局部麻醉药对抗癌药物的体内外增效作用的研究

用体外培养的Eca-109细胞观察了阿霉素(ADM)和平阳霉素(PYM)单用或与局麻药普鲁卡因和利多卡因合用时的细胞毒作用,结果表明:局麻药在本身无细胞毒性浓度下与ADM或PYM联合应用时,可显著加强ADM和PYM的细胞毒作用,且随局麻药剂量增加增效作用加强,但各联合用药组之间的增效程度没有差异。普鲁卡因和利多卡因在本身无体内抑瘤活性的剂量下与顺铂合用,能显著地增强顺铂对实体型S_(180)肉瘤的抑瘤作用,并能延长荷S_(180)腹水瘤小鼠的生存期。     

羟基喜树碱联合奥沙利铂对人肺癌细胞作用的体外研究

目的: 体外观察羟基喜树碱(hydroxycamptothecine,HCPT)联合奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)对人肺癌A549细胞增殖的协同抑制作用,并初步探讨其机制.方法: 采用SRB法测定HCPT和L-OHP对A549细胞增殖的抑制作用,根据中效原理判断两药合用时的效应.采用显微镜、流式细胞仪观察两药对A549细胞的诱导凋亡作用.结果: HCPT和L-OHP均能明显抑制A549细胞增殖和诱导细胞凋亡,两药合用具有协同作用.结论: HCPT联合L-OHP能协同抑制A549细胞增殖,其机制可能是通过协同诱导凋亡.     

化疗药物对宫颈癌细胞系作用的实验研究

目的：本实验通过研究顺氯胺铂(cDDP)、平阳霉素(PYM)、氟尿嘧啶(5-Fu)在体外对宫颈癌Hela及Siha细胞系的作用，探索有效的宫颈癌新辅助化疗方案，以指导宫颈癌的临床化疗。方法：应用三磷酸腺苷生物发光法(adenosine triphosphate cell viability assay，ATP—CVA)检测以上3种化疗药物单用及联合用药对HeLa及Siha细胞的药物敏感性，药物浓度以血浆峰浓度(plasm peak concentration；PPC)计算。结果：从0．2～2倍PPC浓度时，各药物随着浓度的增加抑制率逐渐增加。1倍PPC时，5-FU、cDDP、cDDP PYM和cDDP 5-Fu对Hela细胞的抑制率均高度敏感、PYM随着药物剂量增加对HeLa细胞的抑制率无明显增加，且均不敏感。1倍PPC时，PYM、5-Fu、cDDP、cDDP PYM和cDDP 5-Fu对Siha细胞的抑制率均高度敏感。结论：1倍PPC时，cDDP、5-Fu、cDDP PYM、cDDP 5-Fu能有效抑制HeLa和Siha细胞的生长，PYM能有效的抑制Siha细胞的生长，而对Hela细胞无明显的抑制效应。临床宫颈癌的化疗可以以此作为参考依据。     

化疗药物对宫颈癌细胞系作用的实验研究

目的:本实验通过研究顺氯胺铂(cDDP)、平阳霉素(PYM)、氟尿嘧啶(5-FU)在体外对宫颈癌Hela及Siha细胞系的作用,探索有效的宫颈癌新辅助化疗方案,以指导宫颈癌的临床化疗.方法:应用三磷酸腺苷生物发光法(adenosine triphosphate cell viability assay,ATP-CVA)检测以上3种化疗药物单用及联合用药对HeLa及Siha细胞的药物敏感性,药物浓度以血浆峰浓度(plasm peak concentration;PPC)计算.结果:从0.2～2倍PPC浓度时,各药物随着浓度的增加抑制率逐渐增加.1倍PPC时,5-FU、cDDP、cDDP+PYM和cDDP+5-FU对Hela细胞的抑制率均高度敏感,PYM随着药物剂量增加对HeLa细胞的抑制率无明显增加,且均不敏感.1倍PPC时,PYM、5-FU、cD-DP、cDDP+PYM和cDDP+5-FU对Siha细胞的抑制率均高度敏感.结论:1倍PPC时,cDDP、5-FU、cDDP+PYM、cD-DP+5-FU能有效抑制HeLa和Siha细胞的生长,PYM能有效的抑制Siha细胞的生长,而对Hela细胞无明显的抑制效应.临床宫颈癌的化疗可以以此作为参考依据.     

姜黄素联合5-FU对胃癌MGC-803细胞生长的抑制作用

目的:探讨姜黄素联合低剂量5-FU对胃癌MGC-803细胞生长抑制作用是否达到或优于高剂量5-FU单用以及两药联合应用的效果。为临床上联合应用姜黄素和氟尿嘧啶治疗胃癌提供理论和实验依据。方法:用MTT检测姜黄素（20μmol/L）和不同剂量的5-FU（2、6、20、60μmol/L）联合或5-FU（10、100μmol/L）单独作用于体外培养的胃癌MGC-803细胞12h、24h、36h而产生的增殖抑制效应,并对实验数据进行方差分析和析因分析。结果:两种药物单用及联用时,均对体外培养人胃癌MGC-803细胞增殖有显著抑制作用（P<0.05）,且呈剂量时间依赖效应。姜黄素联合低剂量5-FU对胃癌MGC-803细胞的抑制作用优于高剂量5-FU单用（P<0.05）;两药有很好的协同作用（P<0.05）。结论:姜黄素联合低剂量5-FU对胃癌MGC-803生长的抑制作用优于高剂量5-FU单用;姜黄素与5-FU的联合用药对胃癌细胞的抑制呈协同作用。     

反义硫代寡核苷酸增强细胞毒药物抗乳腺癌活性的体外研究

目的研究以HER2mRNA为靶点的反义硫代脱氧寡核苷酸(SODNs)HA6722单用及与紫杉醇合用时对HER2过表达乳腺癌细胞株MDAMB453体外增殖的抑制作用。方法选择HER2过表达的MDAMB453细胞与HER2低表达的MDAMB231细胞,MTT法观察HA6722单用及与紫杉醇合用时对两种肿瘤细胞增殖的影响;以末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果HA6722及紫杉醇单用均可以剂量依赖方式抑制MDAMB453细胞的体外增殖,IC50值分别为47.6±7.9nmol·L1(n=3,mean±s)和19.4±4.1nmol·L-1(n=3,mean±s)。加用低剂量的HA6722可增强紫杉醇对MDAMB453细胞的抑制作用,IC50值由合用前的19.4±4.1nmol·L-1降至13.6±5.2nmol·L-1(n=3,P<0.05)。联合应用时,在IC50浓度下二者之间的联合指数(CI)为0.81±0.43(n=3),其对MDAMB453细胞的相互作用表现为正性协同作用。结论反义寡核苷酸HA6722与细胞毒药物紫杉醇合用对HER2过表达乳腺癌细胞的体外增殖抑制具有协同作用...     

替尼泊甙和羟基喜树碱对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的作用

背景与目的:研究显示,拓扑异构酶(topoisomerase,Topo)Ⅰ和Ⅱ抑制剂联合应用有一定的协同抗肿瘤作用,但两物联合应用治疗胃癌的报道较少.本研究探讨Topo Ⅰ抑制剂羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)和TopoⅡ抑制剂替尼泊甙(teniposide,VM-26)联合应用对胃癌细胞BGC-823的体外抑制作用和诱导细胞凋亡的作用.方法:利用噻唑蓝(MTT)法测定HCPT、VM-26单药及联合用药对BGC-823细胞的体外抑制作用,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果:1.963～31.413 μmol/L VM-26对BGC-823细胞的抑制率为15.99%～80.83%;1.963 μmol/LVM-26处理细胞0、12、24、48 h,细胞凋亡率分别为3.90%、4.42%、7.60%、17.70%.8.577～137.227 μmol/L HCPT对细胞的抑制率为7.89%～70.32%,8.577 μmol/LHCPT处理0、12、24、48 h后,细胞凋亡率分别为2.80%、8.50%、10.50%、13.30%.联合用药时抑制率为21.32%～87.74%,凋亡率为2.80%、15.50%、15.70%、20.20%.联合用药指数为1.293.结论:HCPT与VM-26单药可抑制BGC-823细胞增殖,诱导细胞凋亡;HCPT与VM-26联合应用在胃癌细胞中产生拮抗作用.     

反义硫代寡核苷酸与榄香烯乳剂合用抗乳腺癌活性的体外研究

目的:研究以HER2mRNA为靶点的反义硫代脱氧寡核苷酸(S-ODNs)HA6722单用及与榄香烯乳剂合用时对HER-2过表达乳腺癌细胞株MDA-MB-453体外增殖的抑制作用。方法:选择HER2过表达的MDA-MB-453细胞与HER2低表达的MDA-MB-231细胞,MTT法观察HA6722单用及与榄香烯乳剂合用时对两种肿瘤细胞增殖的影响。结果:HA6722及榄香烯单用均可以剂量依赖方式抑制MDA-MB-453细胞的体外增殖,IC50值分别为41.8±8.1nmol·L-1和79.4±12.1nmol·L-1(n=3,mean±s)。加用低剂量的HA6722可增强榄香烯乳剂对MDA-MB-453细胞的抑制作用,IC50值由合用前的79.4±12.1nmol·L-1降至51.6±8.2nmol·L-1(n=3,P<0.05)。相反,在HER2低表达的MDA-MB-231细胞则没有这种增强作用;在IC50浓度下二者之间的联合指数(CI)为0.72±0.38(n=3)。结论:反义寡核苷酸HA6722与榄香烯乳剂合用对HER-2过表达乳腺癌细胞的体外增殖抑制具有协同作用。     

中效原理在体外抗癌药物定量分析中的应用

 目的　在体外利用中效原理定量分析抗癌药物联合应用过程中的协同、相加或拮抗作用。方法　采用MTT法 ,利用中效原理判断联合用药 (阿糖胞苷 ,长春新碱 )对HL 6 0细胞的效应。结果　两种药物单用及联合应用时随药物剂量增加 ,其效应也随之增加。两药大剂量合用时为拮抗效应 ,小剂量合用时为协同效应。两药合用时给药次序不同不会影响合用效应 ,两药合用时药物浓度比例变化会影响合用效应。结论　两种药物合用时大剂量为拮抗 ,小剂量为协同 ,其效应大小与两种药物浓度比例有关 ,而与给药时间次序无关。     

羟基喜树碱联合奥沙利铂诱导人大肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU的凋亡机制

目的:体外观察羟基喜树碱(HCPT)联合奥沙利铂(L-OHP)对人大肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU增殖抑制及诱导凋亡作用,并初步探讨其诱导凋亡方面机制.方法:MTT法测定HCPT联合L-OHP对LoVo/5-FU细胞增殖抑制作用,并根据中效原理判断两药合用时的效应.流式细胞仪观察两药对LoVo/5-FU细胞的凋亡诱导作用.半定量RT-PCR方法检测单药及联合作用后X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP) mRNA表达变化.结果:HCPT联合L-OHP对LoVo/5-FU细胞有明显的抑制增殖作用,细胞增殖的抑制率与药物浓度呈正相关.在抑制率(fa)>0.18时合用指数(CI)<1,两药表现为协同作用.HCPT浓度分别为0.02、0.04和0.08 mg/L.作用48 h后,LoVo/5-FU细胞凋亡率分别为5.92±0.58、9.93±0.62和3.76±0.45.当0.04 mg/L HCPT联合L-OHP作用48 h后,其凋亡率为18.44±0.57,联合组与单药组比较差异有统计学意义,P<0.05.耐药细胞LoVo/5-FU较亲本细胞LoVo高表达XIAP mRNA(0.88±0.03 vs 0.11±0.02,P<0.01),两药联合作用后XIAP mRNA降低明显为0.21±0.03,P<0.01.结论:HCPT联合L-OHP能够协同抑制LoVo/5-FU细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关,抑制XIAP表达发挥作用.     

羟基喜树碱联合方案治疗难治性恶性淋巴瘤

目的 观察以羟基喜树碱(HCPT)注射液为主的联合方案治疗难治性恶性淋巴瘤的疗效。方法 HCPT10mg／次,静脉滴注,2h,联合Ara-C或VP16或PYM治疗难治性恶性淋巴瘤18例,其中非霍奇金淋巴瘤15例,霍奇金淋巴瘤3例。结果 CR1例,PR9例,总有效率55．5％,无进展生存1．5～10个月。该方案毒副作用轻,患者耐受性良好。结论 羟基喜树碱联合方案治疗难治性恶性淋巴瘤有一定疗效,值得进一步观察和总结。     

抗瘤药与胸腺素对小鼠脾细胞自然杀伤活性的影响

本文用~3H—TdR释放法检测了平阳霉素、阿霉素及胸腺素对BALB/C小鼠脾细胞杀伤YAC—1瘤细胞活性影响。结果显示一定量的平阳霉素除了能直接杀伤瘤细胞外,也能增强脾细胞NK样杀伤活性;并证明阿霉素有相同的作用;当平阳霉素、阿霉素分别与胸腺素合用后,这种增强作用更为明显。     

羟基喜树碱放射增敏作用的离体研究

目的　应用克隆形成方法 ,研究羟基喜树碱 (HCPT)对人鼻咽癌细胞系 (CNE)和胃癌细胞系 (BGC 82 3)的放射增敏作用。方法　实验分为单纯照射组和照射加药组。照射加药组在照射后均立即给予HCPT 2 μg/ml(药物剂量为ID50 剂量 ) ,37℃孵箱内作用 4h。应用克隆形成方法 ,观察单纯照射和照射加HCPT对细胞的杀伤作用。计算细胞存活率 ,用单击多靶数学模型进行曲线拟合做图。结果　BGC 82 3细胞单纯照射组D0 值为 1 17Gy,Dq 值为 1 91Gy,N值为 5 14;照射加HCPT组D0 值为 0 95Gy ,Dq 值为 0 0 1Gy ,N值为 1 0 1;放射增敏比 (SER)为 1 2 3(1 17/ 0 95 )。CNE Ⅰ细胞单纯照射组D0 值为 1 6 0Gy ,Dq 值为 0 6 5Gy ,N值为 1 5 ;照射加HCPT组D0 值为 0 95Gy ,Dq 值为 0 0 1Gy ,N值为 1 0 1;SER为 1 6 8(1 6 / 0 95 )。结论　研究结果显示 ,HCPT具有一定的放射增敏作用 ,为临床的放疗和HCPT的联合应用提供了实验依据。     

羟基喜树碱和鬼臼乙叉甙联合治疗鼻咽癌的实验研究

背景与目的:许多研究表明,拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ抑制剂具有互补作用,两者合用有协同作用。本研究探讨拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ抑制剂犤羟基喜树碱(HCPT)和鬼臼乙叉甙(VP-16)犦联合治疗鼻咽癌实验研究。方法:MTT法测定HCPT和VP-16单独及联合应用对鼻咽癌细胞株CNE2的细胞毒作用。建立CNE2裸鼠移植瘤模型,观察HCPT和VP-16联合应用体内抑制肿瘤生长的作用。结果:HCPT和VP-16单独应用对CNE2具有明显的细胞毒作用,其IC50分别为(13.5±1.2)μmol/L及(13.5±1.0)μmol/L。在体外实验中,在HCPT与VP-16相同剂量条件下,高浓度合用具有明显的协同作用(CI<1)。体内实验也表明,1.5mg/kg每2天1次,HCPT抑瘤率为13.6%;10mg/kg每2天1次,VP-16抑瘤率为27.3%;VP-16与HCPT合用,其抑瘤率为50%。结论:HCPT+VP-16在体内、外可协同抑制鼻咽癌细胞的生长。     

以羟基喜树碱为基础的联合方案对实验性鼻咽癌抗瘤作用的研究

目的：探讨以拓扑异构酶Ⅰ抑制剂基对碱（10－hydroxycampothecin,HCPT)为基础的联合方案对实验性鼻咽癌（nasopharngeal carcinoma,NPC)的抗瘤作用。方法：以人NPC细胞株CNE2的体外和裸鼠移植瘤为模型，研究HCPT与顺铂（cisplatin,DDP)或（和）5－氟尿嘧啶（5－fluorouracil,5-FU)联合作用的抗瘤结果。细胞毒测定用MTT法，体内抗瘤模型为CNE2裸鼠模型。结果：HCPT、DDP和5－FU对CNE2的IC50分别为14．2、17．2及49．2μmol/L,HCPTgn DDP合用具有明显的协同抗NPC作用。HCPT与5－FU合用虽较单药抗瘤作用优，但未见明显的相加或协同作用。HCPT＋DDP＋5－FU三药合用药两药合用效果更优，且毒性可耐受。结论：HCPT＋DDP或HCPT＋DDP＋5－FU具有协同抗NPC肿瘤作用，可试用于临床。     

过继免疫疗法(AIT)与羟基喜树碱(HCPT)序贯应用治疗膀胱癌的实验研究

目的了解过继免疫疗法(AIT)与羟基喜树碱(HCPT)序贯应用对膀胱肿瘤的作用.方法体外实验测定TIL及TIL与HCPT联合应用对不同靶细胞的杀伤活性,体内实验了解不同治疗方法对小鼠膀胱肿瘤的治疗效果.结果TIL对同种异体膀胱肿瘤细胞有强大的杀伤活性,对正常组织细胞无毒性,TIL与HCPT联合应用对肿瘤细胞的杀伤毒性低于单独应用时的杀伤活性.体内实验说明同时应用TIL及HCPT无明显疗效,而合理联合应用即序贯疗法有强大的抗癌作用.结论通过本实验说明过继免疫疗法与HCPT序贯应用才能起到抗癌作用,其可能机理是序贯疗法充分发挥HCPT化疗作用又不影响TIL的杀伤活性,并且有促进TIL聚积于肿瘤周围的效果.     

Antitumor activity and pharmacokinetics following oral administration of natural product DNA topoisomerase I inhibitors 10-hydroxycamptothecin and camptothecin in SCID mice bearing human breast cancer xenografts

The DNA topoisomerase I inhibitors, 10-hydroxycamptothecin (HCPT) and camptothecin (CPT), are indole alkaloids isolated from the Chinese tree, Camptotheca acuminata. They have been shown to have a wide spectrum of anticancer activity both in vitro and in vivo. However, their use has been limited due to their water-insolubility. The purpose of the present study was 2-fold, to determine the in vitro and in vivo activity of HCPT and CPT against human breast cancer and to determine the pharmacokinetics of the two drugs to better understand how they can best be used therapeutically. The bl vitro inhibitory effect on tumor growth was observed with breast cancer cell line MDA-MB-468. The in vivo antitumor effects were then determined using severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing MDA-MB-468 xenografts. The tumor-bearing mice were orally administered HCPT (1, 3, 6, 9 mg/kg/day, 5 days per week) or CPT (1, 3, 6 mg/kg/day, 5 days per week) for 3 weeks. Growth of the MDA-MB-468 cells was inhibited by HCPT and CPT in vitro and in vivo in a dose-dependent manner. Complete regression of the tumor xenografts, determined by tumor measurement and microscopic examination, occurred in the groups of animals treated with doses of HCPT or CPT of 3 mg/kg/day or more. In general, HCPT was more effective and less toxic than CPT. To determine the potential mechanisms for the pharmacologic differences, the comparative pharmacokinetics of HCPT and CPT were determined in tumor-bearing SCID mice following i.v. or oral administration of H-3-HCPT or H-3-CPT. Parent drugs and their metabolites in plasma, urine, feces, and various tissues were quantified by a recently developed reversed-phase HPLC method. Significant absorption of both HCPT and CPT was observed after oral administration, with CPT having a higher bioavailability. HCPT and CPT were distributed widely into various tissues including the tumor, enterohepatic system, kidneys, and bone marrow. These studies indicate that HCPT and CPT are of potential use in treatment of breast cancer, providing the basis for the design of future human trials with these anticancer drugs.     

开环及闭环羟基喜树碱对口腔鳞癌细胞株抗癌作用的研究

背景与目的:羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)的抗癌活性与其内酯环(包括闭环和开环)密切相关,但关于闭环HCPT和开环HCPT的抗癌活性仍有争议,研究已显示开环HCPT对口腔鳞癌具有明显的体内外抑制作用,本文比较开环及闭环HCPT对口腔鳞癌细胞株Tca8113的体内外抗瘤作用及其作用机理。方法:采用开环及闭环HCPT处理Tca8113细胞及其裸鼠移植瘤,MTT法及流式细胞仪(FCM)检测HCPT对Tca8113细胞的细胞毒作用及对细胞周期的影响;观察经HCPT处理后Tca8113细胞移植瘤的生长状态,计算肿瘤倍增时间和抑瘤率;高效液相色谱仪检测裸鼠血浆及移植瘤中HCPT的浓度,计算药代动力学参数。结果:开环及闭环HCPT对Tca8113细胞具有相同的强杀伤作用,FCM检测显示小于1μmol/LHCPT可将细胞阻滞在S期和G2/M期,100μmol/LHCPT则诱导细胞凋亡。与对照组比较,HCPT组移植瘤生长减慢,倍增时间延长,肿瘤抑制率分别为69.6%(3mg/kg开环HCPT)、65.0%(3mg/kg闭环HCPT)和74.1%(10mg/kg开环HCPT)。腹腔注射10mg/kgHCPT后裸鼠血浆曲线下面积分别为2.66μg·h·ml-1(闭环HCPT)和0.42μg·h·ml-1(开环HCPT),肿瘤组织中可检测到HCPT。HCPT3mg/kg组未见明显的毒副作用,开环HCPT10mg/kg组可见明显的胃肠道反应,闭环HCPT10mg/kg组所有裸鼠死亡。结论:开环及闭环HCPT均对口腔鳞癌细胞具有强的体内外细胞毒作用,其机理与阻断细胞于S期和G2/M期以及诱导细胞凋亡有关,但闭环HCPT毒性较开环HCPT毒性大。     

Induction of apoptosis in KB cells by pingyangmycin

Pingyangmycin (PYM; Bleomycin A(5)), an antitumour antibiotic is currently used during anticancer therapy. Previous experiments demonstrated that the therapeutic efficiency of PYM for treatment of malignant tumours is considered to be related to its ability to cause DNA strand breaks in vitro. However, very little is known about the interaction of PYM with the target cells, and it is still unclear how PYM enters the cells. In this study, cell death induced by PYM was studied in a human squamous cell carcinoma cell line (KB cells). In order to determine if cell death occurred by necrosis (reproductive cell death) or apoptosis (programmed cell death), KB cells were exposed to different concentrations of PYM and evaluated by biochemical and morphological criteria. Our results indicate that KB cells displayed an arrest in the G(2)-M phase of the cell cycle and became enlarged and polynucleated before dying at the low concentrations of PYM. In contrast, when cells were exposed to high concentrations of PYM, morphological changes identical to those usually associated with apoptosis were observed as well as internucleosomal digestion of genomic DNA. In conclusion, we demonstrate that PYM is able to induce two distinct modes of cell death depending on the doses of PYM.