广西金银花再生体系的建立

以广西金银花的带腋芽茎段为外植体,MS、1/2MS为基本培养基,加入适量的6-BA、NAA,按照不同的组合配制出诱导培养基、分化培养基、生根培养基,构建高效的金银花再生体系。结果表明,诱导腋芽较理想的培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1及MS+6-BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,最适的继代培养基为Ms培养基+0.5mg·L-16-BA+0.01 mg·L-1NAA,最适生根培养基为1/2Ms培养基+0.5 mg·L-1NAA,为广西的金银花规模化种植提供了技术支撑。     

白蓝无性繁殖试验初探

以白蓝带腋芽茎段为外植体,在MS KT 2 mg·L-1 NAA 0.2 mg·L-1的培养基上试管培养,结果显示,茎段可形成愈伤组织,愈伤组织诱导率最高可达80.95%,KT诱导的效果优于6-BA.MS KT 0.1mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1培养基上芽分化培养,培养14天,平均增殖倍数为4.66.1/2MS IBA 0.1 mg·L-1培养基上生根,18天后可获得完整植株.     

一品红的组织培养研究

以一品红腋芽、顶芽、茎段、嫩叶为初次诱导外植体,对一品红的组织培养途径进行研究,建立了一品红植株再生体系.结果表明:组织培养的取材部位为腋芽、顶芽和茎段.诱导愈伤组织外植体为茎段,培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+蔗糖30 g/L.诱导丛生芽的外植体为腋芽、顶芽和愈伤组织,培养基配方为腋芽、顶芽:MS+6-BA 0.6mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖30 g/L;愈伤组织:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L.丛生芽继代增殖的培养基配方为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30 g/L.生根培养基配方1/2MS+NAA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L.     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。     

高品质甜叶菊品系“1096”的组培快繁

采用改良DNS等方法筛选出的生长快、糖苷含量高的甜叶菊品系＂1096＂为材料,研究了不同外植体、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明：以茎尖为外植体愈伤组织和不定芽诱导率均最高;其次是带腋芽茎段;再次为叶片。无腋芽茎段和无菌根均能诱导出愈伤组织,但不能诱导成芽。茎尖不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0mg/L;叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0mg/L＋IAA 1.0mg/L;带腋芽茎段不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.5mg/L。不定芽继代增殖培养采用MS＋6-BA 0.5mg/L＋NAA0.05mg/L;在1/4MS＋IBA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋1g/L活性炭的培养基上诱导生根,生根率可达100%,生根苗移栽后成活率达95%。     

杜仲带芽茎段诱导和分化的组培体系优化

以杜仲的幼嫩茎段为试材,采用组织培养的方法,研究了消毒时间、基本培养基、NAA浓度、6-BA浓度、低温处理时间及培养环境对杜仲腋芽诱导及其分化的影响,以期为建立杜仲高效组织培养体系提供依据。结果表明:最佳消毒时间为9 min,污染率与死亡率均较低,分别为10.00%和26.67%;腋芽诱导的基本培养基以MS培养基为最佳,诱导率达91.66%;诱导培养基为MS+0.2 mg·L~(-1) 6-BA+0.03 mg·L~(-1) NAA时,腋芽的诱导率较高,达93.33%,且生长良好;当低温处理时间为24 h时,外植体诱导效果最好,且褐化率最低,为5.00%;与黑暗培养相比,光照培养条件更加有利于杜仲的腋芽诱导和生长;MS+1.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为愈伤分化的最佳培养基,MS+2.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为芽增殖的最佳培养基。     

防风愈伤组织培养研究

以防风为试材,研究不同外植体、激素组合对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。结果表明:茎段是防风组织培养较为合适的外植体。茎段在添加2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0mg/L的MS培养基上愈伤组织诱导率最高可达100%,叶片在添加2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0mg/L的MS培养基上愈伤组织诱导率可达75%;继代后的愈伤组织转到6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的MS分化培养基上进行分化,其分化率达72%。     

‘黄水蜜’桃实生苗茎段再生体系的建立

【目的】建立‘黄水蜜’桃实生苗茎段高效稳定的再生体系。【方法】以‘黄水蜜’桃实生苗茎段为外植体,探讨了不同植物生长调节剂质量浓度组合对不定芽诱导过程中愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,并采用两步生根法研究不同植物生长调节剂种类对不定根诱导的影响。【结果】适合‘黄水蜜’桃实生苗茎段切口处愈伤组织再生的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+Ag NO30.5 mg·L-1,不定芽再生的最佳培养基为MS+6-BA 3.0mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ag NO30.5 mg·L-1,其愈伤组织形成率和不定芽再生率分别为85%和47%;获得的不定芽先后经WPM+ZT 2.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ag NO30.5 mg·L-1和MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA30.5 mg·L-1+Ag NO30.5mg·L-1两步生根法培养后,不定根再生率为50%,平均根数量为5.00。【结论】初步建立了‘黄水蜜’桃实生苗茎段再生体系,为桃遗传转化研究奠定基础。     

油点花的组织培养与快速繁殖

以油点花Ledebouria socialis(Baker)Jessop的叶片、叶柄和假鳞茎为外植体,经表面消毒处理,接种于不同激素配比的MS培养基中,探讨油点花外植体诱导愈伤组织、丛生芽、不定根培养的最适培养基和培养条件,以获得大量种苗,为其人工种植及商业化水平发展提供参考依据。结果表明:不同外植体均能诱导愈伤组织的产生,且叶片外植体最易诱导;适合油点花愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,诱导率为96.3%~98.8%;而MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1适宜于芽诱导培养,诱导率为91.1%;培养基MS+NAA 0.2 mg·L-1适宜生根及壮苗培养,生根率89.5%;练苗移栽,其平均成活率达86.7%以上。     

睡菜的离体培养与植株再生研究

以不带节的睡菜茎段为外植体,研究其离体再生体系.结果表明:将茎段接种到MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L培养基上10 d可以诱导产生愈伤组织,然后转接至MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.2mg/L+KT 0.05 mg/L培养基上15 d可使愈伤组织分化为幼苗;将带节的睡菜茎段接种到MS+IBA 0.1～0.2 mg/L培养基上7d可使其腋芽萌发为幼苗;将幼苗接种到1/2MS+IBA 0.5mg/L培养基上3～5 d可生根,实现植株再生.     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

红千层的离体培养及快速繁殖

 研究了红千层离体快繁的若干影响因素。结果表明: 叶片在MS + 6-BA 115 mg·L ^{- 1}+NAA015 mg·L ^{- 1}中的愈伤组织诱导率43% , 并可直接从愈伤组织表面分化出不定芽, 分化率为69.2%; 腋芽启动培养基为MS + 6-BA 1～1.5 mg·L ^{- 1} + NAA 0.5 mg·L ^{- 1} , 萌动率为77%; 继代和增殖培养基为MS + 6-BA 1 mg·L ^{- 1} +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 平均增殖系数为16.7; 生根壮苗培养基为1 /2MS +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 生根率96.1%; 试管苗生根培养30～35 d移栽, 成活率最高可达90%以上。     

食用仙人掌‘米邦塔’的试管快繁

 对食用仙人掌‘米邦塔’的试管快繁研究结果表明: 初代培养基以MS + 6-BA 0.6 mg·L^-1 +NAA 1.0 mg·L^-1 + 2 ,4-D 0.1 mg·L^-1为最佳处理, 接种60 d 后, 外植体上刺座下的潜伏芽萌发率可达67 %。继代增殖培养适宜培养基为MS + 6-BA 0.1 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1 + 2 ,4-D 0.2 mg·L^-1 或MS + 6-BA 0.1mg·L^-1 + NAA 0.5 mg·L^-1 , 平均每50 d 继代增殖培养1 次, 增殖倍数可达5～6 , 且新生的小子茎生长旺盛。在培养过程中, 虽然部分外植体切口处发生大团绿色至黄绿色小颗粒状愈伤组织, 然而均没有分化不定芽。在生根培养基MS + IAA 0.1 mg·L^-1 或MS + IBA 0.1 mg·L^-1 上, 2～3 cm 高的小子茎培养10 d 左右发根,形成完整植株。当试管苗高达5 cm时移入砂床, 成活率高达99 %, 经约60 d , 试管苗发出第一批掌片。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

中国野生葡萄的离体培养与快速繁殖

 以中国野生葡萄12 个种22 个株系的单芽茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究。结果表明, 除塘尾刺葡萄外所有株系在MS + BA 0.5～1.0 mg·L - 1 + IBA 0.2 mg·L ^{- 1}中均有较好的萌芽效果, 并在1/ 2 MS + IBA 0.1～0.2 mg·L^{- 1}中继代生根良好。少数株系的适宜继代与生根培养基为1/ 2 MS + IBA 0.1～0.2 mg·L ^{- 1} + NAA 0.02 mg·L ^{- 1} 。另外, 株系白河- 35 - 1、华东葡萄(株系名未定) 、留坝- 7、左山- 1、安林- 3、燕山- 1、广西- 1、广西- 2 和泰山- 1 的外植体在1/ 2 MS + IBA 0.2 mg·L^{- 1}中具萌芽和生根的双重作用, 可一次成苗。采用珍珠岩和营养土两步炼苗, 成活率可达90 %以上。     

大白菜、青花菜和叶用芥菜体细胞杂交种形态学与细胞学特性鉴定

 为拓宽十字花科蔬菜育种种质资源,以大白菜（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）、青花菜（B. oleracea L. var. varitalica）和叶用芥菜（B. juncea L. Czern）的子叶、下胚轴为材料,分离、纯化原生质体,采用40% 聚乙二醇（Polyethylene glycol,PEG）融合法进行原生质体融合。融合细胞在附加0.2 mg · L^-1 2,4-D + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 0.1 mg · L^-1 激动素（kinetin）的改良K8p培养基中液体培养,当细胞分裂至8 ~ 10细胞期时,将分裂的细胞包埋于0.15%琼脂糖,然后在添加0.3 mol · L^-1蔗糖和2 mg · L^-1 6-BA + 2 mg · L^-1 玉米素（zeatin）+ 1 mg · L^-1 NAA + 0.5 mg · L^-1 kinetin的Kao培养基中诱导愈伤组织。将培养获得的936个愈伤组织转到3种不定芽诱导培养基MS + 5 mg ? L-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 2 mg · L^-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.5 mg · L^-1 NAA上诱导芽分化,当芽长3 cm左右时,转到1/2 MS + 0.2 mg · L^-1 NAA的生根培养基上诱导生根,共获得了96株再生植株,对其进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。形态学观察显示再生植株表型变化大,包括3个亲本的中间型或两个亲本的中间型;PCR技术鉴定结果显示96株杂种植株中93株为细胞质雄性不育特性;染色体计数显示,再生的植株染色体数变化范围广（2n = 38 ~ 64）,但未发现染色体数总和与3种融合亲本染色体数总数（2n = 74）相一致的个体。基因组原位杂交（Genomic in situ hybridization,GISH）和扩增片段长度多态性（Amplified fragment length polymorphism,AFLP）分析结果表明,再生植株基因组中分别检测出大白菜、青花菜、叶用芥菜的DNA片段,证实了大白菜、青花菜、叶用芥菜种间体细胞杂交种的真实性。     

二倍体马铃薯高效再生体系的建立

 以二倍体马铃薯抗青枯病基因型ED13、CE171和感青枯病基因型ED25的茎段为外植体,在优化植物生长调节剂配比的基础上,对不同基因型的组培再生进行了研究。结果表明：不同基因型具有不同生长调节剂配比要求。固体－液体培养基双层看护培养对于二倍体马铃薯茎段愈伤组织的诱导是有效的,尤以固体培养基中NAA 2.0 mg · L^-1 : 6-BA 2.0 mg · L^-1的配比为佳。对于ED13而言,液体培养基中以2,4-D 2.5 mg · L^-1 : KT 0.5 mg · L^-1的配比为佳,相比之下CE171则以2,4-D 1.5 mg · L^-1 : KT 1.0 mg · L^-1为最好,二者的愈伤诱导率均达100%;对于基因型ED25,只有在NAA 2.0 mg · L^-1 : 6-BA 1.0 mg · L^-1和2,4-D 1.5 mg · L^-1 : KT 1.0 mg · L^-1时才能形成较好的愈伤。ZT在愈伤组织诱导芽分化过程中具有重要作用,单独使用ZT浓度为1.0 mg · L^-1时,ED13和CE171的芽分化率均达95％以上;而ED25则只有在ZT和6-BA配合使用,配比为ZT 0.5 mg · L^-1 : 6-BA 2.5 mg · L^-1时才可获得较高的芽分化率。     

草本威灵仙的组织培养与快速繁殖

 用种子切段作外植体，建立了草本威灵仙的组织培养和再生体系。试验结果表明：草本威灵仙种子切段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg·L^-1 +NAA 0.3 mg·L^-1，诱导率达86.7％；附加6-BA 2 mg·L^-1+NAA 0．2 mg·L ^-1的Ms培养基有利于芽的分化和增殖，培养60 d左右，每个外植体分化形成的再生小植株数达到12～18个；在1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 的培养基中生根效果最好。移植时喷施营养液可以提高幼苗的成活率。