肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色结果的比较

目的:探讨冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色对肾活检标本病理诊断的影响.方法:将40例肾活检标本制成并分为冰冻切片组和石蜡切片组,其中石蜡切片组用高压加热抗原修复后行免疫荧光染色,比较两组切片免疫荧光染色结果.结果:石蜡切片组出现较多的假阴性结果和非特异性染色,与冰冻切片组相比,抗体IgG、IgA、C1q、C3的荧光强度均不同,差异有统计学意义.结论:肾活检标本石蜡切片用高压加热抗原修复后行免疫荧光染色可能影响肾活检标本的病理诊断.     

石蜡切片免疫荧光染色在肾脏病理诊断中的应用

冰冻切片免疫荧光染色是肾脏疾病免疫病理学的常用检查方法,在肾脏病理诊断中起着重要作用.有时由于一些原因不能采用冰冻切片免疫荧光染色而影响诊断.我们利用微波加热及酶消化相结合的抗原修复技术,对肾活检组织的石蜡切片进行免疫荧光染色,弥补了此不足,取得了较好的效果.     

肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色方法的再改良

探讨肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色再改良的方法,以提高石蜡切片的诊断准确率。方法选择2010年6-12月在北京大学深圳医院行肾组织活检确诊为肾小球疾病的患者44例,其中IgA肾病20例,狼疮性肾炎12例,膜性肾病12例。对其肾组织除常规冰冻切片直接免疫荧光染色外,对石蜡切片进行高温、高压修复和胃蛋白酶消化处理,再分别行免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C1q)、纤维蛋白(Fib)、HBsAg及HBcAg直接免疫荧光染色,比较石蜡与冰冻切片的直接免疫荧光染色结果。结果冰冻切片:肾小球数1～12个,平均5个;石蜡切片:肾小球数7～30个,平均15个。20例IgA肾病、12例狼疮性肾炎、12例膜性肾病患者的肾组织行冰冻(IgA、IgG、IgM、C3、C1q、Fib、HbcAg和HbsAg)直接免疫荧光染色时在不同荧光强度中所占比例与行石蜡直接免疫荧光染色比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论再改良的肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色是冰冻切片失败时较好的补救手段。其石蜡切片组织结构更清晰,免疫复合物沉积部位较冰冻切片更易判断。     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的 探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段.方法 采用石蜡切片进行脱蜡,修复抗原直接免疫荧光染色,将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较.结果 石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100%,而石蜡切片具有组织结构保存好,免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点.结论 石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段.     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段。方法采用石蜡切片进行脱蜡，修复抗原直接免疫荧光染色，将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较。结果石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100％，而石蜡切片具有组织结构保存好，免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点。结论石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段。     

区分肾淀粉样变类型的病理染色方法比较

目的分析3种特殊染色及免疫染色方法对区分肾淀粉样变类型的准确性、灵敏度和着色强度的影响,以提高临床的诊治
水平。方法选择30例肾淀粉样变患者的病理切片,采用3种酸化刚果红染色和5种抗原修复法,对轻链蛋白（κ、λ）、淀粉样蛋白
A等指标进行冰冻组织及石蜡组织的免疫荧光、免疫组化染色。使用IPP图像分析系统进行半定量分析及荧光着色半定量分
析,观察比较阳性部位着色的准确性、灵敏度和着色强度效果。结果酸化甲醇刚果红染色法优于酸化Bennhold’s刚果红染色
法、酸化Alkaland’s刚果红染色法,IPP半定量分析冰冻组织的免疫荧光、免疫组化优于石蜡组织（P=0.02）。荧光半定量分析着
色强度相差一个+左右;石蜡组织暴露抗原的方法中蛋白酶K消化优于抗原热修复、胰酶或胃酶消化（P=0.01）。结论酸化甲醇
刚果红染色法在肾组织淀粉样变部位的阳性着色准确性、灵敏度、着色强度和重复率均优于Bennhold’s 刚果红染色法、酸化
Alkaland’s刚果红染色法。起到初步分型及辅助验证免疫荧光染色结果的作用;进行冰冻组织轻链蛋白（κ、λ）及淀粉样蛋白A
免疫荧光染色,更有利于肾淀粉样变的准确分型,如果无冰冻组织也可选用蛋白酶K消化石蜡组织免疫荧光染色。
     

不同类型标本的衰老相关—β—半乳糖酸苷酶染色方法

目的：研究衰老相关－β－半乳糖苷酶（ＳＡ－β－Ｇａｌ）组化染色在不同类型组织切片中的应用。方法：比较血涂片、冰冻切片及石蜡切片在不同条件下ＳＡ－β－Ｇａｌ的显色效果。结果与结论：冰冻切片结果良好；石蜡切片经抗原修复后，结果不及未经抗原修复者；血涂片以４０ｇ／Ｌ多聚甲醛固４５ｍｉｎ者效果最佳。ＳＡ－β－Ｇａｌ可用于不同类型的组织标本。     

不同类型标本的衰老相关-β-半乳糖苷酶染色方法

目的：研究衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)组化染色在不同类型组织切片中的应用。方法：比较血涂片、冰冻切片及石蜡切片在不同条件下SA-β-Gal的显色效果。结果与结论：冰冻切片结果良好;石蜡切片经抗原修复后,结果不及未经抗原修复者;血涂片以g／L多聚甲醛固定min者效果最佳。SA-β-Gal可用于不同类型的组织标本。     

165例小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术分析

目的 探讨肾穿刺技术对小儿肾病诊断上的价值.方法 对165例小儿肾病在B超引导下经皮肾穿刺活检,石蜡切片和冰冻切片,石蜡切片分别做HE、PAS、PASM、Masson染色,冰冻切片分别做IgG、IgM、IgA、C3、C1q及Fibrinogen染色.结果 石蜡切片的4种染色对比鲜明,各种病理改变清晰,肾小球数量充足≥10个.冰冻切片免疫荧光染色背景清晰,肾小球数量均≥5个,没有冰晶形成,荧光标记明确,所有病种可分别在病变相应部位找到团块状、线状或颗粒状的黄绿色荧光.结论 通过改进标本的处理方法能提高制片质量,明显提高肾病的诊断率.     

微波加热修复和盐酸水解修复方法对大鼠脑组织免疫组化染色结果的影响

目的比较微波加热修复法和盐酸水解修复法在大鼠脑组织免疫组化中的染色效果。方法通过使用不同的抗原修复方法,比较大鼠凋亡脑组织Bcl-2免疫组化标记的阳性表达率及阳性表达差异。结果①微波加热修复组和盐酸水解修复组Bcl-2阳性表达率分别与不修复组作比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而微波加热修复组和盐酸水解修复组的Bcl-2阳性表达率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;②微波加热修复组和盐酸水解修复组的Bcl-2阳性表达差异比较具有统计学意义（P〈0.05）。结论与盐酸水解修复法相比,微波加热修复法可作为一种相对更有效的方法应用于大鼠脑组织石蜡切片的免疫组化实验。     

16G和18G Cru—cut手动活检针超声定位肾活检的效果与安全性比较

目的：研究不同型号活检针对肾活检成功率及并发症的影响。方法将486例患者分成两组,16G组216例患者采用16 G Cru- cut手动活检针进行彩超引导下肾组织活检;18G组270例患者采用18 G Cru- cut活检针。16G活检针穿刺要求取材2条肾组织,18G活检针穿刺要求取材3条肾组织。结果两组活检总成功率94.44%。16G组活检成功率93.52%;平均穿刺次数（2.57±0.34）次;并发症发生率8.80%（肉眼血尿5.56%,肾包膜下血肿3.24%）。18G组活检成功率95.19%;平均穿刺次数（2.84±0.51）次;并发症发生率5.56%（肉眼血尿4.07%,肾包膜下血肿1.48%）,两组成功率、并发症发生率均无统计学差异（均P＞0.05）,两组穿刺次数有统计学差异（P＜0.01）。16G组光镜下平均肾小球数量（19.33±4.91）个;18G组光镜下平均肾小球数量（25.27±6.23）个;两组比较有统计学差异（P＜0.05）。结论使用18G针进行超声引导下肾活检,虽多取材1次,但与16G针比较不增加并发症。两种活检针取材的有效肾小球数量有差异,但均可保证光镜、电镜及免疫荧光检测的标本质量。     

CD71和IgA在IgA肾病肾小球上共位表达分子研究

1材料和方法1.1分组2005年6月~2006年6月对78例肾活检患者,其中男40例,女38例,年龄20~55岁,分为2组:①IgA肾1.2方法1.2.1病理检查肾活检标本进行石蜡包埋,常规HE、PAS、Masson、PASM染色。冰冻切片直接或间接免疫荧光检查IgA、IgG、IgM、C3、C1q、FRA、HBsAg和HbcAg(均购自丹麦     

伴有与无肾组织乙肝病毒抗原沉积的IgA肾病患者临床和病理对比分析

目的了解伴有与无肾组织乙肝病毒抗原沉积的IgA肾病患者临床和病理特征,探讨乙肝病毒(HBV)感染与IgA肾病的关系。方法选择2008年12月至2011年12月在北京大学深圳医院住院、并行肾组织活检确诊的IgA肾病患者316例,其中伴HBsAg和(或)HBcAg肾小球沉积的患者(研究组)25例(7.9%),无HBsAg和(或)HBcAg肾小球沉积的患者(对照组)291例(92.1%)。2组患者均行肾组织活检,其标本分别常规进行光学显微镜、免疫荧光及电镜检测,以及血清HBV感染标志物、肌酐、胆固醇、白蛋白、C3、IgA和24h尿蛋白水平的检测,同时对2组患者肾脏病变按肾小球活动病变积分、肾小球慢性病变积分及肾小管间质积分进行评定。结果2组患者肾小球活动病变积分及肾小球慢性病变积分比较差异均无统计学意义(均P>0.05),研究组患者肾小管间质积分明显高于对照组(P<0.05)。研究组患者肾组织C1q沉积所占比例略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。研究组患者血清HBV感染标志物阳性率显著高于对照组(P<0.01)。结论乙肝病毒抗原在肾组织中沉积与IgA肾病发病并无直接关系,但有可能加重了肾小管间质的损害。     

不同染色方法检测HBsAg阳性患者肾组织中乙肝抗原的效果比较

目的：探讨不同染色方法检测HBsAg阳性患者肾组织中乙肝抗原的效果。方法收集血清HBsAg阳性的肾穿刺患者77例,分别采用免疫荧光法和改良免疫组化法检测肾组织HBsAg及HBcAg阳性表达情况。结果继发于乙肝病毒感染相关的肾小球肾炎（HBV- GN）中,HBsAg免疫荧光法及改良免疫组化法敏感性为48.1%及100%;HBcAg免疫荧光法及改良免疫组化法敏感性为22.2%及70.4%,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。非乙肝相关性肾小球肾炎（NHBV- GN）中,HBsAg免疫荧光法及改良免疫组化法特异性为98%及96%;HBcAg免疫荧光法及改良免疫组化法特异性为100%及96%,两种方法特异性均较高,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。乙肝抗原血症者肾组织HBsAg及HBcAg改良免疫组化法平均阳性强度明显高于免疫荧光法（P＜0.01）。血清乙肝“大三阳”、DNA复制者HBsAg改良免疫组化法检测阳性强度均明显高于“小三阳”及DNA不复制者（P＜0.05或0.01）。结论改良免疫组化染色法提高了乙肝抗原血症者肾组织乙肝抗原的检出率及肾小球疾病尤其是HBV- GN诊断的准确性,同时HBsAg阳性强度还可预测乙肝感染严重程度。     

石蜡切片免疫荧光法在肾病穿刺组织中的应用

目的：探讨石蜡切片免疫荧光法检测肾病穿刺组织中免疫球蛋白等指标的最佳实验条件。方法：收集北京大学基础医学院病理学系的肾病穿刺组织标本45例,包括IgA肾病20例、膜性肾病15例、膜型乙肝病毒相关性肾炎10例,将组织标本用10%（体积分数）中性甲醛溶液固定、石蜡包埋、组织切片,在不同的抗原修复条件和抗体结合时间下,分别标记IgG、IgA、HBsAg、HBcAg,观察染色结果,并与其新鲜组织的免疫荧光染色结果相比较,评判石蜡切片免疫荧光法的应用价值。结果：热诱导抗原修复法修复后一步法和二步法染色均为阴性;蛋白水解酶消化法中胰蛋白酶优于胃蛋白酶,并以胰蛋白酶消化30 min、IgG和IgA 37 ℃温箱孵育90 min、HBsAg和HBcAg二抗37 ℃温箱孵育150 min染色结果最佳,与新鲜组织标本染色强度接近或略弱一些,阳性表达的方式也与后者相同,符合率100%。结论：经胰蛋白酶消化的石蜡切片免疫荧光法能够较好地应用于肾病穿刺组织诊断。     

Technological improvement on the prevention of dento-periodontal tissue section from separating from slices

目的 探讨一种可有效防止牙-牙周组织切片脱片的方法.方法 改进组采用APES涂胶玻片,在抗原修复前在组织切片上覆盖同等大小纱布和空载玻片,回形针固定.对照组使用普通玻片,烤片过夜,常规脱蜡水化.比较改进组和对照组各40张切片在煮沸法、酶抗原修复后脱片率,并用PCNA检验其染色效果.结果 改进组脱片率较对照组明显降低(P＜0.01).煮沸法抗原修复后PCNA染色有核染阳性细胞散在存在于组织中,背景清晰,效果满意.胰酶修复法两组均未出现阳性表达.结论 该改进的方法能有效防止牙-牙周组织脱片并不影响染色效果,值得推广应用.     

正常人头皮毛囊角蛋白的免疫组化研究

目的 了解毛发角蛋白家族在正常人头皮毛囊中的分布情况。方法 采用免疫组化染色方法对毛发角蛋白家族在正常人头皮毛囊切片上进行检测,同时比较了冰冻切片与石蜡切片（含抗原热修复）上的检测差异。结果 ＲＣＫ１０２（Ｋ５、Ｋ８）在皮脂腺、汗腺、毛干、内外根鞘中阳性,ＬＰＩＫ（Ｋ７）在皮脂腺、汗腺、内根鞘中阳性。ＲＫＳＥ６０（Ｋ１０）在汗腺表达,ＲＣＫ１０７（Ｋ１４）在基底层阳性。冰冻切片及石蜡切片抗原热修复     

两种切片法对脊髓Ⅱ板层BDNF免疫组化反应的影响

目的：为比较不同组织切片方法对免疫组织化学结果的影响。方法：用成年SD大鼠L5脊髓分别制成冰冻（20μm）和石蜡（5μm）切片，用兔抗BDNF多克隆抗体作ABC免疫组化染色。结果：冰冻切片组背角Ⅱ板层除有大量BDNF阳性神经膨体外，尚可见一些阳性神经元，石蜡切片组则仅有大量阳性神经膨体，而几乎未见阳性神经元。结论：不同制片法对免疫组织化学结果有影响，即冰冻切片可能较石蜡切片具有更高的免疫反应敏感性。本文中石蜡切片较低的BDNF免疫活性可能与其制作过程中有机溶剂（酒精、二甲苯）的使用和/或包埋过程中加热处理所致的BDNF抗原丢失有关。     

探讨IgA肾病牛津分型与肾功能及血尿酸之间的关系

目的：研究血清尿酸与IgA肾病牛津分型之间的关系。方法经肾活检确诊的原发性IgA肾病患者49例,以氧化酶法测定血清尿酸水平,并将患者分为高尿酸组和非高尿酸组。检测血浆白蛋白、尿蛋白量（24小时）、尿素氮（ BUN）、肌酐（ Scr）等,并行肾组织病理检测。免疫荧光法检测 IgG、IgM、IgA、C3、Clq、纤维蛋白相关抗原;石蜡切片采用HE、PAS、PASM、Masson染色。结果本组结果显示在血尿酸正常及高尿酸组,三种病理分型（M、E、S）中各分级差异均无显著性（P〉0.05）。在高尿酸血症组中小管萎缩或间质纤维化发生率显著高于正常尿酸组,差异有显著性（P〈0.05）。结论 IgA牛津分型中公认的预示预后不良的病理指标包括系膜细胞增多、毛细血管内细胞增多、节段肾小球硬化,在随访分析中未提示其对预后的危险性,IgA肾病牛津分型设计科学,为这一领域的研究奠定了基础和发展方向。     

一种新型石蜡切片脱蜡抗原修复液在免疫组化中的应用

目的 将新型的石蜡切片脱蜡抗原修复液对免疫组化染色结果的影响.方法 用适量的20倍稀释的脱蜡抗原修复液对乳腺癌组织石蜡切片标本E R、P R、CerbB-2表达进行检测.结果 E R、P R、CerbB-2阳性定位准确.结论 使用新型的石蜡切片脱蜡抗原修复液替代传统的免疫组化操作,将组织切片脱蜡和抗原修复一次性完成.且操作简便,避免二甲苯对人体所造成的伤害,对染色结果能获得满意的效果.