中医药对顺铂耳毒性的防治作用研究进展

顺铂是临床上广泛应用的抗肿瘤化疗药物,耳毒性是其常见的毒副作用,患者常出现耳鸣、耳聋等症状,预防与缓解顺铂耳毒性逐渐成为亟待解决的问题.研究表明,中医药对顺铂产生的耳毒性有一定的预防和治疗作用.笔者从顺铂致耳毒性的中医认识、作用机制以及治疗策略综述了中医药对顺铂耳毒性的作用研究进展,以期为寻找缓解化疗药物毒副作用的策略...     

二十二碳六烯酸对豚鼠顺铂所致耳毒性的影响

目的：通过动物实验,研究二十二碳六烯（DHA）全身给药对顺铂所致豚鼠耳毒性的保护作用。方法将健康豚鼠24只分为正常对照组、DHA加顺铂组、顺铂组,DHA加顺铂组连续给予植物油稀释后的DHA灌胃,500 mg?kg －1? d－1,共30 d。在灌胃22 d时,开始生理盐水稀释后的0．25 mg／mL的顺铂溶液腹腔注射,连续9 d ,正常对照组和顺铂组只给予相同剂量植物油灌胃。结果顺铂造模后,顺铂组和DHA加顺铂组 ABR阈值明显高于正常对照组,DHA加顺铂组明显低于顺铂组。DHA加顺铂组外毛细胞残存数明显高于顺铂组,组织形态优于顺铂组,螺旋神经节细胞形态顺铂组差于DHA加顺铂组。结论 DHA 灌胃给药对临床顺铂化疗耳毒性并发症有一定的保护作用。     

序贯疗法的顺铂耳毒性临床观察

序贯疗法的顺铂耳毒性临床观察丁军，张笑如河南医科大学第二附属医院耳鼻喉科郑州４５０００３关键词序贯疗法；顺铂；耳毒性顺铂（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）为临床上最常用的广谱抗肿瘤药物之一，也是目前头颈部恶性肿瘤化疗中的主要药物。但顺铂的毒副作用较多，其上要毒性...     

顺铂耳毒性的临床听力学研究

目的:应用0.5 kHz～16 kHz畸变产物耳声发射DPOAE和扩展高频测听对顺铂耳毒性进行临床研究.探讨顺铂耳毒性的听力学损害特点及其可能的发病机理.方法:对24例应用顺铂进行初次化疗的妇科肿瘤患者于化疗前后分别进行0.5 kHz～16.0 kHz DPOAE、常频纯音测听及扩展高频测听检查,比较DPOAE和常频纯音测听、扩展高频测听的结果.结果:顺铂化疗后扩展高频区纯音听阈升高,DPOAE在3.0kHz、4.0 kHz处及扩展高频区下降明显.19岁～29岁组变化明显,而50岁～65岁组无变化.结论:顺铂具有明确的耳毒性.常频DPOAE较常频纯音测听更敏感,和扩展高频测听检查一样均可用于顺铂耳毒性的监测.扩展高频DPOAE可能比常频DPOAE更敏感.患者对顺铂的易感性可能随着年龄的增加逐渐减低.     

川芎嗪对顺铂所致耳蜗毒性保护作用的实验研究

目的 观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在川芎嗪(TMP)拮抗顺铂(CDDP)耳毒性中的表达情况,探讨顺铂耳毒性的致病机制及川芎嗪对顺铂耳毒性的防护作用.方法 选取50只健康豚鼠,随机分为对照组、顺铂组和中药组,各组动物均于用药前及停药后测试听觉脑干诱发电位(ABR),利用免疫组织化学方法测定各组耳蜗内iNOS的表达情况.结果 对照组ABR阈值(40.94±6.75)db,顺铂组ABR阈值为(76.26±4.54)db,中药组ABR阈值为(58.98±5.82)db,3组比较差异具有显著性(P<0.01);免疫组化结果显示iNOS在对照组不表达,顺铂组Corti氏器和螺旋神经节细胞胞浆内有强阳性表达,中药组有阳性表达,3组比较差异具有显著性(P<0.01).结论 川芎嗪可以通过抑制iNOS的表达来对抗顺铂的耳毒性.     

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用

目的建立新生昆明小鼠离体顺铂耳毒性模型,研究顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用。方法分离生后3d的昆明小鼠耳蜗基底膜,在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度顺铂对小鼠耳蜗毛细胞的损伤,同时应用Hoechst 33258染色技术检测耳蜗毛细胞的凋亡。结果不同浓度顺铂均可使小鼠耳蜗毛细胞发生凋亡的形态学变化。顺铂浓度为4mg·L-1时,耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着顺铂浓度的增高(8～64mg·L-1),耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.01)。结论应用新生昆明小鼠能建立可靠的离体顺铂耳毒性模型;顺铂可导致耳蜗毛细胞凋亡,提示凋亡可能是顺铂耳毒性机制之一。     

熊果酸对顺铂所致耳蜗氧化损伤的防护及机制研究

【立论依据】 顺铂是目前公认一线抗癌药物,被广泛用于治疗肺癌、卵巢癌等恶性肿瘤。然而,顺铂能诱导耳蜗内TRPV1的高表达,进而促进ROS的过量生成并进一步引发脂质过氧化,最终使耳蜗细胞凋亡,导致听力丧失。已知熊果酸具有很强的抗氧化作用,可有效防护H₂O₂对HEI-OC1听觉细胞的破坏;并可有效抑制TRPV1的激活以发挥止咳作用。据此我们推测,熊果酸可通过抑制顺铂所致TRPV1的高表达、防止脂质过氧化,从而有效拮抗顺铂的耳毒性。 【设计思路】 应用免疫组化和免疫荧光染色、蛋白质印迹技术,结合听脑干反应(ABR)测试,研究熊果酸对顺铂所致耳蜗氧化损伤的防护作用及其机制;并选用人卵巢癌细胞株SKOV3进行体外培养,观察熊果酸对顺铂抗肿瘤作用的影响,为临床防护顺铂耳毒性提供新思路。 【实验内容】 (1)建立小鼠顺铂耳毒性模型,通过ABR测试和荧光标记,初步探明熊果酸对顺铂耳毒性的防护作用;并且选用SKOV3细胞株进行体外培养,观察熊果酸对顺铂抗肿瘤作用的影响,明确熊果酸的临床应用可行性。(2)建立小鼠顺铂耳毒性模型,应用ABR测试以评价听功能,免疫组化和免疫荧光染色、蛋白质印迹技术检测TRPV1、脂质过氧化产物4-HNE和caspase-3在耳蜗的表达,探讨熊果酸发挥防护作用的可能机制。 【材料】 成年BALB/c小鼠、人卵巢癌细胞株SKOV3、顺铂、熊果酸、抗TRPV1、4-HNE和caspase-3抗体、蛋白质印迹 检测相关试剂、细胞培养相关试剂等。 【可行性】 (1)本团队成员已熟练掌握本研究所需实验技术。(2)指导教师多年从事药物耳毒性机制与防护研究,可给予理论指导、仪器和技术支持。(3)预实验结果显示,熊果酸可有效拮抗顺铂的耳毒性,并且熊果酸不影响顺铂的抗肿瘤作用。 【创新性】 本研究首次阐明熊果酸可有效拮抗顺铂对小鼠耳蜗的氧化损伤,并进一步揭示了其发挥作用的可能机制,为临床防护顺铂耳毒性提供了实验依据。     

进口大剂量顺铂耳毒性的临床分析

目的：了解大剂量顺铂的耳毒性。方法：应用含进口大剂量顺铂的联合化疗方案治疗患者21例,测定其治疗前后的气导纯音听力阈。结果：顺铂耳毒性表现：第1周期治疗后为高频失听（6000、8000Hz）,第2周期治疗后向3000、4000Hz等频率发展,程度加重。     

槐耳联合顺铂体外诱导肝癌细胞HepG2自噬的实验研究

目的观察槐耳联合顺铂是否能诱导Hep G2细胞自噬及探讨其对自噬相关蛋白表达的影响。方法采用体外细胞培养方法,分别用槐耳浸膏、顺铂及槐耳浸膏联合顺铂干预Hep G2细胞。用MTT法检测细胞活性;光学显微镜观察Hep G2细胞自噬的形态学改变;Western blot检测自噬相关蛋白P53、P-Akt、Akt表达的影响。结果光学显微镜下可观察到药物组细胞的形态改变;MTT实验显示槐耳及顺铂均可抑制Hep G2细胞的生长,呈时间及浓度依赖性;各药物组细胞P-Akt蛋白表达水平下降,Akt和P53表达升高。结论槐耳给药可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活肝癌Hep G2自噬。     

亚硒酸钠减轻顺氯氨铂内耳毒性的实验研究

顺铂用于肿瘤病人的化疗,常出现耳毒、肾毒等付作用。减轻或改善这些副作用,并保证其抗肿瘤活性是一个亟待解决的问题。本实验将微量元素硒做为抗肿瘤药物顺铂的拮抗剂用于动物实验,旨在降低顺铂     

蚤休薯蓣皂苷联合顺铂抑制小鼠移植瘤生长及转移

目的 探讨蚤休薯蓣皂苷(RD)联合顺铂对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长与转移的抑制作用。方法 40只C₅₇BL小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞建立肺腺癌移植瘤模型,随机均分成对照组、RD组、顺铂组及RD联合顺铂组,从接种后第4 天开始给予生理盐水或相应药物干预,于接种后第29 天处死,通过免疫组化检测皮下移植瘤组织CD34表达,荧光实时定量PCR检测皮下移植瘤组织血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达,Western blotting测定皮下移植瘤组织 VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 RD联合顺铂组抑瘤率、肺表面结节转移抑制率高于RD组与顺铂组(P<0.01),Q值为1.01;RD联合顺铂组上述指标改善程度优于单独用药组(P<0.01),但RD组与顺铂组相比,差异无显著性(P>0.05)。结论 RD联合顺铂对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长与转移有相加抑制作用,其机制可能与拮抗肿瘤血管生成和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

3种顺铂注射制剂的稳定性研究

目的考察顺铂冻干粉针、顺铂无菌分装粉末及顺铂注射液的稳定性,为临床应用提供指导。方法采用热、湿及光加速试验,以外观、主药含量、降解产物及pH值为重点考察指标,进行稳定性研究。结果两种注射用顺铂粉针 (冻干型及粉末型)的热、湿及光稳定性无明显差别(P>0.05),但均明显优于顺铂注射液(P<0.05)。光对顺铂稳定性影响较热、湿更显著。结论　两种注射用顺铂粉针稳定性较好,顺铂注射液稳定性较差,临床应用应以注射用顺铂粉针为佳。     

miR-130a在卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达及其意义

目的分析miR-130a在卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达,探讨miR-130a与卵巢癌对顺铂耐药的关系。方法以浓度梯度递增法构建卵巢癌耐顺铂细胞株,MTT法对耐药细胞株进行鉴定并测定耐药指数,应用荧光实时定量PCR检测并分析各细胞株中miR-130a的表达。结果成功构建卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/CIS1、A2780/CIS2和SKOV3/CIS(P<0.05),其耐药指数分别为30.2、5.3和24.5。荧光实时定量PCR结果显示miR-130a在卵巢癌耐药细胞株中存在稳定的异常高表达(P<0.05),A2780/CIS1、A2780/CIS2以及SKOV3/CIS中miR-130a表达分别较亲本细胞平均上调30.51倍、4.87倍和24.43倍。各耐药细胞中miR-130a表达上调倍数接近于各自的顺铂耐药指数。结论 miR-130a表达的上调可能与卵巢癌细胞株对顺铂的耐药性密切相关。推测抑制miR-130a的表达有助于逆转卵巢癌顺铂耐药性,miR-130a有望成为逆转卵巢癌顺铂耐药性的潜在基因治疗靶点。     

顺铂对鼠胶质瘤SHG-44细胞的增殖抑制和辐射增敏作用

目的:观察顺铂对鼠胶质瘤SHG-44细胞的抑制及放射增敏作用,并探讨其作用机制。方法:不同浓度紫杉醇(0、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml和5μg/ml)作用于SHG-44细胞,MTT法检测顺铂对SHG-44细胞的增殖抑制作用;克隆形成法检测细胞辐射敏感性变化,流式细胞术检测细胞凋亡百分率变化。结果:顺铂有明显的抑制SHG-44细胞增殖和提高其放射敏感性的作用,顺铂可提高3 Gy、6 Gy照射24 h后SHG-44细胞的凋亡率。结论:顺铂对人胶质瘤SH-44细胞具有杀伤及放射增敏作用。其可能机制是加强射线对肿瘤细胞的诱导凋亡效应,增加其杀伤肿瘤作用。     

NS-398对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响

目的 研究环氧合酶-2（COX-2）特异性抑制剂NS-398对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响.方法 用含NS-398和顺铂的细胞培养液作用于Hela细胞,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测作用后的Hela细胞对顺铂敏感性的变化;采用流式细胞仪分别检测经过NS-398和顺铂作用的细胞与顺铂联合单独作用的细胞的COX-2蛋白表达情况.结果 NS-398和顺铂联合作用后的Hela细胞COX-2表达量较顺铂单独作用后的减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;在转染48h后,Hela细胞对顺铂的半数抑制量（IC50值）从（10.475±1.713）μg/ml提高到（0.194±0.021）μg/ml,Hela细胞对顺铂的敏感性增加了53.88倍.结论 NS-398能增加宫颈癌Hela细胞对顺铂的敏感性.     

壳聚糖-顺铂微球瘤内治疗大鼠C6胶质瘤的实验观察

目的:观察壳聚糖-顺铂缓释微球对C6胶质瘤瘤内化疗的疗效。方法:将C6细胞株进行传代、培养,并对C6胶质瘤细胞进行顺铂体外药敏测定,然后制作动物脑胶质瘤模型,造模后7 d沿原创道分别给予生理盐水、顺铂及壳聚糖-顺铂缓释剂10μl,观察各组大鼠瘤内给药后的生存期,并取病理标本行病理学检查及免疫组织化学染色检测。结果:C6胶质瘤细胞对顺铂敏感;胶质瘤模型成瘤率为100%;壳聚糖-顺铂缓释剂组平均生存期为(36.47±9.96)d,明显长于生理盐水组(16.80±6.36)d和顺铂组(28.64±10.14)d(P<0.05)。结论:壳聚糖-顺铂微球的瘤内化疗疗效明显,且比单纯顺铂用药效果好。     

顺铂对人卵巢癌CAOV3细胞端粒酶活性和凋亡的影响

目的研究顺铂作用于卵巢癌CAOV3细胞后，端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期变化与细胞耐药性的关系。方法用顺铂处理卵巢癌CAOV3细胞，端粒酶重复序列扩增(TRAP)一银染法测定端粒酶活性，流式细胞仪观察细胞凋亡和细胞周期的改变。结果顺铂(DDP)处理卵巢癌CAOV3细胞后，CAOV3细胞端粒酶活性受到抑制，细胞周期受阻于G2／M期，未见细胞凋亡峰改变。结论CAOV3细胞对顺铂的耐药性通过多因素起作用，DDP对端粒酶活性具有抑制作用，可以改变细胞周期，但对细胞凋亡无明显影响。     

Focal encephalopathy after cisplatin therapy

Focal encephalopathy after cisplatin therapy, although described previously, is a rare adverse effect. Recently, four patients who received cisplatin therapy at our institution developed focal encephalopathy which manifested itself as cortical blindness, aphasia with seizures, aphasia with hemianopia and a focal seizure, respectively, shortly after the administration of cisplatin. Each episode occurred while the patients were febrile with neutropenia although no evidence of central nervous system infection was found. The neurological symptoms occurred after at least two courses of cisplatin therapy (minimum total cisplatin dose, 300 mg/m2) and three of the four patients also were noted to have hypomagnesaemia. In each case, the neurological deficit resolved and two patients received further cisplatin therapy without a recurrence of the neurological symptoms. Our experience suggests that focal encephalopathy that is associated with cisplatin therapy may resolve completely with supportive measures alone and need not preclude further therapy with cisplatin.     

顺铂胸腔内注射治疗食管癌术后乳糜胸

目的评价顺铂胸腔内注射治疗食管癌术后乳糜胸的临床应用价值。方法回顾分析了安阳市人民医院2004年7月至2011年6月食管癌术后8例乳糜胸的治疗效果。食管癌术后发生的7例乳糜胸于确诊当日用100mL生理盐水溶解的40mg顺铂针经胸管行胸腔内注射。结果使用顺铂胸腔内注射的7例乳糜胸患者,无论其引流量多少均于短期保守治愈。1例食管良性病变术后发生的乳糜胸未便试用,行小切口开胸治愈。结论胸腔内注射顺铂可有效治疗食管癌术后乳糜胸,方法简单实用、无痛苦。其作用机理和能否在其他原因引起的乳糜胸中试用值得进一步探讨。     

Increased procoagulant activity of red blood cells in the presence of cisplatin

Background Cisplatin based chemotherapy is a well recognized risk factor for coagulation disorders and thrombosis. The pathophysiological mechanisms by which cisplatin promote thrombosis are not well understood. Methods Red blood cells （RBCs） were separated from peripheral blood of patients with breast cancer （n=10） and healthy adults （n=6） and treated with cisplatin. Coagulation time of RBCs was assessed by one step recalcification time and the productions of thrombin, intrinsic and extrinsic factor Xa were measured in the presence or absence of various concentrations of lactadherin. Exposed phosphatidylserine was stained with lactadherin and observed by confocal microscopy and flow cytometry. Results Neither fresh RBCs nor RBCs treated without cisplatin had potent procoagulant activity. Cisplatin treatment increased procoagulant activity of RBCs in a cell number- and concentration-dependent manner. Exposed phosphatidylserine was stained with lactadherin and after cisplatin treatment, strong fluorescence was revealed by confocal microscopy. Lactadherin bound RBCs from patients with breast cancer increased from （1.9＋0.5）% on control RBCs to （68.0±3.5）% on RBCs treated with 10umol/L cisplatin for 24 hours. Conclusions Cisplatin treatment increases procoagulant activity of RBCs, which have a strong association with exposure of phosphatidylserine. The increased procoagulant activity may contribute to the pathogenesis of thrombophilia during cisplatin based chemotherapy in breast cancer patients.