过氧亚硝酸诱导生成硫中心自由基的荧光表征

将4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基用于标记9-羧基-吖啶,得到自旋标记荧光探针4-(9-吖啶酯)-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基. 以谷胱甘肽作为蛋白质肽模型,研究了活性氧过氧亚硝酸诱导其损伤产生的硫中心自由基的荧光表征. 自旋标记荧光探针为弱荧光物质,当与硫中心自由基作用后,导致其荧光增强,从而可对硫中心自由基进行表征.     

2,2′-联吡啶荧光探针快速检测纳米TiO2薄膜的光催化活性

紫外光照射浸有纳米TiO2薄膜的溶液,能够产生羟自由基,其中羟自由基又能将荧光微弱的2,2′-联吡啶羟基化,其反应体系的荧光增强.利用2,2′-联吡啶作为荧光探针,通过检测其羟基化产物的生成速率来迅速、准确地评价纳米TiO2薄膜的光催化活性.通过与传统的染料法对比,荧光探针法极大地缩短了检测时间,从180 min减少到8 min,得出2,2′-联吡啶荧光探针法评价纳米TiO2薄膜光催化活性具有可行性.     

2，2＇-联吡啶荧光探针快速检测纳米TiO2薄膜的光催化活性

紫外光照射浸有纳米TiO2薄膜的溶液，能够产生羟自由基，其中羟自由基又能将荧光微弱的2，2’-联吡啶羟基化，其反应体系的荧光增强。利用2，2’-联吡啶作为荧光探针，通过检测其羟基化产物的生成速率来迅速、准确地评价纳米TiO2薄膜的光催化活性。通过与传统的染料法对比，荧光探针法极大地缩短了检测时间，从180min减少到8min，得出2，2’-联吡啶荧光探针法评价纳米TiO2薄膜光催化活性具有可行性。     

明日叶黄酮类化合物清除羟基自由基活性研究

为了研究明日叶黄酮类化合物对羟基自由基的清除作用,以明日叶（主要取叶片）为原料,用体积分数为65％乙醇提取明日叶总黄酮,测定其总黄酮含量.通过Fenton反应体系产生羟基自由基,利用明日叶提取液中的功能成分黄酮类化合物对羟基自由基的清除作用进行研究.结果表明：明日叶提取物总黄酮质量分数为10.18％,且黄酮类化合物对羟基自由基有较强清除效力,当提取物总黄酮浓度在0.1～1.0 mg/mL范围内,其与清除率呈正相关.明日叶中黄酮类化合物对羟基自由基有较强清除效力,作为天然抗氧化产品开发具有一定价值.     

含有酚羟基的吖嗪类荧光探针的阴离子识别与传感研究

设计合成了含有酚羟基的萘吖嗪类荧光探针分子,利用紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱研究了探针分子的阴离子识别和光化学传感性能。研究结果表明,该探针分子可以通过比色（紫外-可见吸收光谱）和荧光发射光谱双通道识别检测氟离子。该探针分子是一类比率型阴离子荧光探针,作用方式为探针分子酚羟基的去质子化作用,这种激发态质子转移（ESIPT）是探针分子呈现比率荧光特性的原因。通过本实验不但可以让学生掌握紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱仪的使用方法,还能培养学生在分子识别与光化学传感领域的科研兴趣。     

羟基自由基与鸟苷作用分子机理的荧光分析研究

通过鸟苷与H2O2光解反应,形成了荧光物质8-羟基鸟苷,分析了8-羟基鸟苷在不同条件下存在的形式及不同存在形式与荧光强度的关系。探讨了羟基自由基产生及其与鸟苷反应的条件,根据荧光强度与羟基自由基的量效关系,研究了羟基自由基与鸟苷作用的分子机理,探讨了茶叶提取液和大蒜提取液通过清除羟基自由基对鸟苷的保护作用。     

荧光法研究硒酶模型化合物消除.OH自由基的作用

利用Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟基自由基与苯甲酸生成具有荧光的羟化苯甲酸，用荧光法间接测定羟基自由基的含量．用荧光法研究新合成的５种硒酶模型化合物对羟基自由基的清除作用．结果表明，新合成的硒酶模型化合物对羟基自由基有良好的清除作用．该法具有简便、快速、灵敏等特点．     

石墨烯量子点荧光探针对碱性磷酸酶活性的高效检测

基于苯醌类物质静态猝灭石墨烯量子点(GQDs)荧光的特性, 构建了一种利用GQDs荧光探针实时、 高效检测碱性磷酸酶(ALP)活性的新方法. 过氧化氢在辣根过氧化物酶催化作用下产生羟基自由基并将邻苯二酚氧化成邻苯醌, 导致GQDs的荧光猝灭. ALP催化抗坏血酸-2-磷酸反应生成抗坏血酸, 具有较强还原性的抗坏血酸能清除溶液中的过氧化氢和羟基自由基, 抑制邻苯醌的产生, 使GQDs的荧光猝灭效果减弱. 随着ALP活性的增大, GQDs在440 nm处的荧光强度不断增强, 由此建立了一种高效检测ALP活性的新方法. 在最佳实验条件下, 该GQDs荧光探针对ALP活性的检出限为0.084 U/L. 将此方法成功用于人血清中ALP活性的检测, 为与ALP相关疾病的诊断与治疗提供了理论基础.     

脂质体荧光探针检测磷脂酶C的活性

建立了一种以荧光标记脂质体为探针检测磷脂酶 C (PLC) 活性的新方法.此荧光探针是由二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)和丽丝胺罗丹明B标记的荧光磷脂(Liss Rhod PE)通过自组装形成有序的荧光标记脂质体,探针脂质体中Liss Rhod PE由于相互之间距离靠近产生自猝灭效应,因而作为探针的脂质体并不表现出荧光性质.当在此探针溶液中加入目标物PLC,PLC可以水解切割标记在磷脂酰基二位上的荧光团罗丹明,使其从脂质体释放到溶液中,导致自猝灭效应的减弱,溶液荧光信号增强,以此实现对PLC活性的检测.使用此探针检测PLC活性,荧光强度的增加值与PLC浓度在5~300 U/L范围内呈良好的线性关系,检出限为2 U/L(S/N=3).此外,此探针还可用于PLC抑制剂的筛选.     

芯片毛细管电泳评估脂质体介导超氧化物歧化酶减低细胞内氧化应激

超氧化物歧化酶(SOD)可用作抗氧化的药物。它能催化并清除细胞内的活性氧组分(ROS),保护细胞免受自由基的氧化破坏。但是由于SOD分子量较大,难以透过细胞膜进入细胞内,显著降低了SOD的药效。本研究用激光共聚焦荧光显微镜拍摄的荧光图像说明,纳米脂质体可介导SOD进入细胞。用芯片毛细管电泳激光诱导荧光分析法(MCE-LIF)测定单细胞中ROS和谷胱甘肽(GSH)的荧光信号强度,评估了用脂质体包裹的SOD与细胞作用的抗氧化效果。用脂质体包裹的SOD与肝癌细胞共培养2h,与直接用SOD作用于肝癌细胞相比较,细胞内ROS明显降低,GSH明显提高。实验结果说明,用脂质体包裹SOD是一种减低细胞内氧化应激的有效给药途径。     

荧光自旋捕获探针的合成及ESR捕获研究

设计合成了具有荧光基团的新型硝酮类自由基捕获探针并对其结构进行了表征.自由基捕获实验结果表明,该探针能实现对超氧阴离子自由基与碳中心自由基的捕获.此外,该自由基捕获探针反应产物的荧光强度与被捕获自由基浓度之间存在相关性,有望建立依据荧光强度分析被捕获自由基浓度的新方法.     

基于氟引发串联释放的氟硼二吡咯类荧光探针的合成及其识别性能

以4-羟基氟硼二吡咯为荧光团,叔丁基二苯基硅基(TBDPS)作活泼羟基的保护基,设计合成了一种新颖的基于氟离子切断硅氧键,引发释放的氟硼二吡咯类氟离子荧光探针R.光谱实验研究表明,该荧光探针和氟离子作用后,紫外吸收光谱在605 nm处出现新的吸收峰,含R的溶液由橙黄色变成蓝色;荧光发射光谱中在514 nm处最大发射峰出现下降,荧光颜色由绿色变成荧光淬灭.此外,将荧光探针R应用于试纸条件下也能实现对氟离子的裸眼检测.     

氧氟沙星-Fenton体系荧光法测定和评价中草药抗氧化活性北大核心CSCD

研究利用荧光法测定和评价中草药抗氧化活性。氧氟沙星(Ofloxacin,OFL)能产生强荧光,在酸性环境中,Fenton反应产生的羟基自由基(·OH)能氧化OFL使其荧光猝灭,加入抗氧化剂或含有抗氧化成分的中草药可清除·OH使与OFL反应的·OH量减少,导致OFL荧光猝灭程度减弱。OFL荧光猝灭程度与加入抗氧化剂量或中草药中抗氧化成分的量呈定量关系,据此建立了一种测定和评价中草药抗氧化活性的新方法。应用该法测定和评价了7种常见中草药抗氧化活性,其中夏枯草、连翘和黄连的抗氧化活性较强。该方法操作简单,体系稳定,可用于中草药抗氧化活性测定和评价。     

3-羟基邻苯二甲酰亚胺全水溶性次氯酸荧光探针及其应用

利用二甲基硫代氨基甲酸酯对次氯酸(HOCl)的特异性和吡啶盐的水溶性,以4-羟基异苯并呋喃-1,3-二酮作为原料,设计合成了一种检测HOCl的全水溶性激发态分子内质子转移(ESIPT)荧光探针.由于二甲氨基硫代甲酸酯对羟基的保护,探针分子内的ESIPT作用被阻碍,自身无荧光;当加入HOCl时,HOCl氧化二甲氨基硫代甲...     

掺杂Yb的TiO2光催化剂的制备和性能

采用溶胶-凝胶法制备了Yb掺杂TiO2纳米光催化剂,并通过XRD和BET等手段进行了表征.以对苯二甲酸作为探针分子,结合化学荧光技术研究了光催化剂表面羟基自由基的生成;并以苯酚为光催化降解反应模型化合物,考察了光催化剂的活性.测定了苯酚在TiO2和Yb掺杂TiO2光催化剂上的吸附常数.结果表明:Yb掺杂使TiO2的粒径减小,比表面积增大,同时导致羟基自由基的生成速率增大.Yb掺杂有利于反应底物在催化剂表面的吸附,Yb的最佳掺入量为Yb/Ti摩尔比=0.8%.     

新型脱氢枞胺衍生物的合成及其抗自由基活性

通过不同的方法在脱氢枞胺中引入酰腙、没食子酸、肟、异烟基等对清除自由基有效果的基团,设计合成了几种新型的脱氢枞胺衍生物.利用1H NMR,13C NMR,IR和HRMS对所有合成的化合物进行了结构表征.测试了所合成的化合物对清除超氧阴离子(O2-)和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的活性,其中N-(3,4,5-三羟基苯甲酰基)-脱氢枞胺(6)对O-2的抑制率达到38.18%,是常用抗氧化药物Vc(18.35%)的两倍以上;对(DPPH·)的半数抑制浓度为0.002×103 mg/L,远优于Vc(0.236×103 mg/L).     

红花黄色素抗氧化活性研究

通过考察红花黄色素(SY)及其主要化学成分对羟基自由基介导2-脱氧核糖氧化降解的抑制作用,以及对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)的清除能力,探究SY的体外抗氧化活性及其抗氧化的主要有效成分.通过Fenton反应产生羟基自由基,用紫外分光光度计检测了SY及其主要化学成分对2-脱氧核糖降解的抑制作用和对DPPH·的清除能力,同时对红花黄色素B(SYB)抑制2-脱氧核糖降解的作用机制做了初步研究.结果表明SY抑制Fenton反应对2-脱氧核糖的氧化降解的IC50为256.79 μg/mL,对DPPH·清除的IC50值为27.15μg/mL.羟基红花黄色素A(HSYA)和SYB是SY中抗氧化的两个有效成分,抑制2-脱氧核糖的氧化降解的IC50分别为220.68 μg/mL和207.01μg/mL;对DPPH·清除的IC50值分别为55.81 μg/mL和41.25μg/mL.SYB对2-脱氧核糖氧化降解的抑制作用机理研究表明,SYB除了对Fenton反应产生的羟基自由基具有直接清除作用外,又可通过与Fe2+离子的络合作用而阻断Fenton反应产生羟基自由基.由此可知SY具有明显的体外抗氧化活性,SYB和HSYA为其主要抗氧化活性成分.     

荧光分子开关的合成与性能测定综合实验教学设计

设计合成了含有酚羟基的BODIPY基荧光探针分子1,通过紫外-可见吸收光谱、荧光发射光谱和氢谱核磁滴定手段研究了探针分子1的阴离子识别与传感性能。研究发现探针分子1可以通过氢键作用选择性键合氟离子,而1-F-复合物可以作为硫酸氢根离子的关-开型荧光探针。探针分子1还可以进一步发展为氟离子和硫酸氢根离子调控的荧光分子开关。结合课堂教学和拓展阅读,使学生进一步了解了荧光分子开关的知识,培养了学生科研兴趣。     

DNA-Lipid探针用于细胞膜外pH值的原位成像

将二酰基脂质体自动偶联到两端标有Cy3和Cy5的具有i-motif结构的DNA链上,形成二酰基脂质体-DNA共轭物(DNA-lipid)探针。二酰基脂质体与细胞膜之间强烈的疏水作用可使该探针直接插入细胞膜表面,实现缺氧和常氧条件下细胞外pH值的比率型检测。在高pH值条件下,具有i-motif结构的DNA链两端的荧光基团处于分离状态,无FRET效应;在低pH值条件下,具有i-motif结构的DNA链在细胞膜表面形成四聚体结构,两端的荧光基团相互靠近,产生强的FRET效应。通过测定两种荧光基团的荧光强度比值实现了pH值的定量检测。利用此探针对pH值的灵敏响应实现了对缺氧环境中细胞外pH值的精确测量,在生理病理学上具有重大意义。     

水解珍珠体外抗氧化活性的研究

本文以L-抗坏血酸(VC)为对照组,测定水解珍珠对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基的清除能力,研究水解珍珠的体外抗氧化活性。结果表明:水解珍珠对DPPH和ABTS自由基具有较强的清除能力,IC_(50)分别为0.07%和0.14%;而对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力相对较弱,IC_(50)分别为12.60%和7.65%;其IC_(50)均低于VC,差异具有统计学意义(p0.05)。另外,水解珍珠对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基的清除率都随着体积分数的增大而显著增加(p0.05)。水解珍珠具备较高的抗氧化能力,可为珍珠资源的开发利用提供理论依据。