高敏化学发光法检测血清梅毒特异性抗体临床应用价值

目的比较高敏化学发光法(HISCL)和临床常用的梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测血清梅毒螺旋体特异性抗体的符合率;应用蛋白质免疫印迹法(Western blot)对阳性结果和两种方法不一致的结果进行验证,以判定HISCL检测血清梅毒特异性抗体的临床应用价值。方法收集5 568例临床检测的血清标本,分别用HISCL和TPPA进行检测,对于检出的阳性结果和两种方法不一致的结果应用Western blot验证。结果5 568例血清标本中,HISCL和TPPA共同检出阳性标本201例,无结果不一致的情况。对所有201例阳性标本均采用Western blot检测验证,结果确认阳性标本数为185例,确认阴性标本数10例,可疑6例。在本次研究中HISCL和TPPA的符合率为100%,灵敏度为100%,特异度为99.70%,阳性预测值为92.04%,阴性预测值为100%。HISCL出现的16例不符合中,临界值指数(COI)值大多在4.0以下。确认的10例阴性结果中,主要为60岁以上的老年人、孕妇和1岁以下儿童,均为免疫状态不稳定的人群;可疑的6例经Western blot验证均为非阴性结果,需临床跟踪随访。结论 HISCL与TPPA有很好的一致性,且HISCL具有检测快速、结果客观、重复性好、适合大批量检测的特点,适合进行梅毒的筛查和确认。但HISCL仍存在一定的假阳性,对于COI值较低的标本应结合临床资料。     

ISO15189认可关于CYP2C19基因多态性检测性能验证评价

目的评价荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测人类CYP2C19基因多态性的分析性能。方法依据ISO15189认可要求对试剂盒的准确度(与金标准比较)、特异度、精密度、检测下限和抗干扰能力进行性能评价。结果 20份临床标本荧光定量PCR与Sanger测序法结果比对,准确度符合率为100%(测序符合率为100%);10份临床标本3个基因型位点荧光定量PCR与Sanger测序法结果均为野生型,特异度符合率为100%;荧光定量PCR对临床标本重复检测15次的结果完全一致,且Ct值CV≤5%;试剂盒最低检出限为0.550ng/μL;血红蛋白、胆红素和三酰甘油3种干扰物质加入已知基因型结果的血液标本后进行检测,与对照结果符合率为100%。结论荧光定量PCR检测人类CYP2C19基因多态性的性能验证满足ISO15189认可要求,适合于临床应用。     

新生儿ABO溶血病实验诊断的方法学探讨

目的 探讨新生儿ABO溶血病的实验诊断方法,并筛选出更为直接、简单易行、准确度高、灵敏度好的实验诊断方法.方法 收集临床疑似病例标本44例,分别用微柱凝胶法和流式细胞仪法进行新生儿溶血病三项试验（即游离试验、释放试验和直抗试验）检测.结果 44例标本中,临床最终确诊42例.微柱凝胶法检测阳性35例,诊断符合率为83.3%;流式细胞仪法检测阳性42例,诊断符合率为100%.差异有统计学意义.（P＜0.05）.结论 对于新生儿ABO 溶血病的实验诊断,流式细胞仪法更为直接,简便易行,灵敏度高,准确度高,结果客观,易于保存,是理想的新生儿ABO溶血病临床实验室检测方法.     

三种方法检测丙型肝炎病毒抗体结果一致性比较

目的探讨采用不同方法检测丙型肝炎病毒抗体结果的一致性。方法随机留取临床患者ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体值为1≤S/C.O.4和S/C.O.4的标本各100份。随机留取内镜患者胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体阴性、阳性标本各100份。采用胶体金法、ELISA、化学发光法三种方法对标本进行复检。结果临床患者ELISA检测结果为1S/C.O.4时,胶体金法的阳性检出率仅为38%;当ELISA法检测结果 S/C.O4时,三种方法检测的阳性率均为100%。对内镜检查患者胶体金法检测留取的阴、阳性标本各100份,胶体金法复检全部符合,ELISA、化学发光法检测有4~6份标本的结果不符合。结论胶体金法作为丙型肝炎病毒抗体检测方法敏感性低,应谨慎采用此方法用于内镜检查患者的检测。     

双向侧流胶体金法检测丙型肝炎抗体的临床评价

目的 对双向侧流胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体的性能进行评价。方法 选取经重组免疫印迹法（RIBA）检测的标本419例，临床确诊丙肝患者标本107例，临床非丙肝患者标本162例，正常对照人群标本150例，丙肝ELISA阳性参考品2例。对标本分别应用双向侧流胶体金法和化学发光微粒子法测定丙肝抗体，对结果进行统计学处理和分析。结果 对RIBA法确证阳性及阴性样本组测定的结果表明，双向侧流胶体金法敏感度为98．1％，特异度为99．7％；与对照方法（化学发光法）结果相比，总符合率99．0％，检测重复率为大于95％，与甲型肝炎、乙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、HIV-1／2阳性不存在交叉反应。结论 双向侧流胶体金法检测性能基本能满足临床常规检测HCV抗体的需要。     

粪便Hp抗原检测对诊断儿童Hp感染的价值

目的探讨粪便Hp抗原检测方法在诊断儿童Hp感染中的价值。方法用ELISA试剂盒对100例有上消化道症状患儿的粪便标本进行Hp抗原检测，同时进行胃粘膜活检标本快速尿素酶试验、组织学染色和血清学试验，3项检查中至少2项阳性作为“金标准”判定为Hp感染。结果“金标准”诊断Hp感染阳性36例，阴性64例，阳性的36例中34例粪便抗原检测阳性，阴性的64例中60例粪便抗原检测阴性。敏感度94．4％，特异度93.8％，准确度94.0％。结论粪便Hp抗原检测简便易行、无创伤性、经济、准确性高，值得推广。     

基因芯片检测结核分枝杆菌耐药基因效能分析

目的评价基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的效能。方法选取140例MTB阳性的痰标本进行基因芯片检测和传统药敏试验检测,分析基因芯片法对异烟肼(INH)、利福平(RFP)耐药性检测的灵敏度、特异度、准确度。对两种结果不符合的标本进行耐药基因测序检验。结果 INH耐药基因检测的灵敏度89.5%,特异度96.1%;RFP耐药基因检测的灵敏度86.4%,特异度97.9%。痰和菌株进行基因芯片检测的结果一致率为97.1%,用痰标本进行基因芯片耐药基因检测报告时间为(3.6±1.5)d,传统药敏报告时间为(65.1±4.9)d。结论利用痰标本进行的基因芯片检测可作为一种高效的MTB耐药筛查方法。     

三种不同方法检查尿液细胞成分的对比

目的：探讨利用不同方法检测尿液细胞成分的符合情况、影响因素及临床价值。方法：采用H-100干化学分析仪、UF-50全自动尿沉渣分析仪和显微镜对740份尿液联合检查。对白细胞和红细胞阳性标本的三种检测结果进行对比。结果：以镜检法为标准UF-50红细胞准确度为89.7%,白细胞准确度为95.8%;干化学法红细胞准确度为88.5%,白细胞准确度为94.3%。UF-50在敏感度和特异度等方面明显优于干化学法。结论：三种检测方法的联合应用更能提高尿液检查的质量,对疾病的诊断、鉴别诊断及病程中动态观察有重要的参考价值。     

BCR-ABL融合基因核酸检测试剂的研发及临床应用

目的研发同时检测多种BCR-ABL融合基因类型的试剂并建立相对应的荧光定量检测方法,同时进行临床标本检测。方法检索GeneBank等生物信息数据库,获得BCR-ABL基因可能的融合亚型,对亚型之间的序列进行比对并设计BCR-ABL融合基因特异性引物,从而应用质粒建立新的荧光定量体系。收集武汉大学人民医院2014年1月1日～11月31日住院部确诊为初发白血病患者30例,其中慢性髓细胞白血病15例,急性淋巴细胞白血病15例,另同时收集体检中心健康对照20例。应用新建立体系、商品试剂盒及直接测序法进行BCR-ABL融合基因的检测。结果新建荧光定量PCR体系准确度验证结果阳性符合率为100%,阴性符合率为100%;特异性验证结果各干扰项检测均为阴性;可检测11种融合基因类型。对BCR-ABL融合基因亚型e13a2,e14a2和e1a2的检测新方法阳性符合率为100%(10/10),阴性符合率为100%(5/5)。对稀有融合基因亚型e19a2检测新方法检测阳性率100%(2/2),商品试剂盒检测阳性率为0%(0/2)。新方法与直接测序法相比阳性符合率为100%(16/16),阴性符合率为100%(14/14)。结论以研发的BCR-ABL融合基因检测试剂而建立的荧光定量方法检测BCR-ABL融合基因与测序结果符合率为100%,是一种快速、可靠的检测方法,可应用于临床。     

免疫荧光法检测阴道加德纳菌的方法学评价

目的探讨运用免疫荧光法检测阴道加德纳菌(GV)的临床应用价值。方法选取2015年4~12月进行细菌性阴道炎检测的2 612例患者作为研究对象,每例患者取双份阴道分泌物标本,分为两组,观察组采用免疫荧光法进行检测,对照组采用分离培养法进行检测,分析免疫荧光法检测GV的敏感度、特异度、准确度以及阳性检出率。结果免疫荧光法检测GV的敏感度为94.31%,特异度为90.75%,准确度为91.20%;分离培养法阳性检出率为34.99%,免疫荧光法阳性检出率为39.01%,两者比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论免疫荧光法检测GV具有灵敏度高、特异性强、阳性检出率高、诊断时间短的优点,适用于临床检测。     

UF-100流式尿沉渣分析仪与显微镜检测红细胞结果对比分析

目的 探讨UF-100尿沉渣分析与手工显微镜检测尿中红细胞的符合情况及影响因素.方法 用UF-100尿沉渣分析仪和尿干化学联机后结果与显微镜结果进行分析比较.结果 通过对800份尿液结果的分析,显微镜检出阳性68例,占8.5％；UF-100检出阳性101例,占12.6％.两种方法检测红细胞的符合率为63.4％,UF-100测红细胞假阳性率为38％.结论 尿液中有形成分复杂,UF-100不能完全取代显微镜镜检,只是大批量标本分析时的一种过筛手段,对UF-100检测红细胞阳性者仍需要用显微镜复检,以提高报告结果的准确性.两种方法联合应用,可以提高检测结果的准确度,具有较高的临床应用价值.     

单管多重PCR技术快速检测四种性传播疾病的病原菌

目的建立一种简单快速、准确可靠，能同时检测淋病奈瑟菌（NG）、人型支原体（MH）、沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（UU）四种病原菌DNA的方法并用于临床标本的检测。方法同时采用以聚合酶链技术（PCR）为基础的单管多重PCR技术、荧光定量PCR技术、EIA技术和微生物培养对185例门诊可疑标本进行双盲实验，并以荧光定量PCR技术加另一种检测技术作为金标准，对单管多重PCR技术检测性传播疾病（STD）病原菌的敏感度、特异度、准确度和重复性进行评价。结果用荧光定量PCR技术加另一种检测技术鉴定出来的119例STD阳性（包括40例混合感染）和66例STD阴性病例与单管多重PCR技术鉴定所得结果符合。该法的敏感度、特异度和符合率分别为10^-9fg／μl，100％，98．3％；18份临床标本连续5d的重复性良好。结论单管多重PCR技术作为检测STD单与多重感染的技术手段，具有简便快速、准确可靠、经济适用等优点，为临床诊断提供了一种新的检测方法。     

噬菌体生物扩增法在白带标本结核分枝杆菌检测中的应用价值

目的 探讨噬菌体生物扩增法在检测白带标本结核分枝杆菌中的应用价值.方法 应用噬菌体生物扩增法检测30例女性生殖器结核疑似患者白带标本,以改良罗氏培养法为对照,评价噬菌体生物扩增法检测白带标本中结核分枝杆菌的应用价值.结果 30例白带标本中,噬菌体生物扩增法检测阳性率为20.00%(6/30),改良罗氏培养法阳性率为13.33%(4/30),2种方法检测结果阳性符合率为75.00%(3/4),阴性符合率为88.46%(23/26);总符合率为86.67%(26/30).2种方法检测结果比较差异无统计学意义(χ2=0.25,P>0.05).结论噬菌体生物扩增法检测白带标本中的结核分枝杆菌具有较高的特异度和准确度,适于临床推广应用.     

AUTOF MS 1000 质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株鉴定能力的评估

目的　评估Autof MS 1000 质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株的鉴定能力。方法　参考CLSI M52 标准对 Autof MS 1000 质谱鉴定系统进行评估。菌株鉴定的评估指标包括准确度和精密度。准确度评估以Bruker MALDI-TOF 作为参比设备,以Autof MS 1000 为待评估设备,选取231 株能够涵盖实验室80% ～ 90% 的常见分离菌株及1 株室间 质评菌株作为检测标本,包括革兰氏阳性需氧菌77 株,革兰氏阴性需氧菌95 株,厌氧菌30 株,酵母样真菌30 株,待 评估设备鉴定结果与参比设备鉴定结果一致时判断为相符,若结果不一致则以测序方法（细菌为16S RNA,真菌为ITS 区测序）鉴定结果为准。精密度评估为选取12 株室内质控菌株和临床分离菌株作为检测标本,在Autof MS 1000 质谱 鉴定系统上进行重复性测试,每株菌重复检测3 次,判断其鉴定结果的一致性。以准确度大于90％、精密度大于95％ 为判断合格标准。结果　232 株临床实验室常见分离菌株鉴定结果准确度为100%;12 株室内质控菌株和临床分离菌株 重复性检测结果的精密度为100%。结论　Autof MS 1000 质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株鉴定的准确度和精密度 都很高,并且具有快速、低耗及易操作等优势,建议可在临床微生物实验室推广使用。     

胶体金法检测血清人绒毛膜促性腺激素用于宫外孕鉴别诊断的可行性研究

目的通过评价早早孕胶体金法的检测性能,给临床急腹症——宫外孕排除提供及时准确的辅助诊断信息。方法选取303例临床门诊急诊血清标本,采用早早孕纸条胶体金法检测人绒毛膜促性腺激素(HCG),同时采用ECIQ化学发光免疫法检测β-HCG验证。结果采用胶体金试纸法检测303例标本中,阴性108例,弱阳性89例,阳性29例,强阳性77例,化学发光免疫法检测β-HCG发现胶体金试纸法检测的89例弱阳性性标本中有4例为假阳性,其余结果均一致。两种检测结果经McNemar检验,两种方法优劣性差异无统计学意义(P0.05)。结论胶体金试纸法操作简便快速,可作为急诊宫外孕初筛的一项辅助指标。     

精液中纳米细菌检测方法的建立

目的建立简便、快速、高效检测精液中纳米细菌的荧光定量RT-PCR法。方法采取12例睾丸微石症患者精液标本及12例健康人正常对照精液标本,进行PCR检测,并对RT-PCR重复性,灵敏度,特异性验证。结果 12例睾丸微石症患者精液标本中,6例标本出现阳性,阳性率占50%,健康正常对照精液标本检出1例阳性。建立RT-PCR一步法检测精液中纳米细菌,灵敏度达到500 PEU/ml,Ct变异系数均5%,重复性好。结论荧光定量RT-PCR法检测睾丸微石症患者精液纳米细菌方法可靠,简便准确,稳定性好。     

Trustline结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测试剂盒(胶体金法)的临床应用评价

目的 评价Trustline结核抗体IgG/IgM检测试剂盒临床应用效果。 方法 选用3家医院的1009份血清标本,其中628份为结核病患者血清(308例菌阳病例,320例菌阴病例);对照组381份非结核病血清。采用Trustline试剂盒及一种已上市的试剂盒(对照试剂盒)分别检测1009份血清,计算多项检测指标,从而评价试剂盒的检测效果。 结果 通过检测1009份临床血清标本, Trustline试剂盒检测血清抗体(IgG+IgM)的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、 Youden 指数分别为61.3%、79.8%、 83.3%、 55.6% 和0.411,对照试剂盒检测血清抗体(IgG) 的结果分别为53.7%、89.0%、88.9%、 53.8%和0.426。经统计分析表明Trustline试剂盒的灵敏度显著优于对照试剂盒(P0.01),特异度低于对照试剂盒(P0.01),但阳性诊断效率和阴性诊断效率方面差异无统计学意义,Youden指数相接近。 进一步分析显示Trustline试剂盒对菌阳样本及菌阴样本的检出率分别77.6%和44.7%,对照试剂盒则为67.9%和40.0%,对菌阳样本检出率的差异有统计学意义。检测1009份标本,Trustline试剂盒共得IgM阳性35例,其中结核组阳性30例(4.8%),非结核组阳性5例(1.3%)。 结论 Trustline试剂盒检测结核抗体的灵敏度显著优于对照结核抗体试剂盒,并可同时用于检测IgG/IgM抗体,可以应用于结核病的快速诊断。     

电化学发光免疫分析法与梅毒螺旋体抗体法在梅毒诊断中应用对比

比较电化学发光免疫分析法(ECLIA)与梅毒螺旋体抗体法(ELISA)在梅毒诊断中的应用价值。选择2014年12月~2015年12月我院收治的疑似梅毒患者120例,经血清学试验、临床症状观察、询问病史等手段确诊为梅毒患者76例,非梅毒患者44例。所有患者均给予ECLIA与ELISA进行检测,比较两组检测方法的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值。ELISA检测的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值分别为98.68%、100.00%、99.17%、100%、97.78%,ECLIA分别为100.00%、97.73%、99.17%、98.70%、100.00%,两组相比,无显著差异(P0.05)。ECLIA与ELISA检测梅毒均具有非常高的灵敏度、特异度、准确度,可用于梅毒临床筛查与诊断中;此外,ECLIA操作简单、用时较短、可重复操作、无污染,故应用价值更为显著。     

微流控技术在急诊降钙素原检测中的应用

目的 分析一种微流控免疫荧光法与罗氏电化学发光法定量测定降钙素原(PCT)的结果一致性.方法 以罗氏电化学发光法为对照方法,微流控技术为实验方法,分别检测来自140例患者的血液标本,对照方法检测标本类型为血浆,实验方法检测标本类型为血浆、同源全血、同源血清和同源末梢血,对检测结果进行相关性和一致性分析.以罗氏电化学发光法检测结果为金标准,不同PCT质量浓度作为医学决定水平,分析微流控技术检测的灵敏度和特异度.结果 对照方法检测血浆和实验方法检测血浆、同源全血、同源血清和同源末梢血的线性相关系数r2分别为0.982、0.988、0.983、0.975,平均偏倚分别为-0.29、-0.21、-0.14、-0.11 ng/mL;实验方法检测血浆和同源全血、同源血清、同源末梢血的r2分别为0.995、0.992、0.983,平均偏倚分别为0.32、0、0.23 ng/mL;以0.5 ng/mL的PCT为决定水平时,实验方法检测血浆、同源全血、同源血清、同源末梢血的灵敏度分别为97％、91％、98％、83％,特异度分别为95％、95％、100％、100％,一致性分析Kappa值分别为0.914、0.868、0.970、0.885;以2.0 ng/mL的PCT为决定水平时,实验方法检测血浆、同源全血、同源血清、同源末梢血的灵敏度分别为100％、100％、98％、100％,特异度分别为91％、89％、100％、88％,一致性分析Kappa值分别为0.940、0.905、0.939、0.906.结论 微流控技术与罗氏电化学发光法检测结果具有良好的一致性,可为临床提供更加快速、准确、标本类型更为多样化的PCT即时检测方法,缩短急诊检验的报告时间.     

两种方法检测孕妇乙肝表面抗原的结果分析

目的分析酶免疫法与胶体金法检测孕妇乙肝表面抗原的结果,为临床提供参考依据。方法利用酶免疫法测定本院孕妇乙肝5项,收集乙肝表面抗原阳性血清与阴性血清共260例,其中阳性160例,阴性100例,采用胶体金法检测,对检测结果进行统计分析。结果酶免疫法与胶体金检测共有150例阳性结果相吻合,100例阴性结果完全相同,10例结果不符合,金标法阳性预测率为98.3%,特异性为100.0%,灵敏度为98.1%,准确度为98.2%,两者比较差异无统计学意义。结论金标法与酶免疫法检测相比,具有快速、简便等优点,能满足临产孕妇急诊检测的需要,可以用来筛查,但不能完全取代酶免疫法。