螺内酯对糖尿病大鼠肾小球保护作用的机制探讨

目的 观察螺内酯对糖尿病大鼠肾小球的保护作用并探讨其机制。 方法 将SD大鼠随机分为健康对照组、病理组、螺内酯治疗组。治疗30 d后处死，观察肾小球病理形态变化；RT-PCR法观察肾脏皮质纤溶酶原激活剂抑制物1(PAI-1) 和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的变化； Western印迹法观察肾脏皮质PAI-1的表达；免疫组化方法观察肾脏皮质TGF-β1、纤连蛋白(FN)变化及检测肾皮质丙二醛(MDA) 含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 、总抗氧化能力(T-AOC)活性。 结果 与病理组比，螺内酯治疗后可下调肾皮质TGF-β1、PAI-1 mRNA与蛋白表达（P均< 0.05）；降低肾皮质MDA水平[（0.95±0.20）比（1.23±0.31） nmol/mg，P < 0.05]；增强SOD、GSH-Px、T-AOC活性[分别为（550.19±20.06）比（509.53±33.25） U/mg，（21.67±2.70）比（18.91±2.30） U/mg，（1.15±0.21）比（0.86±0.26） U/mg，P均< 0.05]；减少FN在肾小球的沉积(P < 0.01)；改善肾小球的病理状况。 结论 螺内酯可能通过下调糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、PAI-1表达，降低肾皮质氧化应激水平，起到保护糖尿病大鼠肾脏，延缓肾小球硬化的作用。     

大剂量螺内酯对自发性高血压大鼠肾脏纤维化的影响

目的 观察大剂量螺内酯对自发性高血压大鼠（SHR）肾脏纤维化的影响。 方法 8周龄的雄性SHR 24只随机分为低剂量和大剂量螺内酯干预组[分别为20和100 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1螺内酯灌胃]和高血压对照组，同时设同源正常对照组京都大鼠（WKY）8只。干预8周，检测收缩压、尿蛋白、血白蛋白、钾、钠、Scr和肾组织及血浆醛固酮水平。肾组织切片分别行HE和Masson染色，以评价肾小球损伤及肾小球内胶原沉积情况。免疫组化SABC法检测肾组织TGF-β1和醛固酮受体蛋白表达。RT-PCR检测肾组织TGF-β1和醛固酮受体mRNA水平。 结果 与高血压组大鼠相比，低剂量螺内酯干预后，尿蛋白减少（P < 0.05），血白蛋白升高（P < 0.05），血浆和肾组织醛固酮水平降低，但差异无统计学意义；大剂量螺内酯干预后，血压没有显著改变，尿蛋白显著升高[（27.3±4.5）比（24.5±3.2） mg/d， P < 0.05]，血白蛋白显著减少[（20.2±4.2）比（22.7±3.5） g/L, P < 0.05]，血浆和肾组织醛固酮水平显著升高[肾组织（28.3±1.5）比（22.2±0.6） ng/g， P < 0.05]。与高血压组比较，低剂量螺内酯干预后，蛋白管型增多、管周炎性细胞浸润均减少（P < 0.05）；大剂量螺内酯干预后，蛋白管型、小管扩张加重，管周炎性细胞浸润明显增多（P < 0.05），肾小球内胶原形成亦明显增多（P < 0.05）。与高血压组大鼠比较，低剂量螺内酯干预后，肾组织醛固酮受体mRNA和蛋白表达均无显著改变，TGF-β1 mRNA和蛋白的表达显著减少（P < 0.05）；大剂量螺内酯干预后，肾组织醛固酮受体及TGF-β1 mRNA和蛋白的表达均显著升高(P < 0.05)。 结论 大剂量螺内酯可以加重高血压肾脏纤维化，可能是通过上调醛固酮及其受体表达实现的。     

缬沙坦与螺内酯联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:探讨缬沙坦与螺内酯联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响。方法:取6周龄SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、缬沙坦组、螺内酯组及缬沙坦+螺内酯联合治疗组,每组10只。采用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型。正常组及模型组给予生理盐水10 ml·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,治疗组均给予缬沙坦10 mg·kg~(-1)·d~(-1)、螺内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃、缬沙坦10 mg·kg~(-1)·d~(-1)+螺内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,各组大鼠均于术后2周后处死。肾组织行HE染色及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察梗阻肾组织TGF-β1mRNA、BMP-7 mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组的TGF-β1mRNA表达增多(P0.05),BMP-7 mRNA表达则显著降低,三组治疗组TGF-β1mRNA表达显著低于模型组(P值均0.05),而BMP-7mRNA表达则显著增加。联合治疗组与缬沙坦、螺内酯组的差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:与单用缬沙坦、螺内酯相比,联合治疗能减轻UUO大鼠肾间质纤维化。     

缬沙坦和螺内酯对高血压大鼠心肌生长因子和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

本研究旨在观察盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯对自发性高血压大鼠 (SHR)心肌中生长因子和Ⅰ型胶原的影响 ,探讨螺内酯改善心肌重塑和心力衰竭患者预后的作用机制。一、材料和方法1.实验动物及分组 :选用 6周龄雄性SHR18只 ,体重 ( 82 .67± 11.3 7) g ,随机分为 3组 ,每组各 6只 ,分别设为SHR阳性对照组、缬沙坦治疗组、螺内酯治疗组 ,6只WKY大鼠作为正常对照组。2 .药物及给药方法 :两治疗组分别给予缬沙坦 (诺华公司 ) 3 0mg·kg-1·d-1、螺内酯 (江苏盐城制药厂 ) 2 0mg·kg-1·d-1溶于饮水灌胃 ,每天 1次 ,连续治疗 13周 ;两对照组不…     

PCI-neo-肝细胞生长因子对大鼠肾小球系膜细胞增生及转化生长因子β1表达的影响

肾小球系膜细胞(GMC)的过度增生是导致肾小球硬化及肾间质纤维化的重要机制之一[1].肝细胞生长因子(HGF)是一种多效性的细胞因子,其可通过加速细胞外基质降解,阻断小管上皮细胞转分化等实现对肾脏的保护[2-4].目前HGF对正常及增生的GMC是否有抑制作用尚不明确.本研究采用可在体内持续平稳表达的PCI-neo-HGF质粒进行研究[5],主要探讨HGF是否能抑制正常及脂多糖(LPS)刺激后的大鼠GMC的增生,以及这种作用是否与抑制转化生长因子β1(TGF-β1)的表达相关.     

Impact of PCI-neo-HGF on the expression of TGF-β1 and proliferation of glomerular mesangial cells in rats

肾小球系膜细胞(GMC)的过度增生是导致肾小球硬化及肾间质纤维化的重要机制之一[1].肝细胞生长因子(HGF)是一种多效性的细胞因子,其可通过加速细胞外基质降解,阻断小管上皮细胞转分化等实现对肾脏的保护[2-4].目前HGF对正常及增生的GMC是否有抑制作用尚不明确.本研究采用可在体内持续平稳表达的PCI-neo-HGF质粒进行研究[5],主要探讨HGF是否能抑制正常及脂多糖(LPS)刺激后的大鼠GMC的增生,以及这种作用是否与抑制转化生长因子β1(TGF-β1)的表达相关.     

Impact of PCI-neo-HGF on the expression of TGF-β1 and proliferation of glomerular mesangial cells in rats

肾小球系膜细胞(GMC)的过度增生是导致肾小球硬化及肾间质纤维化的重要机制之一[1].肝细胞生长因子(HGF)是一种多效性的细胞因子,其可通过加速细胞外基质降解,阻断小管上皮细胞转分化等实现对肾脏的保护[2-4].目前HGF对正常及增生的GMC是否有抑制作用尚不明确.本研究采用可在体内持续平稳表达的PCI-neo-HGF质粒进行研究[5],主要探讨HGF是否能抑制正常及脂多糖(LPS)刺激后的大鼠GMC的增生,以及这种作用是否与抑制转化生长因子β1(TGF-β1)的表达相关.     

结缔组织生长因子与糖尿病肾病

糖尿病肾病(DN)是糖尿病最主要的慢性并发症之一,在西方国家已成为终末期肾病(ESRD)的首要病因[1].其发病机制迄今未明.一般认为与高血糖及其引起的代谢紊乱、肾小球血流动力学改变等因素有关.近年来,某些生长因子在DN发病机制中的作用越来越受到重视.其中,结缔组织生长因子(CTGF)作为转化生长因子β(TGF-β)促纤维化活性的下游效应因子而备受关注.     

螺内酯对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用

目的观察螺内酯对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾皮质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)介导的肾间质纤维化的影响。方法UUO大鼠给予螺内酯20mg·kg-1·d-1灌胃,用免疫组化及RT-PCR的方法检测术后7d、14d、21d的TIMP-1表达量并观察肾脏病理改变。结果与假手术组相比,UUO组及螺内酯组的TIMP-1mRNA和TIMP-1蛋白表达水平均明显增高(P<0.01),且UUO组显著高于螺内酯组(P<0.01)。结论螺内酯可通过下调TIMP-1减轻UUO术后肾组织间质纤维化。     

Impact of all-trans retinoic acid on COX-2 expression and Smad pathway in rat glomerular mesangial cells induced by TGF-β1

转化生长因子β1(TGF-β1)可能是致组织纤维化的核心因子,其经典信号通路为Smad通路.环氧化酶2(COX-2)是一种膜结合蛋白,在炎性反应中起重要作用.局部浸润的炎性细胞、肾小球的巨噬细胞、系膜细胞都是COX-2的来源[1].维甲酸能抑制肾脏纤维化,保护肾功能[2],其主要包括全反式维甲酸(atRA),92顺式维甲酸和132顺式维甲酸.本研究探讨atRA对肾小球系膜细胞TGF-β-Smad信号通路中COX-2表达的影响.     

全反式维甲酸对转化生长因子β1诱导肾小球系膜细胞环氧化酶2表达及Smad信号通路的影响

转化生长因子β1(TGF-β1)可能是致组织纤维化的核心因子,其经典信号通路为Smad通路.环氧化酶2(COX-2)是一种膜结合蛋白,在炎性反应中起重要作用.局部浸润的炎性细胞、肾小球的巨噬细胞、系膜细胞都是COX-2的来源[1].维甲酸能抑制肾脏纤维化,保护肾功能[2],其主要包括全反式维甲酸(atRA),92顺式维甲酸和132顺式维甲酸.本研究探讨atRA对肾小球系膜细胞TGF-β-Smad信号通路中COX-2表达的影响.     

Impact of all-trans retinoic acid on COX-2 expression and Smad pathway in rat glomerular mesangial cells induced by TGF-β1

转化生长因子β1(TGF-β1)可能是致组织纤维化的核心因子,其经典信号通路为Smad通路.环氧化酶2(COX-2)是一种膜结合蛋白,在炎性反应中起重要作用.局部浸润的炎性细胞、肾小球的巨噬细胞、系膜细胞都是COX-2的来源[1].维甲酸能抑制肾脏纤维化,保护肾功能[2],其主要包括全反式维甲酸(atRA),92顺式维甲酸和132顺式维甲酸.本研究探讨atRA对肾小球系膜细胞TGF-β-Smad信号通路中COX-2表达的影响.     

Kuppel因子4调节人乳腺癌细胞对小白菊内酯敏感性的影响

小白菊内酯(PN)是中药野生甘菊(艾菊属银胶菊)的主要提取成分,它是倍半萜烯内酯的主要成分[1].近年来研究结果显示,PN在多种肿瘤中发挥抗癌作用[2-4].Kuppel因子4(KLF4)锌指转录因子在正常组织的细胞增殖、凋亡、组织内稳态和生长抑制等多种过程中起着重要的作用[5].Akaogi等[6]研究结果显示KLF4抑制乳腺癌的生长,在乳腺癌细胞中以抑癌基因发挥作用.我们以人乳腺癌细胞为研究对象,探讨KLF4基因对PN抗乳腺癌细胞敏感性的影响及其机制.     

醛固酮抑制Akt活性诱导大鼠足细胞凋亡

目的 探讨醛固酮(ALD)能否诱导培养大鼠足细胞凋亡及Akt信号通路是否参与ALD诱导的足细胞凋亡。方法 体外培养并鉴定大鼠足细胞。无血清同步化处理24 h，分别给予终浓度为0(对照组)、10-9~10-5 mol/L ALD，伴或不伴螺内酯(10-7 mol/L)共孵育。流式细胞仪检测凋亡指数，Hoechst-33342染色检测足细胞凋亡。多聚酶链反应(RT-PCR)检测足细胞盐皮质激素受体(MR)和11β-羟类固醇脱氢酶2 (11β-HSD2) mRNA表达。Akt活性检测试剂盒检测Akt活性表达。结果 ALD以时间和剂量依赖方式诱导足细胞凋亡。螺内酯可明显抑制ALD诱导的足细胞凋亡[ALD+螺内酯组(5.61%±0.72%)比ALD组(15.10%±1.46%)，P < 0.05]。RT-PCR结果证实足细胞表达MR和11β-HSD2 mRNA。螺内酯可部分阻断ALD对Akt活性的抑制作用。ALD诱导的足细胞凋亡率与Akt活性呈明显负相关(r=-0.77， P < 0.05)。结论 ALD可诱导大鼠足细胞凋亡，Akt活性下降可能参与ALD诱导的足细胞凋亡。     

来氟米特对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

近年来随着对糖尿病肾病(DN)发病机制的深入研究,已确立了炎性反应在其进展中的作用.来氟米特(leflunomide,LEF)是一种新型免疫抑制剂,具有抗炎、抗增殖作用,可用于伴大量蛋白尿的DN的治疗[1].本研究观察来氟米特对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达、肾脏病理改变及尿蛋白排泄的影响,探讨其保护作用.     

补肾方对慢性肾小球肾炎患者尿中转化生长因子β1的影响

转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一种具有多种生物学活性的细胞因子,在调节细胞外基质代谢、参与炎症反应和间质纤维化等方面起着重要作用.近年研究表明,TGF-β1的过度表达是构成肾组织纤维化的病理学基础,对肾脏纤维化的发生发展起着重要作用[1].本研究主要观察补肾方对慢性肾小球肾炎患者尿中TGF-β1水平的影响,并进行临床随机对照研究,现报道如下.     

Gremlin对高糖环境下系膜细胞转化生长因子β1及胞外调节蛋白激酶表达的影响

Gremlin是骨形态发生蛋白(BMP)的一种内源性拮抗剂,对胚胎发育、生长和细胞分化起重要的调节作用[1].近年来的研究发现Gremlin与糖尿病肾病(DN)的发生发展密切相关,但我们对Gremlin在糖尿病肾损害过程中所扮演的角色尚知之甚少.TGF-β1及细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)在DN的发病中起重要作用,TGF-β1及其下游结缔组织生长因子(CTGF)可导致肾组织纤维化[2-3].我们的前期研究发现体外高糖环境下小鼠系膜细胞ERK1/2通路可被激活[4].本研究通过转染Gremlin基因,观察其对高糖环境下小鼠肾小球系膜细胞(MMCs) TGF-β1、CTGF及磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)表达的影响,为进一步揭示DN发病的分子学机制及寻找早期防治方法提供理论依据.     

前列腺素El脂微球载体制剂对实验性肾炎鼠肾保护作用研究

前列腺素E1(PGE1)作为一种扩血管药物,对肾脏具有一定的保护作用。最近,国外学者研究发现PGE1肾保护作用机制并不局限在改善肾血流量、抑制血小板聚集等方面,更重要的是它可抑制肾小球固有细胞增生及细胞外基质(ECM)积聚。我们通过建立大鼠系膜增殖性肾炎(MsPGN)模型,应用免疫组织化学(免疫组化)方法观察了改良型PGE1-PGE1脂微球载体制剂(Lipo PGE1)对肾小球细胞增生、ECM沉积及转化生长因子β1(TGF-β1)影响,旨在初步探讨Lipo PGE1的抑制增殖作用及其可能机制。     

肝细胞生长因子在左肾动脉狭窄大鼠心血管中的表达及干预研究

目的　观察左肾动脉狭窄肾性高血压大鼠模型心肌和血管中肝细胞生长因子 (HGF)的表达 ,并观察缬沙坦和螺内酯对其表达的影响。方法　选用 6周龄SD大鼠 2 4只 ,制备左肾动脉狭窄肾性高血压模型 ,分为 4组 ,分别为手术组、假手术组、缬沙坦组、螺内酯组。治疗组分别用缬沙坦 3 0mg/kg·d-1、螺内酯 2 0mg/kg·d-1溶于饮水灌胃 ,1次 /d ,连续治疗 17周。用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测大鼠心肌和血管HGFmRNA水平。结果　 17周后 ,缬沙坦组和螺内酯组的心肌HGFmRNA/ β actinmRNA(1.17± 0 .0 8/ 0 .85± 0 .0 8)高于手术组 (0 .5 7± 0 .0 7) (P <0 .0 1) ,但低于假手术组 (1.3 5± 0 .0 9) (P均 <0 .0 1)。两治疗组肠系膜动脉HGFmRNA水平高于手术组 (P <0 .0 1) ,但低于假手术组 (P均 <0 .0 1)。结论　缬沙坦和螺内酯均能使左肾动脉狭窄肾性高血压大鼠心肌和血管中的HGF升高 ,同时伴有心肌和血管重塑的改善 ,说明HGF在左肾动脉狭窄肾性高血压大鼠的靶器官保护中起着重要作用