海藻酸钠-明胶共混体系/成骨细胞凝胶修复兔颅骨极限缺损的CT评估

背景：利用组织工程学技术将各种凝胶系统作为支架材料对骨缺损进行修复日益受到重视，在骨修复过程中需要选择相对准确、方便的检测方式，以明确体内成骨过程。 目的：利用螺旋CT和三维重建监测海藻酸钠-明胶共混体系/成骨细胞凝胶修复兔颅骨缺损的愈合过程。 设计、时间及地点：材料学体内动物实验，于2007-10/2008-03在北京世纪坛医院和北京大学医学部组织胚胎学教研室完成。 材料：清洁级2月龄新西兰纯种大白兔15只，由北京海淀区兴隆实验动物养殖场提供。海藻酸钠干粉为美国Sigma公司产品，明胶干粉为河北绿岛公司产品，螺旋CT为德国SIEMENS公司产品。 方法：将15只兔编号后抽取骨髓，密度梯度离心法分离骨髓基质干细胞，加入成骨细胞诱导液进行体外培养，诱导分化的成骨细胞经传代增殖为107数量级。制备海藻酸钠与明胶质量比为2∶3的透明粉红色胶状液体，引入兔成骨细胞，细胞终密度为5×109 L-1，与CaCl2溶液混合，形成果冻样海藻酸钠-明胶共混体系/成骨细胞凝胶。15只兔颅骨均制备直径1.5 cm的极限缺损，1周后植入凝胶复合体0.5 mL进行修复。 主要观察指标：缺损修复后4，8，12周利用CT进行薄层扫描和三维重建检查，采用苏木精-伊红染色和Mallory三色染色观察骨组织愈合情况。 结果：修复后4周，冠状位CT显示颅骨缺损区可见骨痂形成，三维重建仍显示有缺损；标本苏木精-伊红染色显示缺损为纤维结缔组织，并有软骨样组织形成，Mallory三色染色标本呈淡蓝色。修复后8周，冠状位CT显示缺损边缘圆钝，与凝胶材料有骨性突起连接，缺损处密度增高明显，三维重建显示缺损范围较之前有所减小；标本苏木精-伊红染色后缺损部可见大量含血管成分的纤维结缔组织，有骨样组织结构形成，Mallory三色染色显示有褐红色成熟骨组织形成，其旁边有淡蓝色软骨样组织。修复后12周，冠状位CT显示缺损区基本被骨痂填满，三维重建示缺损基本修复；缺损区域和周围骨组织形成骨性结合，骨小梁粗大，哈弗氏系统成熟。 结论：海藻酸钠-明胶共混体系/成骨细胞凝胶以软骨化骨的形式成功修复了兔颅骨极限缺损。在修复过程中，CT冠状位扫描可准确反映出各阶段成骨的过程，但三维重建有一定的局限性，对成骨的判断会产生一定的误差。     

不同消毒方法对海藻酸钠-明胶共混体系理化性能的影响

背景：不同的消毒方式对生物材料的理化性能均有一定的影响，影响的大小就成为选择消毒方法的重要参考依据。 目的：观察不同的消毒方式对海藻酸钠-明胶共混体系理化性能的影响，并选择最佳的消毒方式。 设计、时间及地点：观察对比实验，于2007-08在北京世纪坛医院中心实验室和中国石油大学油气储运工程系完成。 材料：海藻酸钠干粉购自美国Sigma公司，明胶干粉购自河北绿岛公司。 方法：分别以固体 60Co照射消毒、固体高压蒸汽消毒和溶液高压蒸汽消毒后的40 g/L海藻酸钠溶液与消毒明胶配制成海藻酸钠与明胶质量比为2∶3的海藻酸钠-明胶共混体系，终浓度为50 g/L。磁力搅拌30 min，静置30 min后低速离心以使小气泡消失。以未消毒的海藻酸钠粉末与明胶配制的海藻酸钠-明胶共混体系为对照。 主要观察指标：分别测定不同消毒方法消毒后的海藻酸钠-明胶共混体的pH值，吸光度值和黏度。 结果：固体高压蒸汽消毒法、溶液高压蒸汽消毒法、60Co照射消毒法pH值分别为7.25，6.81，6.88；吸光度值分别为0.168，0.166，0.170；黏度分别为2.177，1.796，1.889 Pa•s。 结论：各种消毒方法对海藻酸钠的理化性能均有影响，其中，固体高压蒸汽消毒法影响相对移小。     

海藻酸钠-明胶共混体系凝胶修复颅骨极限缺损过程中血清无机盐及碱性磷酸酶的变化**

背景：将各种凝胶系统作为支架材料进行骨缺损的修复日益受到重视，同时在骨修复过程中需要选择相对准确又方便的检测方式，以明确体内成骨过程。 目的：观察血清钙、磷和碱性磷酸酶浓度在可注射组织工程骨修复过程中的变化并对其作用进行初步探索。 设计、时间及地点：观察性实验，于2007-10/2008-03在北京世纪坛医院、北京大学医学部组织胚胎学教研室进行。 材料：分离培养兔成骨细胞，并引入海藻酸钠-明胶凝胶中构建细胞/支架材料复合体。 方法：36只新西兰纯种大白兔随机分为实验组、对照组和空白组3组，所有动物颅骨制备直径1.5 cm的极限缺损。1周后实验组在缺损处植入自体细胞/支架材料复合体，对照组植入单纯海藻酸钠-明胶凝胶，空白组不予材料修复。 主要观察指标：苏木精-伊红染色和Mallory三色染色观察观察骨组织的形成修复情况；于不同时间点抽取各组兔静脉血，统一条件下使用生化仪检测血清中钙、磷及碱性磷酸酶水平并做配对比较。 结果：实验组的血清碱性磷酸酶高峰出现得比其他2组早，且其高峰值高于对照组和空白组(P < 0.05)，并维持在一个较高的水平，随着修复的完成逐渐降低，到骨缺损后10周时接近正常值。术后2周，各组血钙均有不同程度升高，而血磷有所降低，但组间无显著性差异；术后4，8周，实验组血钙降低，血磷升高，较其他2组钙、磷沉积高峰提前出现(P < 0.05)。组织学结果也证实了以上各时间段骨愈合情况。 结论：在利用凝胶可注射组织工程骨修复兔颅骨极限骨缺损的过程中，血清钙、磷及碱性磷酸酶活性在不同的阶段有所差异, 可以反映体内成骨过程，并且可能在骨缺损的修复与成骨这一过程中参与调节作用。     

复合成骨细胞藻酸盐凝胶的体内成骨效应**☆

目的：为使骨缺损的治疗简便可行，又要保证可靠的骨修复效果，实验将成骨细胞复合于藻酸钙水凝胶中，直接经皮注射动物体内了解其成骨情况。 方法：实验于2006-01/2007-07在十堰市太和医院生命科学研究所实验室完成。将培养的兔骨髓基质成骨细胞复合于1.5%藻酸钠溶液，再加入葡萄糖酸钙，制备成骨细胞密度为1×1010 L-1、钙离子浓度为50 mmol/L的藻酸钙水凝胶。将20只健康成年新西兰大白兔左侧背部经皮注射成骨细胞-藻酸钙水凝胶复合物(实验侧)，右侧注射单纯藻酸钙水凝胶(对照侧)。于术后4，8，12周分别行X射线检查及组织学观察成骨情况。 结果：20只健康成年新西兰大白兔均进入结果分析。X射线和组织学观察表明，实验侧成骨活跃，骨再生迅速，12周内，新生骨组织明显增多，且新生骨组织趋向成熟，X线片显示高密度影;而对照侧未见骨组织出现。 结论：复合成骨细胞的藻酸钙凝胶经皮注射植入在动物体内异位成骨可靠、确切。     

生物衍生骨体外复合构建组织工程化骨修复兔桡骨-骨膜缺损：血管化进程及其生物力学性能

背景：目前组织工程骨的支架材料,力学性能和体内血管化问题仍没有很好解决,因而制约了临床的广泛开展。 目的：观察生物衍生骨体外复合骨髓间充质干细胞构建组织化工程骨修复兔桡骨-骨膜缺损的血管化进程和生物力学性能。 方法：取新西兰大白兔的骨头制备生物衍生骨;体外分离和培养兔骨髓间充质干细胞,定向诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,再将诱导的成骨细胞接种到生物衍生骨支架上制成组织工程骨。取大白兔25只,制成骨膜-桡骨缺损模型,其中5只兔不做处理为空白组;另外20只兔左前肢为对照组单纯植入生物衍生骨,右前肢为实验组植入组织工程骨术后2,4,8,12周分别取5只兔标本,观察血管面积和缺损区植入骨的生物力学性能。 结果与结论：术后4周实验组和对照组血液循环丰富,血管面积较大,12周血管面积趋于稳定,接近正常状态;2,4,8周的实验组和对照组血管面积与空白组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。8周,与对照组比较,实验组修复区的血管网排列规律,12周形态结构已接近正常骨组织,力学性能明显增强。结果证实生物衍生骨复合骨髓间充质干细胞后有较好的血管化进程和力学性能,是修复骨缺损的一种较好的治疗方法。 关键词：生物衍生骨;骨髓间充质干细胞;诱导;组织工程化骨;血管化;生物力学 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.003     

40001/间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的组织学研究

背景：大块软骨损伤目前临床上尚无方法治疗,干细胞技术出现后为解决这一难题提供了理论支持。采用新型的支架材料“壳聚糖-胶原蛋白”结合干细胞诱导分化移植给动物模型是一种较新的尝试。 目的：观察壳聚糖-胶原凝胶复合骨髓间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的组织学变化。 方法：体外培养扩增兔骨髓间充质干细胞。采用软骨诱导分化培养基对P2代细胞进行成软骨诱导。同时制备“壳聚糖-胶原蛋白”支架和兔关节软骨缺损模型。缺损用含有骨髓间充质干细胞的壳聚糖-胶原凝胶填充,另一条关节用没有细胞的支架或不做处理。其中12个关节作为实验组(接受骨髓间充质干细胞+支架),8个关节作为空白对照组(不做处理),8个关节作为单纯支架组(未植入细胞)。造模后于2,4,8,16周进行组织学评分并处死动物行组织学染色。 结果与结论：造模后16周移植的细胞一致分化为软骨细胞,大部分软骨缺损区被新生软骨修复,组织学评分实验组关节修复良好。提示应用骨髓间充质干细胞结合“壳聚糖-胶原蛋白”复合物可以修复关节软骨缺损。 关键词：壳聚糖-胶原凝胶;兔;骨髓间充质干细胞;软骨缺损;组织学变化 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.006     

肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗兔股骨头坏死

背景：课题利用实验室自主研制、已获国家SFDA批准临床试验的重组肝细胞生长因子腺病毒感染骨髓间充质干细胞,结合肝细胞生长因子的促血管新生和抗细胞凋亡以及间充质干细胞的成骨功能,通过细胞治疗的手段进行骨损伤修复。 目的：探讨肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔股骨头坏死骨缺损的治疗效果。 设计、时间及地点：细胞-材料学体内实验,于2007-09/12在北京放射与辐射医学研究所和解放军66400部队骨病专科医院完成。 材料：清洁级26~28周龄新西兰大白兔18只,由北京开源兔业养殖场提供。骨基质明胶为上海骁博科技发展有限公司产品。 方法：采用贴壁法分离培养兔自体骨髓间充质干细胞,体外鉴定成骨和成脂肪能力。18只兔均建立双侧股骨头坏死骨缺损模型,随机分为3组,6只/组,单纯材料组缺损区仅填塞骨基质明胶,细胞-材料组填塞复合骨髓间充质干细胞的骨基质明胶,基因修饰细胞-材料组填塞复合Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞的骨基质明胶,各组细胞用量为 107个/缺损,骨基质明胶用量为27 mm3/缺损,修复3个月后取材进行组织学检查。骨髓间充质干细胞和Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞经荧光染料二醋酸琥珀酰酯羟基荧光素标记后,氯化钴处理72 h,流式细胞学分析细胞增殖情况。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞的诱导分化,骨髓间充质干细胞对兔股骨头坏死的修复效果,Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞抗低氧损伤能力。 结果：培养的细胞在适当诱导条件下可分化为成骨和成脂肪细胞。修复后3个月组织学分析显示,单纯材料组仅见疏松的纤维肉芽组织填充;细胞-材料组可见致密的纤维肉芽组织填充,其间有较多的新生血管,但未见新生骨组织;基因修饰细胞-材料组多为软骨样组织填充,周围可见新骨带形成。各组Lane-Sandhu骨组织学评分比较差异有非常显著性意义(P < 0.01),其中基因修饰细胞-材料组评分最高,即Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞具备最佳的骨修复能力。培养体系中加入氯化钴后,已增殖的Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞比例显著高于未感染骨髓间充质干细胞(P < 0.001)。 结论：在骨缺损模型中Ad-HGF感染的骨髓间充质干细胞具有更强的抗低氧损伤能力,其在体内成骨能力优于未感染的骨髓间充质干细胞,提示肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植是应用于缺血性骨坏死的有效治疗途径。     

滨珊瑚及富血小板血浆复合材料修复兔下颌骨缺损★

背景：近年来的一些研究表明自体来源的富血小板血浆可能对骨缺损修复具有促进作用。 目的：观察复合富血小板血浆的滨珊瑚对兔下颌骨缺损的修复作用。 设计、时间及地点：随机分组设计、对照动物实验，2005-07/2006-03在中山大学附属第三医院动物实验室完成。 材料：采用海南产滨珊瑚，孔径为150~200 μm，孔隙率40%~50%，碾磨及筛选出直径200~400 μm大小颗粒。 方法：选择新西兰兔24只，采用自身对照方法，在每只动物的两侧下颌骨体部分别作1处洞穿型骨缺损，大小15 mm×5 mm，随机选择一侧为实验侧，另一侧为对照侧。植入滨珊瑚/富血小板血浆的复合物作为实验组，植入滨珊瑚/贫血小板血浆的复合物作为对照组。 主要观察指标：术后2，4，8，12周通过大体观察、X射线片、组织学染色观察兔两侧下颌骨愈合情况。 结果：新西兰兔24只均进入结果分析。术后2，4，8周，加入富血小板血浆的材料区比较对照侧可以看到更多的间充质细胞和成骨细胞，并且有更多的新生骨形成。术后12周，两侧缺损区植骨床生长没有区别，骨质均成熟和致密。 结论：富血小板血浆能起到很好的促进骨生长的效果，滨珊瑚与富血小板血浆的复合物能显著促进兔下颌骨缺损的修复。     

明胶-磷灰石-米诺环素仿生纳米复合材料修复兔胫骨缺损

背景：仿生纳米复合材料具有与自体骨相似的组成和结构,有较好的应用前景。 目的：观察新型明胶-磷灰石-米诺环素仿生纳米复合材料修复兔胫骨缺损的效果。 方法：取20只健康成年新西兰大白兔,制作胫骨上端15 mm×8 mm的腔隙性临界性骨缺损。随机数字表法分为实验组(n=16)和空白对照组(n=4)。实验组植入课题组研制的明胶-磷灰石-米诺环素仿生纳米复合骨修复材料新型复合材料,空白对照组不植入任何材料。分别于术后2,4,8,12周行大体观察、X射线平片及组织学观察新型骨修复材料的骨修复效果。 结果与结论：大体观察显示实验组植入8周后缺损已经融合,12周时塑形接近正常。X射线平片显示随着时间延长,实验组骨缺损骨痂增多,12周基本愈合,塑形完成,空白对照组未见骨性修复,形成骨不连。组织学观察实验组术后4周材料开始吸收,8周后降解被新生骨取代,12周完全修复,空白对照组各时间点均由纤维组织充填。提示新型明胶-磷灰石-米诺环素仿生纳米复合材料能有效促进临界性骨缺损的修复。 关键词：明胶;羟基磷灰石;米诺环素;生物相容性;兔;组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.002     

海藻酸钠微球与明胶海绵栓塞肺结核大咯血的效果比较：143例分析

摘要 背景：在诸多治疗方案中,介入栓塞肺结核大咯血的疗效最明确、显著。而多种栓堵材料也随之而出现,从传统的明胶海绵、聚乙烯醇颗粒,到目前应用广泛的微弹簧圈、海藻酸钠微球栓塞剂,疗效各不相同。 目的：比较海藻酸钠微球与明胶海绵支气管动脉内栓塞治疗肺结核大咯血的疗效。 方法：143例肺结核大咯血患者,根据栓塞材料不同分为明胶组与海藻酸钠微球组。先行选择性支气管动脉插管造影,再做超选择支气管动脉插管,最后注入栓塞材料栓塞末梢支气管动脉。 结果与结论：明胶组共栓塞靶血管92支,44例(58.7%)患者栓塞后即刻止血,总有效率为81.3%。随访2年,复发12例(25.3%)。海藻酸钠微球组共栓塞靶血管83支,60例(89. 1%)患者栓塞后即刻止血,总有效率为92.6%。随访2年,复发5例(7.8%)。两组比较,海藻酸钠微球组即刻止血效果显著优于明胶组(P < 0.05),治愈率显著高于明胶组(P < 0.05);海藻酸钠微球组复发率显著低于明胶组(P < 0.05);海藻酸钠微球组总有效率显著高于明胶组(P < 0.05)。并发症的发生率两组差异无显著性意义(P > 0.05)。结果提示,海藻酸钠微球支气管动脉栓塞治疗肺结核大咯血安全、有效,复发率低,值得临床推广应用。 关键词：支气管动脉栓塞;肺结核咯血;海藻酸钠微球;明胶海绵;介入治疗 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.42.041     

负载转基因成肌细胞和骨形态发生蛋白组织工程化骨修复骨缺损

背景：近年来有报道提出了睫状神经营养因子能够抑制成肌细胞体外成肌分化,可保持成肌细胞去分化状态的理论。两者可通过基因工程技术结合为组织工程化骨的构建提供种子细胞,联合骨形态发生蛋白在一定条件下促进骨缺损的修复。 目的：探讨转染睫状神经营养因子基因成肌细胞与骨形态发生蛋白通过透明质酸钠凝胶载体结合修复兔桡骨节段性缺损的效果。 方法：新西兰大白兔制备左侧桡骨中段造成1.0 cm的节段性骨缺损,缺损处以1.4 cm硅胶管桥接固定,管内植入负载骨形态发生蛋白与转睫状神经营养因子基因成肌细胞的透明质酸凝胶(实验组)、仅复合骨形态发生蛋白的透明质酸凝胶(对照组)或仅植入透明质酸凝胶(空白组)。 结果与结论：动物体内实验表明实验组的X射线阻射密度、大体标本以及病理组织学观察情况均优于对照组和空白组,对照组也优于空白组。说明应用透明质酸钠凝胶复合转基因成肌细胞和骨形态发生蛋白因子作为膜内填充物构建组织工程化骨具有可行性,其应用于修复兔桡骨节段性缺损效果理想。     

兔椎间盘成骨作用中的转基因人骨形态发生蛋白7

背景：对于骨形态发生蛋白的生物活性分析中发现,极其微量的骨形态发生蛋白在成年个体中被分泌和储存在骨基质和成骨、成软骨等细胞中,当骨折时这些骨形态发生蛋白在骨折区域释放,诱导周围的间充质细胞发生化学趋化、聚集、分化并形成软骨,从而最终形成成熟的骨结构。 目的：验证转基因人骨形态发生蛋白7在兔椎间盘组织中的成骨作用。 方法：健康成年新西兰大白兔随机分成4组。分别于不同的腰椎间盘注入骨形态发生蛋白7溶液,生理盐水,或使用金属手术器械行腰椎间盘单纯破坏,并设立未干预的腰椎间盘作为空白对照。术后第6周应用组织学观察注射区内新骨的形成情况。 结果与结论：各组动物注射生理盐水的椎间盘和空白椎间盘均为阴性结果。注射骨形态发生蛋白组的新生骨的面积显著大于单纯破坏组(P < 0.05)。注射骨形态发生蛋白组新生骨面积组内差异在放大40倍和100倍时,差异无显著性意义(P > 0.05)。结果证实转基因人骨形态发生蛋白7能将家兔的椎间盘转化为新生软骨组织。     

白花丹对家兔骨折愈合的影响

背景：白花丹的主要成分是白花丹醌,它的活性主要是抗白血病、抗癌(肝癌)、抗菌、抗生育、祛痰等,对心血管也有一定的作用。 目的：观察白花丹对实验性家兔骨折愈合过程的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2006-12/2007-02在广西桂林医学院药理学教研室完成。 材料:日龄80~85 d新西兰家兔8只,体质量2.1~2.5 kg,雌雄各半。白花丹全草浸膏,1 mL相当于生药5.5 g,临用前以体积分数为0.5的乙醇按2∶1的比例配制,由广西桂林医学院药理学教研室制备。 方法：取家兔8只,随机分为生理盐水对照组和白花丹水提取液给药组,每组4只。2组于右前肢小腿中段前内侧,尺桡骨结合点上方用骨钳横行截断桡骨,造成家兔实验性右前肢骨折模型。给药组家兔右前肢骨折处外用白花丹全草浸膏的体积分数为0.5的乙醇稀释液,对照组给予生理盐水,2次/d,连续15 d。 主要观察指标：分别测定给药前,给药后15,30 d家兔血清碱性磷酸酶、血Ca2+、P3+及微量元素K+、Na+、Cl-、游离钙、总钙浓度,并观察右前肢骨折X射线影像学检查。 结果：与对照组比较,骨X射线影像学检查显示给药组家兔骨折愈合较快,且血清学检查表明给药组家兔血清Ca2+浓度较对照组显著升高,给药前后比较差异有显著性意义(P < 0.05)。 结论：白花丹可以明显增加骨折家兔血钙浓度,对家兔骨折愈合有促进作用。     

以海藻酸盐及异种骨复合技术制备组织工程化骨及体内成骨

背景：海藻酸有相对温和的凝胶条件与良好的生物相容性,已广泛应用于生物组织工程。 目的：采用海藻酸钠凝胶复合异种骨的方法,构建骨组织工程载体,观察载体中细胞的生物性能及体内成骨能力。 方法：取2 只2 周龄新西兰兔的骨髓,以1×10-8 mol/L重组人骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞。取诱导后第2 代骨髓间充质干细胞接种于1%海藻酸钠凝胶中,培养4 d 苏木精-伊红染色观察凝胶中细胞形态。将第2 代骨髓间充质干细胞分为单纯DMEM凝胶组和含1%海藻酸钠的DMEM凝胶组,分别培养7 d 后行骨形态发生蛋白2免疫组织化学染色观察。取24 只裸鼠,随机分为2 组,于两侧股部肌袋中分别植入骨髓间充质干细胞/海藻酸钠凝胶/牛松质骨复合体作为实验组,骨髓间充质干细胞/牛松质骨复合体作为对照组。术后2,4 周后组织学观察复合体成骨情况,图像分析系统分析各组成骨或软骨的面积百分比。 结果与结论：海藻酸钠凝胶中骨髓间充质干细胞形态饱满,细胞悬浮于凝胶中,可见细胞分裂和核分裂相。单纯DMEM凝胶组和含1% 海藻酸钠的DMEM凝胶组免疫组织化学观察,细胞分裂增殖正常,伸出多种形态的突起,胞核大,核仁清晰。单纯DMEM凝胶组和含1%海藻酸钠的DMEM凝胶组的骨形态发生蛋白2 表达阳性率差异无显著性意义(P > 0.05)。扫描电镜观察海藻酸钠凝胶均匀地复合于牛松质骨微孔中,不同平面均有细胞生长。动物实验显示术后2,4 周实验组和对照组的成骨或软骨的面积百分比差异有显著性意义（P < 0.05）。提示以海藻酸钠凝胶/牛松质骨构建骨组织工程载体,合乎组织工程载体的超结构原理,能最大限度地承载细胞,生物性能好,对骨髓间充质干细胞增殖和成骨表型及相关的生物性能无不良影响,在体内成骨效率较高。 关键词：组织工程骨;海藻酸钠凝胶;异种骨;载体;支架材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.08.043     

环孢素A影响脱钙骨基质诱导成骨的组织学观察

背景：脱钙骨可用于成骨细胞的支架材料,机体组织对脱钙骨有一定的免疫排斥反应。 目的：观察环孢素A影响脱钙骨诱导成骨的组织学变化,探讨脱钙骨成为理想的骨移植材料的可行性。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-03/2008-04在大连医科大学附属二院实验中心完成(国家分子生物学三级实验室)。 材料：用16只新西兰大白兔,分为4组,同种脱钙骨对照组和实验组,异种脱钙骨实验组和对照组,每组4只。环孢素注射液为北京诺华制药有限公司产品。 方法：制备脱钙骨,取自兔的脱钙骨命名为同种脱钙骨,取自犬的脱钙骨命名为异种脱钙骨。于兔的脊旁肌肉内植入相应脱钙骨制备物,每侧2处。实验组每天肌注含环孢素A的实验液2 mg/kg,对照组肌注对照液2 mg/kg,共4周。植入物标本进行苏木精-伊红染色,光镜观察。 主要观察指标：各组脱钙骨组织学观察结果。 结果：同种脱钙骨在所有动物中均引起了骨形成。环孢素A并没有改变同种脱钙骨诱导成骨的形态学。异种脱钙骨对照组在第4周时没有骨或软骨细胞生成。异种脱钙骨环孢素A实验组在第4周时有软骨、骨形成。 结论：环孢素A并没有改变同种脱钙骨诱导成骨的形态学。免疫反应抑制了异种脱钙骨的成骨,环孢素A可抵消这种抑制作用,环孢素A可提高异种脱钙骨治疗骨不连或骨缺损的成功率。     

低剂量激素诱导股骨头缺血性坏死模型的建立

背景：激素性股骨头缺血性坏死的发病机制尚未明确。 目的：单纯应用低剂量激素作用于新西兰大白兔，建立激素性股骨头缺血性坏死模型并观察造模效果。 方法：将30只新西兰大白兔随机分为2组。实验组每周经臀肌注射4 mg/kg甲泼尼龙琥珀酸钠，对照组于相同时间点注射等量生理盐水。同时迫使动物直立进食、饮水，以增加股骨头的负重。 结果与结论：肌注甲泼尼龙琥珀酸钠后，白兔出现不同程度的精神萎靡、活动减少、体质量减轻等。给药4周后，兔血清总三酰甘油及低密度脂蛋白增高、高密度脂蛋白降低(P < 0.05)；血清碱性磷酸酶及总胆固醇分别在给药6，8周后明显增高 (P < 0.05)。苏木精-伊红染色显示；给药4周后，兔股骨头骨髓腔内脂肪细胞体积增大，数量增多；给药6周后，空骨陷窝率增大；给药8周后，骨小梁稀疏变细、结构紊乱，软骨区可见死骨形成及部分性坏死和软骨面塌陷。说明单纯注射低剂量激素可以复制出典型的激素性股骨头缺血性坏死模型。     

肝素-壳聚糖复合体-羟基磷灰石-米诺环素新型仿生纳米复合材料修复兔胫骨缺损

摘要 背景：仿生纳米复合材料具有与自体骨相似的组成和结构,有广泛的应用前景。 目的：观察肝素-壳聚糖-羟基磷灰石-米诺环素仿生纳米复合材料修复兔胫骨缺损的效果。 方法：取20只健康成年新西兰大白兔,制作胫骨上端15 mm×8 mm的腔隙性临界性骨缺损。随机数字表分为实验组(n =16)和空白对照组(n =4)。实验组植入课题组研制的肝素-壳聚糖复合体-磷灰石-米诺环素仿生纳米复合骨修复材料新型复合材料,空白对照组不进行干预。分别于植入后2,4,8,12周行大体观察、X射线平片及组织学观察新型骨修复材料的骨修复效果。 结果与结论：大体观察显示实验组植入后8周后缺损已经融合,12周时塑形接近正常。X射线平片显示随着时间延长,实验组骨缺损骨痂增多,12周基本愈合,塑形完成,空白对照组未见骨性修复,形成骨不连。组织学观察实验组植入后4周材料开始吸收,8周后降解被新生骨取代,12周完全修复,空白对照组各时间点均由纤维组织充填。提示新型肝素-壳聚糖复合体-羟基磷灰石-米诺环素仿生纳米复合材料能有效促进临界性骨缺损的修复。 关键词：肝素;羟基磷灰石;米诺环素;壳聚糖;组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.002