基因疫苗的免疫方法

基因疫苗的免疫方法即基因疫苗的给药途径 ,目前使用的方法有以下几种 :(1)裸 DNA直接注射 :将裸质粒 DNA直接注射到机体的肌肉、皮内、皮下、粘膜、静脉内。这种方法简单易行。 (2 )脂质体包裹 DNA直接注射 :包裹 DNA的脂质体能与组织细胞发生膜融合 ,而将 DNA摄入 ,减少了核酸酶对 DNA的破坏。注射途径同裸 DNA直接注射。 (3)金包被 DNA基因枪轰击法 :将质粒 DNA包被在金微粒子表面 ,用基因枪使包被 DNA的金微粒子高速穿入组织细胞。 (4 )繁殖缺陷细菌携带质粒 DNA法 :选择一种容易进入某组织器官的细菌 ,将其繁殖基因去掉 …     

科技动态

基因疫苗的免疫方法即基因疫苗的给药途径，目前使用的方法有以下几种：①裸DNA直接注射：将裸质粒DNA直接注射到机体的肌肉、皮内、皮下、粘膜、静脉内。这种方法简单易行；②脂质体包裹DNA直接注射：包裹DNA的脂质体能与组织细胞发生膜融合，而将DNA摄入，减少了核酸酶对DNA的破坏。注射途径同裸DNA直接注射；③金包被DNA基因枪轰击法：将质粒DNA包被在金微粒子表面，用基因枪使包被DNA的金微粒子高速穿入组织细胞；④繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法：选择一种容易进入某组织器官的细菌，将其繁殖基因去掉，然后用质粒DNA转化…     

核酸免疫与核酸疫苗研究进展

核酸免疫是利用重组DNA技术将保护性抗原蛋白基因克隆到真核表达载体,并将其直接导入体内,使抗原蛋白经过内源性表达递呈给免疫系统,诱发机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫反应。核酸免疫也称DNA免疫或基因免疫。用于免疫注射的质粒DNA称为核酸疫苗(nucleicacidvaccine)或DNA疫苗(DNAvaccine)。核酸疫苗不同于传统的弱毒苗、灭活疫苗及蛋白亚单位苗,它是带有特异抗原基因的真核表达质粒。1　核酸免疫的发展核酸免疫是随着现代分子生物学和免疫学的发展而产生的。70年代末,Israel等将纯化的多瘤病毒DNA直接注射小鼠,证实裸DNA可被…     

核酸疫苗的研究与应用

核酸疫苗(nucleicacidvaccine)是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)序列质粒载体作为疫苗,直接导入到动物细胞内,通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗又称为基因疫苗或裸DNA疫苗,核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗。这种免疫称为核酸免疫、基因免疫、DNA介导的免疫以及遗传免疫等。核酸疫苗与传统疫苗相比有许多优势。1核酸疫苗的研究历史核酸疫苗是由基因治疗发展而来的,1990年Wolff等发现,在小鼠肌肉组织内直接注射质粒DNA后,质粒及其携带的外…     

基于MHC分子的新型DNA疫苗研究进展

DNA疫苗相对于传统疫苗,具有安全、方便、成本低等优点,但大多数MHC分子介导的DNA疫苗免疫途径不能够产生有效的免疫应答,是影响DNA疫苗免疫效果的主要因素之一。利用MHC分子特殊的免疫学功能,将其与抗原表位偶联,形成稳定抗原肽-MHC分子复合体,使"裸DNA"成为专业的抗原呈递分子的目标,并直接呈递给T细胞,能更有效地诱导机体免疫应答,无疑将成为改善DNA疫苗效率的有效途径。介绍了基于MHC分子开发新型DNA疫苗的研究进展,以期为新型核酸疫苗的设计与开发提供新思路。     

核酸疫苗的应用现状和发展前景

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA）与质粒重组后直接导入动物细胞内，并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。因此，核酸疫苗也称基因疫苗。它包括DNA疫苗和RNA疫苗，其中DNA疫苗由于不需任何化学载体，故又称裸DNA疫苗。同单链RNA相比，双链DNA具结构稳定、操作简单等许多优点，所以DNA疫苗比RNA疫苗更受学者们的青睐。１核酸疫苗在疾病防治方面的应用自１９９０年，Wolff发现DNA能直接诱导机体产生免疫应答以来，通过国内外学者的不断努力，…     

DNA疫苗及其在动物传染病中的应用

DNA疫苗(DNA vaccine)又称基因疫苗 (gene immunication),核酸疫苗(nuclenic acid immunication),是一种将某种保护性抗原的编码基因克隆到真核细胞表达调控序列的质粒中,并制成DNA的重组质粒,直接给动物注射后,质粒     

猪囊虫DNA疫苗pPCV的生物安全性

以猪囊虫DNA疫苗pPCV为研究对象,其生物安全性问题。将DNA疫苗pPCV以肌注方式免疫仔猪,分别于接种后1d、7d、4周、8周分离各组织,提取组织总DNA,利用PCR技术分析了质粒DNA在各组织的分布,以及与细胞基因组整合的可能性;同时采集环境样品,PCR法分析DNA疫苗上的CMV启动子基因、抗性基因和抗原基因在环境中发生转移和扩散的可能性。结果表明,在疫苗接种后第1天几乎所有组织都能检测到质粒DNA,随着时间的延续,仅在注射部位检测到质粒的存在,并且未发现质粒DNA整合入细胞基因组以及转化环境细菌。实验结果表明肌注DNA疫苗在注射部位以外组织中很快被清除,在注射部位组织及环境细菌中均未发现整合现象,因此认为该DNA疫苗对猪体和环境都是安全的。     

寄生虫核酸疫苗的研究概况

核酸疫苗是一种将某种保护性抗原的编码基因克隆到真核细胞表达调控序列的质粒中 ,制成 DNA的重组质粒 ,直接给动物注射后质粒 DNA在组织内扩散 ,被宿主细胞摄取 ,随后通过宿主细胞的转录翻译系统 ,表达保护性抗原蛋白 ,在抗原蛋白释放分泌的同时 ,诱导机体发生免疫应答 ,产生对该抗原的保护性免疫 ,以达到治疗和预防疾病的目的。因此核酸疫苗又称基因疫苗 [1]。其包括 DNA疫苗和 RNA疫苗 ,目前研究最多的是 DNA疫苗 ,由于其不需要任何化学载体 ,又称 DNA疫苗。本文就寄生虫核酸疫苗的研究作一综述。1　核酸疫苗的研究概况1 994年 5…     

DNA疫苗简介

<正>DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗,即将外源基因克隆到真核表达载体上,然后将重组的质粒直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达、产生抗原、激活机体免疫系统,引起免疫反应。这些质粒来源于可编码病毒抗原的DNA。疫苗中包含的DNA是通过大肠杆菌发酵过程得到。在接种的过程中,质粒在注射位点被细胞(例如皮肤或者肌肉中的树状突细胞)吸收,从而使编码病毒抗原的基因被转录。     

DNA疫苗简介

DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗,即将外源基因克隆到真核表达载体上,然后将重组的质粒直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达、产生抗原、激活机体免疫系统,引起免疫反应。这些质粒来源于可编码病毒抗原的DNA。疫苗中包含的DNA是通过大肠杆菌发酵过程得到。在接种的过程中,质粒在注射位点被细胞（例如皮肤或者肌肉中的树状突细胞）吸收,从而使编码病毒抗原的基因被转录。     

用于DNA疫苗的质粒大规模纯化研究进展

DNA疫苗就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上,然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达.     

铜绿假单胞菌flgE基因菊粉季铵盐纳米DNA的制备与免疫效果研究

为提高铜绿假单胞菌flgE基因DNA疫苗的免疫效果,本实验对菊粉进行阳离子化后获得带正电荷的菊粉季铵盐,以其包裹裸DNA疫苗后制备成菊粉季铵盐纳米DNA疫苗,结果显示,flgE基因壳菊粉季铵盐纳米DNA疫苗在扫描电镜下呈现较为规则的圆球型,粒径100 nm～200 nm。以裸DNA疫苗和菊粉季铵盐纳米DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,同时设置灭活疫苗、pcDNA3.1(+)空载体和PBS对照组。免疫1周时经断尾采血并分离血清,采用间接ELISA检测免疫后血清特异性抗体水平,结果显示小鼠免疫后菊粉季铵盐纳米DNA疫苗诱导的血清抗体水平虽低于灭活疫苗,但明显高于裸DNA疫苗(p0.05)。同时每次免疫2周后,每组各随机取5只小鼠分离制备脾淋巴细胞悬液,采用MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,双抗夹心ELISA测定脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-2的水平,结果显示,纳米DNA疫苗组小鼠的刺激指数(SI)及脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-2含量与灭活疫苗组相当,显著高于裸DNA疫苗组(p0.05)。三免2周后以1.8×1010cfu/只铜绿假单胞菌CAU0792菌液攻击各组小鼠,且计算存活数及保护率,结果显示灭活疫苗组、菊粉季铵盐纳米DNA疫苗组和裸DNA疫苗组的保护率分别为90%、75%和55%,表明菊粉季铵盐可增强裸DNA疫苗诱导的免疫应答水平和保护效果。本实验首次将菊粉进行季铵盐化后使其带有正电荷,有利于结合DNA分子形成纳米颗粒,从而增强了DNA疫苗的免疫原性,为铜绿假单胞菌DNA疫苗的研制及新型DNA疫苗佐剂的开发奠定了基础。     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗又称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗。目前研究最多的是DNA疫苗，由于其不需要任何化学载体，又称裸DNA疫苗，主要是利用基因重组技术直接将编码抗原蛋白的外源抗原基因导入动物体细胞内，在宿主细胞中表达外源抗原基因，诱导宿主产生对该抗原的免疫应答，从而使被接种动物获得免疫保护。     

禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因壳聚糖纳米DNA疫苗的免疫效果

为评价禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因壳聚糖纳米DNA疫苗的免疫效果,本实验以壳聚糖为佐剂制备ptfA基因的壳聚糖纳米DNA疫苗,检测其形态及抗DNA酶降解的能力,随后进行动物免疫实验,检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平、免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、IFN-γ分泌情况和抵抗强毒菌株攻击和免疫保护率。实验结果显示,ptfA基因壳聚糖纳米DNA在透射电镜下呈现较为规则的圆球型,粒径约为200 nm,可以有效抵抗DNAaseⅠ的降解。间接ELISA检测结果显示,壳聚糖纳米DNA疫苗组和裸DNA组的血清抗体水平均呈现上升趋势,明显高于空载体对照组和PBS对照组,且壳聚糖纳米DNA疫苗组的抗体水平稍高于裸DNA疫苗组。淋巴细胞增殖试验和IFN-γ分泌试验结果也显示,壳聚糖纳米DNA疫苗组和裸DNA疫苗组的SI值与IFN-γ分泌水平极显著高于两对照组(p0.01),但两种DNA疫苗组之间差异并不显著(p0.05)。强毒菌株攻击后壳聚糖纳米DNA疫苗组的保护率优于裸DNA疫苗组,在一定程度上增强了禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因裸DNA疫苗的免疫效果。从而为禽多杀性巴氏杆菌新型DNA疫苗的研究奠定了基础。     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是利用基因重组技术生产的疫苗,又称为基因疫苗,包括DNA疫苗和RNA疫苗。目前研究最多的是DNA疫苗,因它不需要任何化学载体,所以又称为裸DNA疫苗。先将编码抗原蛋白的基因连接到真核质粒表达载体上,然后导入宿主细胞内,抗原基因就可以在宿主细胞内被表达,从而诱导宿主对     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是90年代发展起来的新方法，它是继病原体疫苗、亚单位疫苗之后的第三代疫苗。核酸疫苗着重于DNA疫苗的研究，直接用“裸”质粒DNA(未与类脂之类传送工具相连的DNA)提供具有免疫原性的抗原，并经MHCⅠ类、Ⅱ类分子加工提呈，能够诱导机体针对质粒编码的抗原产生强而持久的细胞免疫和体液免疫，刺激机体产生免疫记忆。     

禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究

将制备的禽传染性支气管炎脂质体／DNA疫苗和壳聚糖／DNA疫苗，分别以肌肉注射（i．m）和滴鼻、点眼（i．n）两种途径免疫健康雏鸡，以裸DNA疫苗为对照，采用流式细胞仪（FACS）及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测，并于免疫后35d进行攻毒，结果显示：（1）CD4^＋T淋巴细胞数，所有试验组在免疫后1～3周左右均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），各试验组间，脂质体／DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖／DNA疫苗，但仅在第15天差异显著（P〈0．05），而滴鼻、点眼途径则相反；（2）所有试验组CD8^＋T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组间无显著差异；（3）所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著；攻毒后脂质体／DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡，其他试验组有4％或8％死亡率，均显著低于对照组（12％）。由此可见，脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体，且脂质体／DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖／DNA疫苗。     

猪瘟免疫失败原因及对策

近年来,猪瘟的控制主要是采取免疫,但由于免疫过程中常会出现以下问题而导致本病的发生及流行,给养殖业主带来较大的经济损失。1疫苗剂量不准确导致免疫失败疫苗剂量与免疫是否确实密切相关,当达不到接种剂量时,强毒会在猪体内繁殖和呈现带毒现象,当免疫剂量提高到320-400RID时,攻毒后能抑制亚临床感染;所有耐过猪均不带毒。在实际生产中,注射1头份我国生产的猪瘟兔化弱毒疫苗,有时仍能出现非典型猪瘟,但当注射大剂量的疫苗后可获得良好的免疫效果。因此,要在不稳定地区加大剂量,否则不能有效地切断亚临床感染引起的猪瘟疫情。     

DNA载体——聚DEAE葡聚糖和κ-卡拉胶微囊制备的可行性分析

DNA疫苗是一种或多种抗原编码基因克隆到真核表达载体上,将构建的重组质粒直接注入到体内而激活机体免疫系统,被称为DNA免疫。研制高效的DNA疫苗载体,提高DNA疫苗转染效率,降低给药剂量是DNA疫苗研究中亟需攻克的难题。本文对国内外相关研究分析得出聚DEAE-葡聚糖和κ-卡拉胶微囊作为DNA疫苗载体是可行的。