DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化

目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应用免疫荧光组织化学显色法检测神经上皮细胞中DDX3和DDX5的表达变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5阳性表达在环磷酸胺处理后4 h无改变,8、12、24 h均升高,48 h则降低,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5表达异常,提示DDX3和DDX5可能参与了神经管畸形的发生。     

HMGB1在高温致金黄地鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化

为了探讨高温致神经管畸形(NTDs)作用的分子机制,为预防人类NTDs的发生提供理论依据,本研究在高温致金黄地鼠NTDs模型的基础上,研究HMGB1在高温致金黄地鼠NTDs神经上皮细胞中的表达变化。将孕鼠随机分为实验组和对照组,分别于水浴处理后8、16、24、40、64 h(相当于胚龄第8、8.5、9、9.5、10.5 d)处死孕鼠,剖腹取鼠胚,制备石蜡切片,应用免疫荧光染色技术检测NTDs发生过程中HMGB1在神经上皮细胞中的表达变化。结果显示:对照组和模型组孕鼠在水浴处理后8、16、24h,HMGB1免疫阳性产物分布于鼠胚神经上皮细胞和周围间充质细胞的胞浆中;水浴后40、64 h,HMGB1表达部位出现了由胞浆向胞核的转移;高温处理后,HMGB1在实验组各期胚胎神经上皮细胞内的表达均比对照组减弱。上述结果提示,HMGB1的表达变化与神经管发育密切相关,其表达降低是高温致神经管畸形发生的重要途径之一。     

酒精致金黄地鼠神经管和眼畸形的实验研究

目的 观察酒精致金黄地鼠胚胎神经管和眼畸形发生过程的形态学改变，并定量观察致畸过程中的细胞凋亡。方法 实验组孕金黄地鼠分别用腹腔注射酒精致畸处理后4、8、16、24、48和72h剖腹取胚或胎，在光镜、体视显微镜和扫描电镜下观察胚胎神经管和眼的畸形发生中的形态变化；借助TUNEL法和透射电镜，定量研究神经管和眼畸形发生过程中的细胞凋亡。结果 1．酒精可使金黄地鼠神经管和视杯的发生明显延迟。2．酒精处理后8h，神经上皮细胞凋亡显著增加，尤以前脑和神经嵴处明显；16h和24h，凋亡仍大量存在，主要位于神经嵴和延迟发生的视沟部位；48h后神经上皮细胞凋亡逐渐减少。结论 酒精可使金黄地鼠神经管和视杯的发生明显延迟，神经上皮和视泡、视杯上皮细胞过度凋亡，这可能是酒精致神经管和眼畸形的机理之一。     

Beclin1和LC3Ⅱ在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化

目的:检测自噬基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型(LC3Ⅱ)在环磷酰胺致大鼠神经管畸形(NTD)神经上皮细胞中的表达变化,探讨自噬与NTD发生的关系,为防治NTD提供一条新的途径。方法:在已建立的环磷酰胺致大鼠NTD模型基础上,应用免疫荧光显色检测环磷酰胺致大鼠NTD神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ表达变化。结果:与生理盐水对照组相比,环磷酰胺实验组神经管神经上皮细胞中Beclin1和L,C3Ⅱ阳性细胞光密度值在处理后4 h无明显改变;在处理后8、12、24 h升高,48 h降低,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中Beclin1和LC3Ⅱ表达异常,自噬改变可能是NTD发生的重要途径。     

PI3K/Akt通路与神经管发育的研究进展

神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是在胚胎发育早期,由于神经管不闭合或闭合不完全引发的先天性畸形。正常神经管发育过程中,细胞程序性细胞死亡是发育不可缺少的因素。PI3K/Akt信号通路是细胞内重要信号转导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,与细胞凋亡、增殖等过程密切相关。文章对PI3K/Akt信号通路调控细胞凋亡作用与神经发育之间的关系进行综述,以期对NTDs发生机制的进一步阐明提供思路及线索。     

过量维甲酸对金黄地鼠胚胎神经管维甲酸受体α表达的影响

目的:探讨过量维甲酸(RA)对金黄地鼠胚胎神经管维甲酸受体α(RARα)基因和蛋白表达的影响。方法:采用原位杂交和免疫组织化学方法及图像分析,半定量分析金黄地鼠胚胎神经管正常发生及RA致神经管畸形过程中RARα转录和表达水平的变化。结果:正常对照组RARα表达水平随胚龄增加而逐渐下降。实验组在灌服过量RA后3 h,RARα表达水平明显低于正常对照组;6 h时其表达水平明显高于正常对照组;14、22、46 h其表达水平下降,与对照组相比无显著差异;96 h其表达增强,并显著高于对照组水平。结论:过量RA引起的RARα转录和表达水平的变化与RA致金黄地鼠神经管畸形有关。     

脂肪间充质干细胞条件培养基诱导结肠癌HT29细胞凋亡

目的:观察脂肪间充质干细胞条件培养基(ASC-CM)对结肠癌HT29细胞的增殖抑制作用。方法:将体外培养生长良好的HT29细胞分为两组,一组加入ASC-CM再培养(实验组),另一组加入DMEM/F12培养基再培养(对照组),然后进行如下实验:(1)分别于再培养24h、48h和72h,采用CCK-8检测两组HT29细胞增殖水平,并计算实验组HT29增殖率;(2)于再培养48h采用流式细胞术检测两组HT29细胞凋亡率;(3)再培养48h后,采用实时荧光定量PCR检测两组HT29细胞凋亡因子Caspase-3、Caspase-9、Survivin、XIAP的mRNA表达水平。结果:(1)与对照组比较,实验组HT29细胞24h增殖水平(吸光度OD值)无明显差异(P0.05),培养48h、72h的OD值显著降低(P0.01),且其增殖率下降趋势与培养时间呈明显负相关(r=-0.974,P0.01)。(2)实验组HT29细胞ASC-CM培养48h凋亡率较对照组明显增加(P0.01)。(3)实验组HT29细胞ASC-CM培养48h凋亡因子Caspase-3、Caspase-9mRNA表达较对照组显著升高(P0.01),Survivin、XIAP mRNA表达较对照组显著降低(P0.01)。结论:ASC-CM能有效抑制结肠癌HT29细胞增殖和促进凋亡。     

层粘连蛋白和纤维粘连蛋白在神经管畸形发生中的作用──免疫组织化学研究

给妊娠金黄地鼠灌服过量维生素Ａ酸后，在不同时间剖腹取胎，石蜡包埋、连续切片。用免疫组织化学方法，对神经上皮及其基膜、脊索和神经管周围间充质中的基质粘着分子——纤维粘连蛋白和层粘连蛋白进行定性、定位和半定量观察。结果显示，实验组各组胚胎的纤维粘连蛋白和层粘连蛋白的免疫组织化学染色均有不同程度的减弱。说明过量维生素Ａ酸可使神经上皮及其基膜和周围间充质中的纤维粘连蛋白和层粘连蛋白降低，从而干扰了神经上皮细胞的正常增殖、迁移、生理性死亡和细胞粘着过程。这是维生素Ａ引起神经管畸形的一个重要途径。     

环磷酰胺对SD大鼠的致畸作用及其致神经管畸形形态发生的观察

本实验选用雌性SD大鼠,妊娠第13天腹腔注射环磷酰胺(15mg/kg体重),分別于给药后4、8、12、24、48小时及妊娠第20天剖腹取胎,进行大体形态、光镜和透射电镜观察。结果显示环磷酰胺有明显的胚胎毒作用和致畸作用(致畸率为97.46％),神经管畸形较常见。在光镜下可见给药后8小时,神经上皮细胞开始变性、死亡,最早受影响的部位是端脑和后脑神经上皮的套层;给药后24小时损伤最重,范围广泛。电镜观察见线粒体、内质网等细胞器肿胀、溶解;单位膜模糊;细胞核固缩,电子密度增高。受损区域可见许多髓样小体、空泡、残余体等,神经管周围的间充质细胞排列紊乱,细胞死亡伴间质水肿。给药后48小时,吞噬细胞清除坏死组织并留下较大间隙。上述结果提示,环磷酰胺主要作用于DNA合成活跃的神经上皮细胞,并使其变性、死亡,还可引起线粒体等细胞超微结构的破坏;并能损伤神经管周围的间充质,干扰骨的发生过程。     

PMX诱导神经管畸形及其对神经上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:用培美曲塞(pemetrexed,PMX)建立叶酸缺乏的神经管畸形(neural tube defect,NTD)动物模型,并探讨其对神经上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用不同剂量PMX(5、10、15、17.5、20和30 mg/kg)对C57BL/6孕鼠进行干预,筛选最佳造模剂量。采用磷酸化组蛋白H3(pH3免疫组化的方法以及TUNEL方法)观察胎鼠神经上皮增殖和凋亡情况。结果:随着PMX剂量的增加,小鼠胚胎的吸收胎和畸形率逐渐增加,其中17.5mg/kg体重组的NTD的发生率最高(30.6%),被筛选为最佳造模剂量。pH3免疫组化和TUNEL结果显示,与正常对照组相比,NTD小鼠胚胎神经上皮细胞增殖减少(P<0.05),凋亡增加(P<0.05)。结论:PMX能诱导NTD的发生,其机制可能是因为PMX阻断了叶酸代谢通路并导致神经上皮细胞的增殖抑制和过度凋亡。     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.

     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。