EDTA微波脱钙骨的免疫组化染色

目的：改进传统骨组织的脱钙方法，改善免疫组化效果。方法：采用20％EDTA微波脱钙法对兔骨组织进行脱钙。结果：EDTA微波脱钙法能够更好的保持骨组织结构和组织中的抗原物质，得到更好的免疫组化切片。结论：EDTA微波脱钙法优于传统脱钙法，更适合于骨组织脱钙和免疫组化制片。     

骨组织标本脱钙法的改进

骨组织是一种坚硬的结缔组织，骨基质中有机成分和无机盐紧密结合，使骨组织十分坚硬。因此，在制作骨组织切片时，必须经过脱除钙盐的过程，就是通常说的“脱钙”。传统的脱钙方法常常使用硝酸、盐酸等强酸溶液，尽管脱钙效果好，但能引起组织结构的严重破坏，     

骨组织脱钙方法的改良

骨组织必须经过脱钙才能制作切片。选择适当的脱钙液、脱钙方法以及脱钙时间与骨组织的制片质量有密切关系。我们运用超声波技术及两种传统的脱钙方法对不同的骨性组织分组进行脱钙制片，并进行比较，发现该方法在不破坏组织结构及影响染色的同时，缩短了诊断时间，保证了切片质量。现将方法介绍如下。     

介绍一种理想的Plank脱钙液及使用方法

介绍一种理想的Ｐｌａｎｋ脱钙液及使用方法钱峰（杭州市红十字会医院）病理活检中，骨组织的切片难度较大。因骨组织内含有钙盐，不经脱钙处理是不能制片的。但脱钙液的选择、脱钙时间的长短难以统一和掌握。为此，我们将各种脱钙液在不同浓度、时间、温度上及用或不用微...     

脱钙骨制片与传统骨磨片技术的比较

①目的 比较脱钙骨切片法与骨磨片法显示骨组织结构的效果。②方法 应用硫堇-苦味酸染色显示脱钙骨组织结构，甲紫染色显示骨磨片的骨组织结构。③结果 传统的骨磨片较厚而不均匀，骨小管稀少，其结构不够清晰；脱钙骨切片薄而组织结构典型。④结论 采用硫堇-苦味酸染色制作骨组织切片标本其组织结构清晰可辨，易于提高学生对骨组织结构的辨认能力。     

骨组织电镜脱钙技术在免疫组化中的应用

骨组织的免疫组化一直是病理技术中的一大难题。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，因而骨组织固定、脱钙都是制备标本的重要环节。一些强酸如盐酸、硝酸等虽能快速有效除去骨组织中的钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏；近几年发展的微波辅助EDTA脱钙技术，虽然可实现较好地保护组织抗原性且快速的效果，但操作程序复杂。骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化，其脱钙液与固定液均与其他方法有较大差别，本实验用该方法进行骨组织免疫组化，取得了较理想的效果，现报道如下。     

骨组织脱钙技术及在免疫组化染色中的应用

与一般的软组织不同 ,骨组织石蜡切片在脱水、透明等制片前需要使用脱钙剂除去骨组织中的钙盐才能制备成 4～ 5 μm厚的切片。为了更好地了解脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色质量的影响 ,本文根据骨组织及其免疫组织化学染色的特点 ,结合文献对影响骨组织免疫组织化学染色质量的组织的固定、常用的脱钙方法及脱钙液、低温 微波快速脱钙技术及注意事项等方面进展进行了综合分析。     

微波辐射下不同种脱钙液对病理切片骨组织结构的影响

骨组织必须经过脱钙处理才能制作切片.传统的脱钙方法脱钙效果好,但易引起组织结构的严重破坏,选择适当的脱钙液与骨组织的制片质量有密切关系.本文作者选择4种不同脱钙液进行比较研究,现报道如下.     

骨组织脱钙技术的改进与完善

在病理工作中，骨组织的脱钙处理是一大技术难点，因而，要顺利制出一张质量上乘的骨组织切片并非易事。以往的病理技术资料对骨标本脱钙操作的论述大都十分简单，这对于病理技术普及程度不高的现状来说是不利的。在长期的病理外检工作中，笔者根据有关技术理论要求，结合实际工作情况，不断摸索，积累了一定的经验，现就骨组织脱钙的某些关键环作简要介绍。众所周知，骨组织的基质中沉着大量无机钙盐，同时，由于骨的各组分之间的特殊排列方式使得骨组织极为坚硬，成为病理制片的障碍。骨钙主要成分是磷酸钙，其次为碳酸钙和柠檬酸钙。那么…     

甲酸脱钙法在骨标本制片中的应用

骨标本必须脱钙后方可制片 ,过去常规用硝酸脱钙 ,使组织酸性过强 ,胞核不易着色 ,制片效果不佳 ,严重影响观察。我们对骨组织标本用甲酸进行脱钙 ,取得了很好的效果。1　材料与方法1.1　材料　选择 1999年 6月— 2 0 0 0年 12月骨组织标本 4 0例 ,组织块最大 6 cm× 5 cm× 4 .5 cm,最小如粟粒大。1.2　脱钙方法　 (1) 4 0 %的甲酸水溶液即为脱钙液 ,须放入密闭玻璃容器中。脱钙液临时配制即可。 (2 )将骨组织锯成 0 .3— 0 .4 cm厚的薄片 ,放入脱钙液中。(3)对于硬骨组织 ,2 4小时须更换脱钙液。 (4 )骨组织能用手术刀划开即脱钙成功 ,一…     

应用微波辐射脱钙技术改善骨组织免疫组化染色效果

应用微波辐射EDTA脱钙技术，革新传统的强酸脱钙法，缩短了脱钙时间，达到了完全保存骨组织形态结构及抗原物质的传统方法难以达到目的，增哟了免疫组化染色效果。     

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。     

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的 对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法 观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果 常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论 标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.     

透射电镜骨组织样品脱钙几种方法的研究

基于骨组织比较坚硬 ,透射电镜骨组织样品在戊二醛固定以后需进行脱钙处理。脱钙剂为 5%ＥＤＴＡ 2Ｎａ磷酸缓冲溶液。常规方法在 4℃冰箱中进行脱钙 ,一般需要 3个月。我们研究几种不同脱钙方法 ,然后进行常规样品制备和电镜观察。方法 1:在常温下脱钙 ,更换几次脱钙剂 ,时间 1～ 2月。方法 2 :用磁力加热搅拌器。用一个大烧杯和若干个塑料试管 ,把塑料试管底部用针刺成许多小孔。放骨组织于试管内 ,烧杯底部放入搅拌棒和试管支架 ,放入试管 ,加脱钙剂浸没骨组织 ,加热至2 0℃ ,搅拌。更换几次脱钙剂 ,时间 1～ 2周。方法 3:用微波脱钙。脱…     

微波辐射快速脱钙方法探讨

微波辐射快速脱钙方法探讨张素娟，黄宗义，张盛，李春德，赵彤，董敬朋病理学教研室骨组织脱钙一般需较长时间，组织细胞结构欠清晰。本文利用微波（Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ，ＭＷ）１辐射脱钙［１－４］，缩短脱钙时间２０～４０倍，现报告如下。材料和方法南方医院病理科活...     

超声波骨组织电镜样品脱钙处理的实验研究

目的 探讨超声辐照能否加快骨组织电镜样品的脱钙过程。方法 固定后的样品浸入含134mol／L和NaOH 70mmol／L的脱钙液中，经21kHz的超声波辐照，每天20min共7d。未经超声波处理的样品在脱钙液中浸泡20d作为对照。在透射电镜下观察两组骨组织的超微结构。结果 经超声辐照的样品在骨基质中没有无机盐结晶残留，且超微结构保存良好，与对照组无差异。结论 超声辐照可使脱钙处理的时间大大缩短，仅为对照组的三分之一。     

EDTA微波快速脱钙法

1材料和方法1．1材料固定后松质骨修成0．7cm×0．5cm×0．2cm；惠而浦微波炉AVM600型，功率900W，分七档；5种脱钙液：中性EDTA、PlankRycho液、10％硝酸．水溶液、Thoma’s液、Bouin＇s液。1．2方法微波设定在二档（160w），辐射smin，测量脱钙液温度，间隙Zmin，重复辐射3～4次后，以针顺利刺入骨组织为脱钙的标准。酸性脱钙液脱钙后，用5％硫酸钠水溶液碱化处理，微波辐射二档smin。中性EDTA脱钙无需碱化．常规石蜡制片，HE染色和免疫组化染色。2结果和讨论2．1经EDTA微波辐射脱钙的骨组织，石蜡切片完整，染色鲜艳，组织细胞…     

简单快速脱钙法

对于骨组织及其它钙化组织的制片,必须先将其脱去钙盐方能切成薄片镜检,常规脱钙法一般需48小时～72小时,从脱钙到诊断需较长时间。如何在最短时间里脱钙且又能减少脱钙液对骨组织细胞结构的影响,同时要求脱钙液配制操作简易,这一直是同行们探索的问题。下面就我科多年来总结使用的脱钙方法作一简介,供同行们参考。本法较适合于基层医院及无微波快速脱钙的情况下使用。1 材料与方法取1.0cm×1.0cm×0.2cm骨组织,固定于50%福尔马林溶液中1～2小时。将固定好的骨组织放入10%福尔马林与5%硝酸混合液中13～14小时,放入烤箱25℃～30℃加温…     

介绍一种改良快速病理组织脱钙法

对于临床送检的骨组织及钙化组织做病理切片,必须将骨组织脱去钙盐,才能制成切片.常规脱钙法一般需36-72小时,从组织脱钙到切片诊断需要较长时间.如果在较短时间里脱去钙盐且又能避免脱钙液对骨组织结构的影响,同时要制出组织结构清晰、完整的切片,这一直是我们病理同行探讨的问题,下面就我科自1997年以来总结的一种改良病理组织脱钙方法做一介绍.     

骨组织切片染色方法的改良

骨组织检查可分为骨组织切片法和骨组织磨片法两种，磨片法因组织厚薄不均匀，并对骨的各层结构有损坏而应用较少，因此，常常使用１０％硝酸酒精脱钙和石蜡切片ＨＥ染色，但结构显示受一定限制。笔者用５％硝酸甲醛脱钙后Ｍａｌｌｏｒｙ染色获得良好效果，现报告如下。１　材料和方法新鲜羊骨一段锯成２ｃｍ长，置于５０～６０℃水浴４～５天使骨组织上附着软组织脱落干净，流水冲洗２４小时，凉干，用５％硝酸甲醛脱钙２～３天后再放入稀铵水１小时（隔半小时换一次），流水冲洗２４小时，直至大头针易刺进。常规脱水、透明、包埋、切片，…