高密度培养工程菌生产谷肽甘肽

分析了一株具有高ＧＳＨ合成活性的重组大肠杆菌在摇瓶培养中对葡萄糖的利用能力,继而在２Ｌ发酏罐中研究了不同流加方式对该工程菌高密度培养生产ＧＳＨ的影响。结果发现,采用指数流加模式,发酵２５ｈ,细胞密度（干重）、ＧＳＨ总量和生产强度可分别达到８０ｇ／Ｌ,８８０ｍｇ／Ｌ和３．２ｇ／（Ｌ·ｈ）。     

氨基酸和酵母膏对谷胱甘肽发酵的影响

研究了氨基酸和酵母膏对酵母发酵生产谷胱甘肽（ＧＳＨ）的影响。结果表明，多种氨基酸能促进酵母的生长，对ＧＳＨ的生物合成却没有明显促进作用，而半胱氨酸则表现为在抑制酵母生长的同时显著提高胞内ＧＳＨ含量。半胱氨酸初始浓度为５ｍｍｏｌ／Ｌ时ＧＳＨ比产生速率最大，为３．７ｍｇ·ｇｃｅｌ－１·ｈ－１。酵母膏对酵母的生长和ＧＳＨ的合成均有显著的促进作用。若不添加酵母膏，则３％糖浓度下胞内ＧＳＨ含量只有１％糖浓度下的５０％；而若在３％和１％糖浓度下分别添加０．６％的酵母膏，前者胞内ＧＳＨ含量比不加酵母膏的对照提高了一倍左右；３％糖浓度（补糖操作）发酵液中ＧＳＨ总量（９２．５ｍｇ／Ｌ）比１％糖浓度的ＧＳＨ总量高４８％。     

重组人胸腺肽α1工程菌的高密度发酵

为实现重组人胸腺肽α１工程菌Ｅ．ｃｏｌｉ Ｔｏｐ１０／ｐＴｈｉｏ Ｈｉｓ－Ｔα的高密度高表达发酵,首先进行了培养条件的摸索,确定了该工程菌的最佳培养条件、诱导剂ＩＰＴＧ的浓度、诱导起始和结束时间,然后用５Ｌ自控发酵罐进行分批补料培养,发酵中采用分阶段限制性流加氮、碳源,保持溶解氧在３５％左右,结果经３ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导５ｈ,３批重复发酵,最终菌体密度均达到６０Ａ６００以上（相当于干菌２５．６ｇ／Ｌ）,保持了并超过了该重组蛋白在试管和摇瓶中的表达量,融合蛋白Ｔｈｉｏ Ｈｉｓ－Ｔα的表达占菌体总蛋白的４２．４％左右,含量达到了５．７ｇ／Ｌ,相当于胸腺肽α１ ２．４ｇ／Ｌ,为胸腺肽α１的下游纯化和工业化生产奠定了基础。     

Antagonistic effect of nerve growth factor on neuronal injury induced by hypoxia in cultured cerebral cortical neurons of rats

目的：以连二亚硫酸钠造成原代培养的大鼠胎鼠脑皮质神经元缺氧损伤,观察神经生长因子（ＮＧＦ）对缺氧损伤神经元的影响．方法：测定神经元生存力及细胞外液乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的活性来分析ＮＧＦ的作用,脑皮质细胞匀浆用于测定丙二醛（ＭＤＡ）含量及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）活性．结果：缺氧后,ＬＤＨ释放及细胞生存力降低．ＮＧＦ（１－１００μｇ·Ｌ－１）浓度依赖地减少ＬＤＨ的释放及ＭＤＡ的生成,ＮＧＦ１００μｇ·Ｌ－１显著提高细胞生存力及提高ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性２７倍．结论：ＮＧＦ通过减少脂质过氧化物生成及提高ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性来保护大脑皮质细胞抗缺氧损伤     

海洋硫酸多糖DPS对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

本文采用碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和白介素－１（ＩＬ－１）氘诱导的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖模型,以ＭＴＴ法观察了海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。大鼠血管平滑肌细胞在ＤＰＳ浓度为０．００１μｇ／ｍｌ～１００μｇ／ｍｌ的２液中孵育２４ｈ后,分别加入ｂＦＧＦ（５０ｍｇ／ｍｌ）或ＩＬ－１（５０Ｕ／ＭＬ）再孵育２４ｈ,用ＭＴＴ法测定海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。结果表明,     

表达重组人生长激素的大肠杆菌高密度发酵的初步试验研究

根据表达重组人生长激素的大肠杆菌的自身特点，对其发酵的工艺和条件作了初步的研究和改进，通过以甘油代替葡萄糖作为培养基中的碳源，以流加的方式在发酵过程中逐步补加；同时，通过控制搅拌转速，以控制溶氧不低于２０％的水平，在发酵的中后期，再以流加的方式补充适量的蛋白胨等营养成份，使发酵终止时，大肠杆菌的密度由３０ｇ／Ｌ提高至９０ｇ／Ｌ，而ｒ－ｈＧＨ的细胞表达量并未因此而受到影响，发酵周期从１６ｈ缩短到１０     

海南哥纳香醇甲(GHM10)对体外L1210细胞的抗肿瘤活性

用体外培养法研究ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞生长的抑制作用和作用机制。结果表明，Ｌ１２１０细胞在用ＧＨＭ１０处理１ｈ，２４ｈ和７ｄ后，ＩＣ５０依次为６８５，３３２和１５９μｇ·ｍｌ－１，提示ＧＨＭ１０有非时相特异性细胞毒药物的特性。在用ＧＨＭ１０１～２μｇ·ｍｌ－１作用２４ｈ后，Ｌ１２１０细胞的增长率和有丝分裂指数下降，细胞核形态发生变化，但活细胞率仍保持在９６％以上，提示ＧＨＭ１０主要抑制细胞的增殖。用流式细胞计对Ｌ１２１０细胞进行细胞周期动力学的分析表明，ＧＨＭ１０可在一定程度上阻断Ｇ１期细胞向Ｓ期移行，还可增加Ｌ１２１０细胞的膜流动性     

头孢哌酮钠在3种不同输液中的配伍稳定性

目的：研究在室温（１６￣２２℃）条件下头孢哌酮钠（Ｃｅｆ）在５０ｇ／Ｌ ＧＳ，５０ｇ／Ｌ ＧＮＳ及９ｇ／Ｌ ＮＳ３种输液中的配伍稳定性。方法：将Ｃｅｆ加入３种不同输液中配成浓度为２ｍｇ／ｍｌ的混合物，放置室温条件下，用ＨＰＬＣ法测定配伍后不同时间Ｃｅｆ浓度，同时检查ｐＨ值及外观变化。结果：Ｃｅｆ与３种输液配伍后药液浓度均随时间而降低，Ｃｅｆ钠在５０ｇ／Ｌ ＧＳ，５０ｇ／Ｌ ＧＮＳ及９ｇ／Ｌ ＮＳ中     

缺氧／再给氧和细胞因子对白细胞与脑微血管内皮细胞粘附作用？…

目的：研究缺氧／再给氧（Ｈ／Ｒ）对中性粒细胞（Ｎｅｕ）和单核细胞（Ｍｏｎ）与诱导的培养牛脑微血管细胞粘附作用的影响。方法：牛脑微血管内皮细胞（ＣＭＦＣ）和平滑肌细胞（ＣＭＳＭＣ）经Ｈ／Ｒ处理或经ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α刺激，Ｍｏｎ和Ｎｅｕ与ＣＭＥＣ和ＣＭＳＭＣ粘附的细胞数目用流式细胞仪测定，结果：ＣＭＥＣ先缺氧２ｈ再经复氧与ＴＮＦ－α（２μｇ．Ｌ＾－１）作用２ｈ，Ｍｏｎ和Ｎｅｕ与ＣＭＥＣ的粘附率分别     

甲基斑蝥胺抗乙型肝炎病毒体外实验研究

用２．２．１５细胞株体外抗ＨＢＶ药物模型，对研制的甲基斑蝥胺药物体外抗ＨＢＶ流行性进行评价。应用固相放射免疫测定法检测药物对２．２．１５细胞所分泌的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的抑制效果，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交法分析药物对ＨＢＶ－ＤＮＡ的区带影响，同时以ＭＴＴ法检测药物细胞毒性。药物对病毒复制指标ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的５０％抑制浓度（ＩＤ５０）分别为２．８３ｇ／Ｌ、４．６０ｇ／Ｌ，该药对ＨＢＶ－ＤＮＡ区带无明显影响，药物对细胞的５０％毒性浓度（ＣＤ５０）１０．６０ｇ／Ｌ。药物对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的治疗指数（ＴＩ）＝ＣＤ５０／ＩＤ５０分别为３．７５、２．３０。说明甲基斑蝥胺药物在体外具有一定抗ＨＢＶ活性。     

MECHANISM OF ACTION OF NATRIURETIC FRACTION OF URINE

The nature of calcium dependence of natriuretic fraction (NF)-induced contractions in the rat smooth muscle anococcygeus and a possible correlation between the effect of NF on sodium transport and its natriuretic potency was investigated. NF and noradrenaline-induced contractions were partially dependent on external calcium concentration. Ouabain and potassium (K) free solution (KoPSS)-induced contractions were totally dependent on external calcium and were more effectively inhibited by calcium antagonists than those of NF and noradrenaline suggesting pharmacomechanical coupling as the mode of calcium dependence of NF. Like other agonists which contract by pharmacomechanical coupling, NF stimulated sodium transport (86rubidium uptake) in dog saphenous vein. Such stimulation correlated positively (r = 0.495, n = 17, P less than 0.05) with the natriuretic potency of NF. NF, like noradrenaline, contracts smooth muscle by pharmacomechanical coupling and NF-induced natriuresis is associated with stimulation of the sodium pump.     

黄瓜花叶病介体蚜虫种群空间格局动态分析

本文采用聚集指标、聚集指标的模糊聚类分析和空间格局的回归分析等方法,对黄瓜花叶病传毒介体——瓜蚜自然种群动态进行分析,春秋两季瓜蚜种群均为聚集分布;秋季瓜蚜种群空间格局聚集性可划分为前、中、后三种类型;春季瓜蚜分为前、后两种类型。     

电渗作用对甲硝唑经皮渗透的影响

在Ａｇ／ＡｇＣｌ电极的双室扩散池中测定不同电场对模型药物甲硝唑（１）通过离体大鼠皮肤渗透速率的影响。结果表明，１生理盐水饱和液阳极导入时的透皮速率是被动扩散的２．３倍，阴极导入时药物的透皮速率是其被动扩散的４５％，说明电渗作用明显促进了分子型药物１的经皮渗透；与药物渗透方向相反的电渗流则明显阻碍其经皮渗透     

绞股蓝总甙微丸溶出度及稳定性研究

采用包衣造粒工艺制成绞股蓝总甙微丸，并将此微丸装入硬胶囊制成胶囊剂。用不同的溶出介质对其体外溶出进行了研究，并对其稳定性进行了考察。     

磷酸丙吡胺缓释片的生物利用度研究

比较了每１２ｈ口服自制磷酸丙吡胺缓释片和对照胶囊各２００ｍｇ后的稳态血药浓度及波动系数（ＦＩ％）。测求稳态时Ｃｍａｘ：ＣｍｉｎＴｍａｘ和血药浓度时间曲线下面积（ＡＵＣ０－１２），结果显示两制剂Ｔｍａｘ、ＦＩ％有极显著差异，Ｃｍｉｎ有显著差异而Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０－１２并无显著差异。缓释片具明显的缓释效果，然而生物利用度与胶囊剂相当。     

合浦珠母贝珍珠细胞相容性的初步评价

本文报道了合浦珠母贝珍珠的体外细胞毒性试验结果。将珍珠粉的浸提液加L_(929)细胞培养瓶中,通过细胞相对增殖率(RGR)及细胞形态观察表明,合浦珠母贝珍珠具有较好的细胞相容性,对L_(929)细胞形态无明显影响,但细胞相对增殖率略低于羟基磷灰石陶瓷。     

卡马西平多晶型的研究

红外吸收图谱与中国药典图谱不符合的卡马西平（Ａ晶），可通过用较高浓度乙醇使其转为Ｂ晶而符合规定，经￣（１３）ＣＮＭＲ、ＭＳ、Ｘ线衍射分拆，证实该两种晶体为同质异晶。     

抗血吸虫病药鹤草酚类似物的合成

鹤草酚(Agrimophol)(Ⅰ)是从植物仙鹤草(Agrimonia pilosa Ledeb)根芽中分离出来的一种驱绦虫有效成分,王根法等发现它有抗血吸虫作用,但减虫率不高,胃肠道反应也较重。鹤草酚是间苯三酚的衍生物,分子中有角甲基,人工合成较复杂。我们企图改变其化学结构,使成为结构简单而又易于制备并有抗血吸虫活性而毒性低于鹤草酚的类似物。文     

鲎试剂检测自制200批注射剂热原的结果分析

通过使用鲎试剂对青岛医学院附属医院制剂室自制的２００批注射剂进行热原检测的结果进行分析，认为鲎试验法操作简便，快速灵敏度高，结果可靠，故应用鲎试验法检测注射剂热原是非常适宜的。     

贝母辛的结构修正

从川产家种华西贝母(Fritillaria siechuanica)鳞茎中分出贝母辛(peimisine)(碱Ⅲ)。应用光谱法(¹H—¹H,¹³C—¹H COSY,2D—NOE),对文献报告的贝母辛的结构作了修正,并证明FR—5与贝母辛系同一化合物。指出湖贝辛结构的某些错误以及对松贝辛的结构提出怀疑,认为其可能为贝母辛。