伤寒沙门菌株耐药性与vipR基因RFLP和PFGE分型研究

目的:监洲伤寒沙门菌株对青霉素和其他抗生素的耐药情况.分析多重PCR基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性,分析血清型青霉素耐药菌株的脉冲电场凝胶电泳(PFGE)图型,初步了解耐药菌株分子流行病学上的特点.方法:(1)抗生素药物敏感试验;(2)用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)结果发现23株多重耐药鼠伤寒沙门菌,其中耐4～5种抗生素的9株(40%),耐6～9种抗生素的8株(35.13%),耐10种抗生素的6株(26.10%);可分为16个PFGE型,其中5个PFGE型的菌株敷超过1株.结论:伤寒沙门菌分离株的多重耐药性严重,PFGE分型方法对鼠伤寒沙门菌的分型能力较好.     

腹腔感染大肠埃希菌PFGE谱型及耐药一致性分析

目的探究腹腔感染大肠埃希菌菌株间的相关性及菌株间同源性与药敏结果一致性的关系。 方法使用限制性内切酶XbaⅠ对菌株基因组进行酶切,对酶切后的DNA片段进行脉冲场凝胶电泳（ PFGE）,使用Bionumerics软件分析菌株间相关性,将菌株同源性与药敏结果一致性进行对比分析。 结果47株大肠埃希菌PFGE图谱间同源性为60.4%～97.4%,同源性高于85%有6株。一次自发性细菌性腹膜炎（SBP）可以由一种PFGE谱型的大肠埃希菌引起,也可能是多种PFGE谱型大肠埃希菌的混合感染。一次SBP可能是新发感染,也可能是上次感染的复发。同源性高于85%的菌株对本研究中19种抗菌药物中的15种以上抗菌药物的药敏试验结果相同。 结论导致不同患者腹腔感染的大肠埃希菌来源不同。同源性高于85%的菌株药敏结果具有较高的一致性。     

烧伤创面多重耐药鲍氏不动杆菌同源性和碳青霉烯酶基因型及整合子研究

目的 明确甘肃省人民医院烧伤病房多重耐药鲍氏不动杆菌的耐药性、同源性及与整合子的关系. 方法 31株多重耐药鲍氏不动杆菌分离自该院烧伤住院患者创面分泌物标本.采用琼脂稀释法测定鲍氏不动杆菌对11种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性:PCR扩增I、Ⅱ、Ⅲ类整合酶及整合酶阳性菌株的整合子基因盒,进行序列分析;分析亚胺培南耐药菌株的碳青霉烯酶基因型. 结果 鲍氏不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为45.2%、48.4%、48.4%、41.0%,对头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、阿米卡星、庆大霉素、氨曲南和哌拉西林的耐药率均在80.0%以上.所有菌株PFGE分型共分为A、B、C 3型,A克隆18株、B克隆7株、C克隆6株.20株细菌整合子扩增阳性,携带有aadA1、aadA5、aacA4、aac3、aacC1、aac(6')-Ib、catB8、drfA17和drf8基因,介导对氨基糖苷类抗生素、氯霉素、甲氧苄啶的耐药.14株亚胺培南耐药的菌株均产OXA-23型碳青霉烯酶. 结论 多重耐药鲍氏不动杆菌在该院烧伤病房播散,以A克隆为主;鲍氏不动杆菌整合子主要介导对氨基糖苷类抗生素及氯霉素的耐药性,碳青霉烯类抗生素耐药鲍氏不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶.     

多重耐药鲍曼不动杆菌同源性分析的研究

目的研究本院某时间段内临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌的同源性及β-内酰胺类耐药基因存在情况。方法对2013年9月26日~2013年12月8日临床分离的10株多重耐药鲍曼不动杆菌采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析,PCR法检测β-内酰胺类相关耐药基因,对不同谱型的阳性基因进行测序。结果 10株多重耐药鲍曼不动杆菌中,PFGE谱型共有2种,其中A谱型9株(90%),B型1株(10%);2种谱型多重耐药鲍曼不动杆菌均携带OXA-51基因、OXA-23基因和OXA-66基因;80%(8株)的标本来源于痰液,20%(2株)的标本来源于尿液。结论本院多重耐药鲍曼不动杆菌以A谱型为主要流行株,均同时携带多种β-内酰胺类耐药基因,主要引起呼吸道感染。     

六家医院整合子介导宋内志贺菌多重耐药的形成和传播机制研究

目的 探讨我国多个地区宋内志贺菌的同源性与整合子介导其耐药的机制.方法 连续收集2010年我国六家医院分离的22株宋内志贺菌,采用纸片扩散法测定其对抗菌药物的敏感性.采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子同源性检测,PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)进行整合子检测及分类,联合RFLP和DNA测序技术分析整合子携带的耐药基因.结果 宋内志贺菌多重耐药率高达90.9％ (20/22),对四环素和复方磺胺甲噁唑耐药率最高,为95.5％,对青霉素类抗生素(氨苄西林、哌拉西林、阿莫西林)也呈高水平耐药,耐药率分别为86.4％,90.9％和90.9％.PFGE聚类分析结果显示,22株宋内志贺菌可分为10种PFGE亚型,且均属于同一群,其中优势型为F6型,在济南、长春和上海三市传播.59.1％(13/22)的宋内志贺菌中检出Ⅰ类整合子,其中7株Ⅰ类整合子阳性菌株可变区扩增阳性;86.4％(19/22)的宋内志贺菌检出Ⅱ类整合子,Ⅱ类整合子可变区扩增全部阳性;未检测到Ⅲ类整合子.22株宋内志贺菌中仅有1株(4.5％)检测到非典型Ⅰ类整合子,其可变区扩增亦阳性.DNA测序发现Ⅰ类整合子中携带耐药基因盒dfrA17-aadA5,Ⅱ类和非典型Ⅰ类整合子可变区分别携带耐药基因盒dfrA1-sat1-aadA1和bla oxa-30-aadA1.结论 多重耐药宋内志贺菌在我国不同地区间传播,整合子在宋内志贺菌中广泛存在,参与多重耐药的形成.     

烧伤病区细菌培养及耐药性的分析

目的探讨临床合理用药依据,提高烧伤感染的治愈率。方法从1999年至2004年烧伤住院患者血培养及创面分离出的细菌,用纸片琼脂扩散法进行药敏试验。结果共分离病原菌379株,G 125株,G-241株其中烧伤病区感染病原体以革兰氏阴性杆菌为主,常见感染病原体依次为铜绿假单胞菌(19.8%),金黄色葡萄球菌(18.5%),大肠埃希氏菌(7.7%),不动杆菌(7.4%),肺炎克雷伯氏菌(6.6%)。其中仅万古霉素对金黄色葡萄球菌有效;头胞噻肟钠对肺炎克雷伯氏菌较有效;大肠埃希氏菌对10种抗菌药物的耐药性>68%。烧伤病区耐药菌株以耐5种以上抗菌药物的菌株为主,占全院多重耐药菌株的50.8%。结论医院感染的耐药问题较严重,加强对细菌耐药性的监测,有助于临床合理应用抗菌药物。     

泌尿外科住院患者耐头孢他啶大肠埃希菌的流行病学及危险因素调查

目的探讨泌尿外科住院患者中耐头孢他啶大肠埃希菌的流行病学特点及危险影响因素。方法收集2017年1月到2020年12月本院泌尿外科送检分离培养的非重复大肠埃希菌共406株。根据大肠埃希菌是否对头孢他啶耐药分为耐药组(109例)和敏感组(297例)。使用Vitek 2 Compact对菌株进行药敏测定, 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法完成细菌同源性分型分析, 并使用PCR方法完成耐药基因检测, 统计病例资料并进行危险影响因素分析。结果泌尿外科住院患者中大肠埃希菌对头孢他啶的耐药率为26.8%(109/406), 主要来源于尿液标本(占89.2%);耐药组细菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、氨曲南和环丙沙星等呈现出高的耐药率, 且耐药组对所有抗生素的耐药率均高于敏感组(均P<0.05)。PFGE同源性分析结果显示29株耐头孢他啶大肠埃希菌呈现出不同条带。PCR结果显示耐头孢他啶大肠埃希菌携带blaCTX-M有73株(占67.0%), 携带blaTEM有48株(占44.0%), 携带blaSHV有11株(占10.1%)。多因素logistic回归分析结果显示前列腺疾病(OR=...     

ICU病房耐药性有改变的铜绿假单胞菌的同源性调查

目的:应用随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法快速准确分析铜绿假单胞菌(PA)的同源性,及时监测PA院内感染的发生和发展的情况,为指导临床及时合理使用抗菌药物及流行性病学调查提供可靠的实验数据和理论依据。方法:对ICU病房收集到的PA进行药物敏感性试验,筛选从同一部位分离,间隔5天以上,且药物敏感性有改变的菌株并随机选出的5株PA做RAPD基因分型。结果:29株PA共分出9个基因型。1位患者为单一RAPD型PA菌株感染,且耐药性较稳定;其他患者的RAPD分型都有所改变,且存在基因型互变的可能。结论:耐药表型与RADP基因型之间不存在相关性;单独的药敏不能确定交叉感染的存在;进行RAPD分型对于流行病学调查确定院内交叉感染或流行具有重要意义。     

耐庆大霉素铜绿假单胞菌体外传代耐药水平变化

目的检测耐药铜绿假单胞菌体外传代过程中耐药水平是否发生改变。方法将26株耐庆大霉素(GM)铜绿假单胞菌(PA)株按最低抑菌浓度MIC值分为高等水平(20株)及中等水平(6株)耐药组,进行体外传代(30代)培养,并分别对每株PA子1、10、20、30代进行MIC及最低杀菌浓度(MBC)检测。结果通过对高水平耐GM组和中水平耐GM组各子代间MIC及MBC的均值进行多重比较,每组子代间的总体差异无显著性意义(P＞0.05)。结论耐GM铜绿假单胞菌各子代间耐药水平无发生变化。当临床发现耐药水平不同的铜绿假单胞菌,可高度怀疑是来自不同的PA菌株。     

创伤患者碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌耐药机制研究

目的研究分离自本院创伤患者的碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌耐药特性及耐药机制。方法采用琼脂稀释法对收集的162铜绿假单胞菌进行碳青霉烯类药物耐药菌株筛选,微量肉汤稀释法对获得的碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌检测对临床抗菌药物的敏感性;PCR检测碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌的耐药基因并进行分析。结果通过对162株铜绿假单胞菌进行碳青霉烯来耐药菌株筛选,共获得5株碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌。5株菌均表现为多重耐药表型,对碳青霉烯类药物MIC值为8μg/ml以上,对粘菌素均表现为敏感。PCR检测及测序比对分析发现,菌株PA1826携带有bla NDM-1,菌株PA1701和PA1912携带有bla IMP-1,菌株PA1932和PA1969携带有bla VIM-2。结论尽管本院创伤患者分离的碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌检测率较低,但临床医生仍需要严格合理使用抗菌药物避免抗菌药物耐药性的发生。     

Plasmid fingerprinting technique analysis of Pseudomonas aeruginosa isolated from a burn unit]

We used plasmid fingerprinting technique to analyse 50 strains of Pseudomonas aeruginosa isolated from our burn unit and 15 strains of Pseudomonas aeruginosa from other wards. The results revealed that the carrier rate of R-plasmid was 100%. All 50 strains of Pseudomonas aeruginosa from burn units contained one plasmid with approximate molecular weight of 55 kb. Among 15 strains of Pseudomonas aeruginosa from other wards, 10 strains contained one plasmid with the same molecular weight. However, 3 strains were found to possess an additional 12.5-kd plasmid and 2 strains contained 77-kb plasmid. This proves that R-plasmid carrying Pseudomonas aeruginosa is prevalent in the burn unit, and R-plasmid is disseminated in the hospital.     

2003-2005年积水潭医院烧伤感染常见细菌及耐药性分析

目的 了解笔者单位近期的烧伤感染细菌分布及耐药情况。方法 收集2003年1月-2005年12月从笔者单位492例烧伤住院患者创面分泌物、静脉导管、血液、尿液、粪等标本分离而得的菌株，对其菌种分布特点及耐药性进行分析。结果 送检标本中革兰阴性菌多于革兰阳性菌。革兰阳性菌292株，分离率最高者为金黄色葡萄球菌（16．7％），其中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌在金黄色葡萄球菌中占82．5％；革兰阴性菌372株，分离率较高的分别为铜绿假单胞菌（12．5％）、大肠埃希菌（11．1％）。3年中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对超广谱β内酰胺酶的耐药率分别为60．8％和42．9％。结论 笔者单位烧伤病区细菌耐药问题严重，仍需不断监测病区菌种变化及药物敏感情况，以有效地控制细菌感染和耐药菌株的播散。     

烧伤病区病原菌分布及其耐药性调查

目的了解烧伤病区病原菌分布特点及其耐药情况，为临床治疗提供参考。方法回顾性分析笔者单位烧伤病区348例住院患者的创面、血液、静脉导管、痰液、尿液及脓液等标本分离而得的菌株，统计其病原菌分布情况及耐药性。结果共检出464株病原菌，其中革兰阴性杆菌244株占52、6％、革兰阳性球菌188株占40．5％、真菌32株占6．9％。主要检出菌株为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）对环丙沙星、青霉素G、苯唑西林等的耐药率已达100、0％，只对万古霉素敏感。铜绿假单胞菌对头孢哌酮／舒巴坦、亚胺培南、头孢吡肟的耐药率分别为15、8％、36、8％、33、3％。结论金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌是烧伤病区感染的主要病原菌；金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌对抗生素的耐药率较高。     

铜绿假单胞菌临床分离株β内酰胺类和氨基糖苷类耐药基因分析

目的 了解临床分离的铜绿假单胞菌中β内酰胺类和氨基糖苷类抗生素相关耐药基因的存在状况。方法 从烧伤患者创面分泌物中分离出20株铜绿假单胞菌,经药物敏感试验后将多重耐药菌株挑出,采用PCR检测其16种β内酰胺类抗生素耐药基因TEM、SHV、OXA-10群、PER、VEB、GES、CARB、CTX-M-Ⅰ、IMP、VIM、SPM、GIM、DHA、MOX、FOX和oprD2和aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ等6种氨基糖苷类修饰酶基因的存在情况。结果 20株B内酰胺类耐药基因中TEM阳性20株（100％）、GES阳性20株（100％）,5株oprD2基因缺失（25％）,其余基因均为阴性。氨基糖苷类耐药基因中aac（6′）-Ⅰ阳性20株（100％）、ant（2″）-Ⅰ阳性7株（35％）,其余基因均为阴性。结论 临床分离的铜绿假单胞菌TEM、GES和aae（6′）-Ⅰ基因携带率高,且检出新型基因GES-5,表明烧伤患者铜绿假单胞菌感染耐药性严重。     

烧伤病房铜绿假单胞菌β内酰胺类抗生素耐药基因分析

目的 了解烧伤病房铜绿假单胞菌B内酰胺类抗生素耐药基因携带情况及耐药性。方法 采用K-B法检测来自烧伤创面和病房的铜绿假单胞菌对9种β内酰胺类抗生素的耐药谱。用PCR扩增法检出β内酰胺类抗生素耐药基因的阳性菌株，用他唑巴坦对哌拉西林阻断实验判断上述阳性菌株是否产超广谱β内酰胺酶（ESBL）。结果 12株检出β内酰胺类耐药基因的铜绿假单胞菌对所试的头孢菌素类抗生素和哌拉西林均耐药，其中7株对包括亚胺培南和氨曲南在内的9种抗生素耐药。他唑巴坦对哌拉西林耐药阻断实验提示，这7株耐药基因阳性菌株均产ESBL。本实验扩增出6种β内酰胺耐药基因，分别为VEB、IMP、PSE、FOX、OXA、VIM。结论 烧伤病房铜绿假单胞菌β内酰胺类抗生素耐药基因携带率较高，与细菌多重耐药有密切关系。     

烧伤重症监护病房细菌学调查及其药物敏感性分析

目的调查笔者单位烧伤重症监护病房(ICU)6年来细菌感染及其药物敏感性动态变化。方法对1998—2003年笔者单位烧伤ICU209例患者的细菌培养及药物敏感试验结果进行回顾性分析。结果209例患者标本检出感染菌株845株,其中革兰阴性(G-)菌486株占57.51%,革兰阳性(G )菌339株占40.12%。G-菌中铜绿假单胞菌占66.26%,位居第一;G 菌中粪肠球菌占34.51%、金黄色葡萄球菌占31.27%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)在金黄色葡萄球菌中的分离率为72.64%。药物敏感试验结果显示各检出菌具有多重耐药性。结论笔者单位烧伤ICU细菌感染以G-菌为主,G 菌次之;这些细菌对临床常用抗生素具有多重耐药性。临床应重视细菌的药物敏感性,合理使用抗生素。     

The risk factors for acquisition of imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa in the burn unit

OBJECTIVE: This study was conducted to determine the risk factors for acquisition of imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa (IRPA) in the burn unit. METHODS: Patients hospitalized in the burn unit from July 2003 to November 2004 were included in this study. The features of patients with isolated IRPA were compared with those of patients with isolated imipenem-susceptible P. aeruginosa (ISPA). Demographic features, total burn surface area (TBSA), burn depth, antimicrobials used in 15-day period before isolation, and presence of IRPA in the unit at the same period were included in the risk factors analysis. RESULTS: P. aeruginosa was recovered from 133 patients in this period, 93 were IRPA and 40 were ISPA. There was no significant difference between patients with ISPA and patients with IRPA in terms of age, TBSA, and burn depth. In multivariate logistic regression analysis, hospital stay before isolation (odds ratio (OR): 3.6), carbapenem usage (OR: 7.4), broad-spectra antibiotic usage (OR: 6.5), previous presence of ISPA in the patient (OR: 1.7) and presence of IRPA in the unit at the same period (OR: 2.6) were independent risk factors for acquisition of IRPA. CONCLUSION: Long hospitalization time, previous imipenem/meropenem use, previous broad-spectra antibiotic use, previous presence of ISPA in a patient and presence of IRPA in a unit at the same period were associated with acquisition of IRPA in the burn unit. In order to decrease the incidence of IRPA isolation, the usage of broad-spectra antibiotics, especially carbapenem, should be restricted, hospitalization time should be shortened if possible, and universal isolation precautions should be strictly applied to prevention cross-contamination.     

热带海岛地区某医院烧伤感染病原菌分布及耐药性调查

目的 了解热带海岛地区烧伤感染病原菌分布及耐药情况。方法 回顾性调查分析2000-2005年笔者单位烧伤病区392例住院患者的病原菌分布情况及其耐药性特点。结果 （1）共检出671株病原菌，其中铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌是主要菌种。最常见的铜绿假单胞菌检出率为27．7％，较20世纪90年代（33．6％）有下降趋势。（2）铜绿假单胞菌对亚胺培南／西司他丁及头孢吡肟的耐药率分别为32．2％和36．7％，对其余10种常用抗生素的耐药率均在80．0％以上。（3）141株金黄色葡萄球菌中，共检出89株甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌，检出率为63．1％；未检出对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论 铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌等是热带海岛地区烧伤感染的主要病原菌；前两者的抗生素耐药率较高。     

烧伤患者细菌耐药性的监测

目的 监测烧伤患者中细菌的耐药性,方法 （１）用纸片法进行药物敏感试验,并以有关临床实验室标准数值作为判断耐药标准。（２）用舒巴坦２０μｇ加入于４种头孢菌素纸片内,对多重药的铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯村菌进行药敏试验,检测超广谱β－内酰胺酶的产生,并与未加舒巴坦的药敏纸片进行对照。结果 从烧伤患者中分离到细菌菌株２２７株,其中革兰阴性杆菌有１９５株,占８６％,经药敏试验显示各种细菌均有较高耐药性,且     

烧伤病房728株感染病原菌的分布特点及耐药性分析

目的了解笔者单位近5年烧伤感染病原菌的分布特点及耐药情况。方法收集2001-2006年笔者单位306例烧伤患者创面分泌物等标本中分离的病原菌，对其菌种分布特点及耐药性进行分析。结果革兰阳性菌378株，其中金黄色葡萄球菌的菌株数居首位，尤以甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌居多，表皮葡萄球菌和粪肠球菌的菌株数分别位居第2、3位。革兰阴性杆菌338株，其中鲍氏不动杆菌的菌株数居首位，阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌的菌株数分别位居第2、3位。检出真菌12株。结论笔者单位病原菌的分布情况，可能与甲氧西林耐药葡萄球菌呈多重耐药性以及鲍氏不动杆菌产生各种类型的β内酰胺酶有关。