整装培养细胞内质网的透射电镜观察

采用以高锰酸钾为固定剂的整装培养细胞制样技术：观察了几种细胞系细胞（Ｈｅｌａ，ＬＡ_（７９５），２ＢＳ）内质网（ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍ，简称ＥＲ）的超微结构。由ＥＲ小管构成的连续的网络系统存在于整个细胞的细胞质中。此法同样适于观察线粒体的超微结构及线粒体的三维空间关系，在Ｈｅｌａ细胞中，仅用高锰酸钾固定剂固定７ｍｉｎ就能清晰地看到线粒体的嵴。结果表明，本方法适于观察细胞中膜细胞器的分布和超微结构。     

整装培养细胞内质网的透射电镜观察

采用以高锰酸钾为固定剂的整装培养细胞制样技术:观察了几种细胞系细胞(Hela,LA₇₉₅,2BS)内质网(endoplasmic reticulum,简称ER)的超微结构.由ER小管构成的连续的网络系统存在于整个细胞的细胞质中.此法同样适于观察线粒体的超微结构及线粒体的三维空间关系,在Hela细胞中,仅用高锰酸钾固定剂固定7min就能清晰地看到线粒体的嵴.结果表明,本方法适于观察细胞中膜细胞器的分布和超微结构.     

氢过氧化枯烯对整装培养人血管内皮细胞损伤作用的研究

本实验改良了传统方法,自创PF膜和浮膜培养法,首次整装培养人血管内皮细胞成功,经高锰酸钾固定剂固定,消化细胞内蛋白质,保留脂质膜性系统,应用透射电镜进行整体观察。在此基础上,用氢过氧化枯烯处理,造成整装内皮细胞线粒体,内质网的脂质过氧化损伤模型。本实验进一步证实脂质过氧化对内皮细胞生物膜的损伤,并报告了内质网和线粒体损伤的整体结构变化。     

应用LSCM对脑脊液淋巴瘤细胞内质网的研究

目的：通过激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）技术对脑脊液淋巴瘤细胞内质网进行立体、动态、定量研究。方法：将所观察脑脊液细胞分为正常淋巴细胞组、淋巴瘤细胞组，内质网以荧光探针DiOC6(3)标记后，得到内质网的断层扫描图像、荧光强度地形立体分布图并且定量测量内质网的荧光强度值。结果：与正常淋巴细胞相比，淋巴瘤细胞内质网空间立体分布有明显差别，平均荧光值明显增强，有非常显著性差异（P＜0．01）。结论：本研究对中枢神经系统淋巴瘤的诊断、鉴别诊断、瘤细胞分化程度和功能状态判断有一定意义。     

应用LSCM对脑脊液淋巴白血病细胞、淋巴瘤细胞内质网的研究

目的 :通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )技术对脑脊液淋巴白血病细胞 ,淋巴瘤细胞内质网进行立体、动态、定量研究。方法 :将所观察脑脊液细胞分为正常淋巴细胞组、急性淋巴白血病细胞组、鞘注治疗后急性淋巴白血病细胞组、淋巴瘤细胞组。以内质网荧光探针DioC6(3)标记后 ,得到内质网的断层扫描图像、荧光强度地形立体分布图并且定量测量内质网的荧光强度值。结果 :急性淋巴白血病细胞、淋巴瘤细胞与正常淋巴细胞相比 ,鞘注治疗前后淋巴白血病细胞相比 ,内质网空间立体分布有明显差别 ,平均荧光值有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :研究对中枢神经系统淋巴白血病、淋巴瘤的诊断、鉴别诊断、细胞分化程度和功能状态判断有一定意义。     

培养的不同分化程度的人大肠癌细胞内质网结构特点

目的：探索培养的人大肠癌细胞内质网膜系统超微结构与其分化程度间的关系。方法：采用透射电镜技术和扫描电镜技术分别了培养的高分化和低分化大肠癌细胞系ＣＣＬ２２９和ＣＣＬ２２７内质网膜微细结构和分布。结果：透射电同分化细胞ＣＣＬ２２９内质网较丰富,呈小泡汰和扁平囊状分布于核周及质膜下胞质中,其伪足中亦见丰富的内质网。低分化的ＣＣ名内质网较少,上泡状、短管状分布于胞质中,扫描电上细胞系内质网立体结构显示,     

Salubrinal保护心肌细胞内质网应激凋亡的实验研究

目的探讨Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法采用消化贴壁法获得乳鼠原代心肌细胞,分别给与不同浓度的Salubrinal（10μmol、20μmol、40μmol）预处理,30min后加入TM（5μg/ml）,继续培养24h后通过流式细胞和TUNEL检测方法对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测;Western印迹法检测凋亡过程中Caspase-12蛋白酶的表达变化。结果经Salubrinal预处理的细胞同单独使用衣霉素相比,细胞凋亡率和细胞凋亡指数均显著下降;Caspase-12表达明显减少。结论Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制可能是通过抑制内质网应激凋亡通路。     

脂质过氧化对整装培养人脐静脉内皮细胞的损伤

脂质过氧化对整装培养人脐静脉内皮细胞的损伤张弘陈铁镇过氧化脂质可引起培养内皮细胞损伤，特别是对生物膜系统的损伤。此工作目的是进一步研究这种生物膜系统损伤中内质网和线粒体整体结构的病理变化。一、材料与方法１．ＰＦ膜的制备：将Ｆａｌｃｏｎ培养皿的原材料以...     

益康唑诱导HL-60白血病细胞内质网应激反应性细胞凋亡

目的研究唑类抗真菌药物益康唑（Ec）的抗白血病作用及其机制。方法将12μmol／L Ec、0．1μmol／L倍半萜烯酯（Tg）和0．2μg／ml依霉素（Tu）作用于体外培养的人急性髓细胞性白血病细胞HL-60，利用细胞核荧光染色进行形态学观察．Western blot法检测分子伴侣蛋白（GRP78）和胱天蛋白酶（Caspase）的表达。结果HL-60细胞经Ec，Tg和Tu处理后．细胞呈典型的凋亡形态，凋亡率分别为94％、63％和85％。分子伴侣蛋白GRP78的表达明显增加．位于内质网的Caspase12被活化。结论Ec可诱导人白血病HL-60细胞内质网应激反应性细胞凋亡，凋亡的发生与蛋白质合成抑制．Caspase12的活化有关。     

浮膜培养人内皮细胞及其整装电镜标本制作技术的研究

用Falcon塑料培养器皿的原料,自制一种支持膜(PF),经明胶处理后,首次用于浮膜培养人内皮细胞。细胞生长至亚融合时,以高锰酸钾混合固定液固定、消化细胞以保存细胞的膜系统。将固定后的细胞连同pF贴附于铜网上,干燥后在TEM80kv条件下,细胞的内质网及线粒体等超微及立体超微结构可被清楚地观察到。还讨论了本方法的优缺点并与文献中的其它整体细胞方法做了比较。     

甲状腺细胞培养的观察和应用

目的 :观察甲状腺细胞体外培养的生长和分泌激素的功能特点 ,为临床治疗甲状腺功能减退 (甲减 )探索新的治疗方法。方法 :取 5～ 8个月胎龄的水囊引产新鲜甲状腺细胞进行体外培养 ,观察培养的甲状腺细胞生长特点 ,超微结构特点 ;对培养的甲状腺细胞分泌 T3、T4 的功能进行测定 ;并对 1例临床诊为甲减的患者进行了甲状腺细胞移植观察。结果 :甲状腺细胞在体外培养中 ,经组织学观察 ,细胞生长良好 ,开始为圆形、椭圆形 ,尔后为多边形 ,为上皮型细胞 ,贴瓶生长。培养 12 d后 ,细胞以生长晕为中心 ,呈放射状向四周贴瓶生长。电镜下 ,可见细胞内有大量粗面内质网、线粒体、溶酶体和胶质滴 ,经放射免疫法测定 ,培养的甲状腺细胞可分泌 T3、T4 ,以培养后的前 9d激素分泌水平较高 ,10～ 12 d激素分泌水平逐渐降低 ,随培养时间的延长 ,激素分泌处于较低水平。经统计学两两比较 ,各组均数之间的差别均有高度显著性 (P <0 .0 1)。 1例甲减病例移植甲状腺细胞后 ,临床症状大多消失 ,实验室检查 :T3由移植前的 0 .35 nmol/ L 提高到 2 .4 nmol/ L;T4 由移植前的 3.2 nmol/ L提高到 4 0 .2 nmol/ L;TSH由移植前的 6 7.5 m U/ L 下降到 18.3m U/ L。结论 :甲状腺细胞经体外短期培养 ,生长良好 ,结构正常 ,具有分泌甲状     

兔骨髓基质干细胞体外培养的生物学特性

目的：分离培养兔骨髓基质干细胞并探讨其体外生物学特性。方法：通过梯度密度离心法分离兔骨髓基质干细胞，体外培养、扩增，观察细胞的大体形态和超微结构；通过绘制细胞生长曲线、MTT实验来研究细胞的增殖能力争代谢活性。结果：兔骨髓基质干细胞呈梭形。胞质内有丰富的粗面内质网和线粒体，具有很强的增殖能力和代谢活性。结论：本实验方法取材方便，能较容易地获得大量的兔骨髓基质干细胞。     

体外培养人眼小梁细胞吞噬乳胶微粒观察

应用体外培养的人小梁细胞,观察其吞噬乳胶微粒的能力。结果显示吞噬过程开始４小时内,吞噬功能随时间延长而增强;但吞噬过久细胞则出现变性或死亡。电镜示吞噬微粒后的细胞呈“激惹”状态。结合小梁细胞功能,对吞噬过程的重要性进行了讨论。     

比较硒、钼与硒钼合用对柯萨奇B_3病毒在心肌细胞内复制的影响

作者利用体外培养新生SD大鼠心肌细胞的方法,并控制营养液中硒、钼含量各为10ppm及硒-钼合用,比较各组对柯萨奇B_3病毒复制的影响。结果表明,Se、Mo均有一定的抑制病毒在细胞内复制作用和保护心肌细胞的存活作用。Se、Mo合用确有协同作用。     

EB病毒对体外培养的人鼻咽上皮细胞感染途经的研究

用异硫氰酸荧光素(FITC)标记EB病毒(EBV)感染体外培养的人胚鼻咽上皮和鼻咽癌细胞株(CNE-1和CNE-2),对照为EBV受体阳性的Raji和Ramos细胞。在荧光显微镜下发现FITC-EBV 可与Raji和Ramos细胞结合,如事先经未标记的EBV处理则与 FITC-EBV 结合的阳性细胞数明显下降。贴壁生长的鼻咽上皮细胞不能与FITC-EBV 结合,而刮落的鼻咽上皮细胞则能与FITC-EBV 结合,结果提示鼻咽上皮细胞质膜微细损伤可能成为EBV 直接进入细胞的门户,受损的鼻咽癌细胞更易为EBV 侵入。     

表皮细胞培养与移植研究Ⅰ、人角化细胞在三种培养法中生长的观察

应用三种培养方法观察人角化细胞生长、增殖与形成膜片的过程,共111次。人表皮细胞单层细胞生长率3T3饲养层培养法最高达80.0％;皮块培养法为52.5％;细胞悬液培养法仅为11.8％。3T3饲养层培养法效果最佳,优点较多,值得选用。皮块培养法简便易行,效果也可,如能设法排除成纤维细胞混合生长,仍为可选用的培养方法。     

心内直视手术体外循环中预补钾用量的探讨

对93例心内直视手术体外循环中预补钾用了3种方法,1,34例按<1mmol/kg预补钾量,一次性加入预充液,心脏复跳时,血K~+>4.1mmol/L7例,2,25例按1～1.5mmol/kg预补钾量,分次加入预充液,心脏复跳时血K~+>4.1mmol/L14例;3,34例按1.6～2.0或>2.0mmol/kg预补钾量,将其2/3～4/5的量加入预充液,余量加入5%小苏打液内,转流30min后,持续氧合器内滴入,心脏复跳时,血K~+>4.1mmol/L30例,作者认为使用第3种方法为宜。     

淋巴瘤间质反应性组织细胞和网状细胞增生的特点

作者取76例不同类型淋巴细胞性淋巴瘤患者的淋巴结,分别作5种酶组化染色和3种抗体的免疫组化染色,探讨其间质反应性组织细胞和网状细胞增生的特点。结果发现;病变内各种组织细胞和网状细胞的增生程度有很大的差异,且具有不同的分布规律。     

“U”形针脊柱后路内固定在颈椎骨折脱位中的作用

２０例颈椎骨折脱位应用“Ｕ”形针跨越骨折椎上下各二节段作椎板下节段性固定，植骨融合；若伤椎为寰枢椎，上段从枕骨钻孔穿钢丝固定。术后病人不用外固定可早期坐起或下床活动，无并发症。１８例随访８～３５个月，其中６例有神经损伤症状者５例完全恢复，１例有一定程度恢复。“Ｕ”形针无变形或断裂，钢丝无松动，植骨愈合良好。本手术操作简单、固定牢靠、骨折复位满意。