2型糖尿病胰岛素抵抗对心肌损伤的实验研究

①目的建立糖尿痛心肌损伤动物模型,探讨糖尿病心肌损伤的相关因素。②方法用高脂饲料喂养和腹腔注射链脲佐菌素诱发大鼠2型糖尿病胰岛素抵抗模型,检测血糖和糖耐量、血清TC、TG、血浆胰岛素、心肌组织TNF—a、AngⅡ、AGEs的含量和心脏重量指数,光镜下观察心肌形态结构变化。③结果糖尿病模型组空腹血糖和糖耐量各点血糖值、血清TC、TG、血浆胰岛素、心肌组织TNF—a、AngⅡ、AGEs的含量和心脏重量指数均较正常对照组明显增高（P〈0．01）,光镜下见糖尿病大鼠心肌细胞明显肿胀肥大、变性,心肌纤维结构紊乱。④结论高脂饲料喂养联合腹腔注射STZ可建立2型糖尿病心肌损伤的大鼠模型,可能与心肌局部AngⅡ、TNF—a和AGEs过度表达有关。     

高脂血症在兔心肌细胞增殖及凋亡中的作用

目的 分析高脂血症在兔心肌细胞增殖及凋亡中的作用.方法 将普通级大耳白兔随机分为两组,每组10只.普通饲料组给予普通饲料,高脂饲料组给予高脂饲料,均喂养13 w.实验前及实验第4、7、10和13周末分别取空腹兔耳缘静脉血测血脂水平;实验结束光镜下观察心肌细胞的病理形态学改变,并采用FCM观察各组心肌细胞增殖与凋亡的情况.结果 第4、7、10及13周末,高脂饲料组血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平均显著高于普通饲料组（P〈0.01）.普通饲料组心肌细胞结构基本正常,高脂饲料组心肌细胞出现空泡变性、心肌弥漫性纤维化和淋巴细胞浸润.高脂饲料组G0/G1期百分率较普通饲料组显著增高（P〈0.05）,而S期、G2/M期百分率及PI均较普通饲料组显著降低（P〈0.05或P〈0.01）.结论 高脂血症可引起兔心肌细胞病理性改变,抑制心肌细胞增殖,且对其凋亡无显著影响.     

内质网应激在高脂血症大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的 研究内质网应激是否在高脂血症大鼠诱导心肌细胞凋亡中起作用。方法 通过建立高脂血症大鼠模型,全自动化生化仪检测血清甘油三酯(TG)及胆固醇(TC)水平;HE染色观察心肌组织的病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;免疫组化法及RT-PCR技术检测心肌细胞内质网应激信号通路分子GRP78的表达变化。结果 研究显示在喂养12 W时模型组大鼠血清TC、TG含量明显高于对照组(P<0.01);大鼠模型组较正常组心肌组织排列紊乱、边界不清、心肌纤维断裂、部分细胞核溶解消失;模型组大鼠心肌细胞凋亡率明显高于正常组(P<0.05);大鼠心肌GRP78mRNA及蛋白的表达量,模型组均较对照组明显升高(P<0.05)。结论 内质网应激途径可能在高脂血症诱导心肌细胞凋亡中起到重要作用。     

高游离脂肪酸血症对心肌结构与功能的影响及其机制

目的 观察在肥胖/胰岛素抵抗状态下高游离脂肪酸(FFA)血症与心肌结构及功能的关系,并探讨其可能的分子发病机制.方法 4周龄雄性SD大鼠16只,随机分为2组,肥胖组(OB组)予高脂饲料喂养,对照组(NC组)予正常饲料喂养.行高胰岛素-正糖钳夹实验评价大鼠外周胰岛素敏感性,检测左心室最大收缩速率(+dp/dtmax)、左心室最大舒张速率(-dp/dtmax)及平均心肌细胞直径(MCD).检测血及左室心肌匀浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平以及心肌核转录因子kB(NF-KB)、I-kB、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达.结果 OB组存在明显胰岛素抵抗(P<0.05),MCD较NC组增大(P<0.01),心脏舒、缩功能均下降(P<0.01),血及心肌TG、FFA、AngⅡ浓度均较NC组升高(P<0.05),心肌iNOS、NF-kB表达增强(P<0.01)、I-kB出表达下降(P<0.01).心肌TG与血FFA呈正相关(r=0.80,.P<0.01).心肌FFA与心肌AngⅡ水平(r=0.74,P<0.05)、iNOS(r=0.66,P<0.05)及NF-kB表达(r=0.86,P<0.01)呈正相关.+dp/dtmax与心肌TG(r=-0.87,P<0.01)、AngⅡ(r=-0.52,P<0.05)、iNOS(r=-0.70,P<0.01)及NF-kB 表达(r=-0.57,P<0.01)均呈负相关.-dp/dtmax与心肌TG(r=-0.85,P<0.01)、AngⅡ(r=-0.82,P<0.01)、iNOS(r=-0.78,P<0.01)及NF-KB表达(r=-0.75,P<0.01)均呈负相关.结论 肥胖-胰岛素抵抗大鼠由于血中TG、FFA浓度升高,导致心肌异位脂质沉积.异位沉积的脂质有可能通过激活心肌RAS系统,并增强心肌NF-kB、iNOS的表达.从而引起心肌肥大、心肌细胞凋亡、心功能损害的发生.     

内质网应激在高脂血症大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的:研究内质网应激是否在高脂血症大鼠诱导心肌细胞凋亡中起作用.方法:通过建立高脂血症大鼠模型,全自动化生化仪检测血清甘油三脂(Triglycercide,TG)及胆固醇(Cholesterol,TC)水平;HE染色观察心肌组织的病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;免疫组化法及RT-PCR技术检测心肌细胞内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路分子GRP78的表达变化.结果:喂养12周时模型组大鼠血清TC、TG含量明显高于对照组(P<0.01);大鼠模型组较正常组心肌组织排列紊乱、边界不清、心肌纤维断裂、部分细胞核溶解消失;模型组大鼠心肌细胞凋亡率明显高于正常组(P<0.05);大鼠心肌GRP78mRNA及蛋白的表达量,模型组均较对照组明显升高(P<0.05).结论:ERS途径可能在高脂血症诱导心肌细胞凋亡中起到重要作用.     

盐敏感性高血压大鼠eNOS、iNOS 表达与心肌细胞凋亡关系分析

目的探讨盐敏感性高血压形成和心肌细胞损害产生的机制。方法以辣椒辣素损伤Wistar大鼠感觉神经,饲喂高盐饲料,建立盐敏感性高血压大鼠模型。苏木素—伊红染色观察大鼠组织病理学改变;分光光度法检测心肌组织iNOS活性和NO含量;免疫组织化学方法检测心肌eNOS、iNOS蛋白表达;RT-PCR检测心肌eNOS、iNOS mRNA的表达。单细胞凝胶电泳检测心肌细胞凋亡。结果实验结束时各组比较体重无显著性差异(P>0.05)。在第2、3、4周时,辣椒辣素高盐组鼠尾收缩压与对照组相比差异显著(P<0.05)。辣椒辣素高盐组心肌细胞排列紊乱、细胞间隙明显增大,细胞核排列不整齐;心肌iNOS、NO水平升高(P<0.05);eNOS蛋白表达减少(P<0.05)与eNOS mRNA表达减少(P<0.01);iNOS蛋白表达和iNOSmRNA表达显著增高(P<0.01);凋亡细胞数升高(P<0.05)。结论 eNOS mRNA和蛋白的低表达与感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠形成相关。iNOS mRNA和蛋白的高表达及iNOS活性升高使心肌组织局部产生大量NO。NO可能使得感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心肌细胞凋亡增加,从而加重心肌的损伤。     

清源调脂胶囊对大鼠实验性动脉粥样硬化形成的影响

目的：探讨清源调脂胶囊对大鼠实验性动脉样硬化形成的影响。方法：高脂饲料喂养建立大鼠动脉粥样硬化模型，治疗组大鼠同步给予源调脂胶囊，对照组大鼠同步给予月见草油胶丸，检测各组大鼠血脂液脂质和血清MDA含量及肝脏MDA含量，并观察主动脉组织结构变化，结果：与模型组相比，治疗组、对照组大鼠的TC、TG、LDL－c及MDA等均显著下降，尤以治疗组大鼠为最；治疗组大鼠主动脉粥样硬化程度明显减轻，结论：清源调脂胶囊能有效降低大鼠TC、TG、LDL－c及MDA含量，并对动脉粥样硬化早期病产生明显的抑制作用。     

核仁素对糖尿病性心肌病小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：探讨核仁素对糖尿病性小鼠心肌病心肌细胞凋亡的影响。方法：小鼠给予高脂高糖饲料喂养,第 5,6周分别予链脲佐菌素60 mg/kg腹腔注射,构建2型糖尿病模型;实验分为4组：野生型小鼠对照组、核仁素转基 因小鼠对照组、野生型小鼠糖尿病组、核仁素转基因小鼠糖尿病组;第8周末检测糖尿病相关指标;第20周末,采用 HE染色观察心肌形态学改变;TUNEL染色和caspase-3活性检测心肌细胞凋亡程度。结果：糖尿病组小鼠空腹血糖值 较野生型对照组明显升高;与野生型对照组相比,野生型糖尿病组小鼠心肌HE染色显示细胞排列紊乱,部分肌纤维 出现断裂及溶解,TUNEL染色和caspase-3活性检测显示心肌细胞凋亡明显增加。与野生型糖尿病组小鼠相比,转基 因糖尿病组小鼠心肌形态学改变明显减轻,心肌细胞凋亡明显减少。结论：核仁素过表达可抑制糖尿病性心肌病中 心肌细胞凋亡的发生。     

针刺对高脂大鼠主动脉氧化应激的影响

目的:探讨高脂饮食对SD大鼠主动脉氧化应激的影响以及针刺抑制氧化应激的机制.方法:17只刚断乳的SD大鼠经高脂喂养16周后,按体重随机分为模型组(8只)和针刺组(9只),干预4周后检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、NO、MPO和主动脉NO、tNOS、iNOS、cNOS、SOD、MDA,设普食对照组(9只).结...     

2型糖尿病大鼠并发心肌病的实验研究

目的:观察2型糖尿病大鼠并发心肌病的情况。方法:随机选取100只健康SD大鼠,依据其血糖与体重分为4个小组,均25只,A组(糖尿病组)采用高脂高糖的饲料进行喂养,B组(STZ组)采用普通饲料进行喂养、C组(高脂高糖饲料组)采用高脂高糖的饲料进行喂养,D组(常规对照组)采用普通的饲料进行喂养,其中A、B两组注射STZ(链脲佐菌素)30mg/kg,C、D两组注射柠檬酸盐缓冲液30mg/kg,观察4组的血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯等指标及心肌病变的发生情况。结果:四组大鼠的血糖、总胆固醇、甘油三酯、体重相比较,A、C两组均明显高于B、D两组(P0.05),其中A组为最高,且A组出现心肌细胞变性及凋亡病变等情况明显多于其他几个小组。结论:2型糖尿病大鼠极易发生心肌病变,其心肌病变的病理表现主要为心肌细胞变性、肥厚及间质纤维组织增生等。     

橄榄油对高血脂大鼠降脂作用的研究

目的探讨橄榄油对高脂血症大鼠的降脂作用。方法将大鼠随机分为基础饲料喂养组、高脂饲料喂养组和高脂饲料加橄榄油组，喂养8周后分别测定其血清中TG、TC、LDL-C、apoAl、apoB、MDA含量、AI及肝脏组织中的TG、TC含量。结果大鼠血清TG、TC、LDL-C、apoAl、apoB、MDA含量、AI和肝脏组织中TC、TG水平均呈现出高脂饲料喂养组〉橄榄油喂养组〉基础饲料喂养组（P〈0．05）。结论橄榄油能降低高血脂大鼠血清、肝脏组织中的脂和脂类代谢物水平。     

大蒜精油对糖尿病大鼠心肌组织形态学及心肌细胞凋亡的影响

目的：观察大蒜精油对糖尿病大鼠心肌组织形态学及心肌细胞凋亡的影响。方法：应用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组、大蒜精油低、中、高剂量组,同时设正常对照组。大蒜精油各剂量组按不同浓度比例喂饲大蒜精油。连续干预16天后观察动物一般情况、血糖水平,处死后测全心、左心重量变化;剪取左心室组织,HE及Masson三色染色,镜下观察心脏组织;TUNEL检测心肌细胞凋亡情况。结果：模型组血糖升高明显、全心重及左心室重增加、心肌纤维肥大、心肌出现纤维化、心肌细胞凋亡明显,大蒜精油各组情况得到改善,以大剂量为明显。结论：大蒜精油可有效改善糖尿病大鼠心肌组织结构,减轻心肌纤维化,明显抑制心肌细胞凋亡。     

植物甾醇对大鼠脂质代谢紊乱的预防作用

目的研究植物甾醇对高脂饮食大鼠脂质代谢的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为基础对照组（普通饲料喂养）、高脂模型组（高脂饲料喂养）、植物甾醇低剂量组（高脂饲料喂养,每天100mg／kg植物甾醇灌胃）和植物甾醇高剂量组（高脂饲料喂养,每天200mg／kg植物甾醇灌胃）。分别于实验结束时（6周末）测定各组大鼠的体质量、血脂水平、肝脏脂肪含量及体脂含量。结果实验结束时,3组高脂饮食大鼠的体质量、肝脏脂肪含量、体脂含量以及血清TC、TG、LDL—C水平均明显高于基础对照组（P〈0．05）,血清HDL—C水平低于基础对照组（P〈0．05）。与高脂模型组比较,植物甾醇高剂量组大鼠的体质量增加量较少（P〈0．05）,体脂含量较低（P〈0．05）;植物甾醇低、高剂量组大鼠肝脏脂肪含量及血清TC、TG和LDL—C水平均显著低于高脂模型组（P〈0．05）。结论植物甾醇具有预防高脂饮食大鼠脂质代谢紊乱的作用。高剂量植物甾醇可减少高脂饮食大鼠体质量的增加和体脂含量。     

基于脂质代谢组学研究羟基红花黄色素A治疗高脂血症LDLR-/-小鼠的作用机制

[目的]基于脂质代谢组学方法考察羟基红花黄色素A(HSYA)对高脂饲料诱导的LDLR^-/-小鼠高脂血症脂质代谢的影响及其机制。[方法]将28只雄性LDLR^-/-小鼠分为对照组与高脂组。对照组喂养普通饲料,高脂组喂养高脂饲料,6周后,高脂组按照血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量平均分为4组：模型组、辛伐他汀组、HSYA(3.8 mg/kg)低剂量组、HSYA(7.6 mg/kg)高剂量组。给药11周,给药期间同时给予高脂饲料饲养。全自动生化仪检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、LDL-C含量,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理形态,油红O染色观察小鼠肝脏组织脂肪蓄积情况,采用靶向脂质组学技术对LDLR-/-小鼠血清中脂质进行测定。[结果]与对照组比较,模型组小鼠血清中LDL-C、TC、TG、AST、ALT含量升高(P<0.05),肝组织出现大小不等的脂滴浸润,肝细胞排列紊乱,大量脂质蓄积。与模型组比较,HSYA两组小鼠血清中LDL-C、TC、TG、AST、...     

银杏叶提取物对实验性2型糖尿病大鼠心肌的保护作用

目的：观察银杏叶提取物对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用。方法：采用小剂量链脲佐菌素加高脂高热量饲料喂养的方法建立Wistar大鼠Ⅱ型糖尿病模型，成模后治疗组按8mg·kg^-1·d^-1剂量腹腔注射银杏叶提取物（extract gingko biloha，ECb），（北京双鹤天然药物有限公司，批号（319163—0405），正常对照组及糖尿病组腹腔注射等容积生理盐水，每天1次，连续8周。检测血糖、血胰岛素，心肌组织中一氧化氮（NO）、一氧化氮舍酶（NOS）含量测定。结果：治疗组能明显降低大鼠血糖、血胰岛素及NO含量，降低NOS的活力。结论：银杏叶提取物对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠心肌损伤具有一定保护作用，可能与其对胰岛的修复及清除自由基，抗脂质过氧化作用有关。     

胰岛素抵抗大鼠血清一氧化氮浓度代偿性升高的实验研究

目的:观察高脂高糖饮食诱导胰岛素抵抗(IR)大鼠血清一氧化氮(NO)水平,进一步明确IR阶段NO的作用。方法:高脂高糖饮食喂养SD大鼠8周制造胰岛素抵抗大鼠模型,分别检测两组大鼠血清NO、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及游离脂肪酸(FFA)水平,分析NO与TC、TG、FFA的相关性。结果:IR组大鼠血清NO水平明显高于对照组(IR:59.16±24.33;NC:31.68±16.95,P<0.05),大鼠血清NO水平与血清TC、FFA的相关系数分别为(r=0.292和r=0.201,P<0.05);与TG的相关系数为(r=0.036,P>0.05)。结论:胰岛素抵抗大鼠血清NO水平代偿性升高,且与血清TC、FFA水平呈正相关。     

大鼠高脂饮食性脂肪肝模型血浆和肝脏脂质含量变化

目的 通过连续给大鼠饲喂高脂饮食建立脂肪肝模型,观察大鼠血浆和肝脏组织中脂质含量变化。方法 取雄性SD大鼠30只,其中正常对照组10只,其余20只用高脂饲料制造脂肪肝模型,待模型造成后,将动物用乌拉坦腹腔注射麻醉,腹主动脉采血,测其血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量;取部分肝组织制作病理切片,另取部分冷冻密封保存备测肝组织TG。结果 与正常对照组比较,脂肪肝模型组大鼠血浆中的TC、TG,肝脏组织中TG明显升高;光镜下观察,正常对照组肝细胞形态,结构、排列正常,脂肪肝模型组则可见多处脂质沉积,与生化检测结果一致。结论 高脂饮食饲料可成功建立大鼠脂肪肝模型,模型大鼠血浆和肝脏脂质含量均明显增高。。     

瑞舒伐他汀对糖尿病大鼠心肌功能和NT-pro-BNP的影响

目的:观察瑞舒伐他汀对糖尿病大鼠心肌功能和NT-pro-BNP的影响.方法:利用高糖高脂饲料喂养2个月和链脲佐菌素制备Wistar大鼠糖尿病模型,造模成功后继续原饲料喂养并随机分为对照组和瑞舒伐他汀组.对照组每日予生理盐水灌胃,瑞舒伐他汀组每日予瑞舒伐他汀(20mg/kg)灌胃,持续2个月.观察心脏超声指标左室舒张末期内径(LVEDD)、左室后壁厚度(LWPWT)和左室射血分数(EF)的变化;检测两组大鼠实验末血糖情况,血脂指标甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和心功能指标N末端脑钠肽前体(NT-pro-BNP);计算心脏重量/体重比.结果:瑞舒伐他汀组大鼠实验末的LVEDD和LWPWT指标低于对照组,EF指标高于对照组差异有统计学意义;实验末两组大鼠空腹血糖相比无明显差异;TG、TC和NT-pro-BNP水平明显低于对照组,瑞舒伐他汀组大鼠实验末心脏重量/体重比显著低于对照组.结论:瑞舒伐他汀能改善脂代谢紊乱,降低NT-pro-BNP水平,减轻糖尿病大鼠心肌功能障碍和损伤.     

小檗碱对脂代谢及血管粥样硬化的影响及机制探讨

目的：研究小檗碱（Berberine,Ber）对高脂兔模型脂代谢和血管硬化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：采用高脂饲料喂养2月建立高脂兔动物模型。40只新西兰大耳白兔随机分成普通饲料组（普食组）、高脂模型组、高脂+Ｂer组[28、112 mg/（kg·d）]、高脂+非诺贝特组[30 mg/（kg·d）]。2月后测定各组血清总胆固醇（Total cholesterol,TC）、三酰基甘油（Triglycerides,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（Low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（High density lipoprotein-choles－terol,HDL-C）水平;HE染色观察主动脉组织形态学变化;实时荧光定量PCR检测主动脉诱导型一氧化氮合酶（Inductible nitric oxide synthase,iNOS）和B类1型清道夫受体（Scavenger receptor class-B type 1,SR-B1）基因表达的变化。结果：与普食组相比,高脂模型组 TC、TG和LDL-C水平显著升高（P<0.05）,主动脉内膜出现明显的脂质沉积和泡沫细胞形成,iNOS和SR-B1 mR－NA表达显著升高（P<0.05）;与高脂模型组相比,高脂＋Ber处理组血清TC、TG和LDL-C的水平显著降低（P<0.05）,而HDL水平显著升高（P<0.05）,主动脉粥内膜脂质沉积减轻,泡沫细胞明显减少,iNOS和SR-B1 mRNA表达显著降低（P<0.05）。结论：Ber具有明显的调血脂和抗血管硬化作用,其作用机制与抑制iNOS和SR-B1基因表达相关。     

自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶的变化及其机制探讨

目的 检测自发性高血压大鼠（SHR）心肌细胞凋亡和心肌细胞诱导型一氧化氮合成酶（iNOS)的变化并探讨其机制。方法 透射电子显微镜技术以及脱氧核苷酸末端转移酶缺口末端标记法（TUNEL）观察检测SHR和正常血压大鼠（WKY）心肌细胞凋亡的变化；运用免疫荧光方法检测SHR和WKY大鼠心肌细胞iNOS的变化；所得结果运用图像分析系统分析处理。结果 透射电子显微镜观察发现SHR组左心室心肌组织中可见具有凋亡形态特征的心肌细胞；TUNEL法检测SHR组心肌细胞凋亡明显高于WKY组（P＜0.01)。免疫荧光检测SHR组心肌细胞内iNOS活性明显高于WKY组（P＜0.01)。结论 SHR心肌细胞凋亡显著增加，可能在自发性高血压病的发病过程中起重要作用；SHR心肌细胞内iNOS活性显著增加，可能对心肌细胞凋亡起诱导作用。