Asp,NigerNo.3单宁酶纯化及性质的研究

Ａｓｐ．ＮｉｇｅｒＮｏ．３单宁酶通过超滤、ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ离子交换层析,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０柱层析以及Ｓｅｐｈａｒｏｓ－６Ｂ柱层析四步纯化后,经过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定显现－条蛋白质带,酶的总活力回收率达到１１％,纯化倍数为１１３．５;     

黑曲霉β-D甘露聚糖酶的纯化及基本性质

设计了利用硫酸铵分级沉淀，凝胶过滤层析和羟基磷灰石吸附层析相结合及二次羟基磷灰石吸附层析二种分离方案，使一种黑曲霉β－Ｄ甘露聚糖酶得到纯化，纯化酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示基本为单一蛋白带。凝胶过滤法测的全酶相对分子质量为４９０００，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得相对分子质量为５１０００．聚丙烯酰胺等电聚焦测得此纯化酶等电点为３．８．     

马尾松磨木浆丙酮抽出物的分离及分析

利用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ离子交换色谱和气相色谱－质谱联用技术，对马尾松磨木浆丙酮抽出物的化学成分进行了分离及分析。ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ高子交换色谱可以把丙酮抽出物分离成中性组分、弱酸性组分和强酸性组分，中性组分皂化后可进一步分离成皂化物和不皂化物。利用气相色谱－质谱联用技术，对马尾松磨木浆丙酮抽出物中的弱酸性组分、皂化物和不皂化物的化学成分进行了分析，并分别检测出了一系列化合物。     

螺旋藻多糖提取新工艺的研究

提取螺旋藻多糖的传统工艺存在着流程长,操作复杂,有机溶剂消耗大等问题。采用三氯乙酸（ＴＣＡ）法代替Ｓｅｖａｇ法去除蛋白质,使改进后的提取工艺中蛋白质去除率增加,多糖损失率降低,流程缩短。通过用ＤＥＡＥ－Ｓｐｅｈａｒｏｓｅ和Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ５０柱的分离纯化得到２个多糖组分。经测定,其相对分子质量分别为Ｍｒ１＝１２６００,Ｍｒ２＝１６６００。组分１的单糖组成：Ｄ－葡萄糖、Ｄ－甘露糖、Ｄ－半乳糖和葡萄糖醛酸;组分２的单糖组成：Ｄ－葡萄糖、Ｄ－木糖、Ｌ－鼠李糖和葡萄糖醛酸。     

文摘

文摘以牛奶为基础的酸性食用凝胶的生产方法（ＢＵ－ＤＯＬＦＳＥＮ，Ｇ；ＮＩＥＣＳＥＮ，Ｐ．Ｍ）ＰＣＴＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＰａｔｅｎｔＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ（１９９４）ＷＯ９４／２１１２９ＡＩ，７ｐｐ［英文］ＤＳＡ．Ｐ１０７（１９９５）８０８文章报...     

烟草内切多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白分离纯化研究

首次报道烤烟中存在ＰＧＩＰ，并以烤烟苗为材料通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和分子筛凝胶过滤等步骤分离得到了ＰＧＩＰ，经高ｐＨＤｉｓｃ－ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－Ｄｉｓｃ－ＰＡＧＥ分析为电泳纯，紫外吸收为典型的蛋白质吸收光谱。烤烟ＰＧＩＰ是一种糖蛋白，含糖量为６．０３％，等电点为６．４和６．１。     

稻米中普鲁兰酶的纯化与性质的研究

稻米的普鲁兰酶（ＰｕｌｌｕｌａｎａｓｅＥ．Ｃ．３．２．１．４１）用ＤＥＡＥ－纤维素吸附，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤，聚丙烯酰胺盘状凝胶电泳纯化，得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的纯酶。纯酶作用的最适温度为５０℃，最适ｐＨ为５．５。以普鲁兰（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）为底物酶的米氏常数Ｋｍ为０．０１２５％，以支链淀粉为底物，酶的米氏常数Ｋｍ为２．５％，用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶层析法测得酶的分子量为７００００。     

马尾松木片丙酮抽出物化学组成的分离及分析

利用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ离子交换色谱对马尾松木片丙酮抽出物分离成弱酸性组份、中性组份和强酸性组份。中性组份皂化后进一步分离成皂化物和不皂化物。利用ＧＣ－ＭＳ技术对其中的皂化物和弱酸性组份进行了分析，并检测出了一系列化合物。     

马尾松木片丙酮抽出物化学组成的分离及分析

利用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ离子交换色谱对马尾松木片丙酮抽出物分离成弱酸性组份，中性组份和弱酸性组份，中性组份皂化后进一步分离成皂化物和不皂化物，利用ＧＣ－ＭＳ技术对其中的皂化物和弱酸性组份进行了分析，并检测出了一系列化合物。     

FTB单克隆抗体的研制与特性鉴定

为建立测定ＦＴＢ的ＩＣ－ＥＬＩＳＡ方法，用复合抗原ＦＴＢＳ－ＢＳＡ和ＦＴＢＳ－ＨＳＡ作为免疫原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫小鼠脾细胞与鼠ＳＰ２／Ｏ－Ａｇ１４骨髓瘤细胞融合，经反复筛选，获得２株稳定分泌抗ＦＴＢ抗体的单克隆杂交瘤细胞株。免疫球蛋白亚型鉴定，１株为ＩｇＭ，１株为ＩｇＧ１。两株杂交瘤腹水的ＥＬＩＳＡ效价分别为１×１０－６和１×１０－８，用ＰＥＧ沉淀法和辛酸－饱和硫酸铵法对抗体腹水进行了纯化，并分别测定了２种单抗与ＦＴＢＳ－ＩｇＧ的亲和力常数以及与其它１１种真菌毒素的相对交叉反应，建立了测定ＦＴＢ的ＩＣ－ＥＬＩＳＡ法。     

顶青霉木聚糖酶的纯化与性质

从顶青霉(Pencillium corylophilum)P-3-31培养液中分离到3种木聚糖酶组分,分别称为PartA、PartB和PartC.PartB进一步纯化,经SDS-PAGE鉴定为单带,相对分子质量为24200;PartC进一步纯化,经SDS-PAGE鉴定也是单带,相对分子质量为48300.PartA和PartB的最适反应条件为pH4.0,45℃;PartC的最适反应条件为pH5.5,55℃.PartA和PartB对木聚糖以外的底物不能水解;PartC具有水解CMC的交叉活性和β-木糖苷酶活性,但不能将木二糖水解成木糖.3个纯化酶组分和粗酶对不同来源的木聚糖底物均表现出不同的活性.对于粗酶,若桦木木聚糖为底物的相对酶活为100%,则玉米芯木聚糖为底物的相对酶活为143%,蔗渣木聚糖为底物的相对酶活为124%.     

沙棘果水溶性多糖的分离纯化、组分分析及抗氧化活性的研究

用热水提取沙棘果多糖，乙醇沉淀，并用正交实验确定最佳条件，Sevage法去蛋白，酸性乙醇分级沉淀，分出A、B、C及D四个组分，其中C用DEAE柱层析进一步纯化出C1和C2两个级分，Sephadex G-75及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明C1为单一组分，C2为两种多糖混合组分，经薄层层析分析，C1中含葡萄糖。C2的主要级分中含木糖和一未知组分。抗氧化实验表明沙棘多糖具有抗氧化活性，且抗氧化作用随浓度增加而加大。     

顶青霉木聚糖酶的水解动力学与水解模式

从顶青霉（Penicillium corylophilum）培养液中分离纯化得到的3种木聚糖酶组分(Part A,Part B和Part C),对其水解动力学和水解模式的研究结果表明,3种木聚糖酶的动力学常数（桦木木聚糖为底物）分别为Part A,K     

植物乳杆菌C21胞外多糖的分离纯化及其结构修饰

为研究乳酸菌胞外多糖的结构和性质,采用乙醇沉淀、DEAE- 纤维素离子交换柱层析和 Sepharose CL-6B凝胶过滤层析方法从植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum) C21 SDM 液体培养基中分离纯化得到一种均一组分的胞外多糖,命名为PCPc。采用离子色谱和红外光谱法对其单糖组成和结构进行初步分析,结果表明,PCPc 主要由半乳糖和葡萄糖两种单糖组成,其物质的量比为1:2。并对PCPc 多糖进行化学修饰,获得了其硫酸化和磷酸化衍生物。     

PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF PROTEASES FROM THE VISCERA OF MILKFISH (CHANOS CHANOS)

Proteases in acetone powder prepared from milkfish ( Chanos chanos ) viscera were extracted with deionized water and purified by ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-75 gel filtration, repeated DEAE-Sephadex A-50 and CM-Sepharose CL-6B chromatography. Four fractions with caseinolytic activity, named A, B, C and D, were obtained from CM-Sepharose CL-6B and DEAE-Sephadex A-50 chromatography. The four proteases were purified to electrophoretic homogeneity. Substrate specificity studies indicated that proteases A and B were carboxypeptidase A-like and chymotrypsin-like enzymes, respectively; C and D were trypsin-like enzymes .

ABSTRACT

The optimal temperatures of proteases A, B, C and D for hydrolysis of casein were found to be 60, 60, 55 and 60°C, respectively. The optimal pH of protease A for hydrolysis of hippuryl-L-phenylalanine was 9.0, B for hydrolysis of acetyl-L-tyrosine ethyl ester was 8.0, C and D for hydrolysis of tosyl-L-arginine methyl ester was 8.0. The temperatures which inactivated 50% of enzymes in 5 min were 20°C for protease B; 51°C for protease C; 56°C for protease A; and 61°C for protease D. The molecular weights of proteases A, B, C, and D were 14,800, 16,800, 24,800 and 22,000 daltons, respectively.     

余甘子果实提取物活性成分分离及结构鉴定

以余甘子果实为原料提取其有效成分,经溶剂萃取及柱层析进行初步分离纯化后,得到A、B、C、D、E五个组分,其中组分C、D显现出较高的抑菌性;组分C、D经硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析进一步纯化后,得到五个单体化合物。对这五个单体化合物作抑菌活性实验,发现其中三个具有抑菌性,采用NMR、MS等分析方法对其结构进行鉴定,结果表明,这三个组分分别是：没食子酸(gallic acid)、槲皮素(quercetin)和齐墩果酸(oleanolic)。     

燕麦中的黄酮提取与结构鉴定

通过响应面分析法确定了以燕麦为原料提取黄酮的最佳工艺:70%乙醇、温度55℃、料液比1∶16、提取时间90min,提取率达3.091%。将燕麦黄酮经AB-8大孔树脂、聚酰胺和ODS反相柱层析分离,得到三种黄酮化合物A、B、C,利用核磁共振技术鉴定出A为芦丁;B为莰菲醇-3-O-芸香糖苷;C为莰菲醇-3-O-果糖-α-葡萄糖苷。其中化合物C在禾本科植物中属首次报道。     

大叶麻竹笋多糖分离纯化工艺

以水提醇沉法提取到的大叶麻竹笋粗多糖为原料,对其进行脱蛋白、透析脱色、DEAE-52纤维素柱层析分级、Sephadex-50葡聚糖凝胶柱分级处理,探究大叶麻竹笋多糖的分离纯化工艺。研究结果表明,木瓜蛋白酶结合Sevag法是最佳脱蛋白条件;进行DEAE-52纤维素柱分级,以纯水、0.05 mol/L和0.1 mol/L NaCl溶液洗脱获得了3 种主要的大叶麻竹笋多糖组分BSP1、BSP2、BSP3;再进行Sephadex-50葡聚糖凝胶分级,分别纯化得到了BSP1A、BSP2A、BSP3B 3 种多糖组分,这3 种多糖组分基本不含蛋白质和核酸,且纯度均达到了95.3%以上。     

小球藻糖蛋白的分离纯化与性质测定

小球藻经热水抽提、脱蛋白、乙醇沉淀得粗糖蛋白,粗糖蛋白经Sephadex-75层析得到糖蛋白纯品。糖蛋白纯品经Sephadex-200层析证明为单一物质。紫外可见光谱只出现280nm和195nm的单峰。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示糖蛋白分子量为63.7kDa。气相色谱分析表明该糖蛋白单糖组成主要是葡萄糖、半乳糖、鼠李糖。β-消去反应证明糖和蛋白是O-糖肽键连接的。     

鸡胸软骨多糖组分的分级及自由基清除活性研究

直接用木瓜蛋白酶水解鸡胸软骨,经三氯乙酸除蛋白质、乙醇沉淀、干燥得多糖粗品,采用DEAESepharoseFast Flow 离子交换柱色谱和Sepharose 6B Fast Flow 分离纯化粗多糖,并进行光谱学分析和自由基清除活性研究。结果显示：乙醇沉淀多糖的自由基清除活性显著高于初步透析后的粗多糖,纯化后的硫酸软素的活性最小。粗多糖经DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换柱层析和Sepharose 6B Fast Flow 凝胶柱层析后,得到硫酸软骨素和其他5 种非糖胺聚糖类多糖。5 种多糖的自由基清除活性均显著大于硫酸软骨素。