附加二氮嗪与1,6-二磷酸果糖心麻痹液对冷保存大鼠心脏能量代谢的作用

目的观察附加二氮嗪(DZ)与1,6-二磷酸果糖(FDP)心麻痹液对冷保存大鼠心肌能量代谢的作用.方法42只SD大鼠随机分为4组,正常对照组6只;其余各组每组12只,分别为STH组(单纯St.ThomasⅡ号液),DF组(St.ThomasⅡ号液 DZ 50 μmol/L FDP 5 mmol/L),DF 5-HD组(St.ThomasⅡ号液 DZ50μmol/L FDP5mmol/L 5-羟基葵酸盐100μmol/L),在4℃条件下保存心脏6 h后,6只取左心室,测定心肌ATP、ADP、AMP含量,计算能荷;提取线粒体,测定线粒体内游离Ca2 浓度([Ca2 ]m)及线粒体呼吸功能;另外6只建立离体左心工作模型,再灌注30 min后,测量上述指标.结果与正常对照组比较,冷保存后STH组心肌ATP含量及能荷显著下降,[Ca2 ]m显著增高,线粒体Ⅲ态呼吸速率(ST3)及呼吸控制比(RCR)明显降低(P＜0.01);再灌注后心肌ATP含量及能荷没有明显改善,[Ca2 ]m进一步增高,RCR进一步降低(P＜0.01).DF组各项指标显著优于STH组(P＜0.01);线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂5-HD可部分降低附加DZ与FDP的保护效果.结论附加DZ与FDP可显著改善St.Thomas液冷保存大鼠心脏的能量代谢.     

缺血后处理对不同时程冷保存大鼠心脏的作用研究

目的:研究缺血后处理(postconditioning)对不同时程冷保存大鼠心脏的作用及其机制。方法:利用Langendorff离体鼠心灌注法,观察大鼠心脏在Celsior液(4℃)中保存3 h或5 h后,在其后复灌60 min期间血流动力学的恢复情况,并对复灌期间心律失常严重程度进行定量分析。缺血后处理采用全心停灌30 s,复灌30 s,循环3次。结果:(1)与3 h冷保存对照组相比,大鼠心脏冷保存3 h后给予缺血后处理,在多个复灌时间点上可明显降低左室舒张末期压力,而心率、左室发展压、左室最大收缩/舒张速率、冠脉流出量、心率与发展压的乘积等的恢复率在复灌期明显高于3h对照组。心脏冷保存3 h后心律失常的发生率在复灌第0~10min时最高,缺血后处理可明显降低心律失常的发生率。(2)在缺血后处理短暂复灌期的K-H灌流液中加入100μmol/L的5-HD(线粒体ATP依赖性钾离子通道的阻断剂),可取消缺血后处理降低左室舒张末期压力,增高心率、左室发展压、左室最大收缩/舒张速率、冠脉流出量、心率与发展压乘积的作用。心律失常评分亦明显高于3 h缺血后处理组。(3)大鼠心脏冷保存5 h后给予缺血后处理,在复灌期间各项动力学指标以及心律失常评分上与5 h冷保存对照组无明显差异。结论:缺血后处理对于3 h冷保存的大鼠心脏有显著的保护作用,其作用机制可能是部分通过激活线粒体ATP依赖性钾离子通道起作用,而缺血后处理对于5 h冷保存的大鼠心脏并无保护作用。     

二氮嗪对低温保存诱导的心肌线粒体氧自由基的清除作用

目的 观察二氮嗪(diazoxide,DE)对不同时程低温保存诱导产生的大鼠心肌细胞线粒体内氧自由基的清除作用.方法 根据不同的低温保存时程,SD大鼠随机分9组,每组8只.利用Langendorff离体鼠心灌注法停搏大鼠心脏,然后在4℃单纯Celsior保存液或加入DE(30 μmol/L)的Celsior保存液中分别保存0h、3h、6h、9h或12h后,检测心肌细胞线粒体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量的变化.且同步观察电镜下心肌超微结构的变化.结果 ①与对照组比较,随着冷保存时间的延长,心肌细胞线粒体内SOD活性随之降低,MDA含量随之升高,电镜结果显示心肌细胞线粒体超微结构随之破坏加剧;②与相应低温保存时程的单纯celsior液组比较,在保存液中加入DE后,上述各项指标均有明显改善,且以冷保存6h和9h后最为显著.结论 DE在大鼠心脏长时程低温保存期间町通过直接清除自由基及提高线粒体SOD活力而减轻由长时程低温保存导致的心肌细胞线粒体的损伤.     

含吡那地尔心脏保存液的供心保存效果

目的观察含不同浓度吡那地尔的心脏保存液对供心的保存效果。方法 40只SD大鼠根据供心保存方式随机分为正常对照组、Celsior液对照组、Celsior液+0.25 mmol/L吡那地尔组、Celsior液+0.5 mmol/L吡那地尔组和Celsior液+1 mmol/L吡那地尔组(n=8)。建立Langendorff离体心脏灌注模型,离体心脏置各保存液中6 h,再灌注30 min,观察并比较各组心功能指标[左心室收缩末压(LVESP)、左心室发展压(LVDP)、冠脉流量(CF)、左心室内压最大上升速率(dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(dp/dtmin)]、心肌超微结构和心肌细胞凋亡指数。结果与Celsior液对照组、Celsior液+0.25 mmol/L吡那地尔组和Celsior液+1 mmol/L吡那地尔组比较,Celsior液+0.5 mmol/L吡那地尔组大鼠供心LVESP、LVDP、CF、dp/dtmax和dp/dtmin显著提高(P<0.05),心肌细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),且心肌细胞和线粒体结构较为完整。结论与单纯Celsior心脏保存液相比,含0.5 mmol/L吡那...     

极化停搏液用于离体大鼠心脏保存的实验研究

目的:研究Na 通道阻滞剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)极化停搏液对离体大鼠心脏的保护作用.方法:20只Wis-tar大鼠随机均分入St.Thomas去极化停搏组(对照组,Ⅰ组),TTX极化停搏组(Ⅱ组).建立离体心脏Langendorff和Neely灌注模型,搏动稳定后,灌注30min后停搏.将鼠心置于相应配伍的停搏液中,7℃保存5h后重新灌注心脏30min.观察各组心脏保存前后左心室收缩末压力(LVESP)和压力变化速率(±dp/dt)的恢复率、心肌酶漏出量、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变.结果:恢复灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于去极化组(P＜0.01),CPK和LDH漏出量(P＜0.05)明显低于去极化组,ATP含量维持在较高的水平(P＜0.01),心肌超微结构得到较好保护.结论:极化停搏心脏保存液对离体大鼠心脏的保护作用优于去极化停搏液,在长时间供体心脏保存中显示出明显的优势.     

全氟碳化合物在离体心脏长时程低温保存中的作用

目的 研究全氟化碳化合物（PFC）在大鼠离体心脏长时程低温保存中的作用。方法 30只Wistar大鼠随机分为对照组（Celsior保存液）、Celsior 液通氧组（Celsior+O₂）、双层法通氧组（PFC/Celsior+O₂）,每组10只。制备大鼠离体心脏Langendorff灌注模型。离体心脏在4 ℃条件下保存8 h,于复灌期分别检测血流动力学指标、冠脉流出量及磷酸肌酸激酶(CK) 、乳酸脱氢酶(LDH) 和天门冬氨酸转氨酶(AST)漏出量,观察心肌超微结构的改变。结果 心脏复灌后,与对照组和Celsior+O₂组比较,Celsior/PFC+O₂组左心室舒张压和左心室压力变化速率明显上升（P<0.01）,LDH、CK和AST漏出量明显减少（P<0.01）;而Celsior+O₂组与对照组上述指标比较差异均无统计学意义（P>0.05）。超微结构观察发现,与对照组和Celsior+O2组比较,低温保存后PFC/Celsior+O₂组心肌纤维排列较整齐,肌浆网扩张、线粒体肿胀及嵴结构破坏程度均较轻。结论 氧合的PFC与常规心脏保存液联合应用能够通过向缺血心肌提供更多的氧来改善能量代谢,提高离体大鼠心脏长时程低温保存的效果。     

Na+通道阻滞极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的保护作用

目的 研究含Na⁺通道阻滞剂河豚毒素(TTX)极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的心肌保护作用。方法 20只Wistar大鼠随机均分入St.Thomas去极化停搏组(对照组,Ⅰ组)和TTX极化停搏组(Ⅱ组)。建立离体心脏灌注模型,灌注10min后,分别用St.Thomas和TTX极化停搏液2ml经主动脉插管注入,使心脏停搏。随后将鼠心置于相应配伍的停搏液中,10℃保存7h后重新灌注心脏30min。观察两组心脏保存前后在左心室收缩末压力和压力变化速率恢复率、心肌酶漏出、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变。结果 再灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于Ⅰ组(P<0.01),肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶漏出量低于Ⅰ组(P<0.05),ATP含量维持在较高水平(P<0.01),心肌超微结构得到较好保护。结论 在离体大鼠心脏低温保存过程中TTX极化停搏液心肌保护作用优于STH液。     

全氟碳化合物在离体心脏长时程低温保存中的作用

目的 研究全氟化碳化合物(PFC)在大鼠离体心脏长时程低温保存中的作用.方法 30只Wistar大鼠随机分为对照组(Celsior保存液)、Celsior 液通氧组(Celsior+O2)、双层法通氧组(PFC/Celsior+O2),每组10只.制备大鼠离体心脏Langendorff灌注模型.离体心脏在4 ℃条件下保存8 h,于复灌期分别检测血流动力学指标、冠脉流出量及磷酸肌酸激酶(CK) 、乳酸脱氢酶(LDH) 和天门冬氨酸转氨酶(AST)漏出量,观察心肌超微结构的改变.结果 心脏复灌后,与对照组和Celsior+O2组比较,Celsior/PFC+O2组左心室舒张压和左心室压力变化速率明显上升(P<0.01),LDH、CK和AST漏出量明显减少(P<0.01);而Celsior+O2组与对照组上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).超微结构观察发现,与对照组和Celsior+O2组比较,低温保存后PFC/Celsior+O2组心肌纤维排列较整齐,肌浆网扩张、线粒体肿胀及嵴结构破坏程度均较轻.结论 氧合的PFC与常规心脏保存液联合应用能够通过向缺血心肌提供更多的氧来改善能量代谢,提高离体大鼠心脏长时程低温保存的效果.     

Na^＋通道阻滞极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的保护作用

目的研究含Na^＋通道阻滞剂河豚毒素（TTX）极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的心肌保护作用.方法20只Wistar大鼠随机均分入StThomas去极化停搏组（对照组,Ⅰ组）和TTX极化停搏组（Ⅱ组）.建立离体心脏灌注模型,灌注10 min后,分别用St.Thomas和TTX极化停搏液2 ml经主动脉插管注入,使心脏停搏.随后将鼠心置于相应配伍的停搏液中,10℃保存7 h后重新灌注心脏30 min.观察两组心脏保存前后在左心室收缩末压力和压力变化速率恢复率、心肌酶漏出、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变.结果再灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于Ⅰ组（P＜0.01）,肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶漏出量低于Ⅰ组（P＜0.05）,ATP含量维持在较高水平（P＜0.01）,心肌超微结构得到较好保护.结论在离体大鼠心脏低温保存过程中TTX极化停搏液心肌保护作用优于STH液.     

含二氮嗪的Celsior液和HTK液对移植鼠心脏超时低温保存效果的分析

目的评价含二氮嗪的Celsior液和HTK液对移植鼠心长时间低温保存的效果。方法将32只同种系雄性SD大鼠随机分为Celsior液组和HTK液组，每组8对。采用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植术建立模型。供体麻醉抗凝后，4℃ stanford停搏液灌注心脏停跳，制备离体鼠心，保存于4℃两种不同保存液中10h。之后移植于受体，成功复跳后观察1h，留取标本并测定心率（HR）、心肌含水量（MWC）、心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、心肌酶谱[乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸肌酸激酶（CK）]，并观察心肌超微结构。结果两组大鼠心脏复跳后均跳动有力、心律齐，与Celsior液组比较，HTK液组大鼠HR明显较慢（P〈005），cTnⅠ、LDH及CK含量明显较高（P〈005），但MWC并无明显变化（P〉0．05）。心肌超微结构显示，Celsior液组大鼠心肌结构清楚，肌纤维排列较整齐，肌节清晰，偶见肌丝溶解；线粒体肿胀不明显，嵴结构相对清楚。HTK液组大鼠心肌结构尚清楚，肌纤维疏松，个别区域肌丝肌节溶解，线粒体轻度肿胀，嵴排列尚整齐，偶有空泡变性。结论含二氮嗪的Celsior液和HTK液低温长时间（10h）保存离体心脏均具有良好的心肌保护效作用，而且相对于HTK液，Celsior液的保存效果更好，可作为临床上心脏移植手术中心脏保存的一种有效的方法。     

Protective effects of polarizing cardioplegia with Na(+) channel inhibitor in ex vivo rat heart preservation]

OBJECTIVE: To investigate the protective effects of polarizing cardioplegia with Na(+) channel inhibitor tetrodotoxin (TTX) in ex vivo rat heart preservation. METHODS: Using a Langendorff preparation, Wistar rat hearts were arrested and preserved with St.Thomas (STH) solution (n=10) or with polarizing cardioplegia (TTX, n=10) for 7 h in hypothermic storage (10 degrees Celsius). All the hearts then underwent 30 min of reperfusion. Pre-ischemia and post-ischemia indexes of the rat hearts were determined, including the hemodynamic parameters, myocardial enzymology, ATP content and ultrastructural changes. RESULTS: The recovery of hemodynamic parameters of the hearts in TTX group were better than those in STH group (P<0.01). In comparison with STH group, the leakage of creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH) in TTX group was significantly lower (P<0.05) and ATP level maintained a relative high level with better protected myocardial ultrastructure. CONCLUSION: TTX polarizing cardioplegia provides more effective long-term hypothermic preservation of isolated rat hearts than STH.     

附加N-乙酰半胱氨酸心麻痹液对低温缺血再灌注大鼠心脏高能磷酸化合物代谢的保护作用

目的 应用^31P-核磁共振(^31P-NMR)技术探讨附加N-乙酰半胱氨酸(NAC)心麻痹液对离体低温缺血再灌注鼠心高能磷酸化合物代谢的保护作用。方法 建立^31P-NMR条件下的Langendorff离体心脏逆灌模型，动态测定离体大鼠心脏低温缺血90min再灌注30min过程中的心肌高能磷酸化合物代谢状况，评价附加NAC心麻痹液的作用。结果 附加NAC心麻痹液灌注明显改善再灌注中心肌PCr、ATP和Pi的恢复，显著优于St.Thomas液灌注者。结论 附加NAC可显著改善低温缺血再灌注心脏高能磷酸化合物代谢的保护作用。     

二氮嗪后处理联合预处理对心肌缺血再灌注损伤作用的研究

目的探讨二氮嗪后处理联合预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法 48只Wistar大鼠,建立离体心脏Langendorff装置灌流模型,随机分为如下6组：①对照组（Con组）：左冠状动脉前降支（left anteri-or descending artery,LAD）阻断45 min,复灌120 min。②后处理组（Pos组）：LAD开放时主动脉灌注管给予6次10秒开放/10秒阻断。③二氮嗪后处理组（Dpo组）：二氮嗪（50μmol/L）于复灌时给予。④二氮嗪预处理组（Dpr组）：LAD阻断前给予二氮嗪（50μmol/L）。⑤联合组（Cbm组）：LAD阻断前、后分别给予二氮嗪（50μmol/L）。⑥阻滞剂组（Dhb组）：LAD阻断前、后分别给予二氮嗪（50μmol/L）和5-羟基葵酸盐（100μmol/L）。结果与Con组、Dhb组比较,Pos组、Dpo组、Dpr组、Cbm组的心肌线粒体Flameng评分、心率-收缩压乘积、左心室内压瞬间最大变化速率及冠脉流出液在复灌后各时间点增高（P〈0.05）,LDH漏出量减少,SOD含量较高,CK及MDA含量低（P〈0.05）,Cbm组未表现出叠加效应（P〉0.05）。结论二氮嗪后处理联合预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,但与二氮嗪药物预处理、后处理比较未表现出明显的叠加保护作用。     

Effects of Warm Blood Cardioplegic Solution on Myocardial Protection

ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＷａｒｍＢｌｏｏｄＣａｒｄｉｏｐｌｅｇｉｃＳｏｌｕｔｉｏｎｏｎ　ＭｙｏｃａｒｄｉａｌＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＤＵＸｉｎ－ｌｉｎｇ（杜心灵）；ＬＡＮＨｏｎｇ－ｊｕｎ（蓝鸿钧）；ＳＵＮＺｈｏｎｇ－ｑｕａｎ（孙宗全）（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣ...     

钾通道参与高铁血红素诱导的心肌保护作用

目的:研究血红素氧化酶1的诱导剂高铁血红素在对抗大鼠心肌缺血-复灌损伤中的作用及其相应机制。方法:利用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,观察心功能、心肌梗死面积等指标的变化。结果:腹腔注射高铁血红素后24 h,可明显改善缺血-复灌心脏(30 m in缺血/2 h复灌)的收缩功能,减少复灌期乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸磷酸(CK)的释放,缩小心肌梗死面积。在腹腔注射高铁血红素前给予线粒体KATP通道阻断剂5-HD或肌膜KATP通道阻断剂HMR-1098均可取消高铁血红素引发的心肌保护作用。在高铁血红素预处理后24 h,缺血/复灌前10 m in给予K ca通道阻断剂pax illine,与高铁血红素组相比,心肌梗死面积扩大,心脏收缩功能下降。结论:高铁血红素预处理可对抗心肌缺血-复灌性损伤,其作用可能与激活KATP通道和K ca通道有关。     

木犀草素对冷保存不同时限大鼠心脏功能的影响

目的:研究木犀草素能否延长心脏停搏保存液(UW液)对离体大鼠心脏的低温保存时间。方法:将40只成年SD大鼠随机分成4组(n=10):冷保存12h对照组(12h-UW组)与实验组(12h-Lu组),冷保存18h对照组(18h-UW组)与实验组(18h-Lu组),利用Langendorff离体心脏灌流法,观察心脏在4℃含或不含木犀草素的UW液中保存12h或18h,复灌60min后心脏功能的变化,比较心功能指标:心率(HR)、左心室最大收缩压(LVPSP)、左心室压力变化率(±dp/dtm a x),心脏冠脉流量(CF)及冠脉流出液中磷酸肌酸激酶(CK)的释放量。结果:随着冷保存时间的延长,木犀草素能明显减缓离体大鼠心脏收缩功能(LVPSP,+dp/dtm a x)与舒张功能(-dp/dtm a x)的下降,增加冠脉流量,减少心肌酶CK的漏出,12h-UW组与12h-Lu组、18h-UW组与18-Lu组各观察指标相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素对长时间冷保存的离体大鼠心脏有明显的保护作用。     

Cardioprotective effects of mitochondrial KATP channels activated at different time

Backgroud Recent studies in adult hearts have indicated that KATP channels in the inner mitochondrial membrance are responsible for the protection. And we investigated whether opening of mitochondrial KATP channels (mKATP) could provide myocardial protection for immature rabbits and determined its role in cardioprotection.Methods Thirty-four 3-4-week-old rabbits, weighing 300-350 g, were divided randomly into five groups: Group Ⅰ (control group, n=8); Group Ⅱ ［diazoxide preconditioning group; n=8; the hearts were pretreated with 100 μmol/L diazoxide for 5 minutes followed by 10-minute wash out with Krebs-Henseleit buffer (KHB)］; Group Ⅲ ［diazoxide+5-hydroxydeconate (5-HD) preconditioning group; n=5; the hearts were pretreated with 100 μmol/L diazoxide and 100 μmol/L 5-HD); Group Ⅳ (diazoxide+cardioplegia group; n=8; cardioplegia containing 100 μmol/L diazoxide perfused the hearts for 5 minutes before ischemia); Group Ⅴ (diazoxide+5-HD+cardioplegia group; n=5; the cardioplegia contained 100 μmol/L diazoxide and 100 μmol/L 5-HD). All hearts were excised and connected to langendrff perfusion system and passively perfused with KHB at 38℃ under a pressure of 70 cmH2O. After reperfusion, the recovery rate of left ventricular diastolic pressure (LVDP), ±dp/dtmax, coronary flow (CF), the creatinine kinase (CK), lactate dehydrogenase (LDH), aspartate aminotransferase (AST) in coronary sinus venous effluent and the tissue ATP were measured. Mitochondria were evaluated semiquantitatively by morphology.Results After ischemia and reperfusion (I/R), the two groups that were treated by diazoxide only (Groups Ⅱ and Ⅳ) had a significant improvement in LVDP, ±dp/dtmax, and CF recovery. AST, LDH, and CK were decreased, and the levels of tissue ATP in the two groups were higher. Mitochondria was protected better in Group Ⅳ than in other groups. Conclusions Activating mKATP channels before and during ischemia can similarly protect immature rabbit hearts, and the mechanism is related to the direct protective effect on mitochondria. Opening of mKATP channel during ischemia provides a better protection for mitochondria than it does before ischemia.