褪黑素对下丘脑氨基酸神经递质的影响

应用纸电泳一双波长薄层扫描法测定了雄性小鼠下丘脑天冬氨酸（Ａｓｐ）．谷氨酸（Ｇｉｎ），及γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）３种神经递质的含量和褪黑素（ＭＴ）对其影响。结果发现；下丘脑内３种氨基酸神经递质含量均呈明显的昼夜节律性变化，ＭＴ使Ａｓｐ、ＧＡＢＡ的昼夜节律曲线上移，在１２：００及２０：００ｈ升高Ａｓｐ、ＧＡＢＡ作用明显。不同剂量的ＭＴ腹腔注射能够升高Ａｓｐ．ＧＡＢＡ含量，以５μｇ·ｋｇ－１剂量为强，脑室注射ＭＴ的效果更佳。然而，不同浓度，不同时ＩＭＭＴ给药均不影响下丘脑Ｇｌｕ水平。利血平化小鼠的Ａｓｐ、ＧＡＢＡ含量升高，Ｇｌｎ含量则下降、给利血平化动物注射ＭＴ，则ＭＴ对Ａｓｐ，ＧＡ－ＢＡ的影响消失，而使Ｇｌｎ含量进一步下降。提示：ＭＴ对Ａｓｐ、ＧＡＢＡ昼夜节律产生影响，这种影响可能通过单胺神经递质介导。     

6例河南株HGV NS5基因变异的研究

目的：探讨河南省庚型肝炎病毒基因的变异特征。方法：利用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴＮｅｓｔＰＣＲ） 扩增ＨＧＶＮＳ５ 区序列;将ＰＣＲ扩增产物克隆入Ｔ载体,进行测序和分析。结果：河南株ＨＧＶＮＳ５核酸和氨基酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ 中ＨＧＶ 对应位置序列的同源性分别为８９．０％ ～９８．４％ 和９５．０％ ～９８．４％ ;河南株存在本地区的独特变异点（２３ 位Ａｌｇ→Ｇｌｙ,１１９ 位Ｐｈｅ→Ｌｅｕ ,１５３ 位Ａｓｐ→Ｇｌｕ） 。结论：ＨＧＶＮＳ５ 区基因相当保守,是ＰＣＲ方法检测ＨＧＶ的适宜扩增区段;推测这三个变异点可能是河南株ＨＧＶ 进化标志。     

纤维蛋白原B β318～320 KGD基序与血小板功能的关系

目的：探讨纤维蛋白原(Fbg)Bβ链318～320KGD结构是否为血小板膜糖蛋白GPⅡb／Ⅲa的配基及此结构在血小板止血和血栓形成功能中的作用。方法：采用Site-directed mutagenesis方法制备Fbg BβEGS重组克隆，转染中国仓鼠卵细胞(CHO)，体外表达变异纤维蛋白原，并进行血小板聚集和纤维蛋白凝块收缩实验。结果：变异Fbg和正常Fbg比较，血小板聚集率无明显差异，BβEGS Fbg使凝块收缩反应的启始时间明显延迟，凝块收缩速率高于正常Fbg，变异Fbg与正常Fbg凝块大小相似。结论：血小板聚集率不受EGS结构的影响，EGS结构使凝块收缩反应出现异常，Fbg BβKGD结构可能是与血小板膜GPⅡb／Ⅲa受体结合的配基，参与纤维蛋白凝块收缩反应。     

6例河南株HGV NS5基因变异的研究

目的 探讨河南省庚型肝炎病毒基因的变异特征。方法 利用逆转录－巢式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）扩增ＨＧＶ ＮＳ５区序列;将ＰＣＲ扩增产物克隆入Ｔ载体,进行测序和分析。结果 河南株ＨＧＶ ＮＳ５核酸和氨基酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ中ＨＧＶ对应位置序列的同源笥分别为８９％￣９８．４％和９５％￣９８．４％;河南株有独特变异点（２３位Ａｌｇ→Ｇｌｙ,１１９位Ｐｈｅ→Ｌｅｕ,１５３位Ａｓｐ→Ｇｌｕ）     

Graves病T,B细胞功能异常及甲巯咪唑体外调节作用的研究

目的：探讨Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者Ｔ、Ｂ细胞异常及甲巯咪唑体外对它们的影响。方法：将２５例ＧＤ病人 外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在不同浓度的甲巯咪唑条件下进行体外细胞培养６天后,同时检测Ｔ细胞亚群及ｓＩＬ－ ２Ｒ和ＩｇＧ的含量。结果：ＧＤ病人ＰＢＭＣ中的ＣＤ_８~＋Ｔ细胞亚群百分率明显低于对照组,ＣＤ~＋_４／ＣＤ_８~＋比值显著升高 （ｐ＜０．０１）。 ｓＩＬ－２Ｒ及ＩｇＧ水平较对照组显著升高（ｐ＜０．０１）;Ｘ１０~（－５）ｍｏｌ／Ｌ的甲巯咪唑可明显升高ＧＤ患者ＰＢ－ ＭＣ培养后ＣＤ_８~＋ Ｔ细胞的百分率（Ｐ＜０．０１）,降低ＣＤ_４~８ＣＤ_８~＋比值及ｓＩＬ－２Ｒ和ＩｇＧ水平（Ｐ＜０．０１）。提示：ＧＤ病 人Ｔ细胞亚群对免疫应答发生调节失衡,甲巯咪唑具有调节ＧＤ患者Ｔ、Ｂ细胞功能异常的作用。     

Inhibitory effects of copper-aspirin complex on platelet aggregation

目的：研究阿司匹林铜（ＣｕＡｓｐ）对血小板聚集性的影响及其机制．方法：用Ｂｏｒｎ氏法测定ＣｕＡｓｐ对兔血小板聚集性的影响．用荧光光度法和放射免疫法观察ＣｕＡｓｐ对兔血小板５羟色胺的释放和ＴＸＢ２的产生及血浆中ＴＸＢ２和６ｋｅｔｏＰＧＦ１α水平的影响．结果：ＣｕＡｓｐ体外呈浓度依赖性抑制花生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集和５羟色胺的释放（ＩＣ５０分别为１７和１９μｍｏｌ·Ｌ－１，９５％可信限为９－３３和１０－３０μｍｏｌ·Ｌ－１），且抑制ＴＸＢ２的产生（Ｐ＜００５）．ＣｕＡｓｐ１０ｍｇ·ｋｇ－１灌胃选择性抑制ＡＡ诱导聚集．降低血浆ＴＸＢ２，同时升高６ｋｅｔｏＰＧＦ１α的水平（Ｐ＜００５）．结论：ＣｕＡｓｐ体内外均有比Ａｓｐ更强的抗血小板聚集作用．     

天蓝淡红链霉菌SIPI1482菌株graORF1同源基因的克隆

将含有ａｃｔⅢ基因的质粒ｐＩＪ２３４６及其带有ｇｒａＯＲＦ１～４质粒ｐＩＪ５２０５～５２０８作探针与天蓝淡红链霉菌ＳＩＰＩ１４８２菌种的染色体ＤＮＡ杂交。ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ显示ｐＩＪ２３４６能与２．１ｋｂ的ＢａｍＨⅠ片段杂交；ｇｒａＯＲＦ１能与约６．０ｋｂ和约１０ｋｂＢａｍＨⅠ以及约２０ｋｂＢｃｌⅠ片段杂交。除２．１ｋｂＢａｍＨⅠ片段外，其余的同源片段克隆到质粒ｐＵＣ１８形成几个克隆子，并经ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ确认这些同源片段的存在。含有约１０ｋｂ同源ＤＮＡ片段的ｐＹＧ２５，当转化加利利链霉茵３１６１７时，发现能大大地促进该菌株色素的分泌，表明约１０ｋｂＢａｍＨⅠ同源片段含有某种调节基因。当将质粒ｐＹＧ１１的约６ｋｂＢａｍＨⅠ同源片段克隆到ｐＩＪ６８０构成杂合质粒ｐＹＧ２６并导入变青链霉菌ＴＫ６４，发现同源基因的导入能引起变青链霉菌ＴＫ６４表型的显著变化，表明约６ｋｂ同源基因编码了某些与分化有关的基因。     

生长激素在去垂体大鼠体内的生物活性测定

目的：建立测定生长激素（ＧＨ）在体生物活性的方法。方法：以去垂体大鼠体重增长（ＢＷＧ）和胫骨骺软骨板宽度（ＴＥＷ）为指标，观察动物性别，给药途径，次数和周期不同对效应的影响，同时进行４－ｄＢＷＧ，６－ｄＢＷＧ和６－ｄＴＥＷ法，测定ＧＨ的效价（平行线３×３设计）。结果：♀和♂ｓｃ和ｉｍ给药以及每日给药１次和２次的ＢＷＧ和ＴＥＷ差异无显意义。给药６ｄ比给药４ｄ引起较大的ＢＷＧ和ＴＥＷ（Ｐ〈０．０５）     

Measurement of biological activity of somatotropin in hypophysectomized rats

目的：建立测定生长激素（ＧＨ）在体生物活性的方法．方法：以去垂体大鼠体重增长（ＢＷＧ）和胫骨骺软骨板宽度（ＴＥＷ）为指标，观察动物性别、给药途径、次数和周期不同对效应的影响；同时进行４ｄＢＷＧ，６ｄＢＷＧ和６ｄＴＥＷ法，测定ＧＨ的效价（平行线３×３设计）．结果：♀和♂ｓｃ和ｉｍ给药以及每日给药１次和２次的ＢＷＧ和ＴＥＷ差异无显著意义．给药６ｄ比给药４ｄ引起较大的ＢＷＧ和ＴＥＷ（Ｐ＜００５）．４ｄＢＷＧ法和６ｄＢＷＧ法在００２０－０５００ＩＵ·ｄ－１有较好的λ值（００６６０和０１７４７）和ｒ值（０９０００和０９２３７）；４ｄＢＷＧ，６ｄＢＷＧ和６ｄＴＥＷ法测得ｒｈＧＨ的效价为４６１３２，３９８２９和４８０２３ＩＵ／ａｍｐ．６ｄＢＷＧ法有较小的λ值和较低的ＡＲＦＬ值．结论：可在同一组去垂体大鼠体内同时用４ｄＢＷＧ，６ｄＢＷＧ和６ｄＴＥＷ法测ＧＨ活性，以６ｄＢＷＧ法较好．     

塞替派诱发人支气管上皮细胞恶性转化的基因突变

目的　了解药物致癌过程中的基因突变情况。方法　利用以塞替派为致癌原诱导永生化人支管上皮细胞 (ＢＥＡＳ 2Ｂ)发生恶性转化建立的癌前转化细胞 (ＢＥＡＳ ＴＥ)以及从软琼脂上筛选到了克隆化多倍体细胞 ,沿转化细胞代龄进行了转化进程中ｐ5 3、ｐ16和Ｋｉ ｒａｓ基因突变情况的动态观察。结果　ｐ5 3、Ｋｉ ｒａｓ基因存在多位点、ｐ16基因单位点的的碱基突变。结论　ｐ5 3和Ｋｉ ｒａｓ基因的多位点突变是塞替派诱导细胞转化过程中发生的重要分子事件 ,ｐ16基因非编码区单个碱基的缺失是细胞转化过程中的次要分子事件塞替派诱发人支气…     

TGF-β对原代培养肝细胞及肝癌细胞BEL7401生长作用的影响

目的 研究转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）对正常大鼠肝细胞和肝肿瘤细胞的影响。方法 分离和培养原代大鼠肝细胞,培养ＢＥＬ４０１肝癌细胞,通过测定细胞ＤＮＡ合成、细胞活性（ＭＴＴ）及碱性磷酸酶活性,研究ＴＧＦ－β对正常大鼠肝细胞和肝肿瘤细胞的影响方式及可能的作用途径。结果 实验发现,ＴＧＦ－β可以刺激ＢＥＬ７４０１肝癌细胞的增生,促进其ＤＮＡ合成,并增强其活性ＳＴＧＦ－β对原代培养肝细胞ＤＮＡ合成无明显影响,对其活性有明显的抑制作用。实验还发现,ＴＧＦ－β明显刺激ＢＥＬ７４０１肝癌细胞中的碱性磷酸酶增高,同时抑制原代培养肝细胞的碱性磷酸酶活性。结论ＴＧＦ－β对正常细胞和肝癌细胞ＢＥＬ７４０１的生长有不同的影响作用,这种结果可能是通过不同的细胞信号传导途径实现的。     

Effect of epidermal growth factor on cultured rat hepatocytes poisoned by CCl~4

研究表皮生长因子（ＥＧＦ）对四氯化碳（ＣＣｌ４）所致大鼠原代培养肝细胞损伤的作用．方法：丙氨酸转氨酶（ＡｌａＡＴ）和天门冬氨酸转氨酶（ＡｓｐＡＴ）活力及Ｋ＋浓度用自动生化分析仪测定．丙二醛（ＭＤＡ）用苯巴比土酸比色法测定．放射活力用液体闪烁测量仪测定．细胞病理用光学显微镜和电子显微镜检查．结果：ＥＧＦ显著降低ＡｌａＡＴ，ＡｓｐＡＴ及ＭＤＡ水平，增加中毒肝细胞ＲＮＡ和ＤＮＡ的合成，且Ｋ＋漏出与ＤＮＡ的合成呈正相关．细胞病理显示ＥＧＦ减轻ＣＣｌ４对肝细胞的毒性作用．结论：ＥＧＦ对ＣＣｌ４所致原代培养肝细胞损伤有拮抗作用，肝细胞内Ｋ＋转运是ＤＮＡ合成起信息传递的启动因子．     

膀胱癌多药耐药基因与p53基因表达的临床意义

目的 探讨膀胱癌中多样耐药基因（ＭＤＲ１）与ｐ５３基因表达的临床意义。方法 采用免疫组化（ＳＡＢＣ）法对３５例膀胱移行细胞癌中ＭＤＲ１表达产物Ｐ－ＧＰ与ｐ５３基因产物ｐ５３蛋白进行了检测。结果 ３５例膀胱移行细胞癌中Ｐ－ＧＰ、ｐ５３阳性率分别为４０％和４８．６％,随膀胱癌的病理分析和临床分期而增高。Ｔ２～Ｔ４期同Ｔｉｓ～Ｔ１期相比,ＭＤＲ１及ｐ５３的表达均有显著性差异,ＭＤＲ１与ｐ５３的表达无相关     

Influences of Kupffer cell stimulation and suppression on immunological liver injury in mice

研究库普弗细胞（ＫＣ）是否参与小鼠免疫性肝损伤．方法：给小鼠静脉注射卡介苗（ＢＣＧ）５×１０７活菌后再静脉注射脂多糖（ＬＰＳ）７５μｇ以诱导免疫性肝损伤．以维生素Ａ激活ＫＣ和以印度墨汁或硅砂封闭ＫＣ后，测定血浆一氧化氮（ＮＯ），谷丙转氨酶（ＡｌａＡＴ），谷草转氨酶（ＡｓｐＡＴ）的变化并检查肝组织的病理改变．结果：注射ＢＣＧ后，再注射ＬＰＳ７５μｇ，可导致小鼠血浆ＮＯ，ＡｌａＡＴ，ＡｓｐＡＴ剧烈升高及严重的肝损伤．以维生素Ａ激活ＫＣ后，肝损伤更为严重，而以印度墨汁或硅砂封闭ＫＣ后，肝损伤则显著减轻．结论：ＢＣＧ＋ＬＰＳ诱导的小鼠肝损伤与ＫＣ的功能关系密切，来源于ＫＣ的ＮＯ在ＢＣＧ＋ＬＰＳ诱导的肝损伤中起重要作用．     

阿司匹林铜的抗血小板聚集作用

目的：研究阿司匹林铜（ＣｕＡｓｐ）对血小板聚集性的影响及其机制，方法；用Ｂｏｒｎ氏法测定ＣｕＡｓｐ对兔血小板聚集性的影响，用荧光光度法和放射免疫法观察ＣｕＡｓｐ对兔血小板５－羟色胺的释放和ＴＸＢ２的产生及血浆中ＴＸＢ２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α水平的影响，结果：ＣｕＡｓｐ体外呈浓度依赖性抑制花生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集和５－羟色胺的释放（ＩＣ５０分别为１７和１９μｍｏｌ．Ｌ＾－１，９５％可信     

呼吸道感染患儿血清胆汁酸变化与肝功能损害

目的：探讨呼吸道感染对患儿肝功能损害的程度及其监测的早期敏感指标。方法：对住院治疗的２７９例呼吸道感染患儿测定血清谷草转氨酶（ＡＳＴ）、γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、总胆汁酸（ＴＢＡ）。结果：①部分呼吸道感染患儿ＡＳＴ、ＧＧＴ、ＡＬＰ及ＴＢＡ高于正常健康对照组上限，而针对同一指标，病情轻重不同，其异常率差别无显著性，其中以ＴＢＡ的异常率最高；②重症肺炎组ＴＡＢ与对照组比较，差别     

6例河南株HGV NS5基因变异的研究

目的 探讨河南省庚型肝炎病毒基因的变异特征。方法 利用逆转录－巢式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）扩增ＨＧＶ ＮＳ５区序列；将ＰＣＲ扩增产物克隆人Ｔ载体，进行测序和分析。结果 河南株ＨＧＶ ＮＳ５核酸和氨基酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ中ＨＧＶ对应位置序列的同源性分别为８９．０％～９８．４％和９５．０％～９８．４％；河南株存在本地区的独特变异点（２３位Ａｌｇ→Ｇｌｙ，１１９位Ｐｈｅ→Ｌｅｕ，１５３     

重线变异纤维蛋白原体外表达及对凝血功能的影响

目的：采用基因重组技术和细胞培养方法制备纤维蛋白原（Fbg)β链K318E／D 320S变异蛋白，观察此变异蛋白对凝血反应的影响。方法：用Site-directed mutagenesis方法构建变异重组质粒；磷酸钙法将此质粒转染CHO细胞；经细胞培养表达变异蛋白；硫酸铵沉淀法和免疫亲和层析法获取蛋白。进行纤维蛋白多肽A、B释放实验和在3种Ca^2 浓度下的纤维蛋白聚合实验，并评价此变异蛋白的功能。结果：变异与正常Fbg纤维蛋白多肽A、B释放实验无差异。纤维蛋白聚合实验显示，在不同Ca^2 条件下两者间Lag period,Vmax和最终光密度均有显著性差异（P＜0．05）。结论：B β链变异蛋白可能引起Fbg D区结构的变化，使纤维蛋白聚合位点和Ca^2 结合位点不能发挥正常功能，致使纤维蛋白聚合反应速度减慢及纤维蛋白纤维粗细出现异常。     

采用定点基因缺失突变技术在大肠杆菌中分泌鲑鱼生长激素

目的：为获得与天然鲑鱼生长激素一致的基因工程产物,对已构建的鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒ｐＯｓＧＨ１５３进行改造,删除所编码表达产物氨基端多余的９个碱基,方法：采用ＰＡＬＴＥＲ系统进行寡聚核苷酸指导下的基因定点缺失突变。突变质粒ｐＯｓＧＨ１５８经限制性酶切图谱及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析加以证,结果：含有表达质粒ｐＯｓＧＨ１５８的大肠杆菌株经ＩＰＴＧ诱导后提取周质帽白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫     

消脂护肝胶囊治疗脂肪肝伴高脂血症的临床与实验研究

为探讨消脂肪护肝胶囊在脂肪肝治疗过程中的降脂作用及机理，我们于１９９４年４月－１９９６年５月进行了临床观察及实验研究，并与西药东宝肝泰片，不完全随机对照。结果发现：两组ＴＣ、ＴＧ均降低，ＨＤＬ－Ｃ均有升高，治疗组降ＴＣ、ＴＧ均降低，ＨＣＬ－Ｃ均有升高，治疗治疗组降ＴＣ、ＴＧ作用明显优于对照组（ｐ〈０．０１），升高ＨＤＬ－Ｃ作用两组比较无显著性差异（ｐ〉０．０１）。动物实验也表明：大、小剂量治疗组均