缩反应的影响及其机制

在浴槽实验中观察了血管内皮对离体猪肺内动脉(PA)及冠状动脉(CA)急性缺氧反应的影响。在以苯肾上腺素(PE,2×10~(-8)mol/L)和组织胺(His,2×10~(-6)mol/L)分别使PA、CA预收缩具一定张力后,浴槽低氧(PO_2=40±10mmHg,5.33kPa)可使PA、CA产生收缩,其中PA的张力提高了0.86±0.1g(n= 12),     

UK-68,798对家兔心脏房室结区不同细胞的电生理作用

在离体家兔房室结(AVN)区标本上,用微电极技术研究了Ⅲ类抗心律失常新药UK-68,798对AN、N、NH、H 4种细胞的电生理效应。浓度为5×10~(-9)至5×10~(-6)mol的UK-68,798对上述4种细胞的APA、RP皆无影响,对AVN的自搏频率有剂量依赖性减慢作用但不改变A-H传导时间.在5×10~(-8)～5×10~(-6)mol的剂量范围,UK-68,798使APD_50和APD_(90)发生剂量依赖性延长.4种细胞中以N细胞的APD_(50)和APD_(90)延长百分率最高。各类细胞APD_(90)延长百分率依大小排列,其次序为N>AN>H>NH.例如当浓度为5×10~(-6)mol时4类细胞APD_(90)的延长百分率分别为95±26％(N)、75±22％(AN)、63±26％(H)、46±     

乳腺癌组织中ERα mRNA和PR mRNA检测方法的建立和应用

建立测定雌激素受体α(ERα)mRNA和孕激素受体(PR)mRNA的实时荧光定量RT-PCR,探讨两者在乳腺癌组织及良性乳腺肿瘤组织中的表达水平。分别以pMD18 ERα和pMD18-PR质粒为定量模板,用循环阈值(Ct)定量起始模板,在荧光TaqMan方法的基础上建立了测定ERαmRNA和PR mRNA的实时荧光定量RT-PCR,并分别测定48例乳腺癌组织及28例良性乳腺肿瘤组织中ERαmRNA和PR mRNA的表达水平。ERαmRNA和PR mRNA测定的线性范围为10~3～10~8copy/μg RNA;ERαmRNA和PR mRNA高值和低值的批内和批间变异系数(CV)在5.07%～11.28%之间。ER mRNA在乳腺癌组织中的表达量为6.76×10~5copy/μg RNA(4.17×10~5,9.34×10~5),良性乳腺肿瘤组织中的含量为1.54×10~5 copy/μg RNA(1.02×10~5,2.06×10~5),乳腺癌组织的表达量高于良性组织(P<0.05);PR mRNA在乳腺癌组织中的表达量为1.02×10~6copy/μg RNA(6.81×10~5,1.36×10~6),良性乳腺肿瘤组织中的含量为4.93×10~5 copy/μg RNA(3.21×10~5,6.65×10~5),两者表达无明显差异(P>0.05)。ERαmRNA和PR mRNA在乳腺癌和良性乳腺肿瘤组织中的表达存在相关性。我们建立的测定ERαmRNA和PR mRNA的实时荧光定量RT PCR灵敏、稳定、重复性好,可供临床检测和研究。ERαmRNA和PR mRNA基因表达水平可作为预测治疗效果及判断预后的重要指标。     

环胞素A对IL-4等合成的影响

<正>本文观察环胞素A(C_3A)对哮喘患者PBMC合成IL-4、IL-5、IgE的抑制作用.1 材料和方法1.1 对象 临床确诊为哮喘的病人20例,均为缓解期,1周内均未使用糖皮质激素.β-受体兴奋剂和茶碱类药物.另以10例健康人为对照组.1.2 实验方法1.2.1 单个核细胞(PBMC)的分离和培养:按常规用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,并调整细胞浓度为2×10~6/ml,将健康对照和哮喘患者的PBMC加在含有100mg/L PHA的RPMI-1640培养剂中.此外,在PHA(100mg/L)刺激的同时,将哮喘病人的PBMC分别加在含有1×10~(-6)mol/L、2×10~(-6)mol/L、3×10~(-6)mol/L C_sA的RPMI-1640培养剂中.37℃、5%CO_2温育48h,离心,收集上清,-80℃     

~(125)I标记单克隆抗体竞争结合试验在研究细胞表面抗原中的应用

用氯胺-T法将~(125)I标记到经高压液相纯化的单克隆抗体上进行竞争结合试验,对刺激前后人T细胞白血病细胞株Jurkat和H-TLV-1感染的HUT 102 B2细胞表面活化抗原进行定量检测,结果表明,静止Jurkat细胞不表达Tac抗原(CD25),TLisA1抗原为2.8×10~3/每个细胞,kd值为1.37×10~(-9)M;PMA 20ng/ml刺激24h后Jurkat细胞表面Tac分子为3930/每个细胞,kD值为1.56×10~(-10)M,TLisA1分子增加到2.4×10~4/每个细胞,kD值无明显变化。未刺激HUT     

抗利尿激素单克隆抗体的制备及初步应用

作者应用B淋巴细胞杂交瘤技术,成功地建立了分泌抗抗利尿激素(ADH)的McAb细胞株,所获的3株细胞分泌的McAb分别为IgG1,IgG2a,IgG2b。其诱生腹水滴度可达1×10~(-5)～5×10~(-5),灵敏度为2.5ng/ml。抗体亲和力K值在(3～4)×10~(-9)L/M之间,受温度影响明显。McAb与11种神经肽进行竞争抑制试验,均无交叉反应。静脉注射McAb可使新西兰兔尿量明显增加。用免疫组化的方法对大鼠下丘脑神经细胞进     

整合素beta1亚单位对肝癌细胞与IV型胶原黏附与趋化行为的影响

采用微吸管实验技术 ,测定肝细胞癌 (Hepatocellular carcinom a,HCC)细胞与 IV型胶原裱衬表面的黏附力 ;进一步加入针对整合素 beta1亚单位 (CD2 9)的单克隆抗体 (Anti- CD2 9)处理 HCC细胞 ,观察 Anti- CD2 9对细胞与 IV型胶原裱衬表面的黏附力的影响。采用双微吸管实验法进行 HCC细胞趋化实验 ,在两侧微管内加入相同浓度 (6 0 0μg/ ml )的 IV型胶原 ,并引导微管尖端与同一细胞紧密接触 ,动态观察细胞两侧伪足形成过程 ;在一侧微吸管内加入 2 0μg/ ml Anti- CD2 9,考察 beta1整合素亚单位阻断对 HCC细胞伪足形成的影响。利用流式细胞仪对 HCC细胞表面整合素 beta1亚单位的表达进行分析。结果表明 ,HCC细胞与 5μg/ ml IV型胶原裱衬表面之间的黏附力为 932± 134(× 10 - 1 0 N ,n=6 0 ) ,加入 5μg/ ml Anti- CD2 9黏附力减小到 4 4 9± 119(× 10 - 1 0 N,n=6 0 ) ;加入 10 μg/ ml Anti- CD2 9时黏附力减小到 2 2 0± 78(× 10 - 1 0 N,n=5 5 )。双微吸管趋化实验表明 :两侧微吸管加入相同浓度 IV型胶原 ,细胞向两侧微吸管均有伪足形成 ;在此基础上 ,微吸管加入 Anti- CD2 9的一侧 ,HCC细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制 ,而未加入 Anti- CD2 9的微吸管一侧与加入的对侧相比 ,该侧细胞的伪足明显增     

8—8 恒定旋转低频脉冲磁场对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

本文报导以CS-403型旋磁机,旋转磁场平均强度为1100G,以钐钴合金永磁块,半径5mm,高6mm,场强3000G;以低频脉冲磁场机(系我院物理学教研室研究制造),场强为2.4G,频率20～200HZ为三种不同磁场装置,进行对C_(57)BL纯系小鼠腹腔巨噬细胞(MФ)吞噬白色念珠菌的吞噬功能观察,初步探讨以上三种磁场对抗感染作用的机理,为临床上常采用的磁场抗感染治疗提供实验依据。试验所用白色念珠菌系24小时培养物,浓度为4×10~6/ml,C~(57)BL纯系小鼠腹腔细胞悬液浓度为2×10~6/ml。以上浓度均用20％FCS1640培养基配制,等量混合,滴     

淋巴因子诱导的细胞毒细胞活性检测的研究

本文通过正交设计试验,建立了一种改良的诱生及检测LICC细胞毒活性的培养体系。先将脾脏淋巴细胞(5×10~6/ml)在含有IL-2(0.5U/ml)、CCDF(50％V/V)RPMI1640培养液中预培养72小时,然后加入肿瘤细胞(5×10~4/ml),用~3H-TdR后标法检测LICC细胞毒活性,杀伤时间为72小时。     

催产素对BALB／c小鼠胸腺细胞增殖的促进作用

目的研究催产素(oxytocin,OT)对离体Balb/c小鼠胸腺细胞增殖的影响。方法用3H-TdR掺入法,研究在离体培养状态下不同浓度的OT对胸腺细胞增殖的影响。结果在1×10-5g/l至1×10-3g/l的范围内OT可使胸腺细胞增殖指数增加,在此范围之外对其增殖指数无明显影响。结论在一定浓度范围内OT有促进胸腺细胞增殖的作用。     

G6PI对阿霉素诱导类风湿关节炎关节滑膜细胞凋亡的保护作用

研究葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,G6PI)对阿霉素(adriamycin,ADR)诱导类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis RA)滑膜成纤维样细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)凋亡的影响,探讨其作用机制。本研究从RA的关节滑膜组织中分离培养FLS,利用ADR建立细胞凋亡模型,通过流式细胞仪检测G6PI对细胞凋亡的影响,并通过western blot、Q-PCR检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、Caspase 3、Fas、Cyclin B1的表达;收集细胞培养上清,通过ELISA方法测定IL-1β和TNF-α含量。结果显示,G6PI(1μg/ml)和G6PI(10μg/ml)组RA-FLS的凋亡指数均显著低于ADR对照组;G6PI(1μg/ml)组与G6PI(10μg/ml)组间无显著差异。ADR凋亡模型中,Caspase 3、Fas和Bax表达明显上调,Cyclin B1下调;G6PI作用后,Caspase 3和Fas表达明显低于对照组,Cyclin B1表达则明显高于对照组。G6PI处理组的细胞培养上清中IL-1β和TNF-α含量均显著高于ADR对照组。研究表明G6PI可能通过Fas介导的Caspase通路来保护FLS免遭凋亡,同时促进RA-FLS分泌炎症因子IL-1β和TNF-α,从而参与RA的发生与发展。     

地塞米松对C6胶质瘤细胞细胞周期的影响

目的:研究地塞米松(Dex)对C6胶质瘤细胞细胞周期和增殖的影响。方法:在培养的C6胶质瘤细胞中加入不同浓度(0 mol/L、10-5mol/L、10-4mol/L和10-3mol/L)的Dex,作用不同的时间(6、12和24 h)后取材,运用细胞计数和流式细胞仪检测C6胶质瘤细胞的增殖情况、细胞周期及凋亡。结果:10-3mol/L的Dex诱发了C6胶质瘤细胞的凋亡。24 h时,4个组的C6胶质瘤细胞凋亡率依次为0.37、0.52、0.39和8.24;4个组的C6胶质瘤细胞个数依次为4.37×106、4.29×106、3.57×106和3.44×106,后3组与第1组有明显的差异;4个组的C6胶质瘤细胞增殖指数依次为17.58、6.79、6.29和22.48,前3组随浓度增加而增加,第4组例外。结论:Dex对C6胶质瘤细胞的细胞周期进程有明显的抑制作用。10-4mol/L以下的浓度抑制其由G1期向S期的转换,10-3mol/L剂量的Dex可能抑制C6胶质瘤细胞由G2期向M期的转换或阻滞细胞在S期。大剂量的Dex(10-3mol/L)可引起C6胶质瘤细胞凋亡。     

抗AFP抗体—蓖麻毒素A链偶联物对靶细胞AH66的体外杀伤效应

本文应用流式细胞仪(FACStar~(PIns))的荧光分析技术,去检测与比较羊抗大鼠甲胎蛋白抗体(αAFP)与蓖麻毒蛋白A链(RTA)偶联物(αAFP-RTA)、RTA及αAFP和BTA的混和物(αAFP+RTA)对大鼠腹水型肝癌细胞AH66的体外杀伤作用。其αAFP-RTA、RTA和αAFP+RTA的剂量均以RTA的克分子浓度计算,致死50％靶细胞的浓度(IC_(50))分别为6×10~(-9.6)mol/L、6×10~(-8.4)mol/L、6×10~(-8.2)mol/L。αAFP-RTA与RTA的IC_(50)之比为1:12,αAFP-RTA与αAFP+RTA的IC_(50)之比为1∶14。相当于αAFP-RTA中抗体量的αAFP对AH66细胞不显示杀伤作用。实验证明,αAFP-RTA有明显的导向杀伤靶细胞的效应。上述实验结果与以台盼蓝除外试验所获得的结果基本一致。     

MTT法分析肺泡Mφ上清促纤维母细胞生长活性

本文对MTT比色法用于检测肺泡巨噬细胞上清对纤维母细胞的促生长活性的条件进行了探讨。结果表明:对于实验所选用的三种纤维母细胞,即NIH3T3细胞、人胚肺纤维母细胞、大鼠肺纤维母细胞,在细胞浓度为1×10~5-5×10~6/ml之间,和经低血清浓度(0.4％FCS)培养4—5天后,MTT比色法能较为敏感地反映出矽肺大鼠肺泡巨噬细胞上清对三种纤维母细胞的促生长效应。     

一种平行—培养皿流动室用于细胞对固体表面的吸附力研究

作者报道了人体皮肤成纤维细胞在一种新型平行—培养皿流动室,分流层,细胞吸附和分离的情况。在平行-培养皿顶部为甲基丙烯酸甲酯把两个平皿隔开,相互通过上面涂有镍的7.6×5.0×0.2cm(1×w×h)两个空间,室的容积效应为7.6×3.8×0.02cm(1×w×h)。在研究过程中计算室中心变速压力,通过摄像系统分析,测定细胞周长、形状与传播范围。把人体成纤维细胞放入25cm~2和75cm~2T型长颈瓶中,37℃5%CO_2培养,其中含Hepes-缓冲液RPMI1640培养基、2mM谷酰胺、100IU/ml青霉素/链霉素、10%胎牛血清。细胞经过胰酶消化,稀释成10~5/ml,取5ml