双边栝楼化学成分研究

从双边栝楼果皮中分离出9种化合物,鉴定为棕榈酸、木蜡酸、蟥酸、蒙坦尼酸、蜂蜜酸、L-(-)-α-棕榈酸甘油酯,Δ⁷-豆甾烯醇,Δ⁷-豆甾烯酮-3和Δ⁷-豆甾烯醇-3-β-D-葡萄吡喃糖甙,其中前8个成分系首次从该植物中获得。     

UPLC-MS/MS测定追风透骨丸中马兜铃酸类成分含量

目的 建立超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定追风透骨丸中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ和马兜铃内酰胺Ⅰ的含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；以乙腈-0.1%甲酸水溶液（含5 mmol·L^–1甲酸铵）为流动相梯度洗脱，流速为0.3 mL·min^–1，用电喷雾离子源，在多反应监测模式下采用外标法测定。结果 4个成分在2~250 ng·mL^–1线性关系良好，r均大于0.999，在20 ng·mL^–1添加水平的平均回收率分别为104.2%、75.7%、112.0%、105.4%，RSD为2.8%~6.1%，方法定量限为0.002~0.100 μg·g^–1。7批样品中均未检出马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ，马兜铃酸Ⅰ检出量为0.09~0.41 μg·g^–1，马兜铃内酰胺Ⅰ检出量为0.62~1.30 μg·g^–1。结论 该方法专属性好、灵敏度高、结果准确，可为追风透骨丸中马兜铃酸的质量控制提供参考。     

枇杷不同器官及不同物候4种三萜酸含量的动态变化

为考察4种三萜酸成分在枇杷各器官中分布,揭示不同物候枇杷叶三萜酸动态变化规律,观测枇杷物候,采集花、果实以及不同物候期的叶;采用高效液相色谱法测定熊果酸、齐墩果酸、科罗索酸和山楂酸含量。结果表明,4种三萜酸在所测样品器官中的质量分数高低顺序为落叶(23.2 mg·g^-1)>成熟叶(21.7 mg·g^-1)>嫩叶(17.5 mg·g^-1)>果肉(7.36 mg·g^-1)>花 (6.40 mg·g^-1),种子中未检出这4种三萜酸成分;在枇杷树萌芽、现蕾、开花、结果等不同物候采收的枇杷叶中4种三萜酸总量发生小幅波动,落叶变化范围17.8~26.2 mg·g^-1,成熟叶变化范围在16.5~23.5 mg·g^-1,嫩叶变化范围在14.7~21.5 mg·g^-1。随叶片发育、成熟、衰老,三萜酸含量有所增加;不同物候阶段对枇杷叶干物质积累及4种三萜酸含量产生一定影响。枇杷成熟叶在果实膨大时的干物质和三萜酸积累较多。文章对地域分布广泛的枇杷等植物药在次生代谢产物和采收期等相关研究上具有一定参考作用。     

关木通及其马兜铃总酸对小鼠肾脏毒性的研究

目的:以马兜铃酸A为剂量标准比较了关木通醇提物和关木通马兜铃总酸对小鼠的急性毒性,探讨关木通致毒的剂量关系。方法:小鼠单次灌胃关木通醇提物及其马兜铃总酸后,测定LD₅₀、肝、肾功能及观察了肝、肾组织形态学变化。结果:小鼠给予关木通醇提物的LD₅₀值为4.4g·kg^-1,折合成马兜铃酸A为40mg·kg^-1,与小鼠灌胃给予马兜铃总酸后的LD₅₀值(折合成马兜铃酸A为♂33mg·kg^-1,♀37mg·kg^-1)相近。给予关木通醇提物剂量折合成马兜铃酸A为4.5mg·kg^-1以上时,可引起血尿素氮和肌酐水平增高,同时可见肾脏组织形态学改变;折合成马兜铃酸A25mg·kg^-1以上时可引起AST增高和肝脏组织形态学改变;以上病变程度均与马兜铃酸A的剂量成正比。结论:关木通除了有明显的肾脏毒性外,还有肝脏毒性,致肾毒剂量较致肝毒剂量低,肾脏毒性是关木通致死的主要原因,马兜铃酸是主要的致肾毒成分。关木通的致死和致肾毒作用与马兜铃酸A的剂量成正比例。     

基于颜色-成分关联的余甘子商品等级划分分析

目的 为余甘子商品规格等级划分提供科学依据。方法 收集当前市场流通余甘子共计30批,提取直径、厚度、粒重、表皮颜色L^*,a^*,b^*值为外观指标进行量化测量,采用高效液相色谱法测定没食子酸、柯里拉京、诃黎勒酸、鞣花酸的含量,利用描述统计分析、方差分析、主成分分析确定各鉴别主征重要程度,探索外观指标与内在成分的相关性,制定余甘子商品等级划分标准,运用肝癌HepG2细胞实验验证其科学性。结果 相关性分析结果表明,表皮颜色L^*,a^*,b^*值与柯里拉京、诃黎勒酸、鞣花酸呈极显著负相关（|r|>0.5,P<0.01）,与没食子酸相关性不强（|r|<0.1）,综合考虑各指标的变异系数、主成分分析结果及没食子酸作为《中华人民共和国药典》余甘子质控指标,最终确定表皮颜色L^*,a^*,b^*值、没食子酸含量作为分级指标;根据K-均值聚类分析结果,当同时满足表皮颜色L^*<44,a^*<7,b^*<10,没食子酸含量>1.6%可判定为一等品;当不能同时满足上述条件判定为二等品。肝癌HepG2细胞实验表明一等品半抑制浓度（IC₅₀值）低于二等品。此外,利用表皮颜色L^*,a^*,b^*值制定比色卡,为余甘子商品等级的现场评价提供了可视化工具。结论 该研究初步建立了余甘子商品等级标准,有利于引导余甘子商品市场流通分档议价、优质优价。     

对香豆酸在大鼠体内的药动学研究

 目的 建立反相高效液相色谱法对对香豆酸的药动学进行研究。方法 血浆样品用甲醇沉淀蛋白,采用Diamonsil C₁₈色 谱柱(4．6 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-1％冰醋酸(体积比为21:79),流速1．0 mL·min^-1,检测波长为322nm,内标为橙皮 苷。结果 对香豆酸在0．085～10．6 mg·L^-1(r=0．999 3)时其浓度与对香豆酸和橙皮苷峰面积比呈良好的线性关系,定量限 为0．085 mg·L^-1。大鼠腹腔注射对香豆酸溶液后,对香豆酸的药动学行为符合二室模型,K_a为(0．38±0．09)min^-1,t_1/2(Ka)为 (1．85±0．20)min,t_1/2(α)为(8.9±0.9)min,t_1/2(β)为(34±3)min,k₂₁为(0．045±0．008)min^-1,k₁₀为(0．040±0．009)min^-1,k₁₂为 (0．024±0．003)min^-1,AUC为(130±14)mg·min·L^-1,t_max和ρ_max实测值分别为(6．0±0．8)min和(3．5±0．4)mg·L^-1。结论 该方法灵敏、准确,适合于对香豆酸的药动学研究。     

甘草次酸在大鼠体内药动学的RP-HPLC研究

目的：建立大鼠血浆中甘草次酸浓度的高效液相测定方法，探讨甘草次酸在大鼠体内的药动学过程。方法：大鼠按1.0 mg·kg^-1尾静脉注射甘草次酸后0.08，0.17，0.25，0.33，0.5，0.75，1，2，3，4，6 h眼底采血，乙腈沉淀血浆，HPLC测定血浆中甘草次酸浓度，以DAS软件拟合药动学参数。结果：甘草次酸血药浓度在50～2 000 ng·mL^-1线性良好，r=0.999 7，测得低中高浓度回收率分别为(105.2 ±2.23)%，(102.5±2.95)%，(98.4±2.32)%，日内、日间低中高浓度RSD均小于4%。甘草次酸在大鼠体内药-时曲线符合二室开放模型，主要药动学参数为：t_1/2α=(0.153±0.023) h，t_1/2β=(2.365±0.866) h，C_max =(2.074±0.100) mg·L^-1，CL=(0.715±0.082) L·h^-1·kg^-1，V_d =(2.427±0.872) L·kg^-1，AUC_{0～6 h} =(1.302±0.151) mg·h^-1·L^-1。结论：建立的RP-HPLC适用于体内甘草次酸的含量测定及药代动力学研究，甘草次酸在体内的分布迅速、广泛。     

HPLC同时测定赤芝中4种三萜酸的含量

目的：建立HPLC同时测定赤芝药材中灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D含量的方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液采用梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，检测波长252 nm，柱温35 ℃。结果：灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D的线性范围分别为：5.0～50.0 mg·L^-1(r=0.999 9)，7.2～72 mg·L^-1(r=0.999 9)，11.67～116.7 mg·L^-1(r=0.999 9)和5.32～53.2 mg·L^-1(r=0.999 8)；平均回收率(n=3)分别为98.8%(RSD1.5%)，99.1%(RSD1.9%)，99.5%(RSD1.4%)和98.5%(RSD1.9%)。结论：该方法简便、准确，重复性好，为赤芝药材的质量控制提供了实验依据。     

HPLC同时测定赤芝中4种三萜酸的含量

目的：建立HPLC同时测定赤芝药材中灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D含量的方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液采用梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，检测波长252 nm，柱温35 ℃。结果：灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D的线性范围分别为：5.0～50.0 mg·L^-1(r=0.999 9)，7.2～72 mg·L^-1(r=0.999 9)，11.67～116.7 mg·L^-1(r=0.999 9)和5.32～53.2 mg·L^-1(r=0.999 8)；平均回收率(n=3)分别为98.8%(RSD1.5%)，99.1%(RSD1.9%)，99.5%(RSD1.4%)和98.5%(RSD1.9%)。结论：该方法简便、准确，重复性好，为赤芝药材的质量控制提供了实验依据。     

不同离子交联剂对海藻酸凝胶微丸溶胀和释药性质的影响

 目的考察不同离子交联剂对海藻酸凝胶微丸溶胀和释药性质的影响。方法以考马斯亮兰G-250为模型药物,分别以Ca²⁺,Fe³⁺,Zn²⁺,Ba²⁺为交联剂,采用滴制法制备海藻酸凝胶微丸,考察不同离子交联制备的海藻酸凝胶微丸吸水溶胀和释药行为的差异。结果不同离子交联制备的海藻酸凝胶微丸的溶胀行为和释药行为有明显差异。结论海藻酸凝胶微丸是一种非常有潜力的药物载体,可通过采用不同离子交联制备获得不同缓释效果。     

群多普利的合成研究

 目的研究群多普利的合成工艺。方法以1,1,3,3-四甲氧基丙烷为起始原料经部分水解、缩合、脱水、Diels-Alder反应、高压氢化、环合、水解、酯化、硅胶柱手性拆分及催化氢化制得群多普利。结果重要中间体的结构经MS及¹H-NMR确证,群多普利的结构经MS、IR、NMR及元素分析确证。结论本法各步反应简单易控,产率高于文献,无需使用昂贵试剂,有工业化潜力。     

阿魏酸薄荷酯的合成与体外总抗氧化能力

目的:研究阿魏酸薄荷酯的合成方法及其体外总抗氧化能力.方法:以香兰素为原料,通过与中间体丙二酸单薄荷酯发生缩合反应合成阿魏酸薄荷酯,并通过法和铁离子还原(FRAP)法对其总抗氧化能力进行了测定.结果:经过三步反应合成得到了阿魏酸薄荷酯,化合物未见报道,结构经1H-NMR和MS得到确证,在试验浓度范围内具有一定的抗氧化能力,但比阿魏酸弱.结论:阿魏酸薄荷酯具有抗氧化活性,其合成方法适用于其他阿魏酸酯或阿魏酸酰胺衍生物的合成.     

3′,5′-二辛酰基-5-氟尿嘧啶脱氧核苷的合成及性质研究

 目的 研究5-氟尿嘧啶脱氧核苷 (FUdR)的前体药物3′,5′-二辛酰基-5-氟尿嘧啶脱氧核苷(DO-FUdR)的合成路线、降解规律和体外抗肿瘤细胞增殖活性。方法 通过酯化反应合成了DO-FUdR, 采用MS,NMR等进行了鉴定; HPLC测定DO-FUdR在不同pH 值缓冲液和小鼠组织匀浆中浓度的变化, 计算其在不同介质中的降解速率常数, 并测定了DO-FUdR的溶解度和分配系数;3H-TdR掺入法测定了DO-FUdR对U251星型胶质瘤细胞体外增殖活性的抑制作用。结果 合成化合物为DO-FUdR; 其在缓冲溶液和组织匀浆中的降解过程符合表观一级反应; 与FUdR具有相似的抗胶质瘤细胞增殖活性。结论 DO-FUdR是一种值得进行进一步研究和开发的前体药物。     

透明质酸交联剂的合成

 目的研究透明质酸交联剂双磺基琥珀酰亚胺辛二酸酯(BS₃),3,3′-二硫双磺基琥珀酰亚胺丙酸酯(DTSSP),4,4′二硫双磺基琥珀酰亚胺丁酸酯(DTSSB)的合成方法,寻找一种操作简便,反应路线短,毒性小且成本低的合成工艺。方法以马来酸酐为原料,经加成,环化,还原、环合4步反应得到N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠,N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠与相应的二羧酸反应得到目标产物。结果以起始物马来酸酐计,得到目标产物5步反应总收率分别为31%(BS₃),24%(DTSSP),35%(DTSSB),目标产物经质谱(¹H-NMR)和高分辨率质谱(HRMS)得到确证。结论本合成路线简便易行,适合大规模生产。     

马钱子碱在大鼠体内的药动学

 目的考察马钱子碱在大鼠体内的药动学性质。方法考察不同给药途径对马钱子碱在大鼠体内药动学的影响。HPLC测定静脉注射、灌胃和腹腔注射10 mg·kg^-1马钱子碱溶液后不同时间点的血药浓度。药动学参数采用3P97程序进行拟合。结果马钱子碱溶液灌胃和腹腔注射给药的绝对生物利用度分别为33.3%和74.9%。与静脉注射相比,灌胃和腹腔注射后的药动学特性发生显著改变。静脉注射和灌胃给药后的体内药动学符合二室模型,但腹腔注射符合一室模型。结论给药途径是影响马钱子碱体内药动学性质的重要因素。     

塞络通胶囊对多发梗死性痴呆大鼠认知功能障碍的干预作用

目的:研究塞络通胶囊(塞络通)对多发梗死性痴呆(multi-infarct dementia,MID)大鼠学习记忆功能的改善作用及其机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组以及塞络通高、低剂量组.采用SD大鼠颈内动脉注射微球血管栓塞剂的方法建立多发梗死性痴呆模型;手术成功后第10天,大鼠分别灌胃给予蒸馏水、盐酸美金刚(20 mg· kg-1)以及高、低剂量的塞络通(16.5,33.0 mg·kg-1),每日1次,连续60 d;检测塞络通不同剂量对模型大鼠Morris水迷宫潜伏期、路径长度,以及脑组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响.结果:与假手术组比较,多发梗死性痴呆大鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期及路径长度均明显延长(P＜0.05或P＜0.01),脑组织ChAT活性明显降低(P＜0.05);塞络通干预60 d后明显缩短模型大鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期及路径长度(P＜0.05或P＜0.01);并且明显降低脑组织AchE活性面升高ChAT活性(P＜0.05或P＜0.01).结论:塞络通对多发梗死性痴呆大鼠认知功能障碍具有一定程度的改善作用,作用机制可能与其对脑组织ChAT活性以及AchE活性不同的调节相关.     

诱导子Ag+,La3+对杠柳不定根生长及杠柳毒苷积累影响的研究

目的:考察杠柳不定根牛长特性以及次生产物杠柳毒苷积累特性,并在此基础上考察Ag+,La3+2种诱导子对杠柳不定根生长与杠柳毒苷积累的影响.方法:每4 d对杠柳不定根进行取样,测量干重及杠柳毒苷含量,绘制杠柳不定根生长及杠柳毒苷积累曲线;在不定根生长稳定期加入不同浓度的诱导子Ag+,La3+以考察适宜杠柳毒苷牛物合成的最佳浓度,并将此浓度的诱导子添加到杠柳不定根不同生长阶段以考察诱导子对不定根生长以及对杠柳毒苷生物合成的影响.结果:杠柳不定根牛长特性旱典型S型牛长曲线,其与杠柳毒苷的代谢旱半偶联关系.诱导子Ag+,La3+诱导杠柳毒苷生物合成的最适浓度均为0.05 mmol.L-1,且在指数生长期末期加入这2种诱导子,诱导杠柳毒苷牛物合成效果最好.结论:杠柳不定根生长与其次生产物杠柳毒苷积累呈半偶联关系;诱导子Ag+和La3+的添加浓度与添加时间能明显的影响杠柳不定根生长与杠柳毒苷的生物合成.     

S(+)-盐酸氯胺酮在大鼠体内药动学研究

 目的S(+)-盐酸氯胺酮是盐酸氯胺酮右旋光学异构体,研究大鼠静脉注射给药后体内血浆药动学、组织分布、代谢及排泄特征,为临床应用提供参考依据。方法本实验采用LC-MS测定生物样品中S(+)-盐酸氯胺酮浓度。结果大鼠静脉注射不同剂量S(+)-盐酸氯胺酮(6.25,12.5,25mg·kg^-1)后,ρ_max及AUC与给药剂量呈正相关;体内分布以肾、肾上腺最高,脑、小肠、肌肉、胃、心脏等次之,肝、肺等组织水平最低。S(+)-盐酸氯胺酮静脉注射后经粪、尿、胆汁排泄,排泄量分别占给药量的0.007%,0.66%,和16%。S(+)-盐酸氯胺酮在大鼠体内可经CYP2E1,CYP3A和CYP2C同工酶代谢,氧化成去甲基代谢物和双键去甲基代谢物。结论研究S(+)-盐酸氯胺酮的血浆药动学、组织分布、代谢及排泄特征可为该药临床应用的安全性和有效性提供重要的参考依据。     

大鼠血浆佐米曲普坦的HPLC测定方法学研究

 目的建立大鼠血浆中佐米曲普坦的高效液相测定方法,并研究大鼠不同途径给药后的药动学。方法采用甲基叔丁基醚为溶剂,提取药物。以0.05%三乙胺(用磷酸调至pH 2.70)-乙腈(92∶8)为流动相,色谱柱为Dikma Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流速1.2 mL·min_-1,荧光检测的激发波长225 nm,发射波长360 nm。结果佐米曲普坦在2.5～1 000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 7)。高、中、低3种浓度的提取回收率分别为90.10%,91.75%,86.79%,方法回收率分别为103.55%,94.49%,98.79%,日内和日间RSD均小于4%,最低检测限为1μg·L^-1。计算出灌胃、静注、鼻腔给药途径主要药动学参数分别为:t_1/2(2.03±0.88)h,ρ_max(144±28)μg·L^-1,t_max(0.85±0.14)h,AUC_0～t(442±110)μg·h·L^-1;t_1/2(1.40±0.12)h,ρ_max(567±55)μg·L^-1,AUC_0～t(1 075±128)μg·h·L^-1;t_1/2(1.48±0.23)h,ρ_max(304±34)μg·L^-1,t_max(0.65±0.14)h,AUC_0～t(685±43)μg·h·L^-1。结论该方法操作简单、快速、准确、重现性好,适用于大鼠血浆中佐米曲普坦浓度的检测及其药动学研究。     

丹参红花提取物对鼠心脏成纤维细胞胶原合成的影响

目的:探讨丹参红花提取物(DCE)对血管升压素(AVP)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CF)胶原合成作用的影响,为应用中成药防治高血压心肌纤维化提供理论依据.方法:运用3H-脯氨酸掺入法分别观察不同浓度和不同时间DCE对AVP诱导CF胶原合成的影响.结果:CF的3H-脯氨酸掺入率随着DCE干预浓度的增加而降低,其中100mg/L和200mg/L DCE组的3H-脯氨酸掺入率明显低于空白对照组,并具有统计学意义(P<0.01);随着DCE作用时间的延长,CF的3H-脯氨酸掺入率呈递减趋势,CF胶原合成功能与DCE作用时间呈明显的负相关.结论:DCE能够呈浓度和时间依赖性抑制AVP诱导的CF胶原合成功能,防治高血压心肌纤维化.