氯胺酮对家兔TNFα、IL-8的影响

目的研究氯胺酮对TNFα、IL-8水平和急性肺损伤（ALI）的彩响。方法采用两次注射LPS的方法复制家兔ALl模型。动物随机分为四组（6只／组）：NS组（阴性对照）、LPS组（阳性对照）、氯胺酮1组（K，组）和氟胺酮2组（K，组）。从第2次LPS注射前即刻开始，分别在0、2、4、6、8h测定各组家免血浆TNFα、IL-8浓度及8h时支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNFα、IL-8浓度，同时进行各组肺组织病理学检查。结果NS组各指标无明显变化（P〉0．05）。LPS组血浆和BALF中TNFα、IL-8浓度均显著高于NS组（P〈0．01）。双肺明显肿胀，表面有点片状出血，轻挤切面有水肿液溢出，镜下有明显肺不张和肺泡萎陷，肺问质增厚，内有大量白细胞浸润，肺血管淤血。K1、K2组的变化类似LPS组，但程度更轻，K2组又轻于K1组。结论氨胺酮可抑制家兔血浆和BALF中TNFα、IL-8浓度的升高，减轻ALI程度。     

己酮可可碱对内毒素血症大鼠胃黏膜损伤的保护作用

目的探讨己酮可可碱（PTX）对内毒素血症大鼠胃黏膜损伤的保护作用。方法Wistar大鼠30只随机分为三组：假手术对照组、内毒素组和PTX治疗组,每组10只。检测胃黏膜细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达,并测定各组动物血清TNF—α、IL-1β水平。结果内毒素组ICAM．1表达与假手术组比较明显增高（P〈0．01）,其血清TNF-α和IL-1β水平与假手术组比较也明显增高（P〈0．01）。PTX治疗后,该组血清TNF-α、IL-1β水平和胃黏膜组织ICAM-1蛋白表达与内毒素组比较明显减弱（P〈0．01）。结论ICAM-1和TNF-α、IL-1β在内毒素急性胃黏膜损伤发病机制中起重要作用,PTX可以降低血循环TNF-α、IL-1β水平和下调胃黏膜组织中ICAM-1表达,减轻内毒素对胃黏膜上皮组织的损伤,保护胃黏膜。     

TREM-1siRNA对内毒素刺激巨噬细胞杉RAW264．7分泌炎性因子影响

目的探讨靶向小鼠髓样细胞触发受体1（triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1）的小分子干扰RNA（small inter-feting RNA,siRNA）在体外对内毒素刺激小鼠巨噬细胞株RAW264．7分泌肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白纽胞介素1p（interleukin1B,IL-1β）的抑制作用。方法合成1条靶向小鼠TREM-1分子的siRNA序列,以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）作为报告因子,荧光显微镜观察EGFP的荧光强度,验证siRNA序列的干扰率。以pLKO1-1为载体构建针对TREM-1的pLKO1．1-TREM1-shRNA干扰质粒。将小鼠巨噬细胞株RAW264．7分为4组：空白组;内毒素组（LPS组）;空质粒组（pLKO1．1组）：采用脂质体法将pLKO1．1转染细胞;干扰组（siRNA组）：将pLKO1．1-TREM1-shRNA转染细胞;转染72h后用内毒素刺激24h,并以实时定量PCR分别检测TREM．1、TNF-α与IL-1β的表达;以ELISA分别检测上清液中TNF-α、IL-1β含量。结果与LPS组比较,siRNA组中TREM．1、TNF—α、IL-1β的mRNA显著下降（P〈0．01）,上清液中TNF-α、IL-1β含量明显降低（P〈0．01）。结论小分子干扰RNA可能通过抑制TREM-1基因的表达而减少内毒素诱导小鼠巨噬细胞264．7中TNF-α、IL-1β的分泌。     

地塞米松对哮喘豚鼠气道白介素-5、白介素-10mRNA表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的：检测地塞米松对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素-5（IL-5）mRNA及IL-10 mRNA表达水平及嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡率。方法：健康雄性Hartley系豚鼠随机分为地塞米松组、哮喘组和正常对照组。采用原位细胞凋亡（TUNEL）、RTPCR技术检测BALF中EOS凋亡、IL-5 mRNA及IL-10 mRNA表达水平。结果：地塞米松组BALF中的EOS较哮喘组明显下降，EOS凋亡明显上升（P〈0．01）；IL-5 mRNA水平较哮喘组明显下降，IL-10 mRNA水平较哮喘组明显升高（P〈0.05）。结论：地塞米松可以通过减少IL-5 mRNA的表达，增加IL-10 mRNA的表达有效抑制哮喘豚鼠气道EOS的上升，增加EOS的凋亡。     

酮替芬对高糖高脂饮食诱导肥胖模型大鼠的减肥作用简

目的：探讨酮替芬对高糖高脂饮食诱导的大鼠肥胖模型的减肥作用及其机制。方法：SD大鼠随机分成肥胖模型组、酮替芬干预组和正常对照组,肥胖模型组和酮替芬干预组以高糖高脂饲料饲喂,正常对照组以基础饲料饲喂,酮替芬干预组每天灌胃给予酮替芬0．09mg／kg,持续12周。称重,计算Lee’s指数,检测空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、瘦素（LEP）、游离脂肪酸（FFA）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）;检测白色脂肪解偶联蛋白2（UCP2）mRNA的表达。结果：酮替芬明显降低肥胖模型大鼠的体质量及Lee’S指数（P〈0．05）,降低FBG、FINS和LEP水平（P〈0．05）,降低FFA、TG和LDL—C水平（P〈0．05）和IL-6、TNF—α水平（P〈0．05）,而增加UCP2mRNA的表达水平（P〈0．05）。结论：酮替芬能够降低肥胖模型大鼠炎症介质和游离脂肪酸水平,减轻高胰岛素血症和高瘦素血症,促进脂肪组织能量代谢,实现减肥作用。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠急性肺损伤支气管肺泡灌洗液TNF—α和IL-6水平的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚（PHC）预处理对大鼠急性肺损伤支气管肺泡灌洗液TNF—α和IL-6水平的影响。方法48例SD大鼠,随机分4组：C组：尾静脉注射生理盐水1ml／kg;M组：尾静脉注射大肠杆菌脂多糖（LPS）5mg／kg;P1组：尾静脉注射大肠杆菌LPS5mg／kg＋PHC0．25mg／kg;P2组：尾静脉注射大肠杆菌LPS5mg／kg＋PHC0．75mg／kg。每组12只。观察与C组和M组比较,支气管肺泡灌洗液TNF—α和IL-6结果。结果TNF-α：与C组比较,3组升高（P〈0．01）;与M组比较,P1和P2组降低（P〈0．01）;与P1组比较,P2组降低（P〈0．05）。IL-6：与C组比较,3组升高（P〈0．01）;与M组比较,P1和P2组降低（P〈0．01）;与P1组比较,P2组降低（P〈0．05）。结论PHC预处理能有效减低脓毒症大鼠肺组织血浆TNF—α和IL-6水平,并且在一定剂量范围内呈剂量效应关系。     

乙酰唑胺对内毒素血症鼠胃黏膜水通道蛋白4表达的影响

目的探讨乙酰唑胺对内毒素血症鼠胃黏膜水通道蛋白4（AQP4）表达的影响及意义。方法健康SD大鼠30只,随机分成三组：对照组、内毒素血症组（EDT组）和乙酰唑胺作用组（ATL组）,每组10只,免疫组织化学法检测各组大鼠胃黏膜中AQP4的表达,并同时放免法测定其血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平。结果EDT组AQP4蛋白表达及血清TNF-α、IL-1β水平较对照组明显增加（均P〈0．01）。乙酰唑胺作用后,A1L组的胃黏膜上皮水通道AQP4蛋白表达及血清TNF—α、IL-1β水平均明显低于EDT组（均P〈0．01）。结论AQP4表达的增加和血清TNF-α、IL-1β水平增高参与了内毒素血症大鼠急性胃黏膜组织的损害。乙酰唑胺可下调胃黏膜上皮水通道蛋白AQP4的表达并降低血清TNF—α,IL-1β水平,减轻内毒素对胃黏膜上皮组织造成的损害,保护胃黏膜组织。     

罗红霉素对哮喘大鼠NF—κB及气道炎症的影响

目的：观察罗红霉素对哮喘大鼠NF-κB、气道炎症、气道高反应性的影响。方法：30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组（C组）、哮喘组（A组）、罗红霉素组（R组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）制备哮喘大鼠模型。各组大鼠在末次激发后24h,检测气道反应性后放血处死：ELISA测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的IL-4、IL-5、IFN-γ的浓度;免疫组化检测支气管上皮NF-κB p65活化。结果：哮喘组大鼠气道反应性高于对照组（P〈0．01）,罗红霉素组与哮喘组比较气道反应性下降（P〈0．05）;BALF中IL-4、IL-5,哮喘组含量均高于对照组（P〈0．01）,罗红霉素组均低于哮喘组（P〈0．01）,罗红霉素组BALF中IFN-γ低于对照组（P〈0．01）但高于哮喘组;哮喘组大鼠支气管上皮NF-κB蛋白的活化明显高于对照组,罗红霉素组低于哮喘组（P〈0．01）。支气管上皮NF—κB p65活化与BALF中的IL-4、IL-5的含量呈显著正相关（r=0．856,P〈0．01;r=0．912,P〈0．01）;大鼠BALF中的IL-4、IL-5的含量与Raw增加25％时（PC25Raw）呈显著负相关（r=-0．713,P〈0．01;r=-0．772,P〈0．01）,与Cdyn下降15％时（PC15Cdyn）呈显著负相关（r=-0．738,P〈0．01;r=-0．818,P〈0．01）。结论：罗红霉素可能部分通过抑制NF-κB活性而纠正哮喘Th1／Th2细胞因子失衡,罗红霉素降低哮喘大鼠的气道反应性可能和减少IL-4、IL-5的表达有关。     

乙酰半胱氨酸抑制脂多糖诱导的人肺NCI-H292细胞粘蛋白MUC5AC表达

目的:研究乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的气道粘蛋白MUC5AC表达的调控作用并探讨可能的机制.方法:体外培养人气道上皮细胞NCI-H292,实验分为对照组、黏液高表达组(LPS组)及乙酰半胱氨酸干预组(NAC+LPS组),分别采用Real time PCR和Western blot方法检测NCI-H292细胞MUC5AC、Nrf2的mRNA含量及蛋白表达水平.结果:LPS刺激NCI-H292细胞表达MUC5AC,MUC5AC mRNA及蛋白表达分别增加7.169±1.785及1.473±0.098(P均<0.05).NAC促进NCI-H292细胞Nrf2表达,抑制LPS诱导的MUC5AC表达(P<0.05),以30mM最为显著.结论:乙酰半胱氨酸通过促进Nrf2基因表达,抑制气道上皮细胞粘蛋白MUC5AC分泌.     

大黄对急性胆囊炎患者炎性反应的影响

目的探讨大黄对急性胆囊炎患者炎性反应的影响。方法70例急性胆囊炎患者按数字表法随机分成对照组和治疗组各35例,对照组给予常规治疗,治疗组在对照组治疗的基础上给予大黄粉5g吞服,3次／d,观察两组治疗前后内毒素、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-2（IL-2）水平变化。结果两组内毒索、TNF-α、IL-6在治疗后均明显下降（P〈0．05）,而治疗组的疗效更优于对照组（P〈0．05）;两组IL-2水平在治疗后均明显提高（P〈0．05）,而治疗组较对照组更明显（P〈0．05）。结论大黄能降低急性胆囊炎患者内毒素、TNF—α、IL-6水平,提高IL-2水平,从而减轻炎性反应。     

红花黄色素对大鼠气道黏液高分泌的治疗作用

目的讨论红花黄色素在气道慢性炎症黏液高分泌机制中的作用。方法以注射用红花黄色素为可变因素设为治疗组,应用中性粒细胞弹力酶雾化吸入法建立大鼠气道黏液高分泌机制病理模型,注射用水设为对照组,用RT-PCR、ELISA法检测各组气道上皮黏蛋白的表达情况,以westernblot和放射活性法分别测定蛋白激酶C（PKC）的蛋白水平以及PKC活性。结果红花黄色素组的黏蛋白mRNA转录和蛋白表达水平均较对照组明显降低,治疗组组织中蛋白激酶C（PKC）蛋白水平及活性也有明显下降。结论红花黄色素可通过抑制PKC活性而抑制大鼠气道黏液高分泌。     

IL-1β对人鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC5AC mRNA的表达的影响

目的探讨IL-1β对鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC5ACmRNA表达的影响。方法在培养的第二代人鼻黏膜上皮细胞加入IL-1β(10ng/ml)刺激24h后,采用荧光定量巢式RT-PCR检测人鼻黏膜上皮细胞中MUC5ACmRNA的定量表达。结果在培养的鼻黏膜上皮细胞上检测到MUC5ACmRNA的表达,IL-1β刺激组MUC5ACmRNA定量表达[(4.60±1.89)108拷贝/μg]均高于对照组[(2.50±1.40)107拷贝/μg],差异具有统计学意义(P<0.05﹚。结论 IL-1β诱导鼻黏膜上皮细胞中MUC5ACmRNA的表达增高,提示IL-1β可能具有上调鼻黏膜上皮细胞黏蛋白mRNA的表达的作用。     

氨溴索对急性肺损伤兔E-选择素和细胞间黏附分子-1的影响

目的观察氨溴索对油酸诱导的兔急性肺损伤E－选择素和ICAM－1的影响,探讨氨溴索抗急性肺损伤作用及其机制。方法健康日本大耳白兔24只,随机分为3组：生理盐水组（NS组）,油酸组（OA组）。氨溴索治疗组（AMB组）。采用耳缘静脉注射复制兔油酸型急性肺损伤模型。检测各组动脉氧分压、肺组织湿干比（W／D）,光镜观察肺组织病理改变;检测在静注氨澳索（AMB）或生理盐水6h后BALF和肺组织匀浆白细胞介素－1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子－α（TNF-α）、E-选择素、细胞间黏附分子－1（ICAM－1）含量。结果AMB组肺W／D显著低于OA组（P〈0．01）,但显著高于NS组（P〈0．05）,肺组织病理损伤明显减轻;用药前AMB组和OA组PaO2显著低于NS组;用药后6小时,AMB组PaO2显著高于OA组（P〈0．01）,但显著低于NS组（P〈0．01）。AMB组BALF和肺组织匀浆中IL-10、TNF-α、E-选择素及ICAM－1含量含量均显著低于OA组（P〈0．01）,但均高于NS组（P〈0．01）。BALF和肺组织匀浆中E-选择素、ICAM－1含量与相应标本的IL－1β、TNF-α含量有高度的正相关关系（P〈0．001）。结论氮溴索有较好的抗急性肺损伤的作用。氨溴索能抑制促炎细胞因子等的释放及肺组织细胞黏附分子的合成,部分阻止多形核白细胞（PMN）与内皮细胞的粘附。进而阻止PMN的跨膜运动和其在肺内的聚集．从而发挥抗急性肺损伤的作用。     

气道黏液高分泌诱导因素的研究

目的比较不同因素对气道黏液高分泌的诱导作用,为动物模型制造和临床防治提供指导。方法Wistar大鼠30只随机分成3组:正常组雾化吸入生理盐水;对照组雾化吸入脂多糖(LPS);试验组雾化吸入中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学和斑点印迹法分别测定支气管肺泡灌洗液中黏蛋白(MUC)的含量、气道上皮MUC5AC以及MUC5AC mRNA表达。结果试验组和对照组比正常组的MUC,MUC 5AC以及MUC5AC mRNA水平均显著增加(P<0.01);试验组MUC,MUC5AC以及MUC5AC mRNA表达较对照组明显增加(P<0.05)。结论LPS和NE均为黏液高分泌的有效诱导因素,但NE的黏液促分泌效应较LPS更显著,为强有力的诱导剂,是理想的黏液高分泌造模因子,也是临床防治的重要靶目标。     

甲氨蝶呤对炎性细胞因子及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的：探讨甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对类风湿关节炎（RA）发病起重要作用的炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的作用及其可能的机制.方法：用Ⅱ型胶原建立类风湿关节炎（CIA）动物模型,以MTX（0.2 mg/kg/W）进行处理,6周后处死大鼠,取血清进行IL-1β和TNF-α检测;分离大鼠膝关节取关节滑膜细胞（FLS）进行培养、鉴定,检测脂多糖（LPS）诱导的FLS培养上清中IL-1β和TNF-α的含量,并观察MTX对FLS分泌IL-1β和TNF-α的影响;在FLS的培养中加入不同剂量的MTX,用Westen Blot方法检测FLS中ERK蛋白及磷酸化蛋白的表达.结果：关节炎指数评分、关节肿胀度测定及关节病理显示造模成功,分离关节滑膜细胞经流式细胞仪检测FLS的血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）的表达为85.5％.造模后,CIA大鼠血清IL-1β和TNF-α明显增加,与空白对照组比较有统计学差异（P＜0.05）,MTX能有效减少CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量（P＜0.05）,但未能恢复至正常水平.MTX能抑制LPS诱导的CIA大鼠关节FLS分泌IL-1β和TNF-α.Western Blot检测显示,不同浓度的MTX对CIA大鼠FLS中ERK蛋白的表达与模型对照组相比无统计学差异（P＞0.05）.CIA大鼠FLS中p-ERK蛋白的表达明显高于空白对照组（P＜0.01）,MTX干预后,低剂量组对p-ERK蛋白表达无明显影响,而中、高剂量组可降低p-ERK蛋白的表达（P＜0.05）.结论：MTX既有免疫抑制作用,同时还通过抑制炎性细胞因子IL-1β和TNF-α而具有抗炎作用,其机制可能部分与其抑制MAPK信号通路中的ERK蛋白磷酸化有关.     

糖皮质激素对内毒素耐受的影响

目的应用地塞米松(dexamethasone,Dex)干预小鼠内毒素耐受的形成,研究糖皮质激素对内毒素耐受的影响。方法以昆明鼠为实验对象进行分组,ⅠA组为健康对照组,ⅠB组为单次直接致死剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(2LD50=8 mg/kg)对照组,Ⅱ组为标准内毒素耐受组,ⅢA组为初始LPS刺激前高剂量Dex(10 mg/kg)干预组,ⅢB组为终末致死量LPS前高剂量Dex干预组,ⅣA组为初始LPS刺激前低剂量Dex(1mg/kg)干预组,ⅣB组为终末致死量LPS前低剂量Dex干预组。完成实验处置后3 h取血标本,应用ELISA方法检测血清TNF-α和IL-10水平。结果①ⅠA组TNF-α、IL-10水平极低,ⅠB组TNF-α、IL-10水平较ⅠA组显著增高(P<0.05,P<0.01),Ⅱ组TNF-α、IL-10水平较ⅠB组显著下降(P<0.05,P<0.01),但仍高于ⅠA组。②各Dex干预组TNF-α水平与Ⅱ组比较:ⅢA、ⅣA组TNF-α水平与Ⅱ组TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05),ⅢB、ⅣB组TNF-α水平低于Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05)。③各Dex干预组IL-10水平与Ⅱ组比较:ⅢA、ⅣA组IL-10水平高于Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05),ⅢB、ⅣB组IL-10水平与Ⅱ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论①LPS刺激可导致小鼠体内TNF-α水平、IL-10水平升高。内毒素耐受时,小鼠体内TNF-α、IL-10水平升高的程度明显降低。②终末LPS前一定时间内予以Dex干预可以促进内毒素耐受的形成,Dex剂量过高可能不会带来更多受益。③IL-10对内毒素耐受的形成可能不具有决定作用。     

前列腺素E_1对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症的干预作用

目的探讨前列腺素E1(PGE1)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型气道炎症的干预作用。方法30只Wistar大鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组(每组n=10)。以气道内滴注脂多糖(LPS)和熏烟法建立COPD模型,治疗组在第2～28天(第15天除外)在熏烟前将PGE1脂微球载体制剂(凯时)2ml溶于8ml生理盐水,按2.5ml/kg从尾静脉注入大鼠体内,4周后对大鼠行肺功能测定,然后处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),对炎症细胞行总数和分类计数,对大鼠肺组织行病理学检查,采用免疫组织化学法测定肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果所建COPD模型的病理学改变符合人类COPD的特点。治疗组肺组织的病理改变较COPD模型组明显减轻但未恢复正常。治疗组BALF中TNF-α水平、白细胞总数及中性粒细胞数较COPD模型组下降,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组肺组织TGF-β1的表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TNF-α和TGF-β1在COPD大鼠气道组织的表达明显增强,PGE1能抑制COPD大鼠气道TNF-α和TGF-β1的表达,从而对COPD的气道炎症起到一定的防控效应。PGE1对COPD大鼠气道炎症有明显的抑制作用。     

小儿全身炎症反应综合征血LPS、TNF-α、IL-10水平和IL-10/TNF-α比值的变化及其临床意义

目的比较全身炎症反应综合征（SIRS）患儿与健康儿童血内毒素（LPS）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-10（IL-10）水平以及动态观察IL-10在SIRS发展过程中的变化。方法将SIRS患儿58例设为SIRS组,另21例健康儿童为对照组,分别采用鲎试剂动态比浊定量测定法、酶联免疫实验进行血LPS、TNF-α、IL-10的定量测定,计算IL-10/TNF-α比值,并对部分患儿进行IL-10和IL-10/TNF-α动态观察。结果SIRS组LPS、TNF-α、IL-10的水平均明显高于对照组（P〈0.01）,且TNF-α与IL-10的浓度随LPS水平升高而升高,2者呈显著正相关（P〈0.05）。血LPS、IL-10以及IL-10/TNF-α在病情恶化或死亡的病例中高于治愈或好转病例（P〈0.05）。结论LPS、TNF-α、IL-10的水平与IL-10/TNF-α比值的高低与SIRS预后有关。