药用植物次生代谢相关酶基因克隆方法综述

目的综述药用植物次生代谢酶基因克隆可采用的方法策略,为其基因克隆提供参考。方法查阅相关文献进行总结和归纳。结果阐述了用于克隆药用植物次生代谢酶基因的功能克隆方法、表型克隆方法（DD—PCR、cDNA—AFLP、SSH）、转座子标签克隆方法及图位克隆方法。结论适用于药用植物次生代谢相关酶基因克隆的技术方法有很多种,研究者可根据研究基础、目的和实验条件等进行选择。     

紫草宁生物合成相关的代谢酶及基因

紫草是一种重要的中草药材，其培养细胞在M9培养基中可以大量生产主要的药物成分紫草宁。本文主要论述了在紫草细胞中与紫草宁形成相关的代谢酶和基因方面取得的研究进展，分别讨论了这些代谢酶和基因克隆的功能及表达特性，对植物次生代谢、紫草宁次生药物的生产调控及其代谢工程等研究具有重要的意义。     

中药技术研究热点

转基因药用植物或器官研宄、有效次生代谢途径关键酶基因的克隆研宄、中药DNA分子标记以中药基因芯片的研究等．已成为当今中药研究的热点，并将使传统中药进入一个崭新的时代。在转基因药用植物的研究方面，中国医学科学院药用植物研究所通过用杆菌诱导丹参形成毛状根和冠瘿瘤进而再分化形成植株。他们将其与栽培的丹参作了形态和化学成分比较研究．     

药用植物次生代谢工程

随着对药用植物次生代谢产物生源合成途径日渐全面的认识,应用基因工程技术对植物次生代谢途径进行遗传改良.以期大幅度提高目标产物含量已日益成为研究的热点.本文综述了近年来植物次生代谢途径和遗传修饰领域的研究成果,同时结合本实验室的相关工作,着重介绍黄酮和花青素、吲哚生物碱、莨菪烷和吡咯烷生物碱、萜类化合物等重要植物药用成分的次生代谢工程研究进展.     

光调控对药用植物次生代谢成分合成的影响

药用植物次生代谢成分,因具有特殊的药理活性或功效对人类的健康极为重要,是药品、保健品、化妆品的主要来源。随着人类对于健康和长寿的不断追求,医药市场的需求规模持续增长,提高药用植物次生代谢成分的产量和质量变得特别重要。植物次生代谢成分是植物对环境的一种适应,是在长期进化过程中植物与生物和非生物因素相互作用的结果。药用植物次生代谢成分的产生和积累主要受植物遗传因素和环境因素的影响,其中光环境对其合成影响尤为重要,因而,长期以来光调控一直是国内外众多学者研究的热点。本文综述近年来有关光调控对药用植物次生代谢成分影响的研究进展,主要从光质、光强、光周期的影响分别阐述,以期为高效生产具有重要药理活性的次生代谢成分提供理论依据和实践指导。     

发根农杆菌介导实现药用植物遗传转化的进展

发根农杆菌可转化药用植物而获得毛状根，毛状根在离体培养条件下表现出快速、大量合成代谢产物的能力。近年来许多珍贵药材面临着资源受限的状况，甚至濒临灭绝的危险，因此Ri质粒及其发根培养系统因其在有价值的次生代谢产物生产方面的优越性而被广泛重视，并成为药用资源植物可持续发展的有效途径之一。该文介绍了发根农杆菌转化药用植物的机制、感染植物的方法、影响遗传转化的因素、毛状根的培养以及获得药用植物次生代谢产物等方面的研究。     

药用植物毛状根培养与次生代谢产物的研究

通过检索国内生物学、医药学和大学学报等主要学术发表的论著,对近年来药用植物毛状根培养、以及利用药用植物毛状根培养生产次生代谢产物的研究进展进行总结和简要介绍.     

利用基因工程生产植物次生代谢产物

植物次生代谢产物对于控制和影响植物性状起着十分重要的作用。也为人类提供了所需的药物。染料，香料等众多的化合物，综述了植物次生代谢途径的研究，相关基因的克隆以及次生代谢的基因工程。     

洛伐他汀生物合成及其相关基因研究进展

洛伐他汀是一种有效的降胆固醇药物，这种真菌次生代谢产物及其衍生物是胆固醇生物合成限速酶——HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂。文章综述了用同位素标记前体研究洛伐他汀生物合成和洛伐他汀生物合成相关基因的克隆、功能分析等方面的研究进展。     

蜡梅属药用植物分子生物学研究进展

蜡梅属植物有很高的观赏和药用价值，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、镇痛等药理活性。然而，现今研究多关注其种质资源、品种分类、化学成分和临床应用等方面，缺乏分子生物学方向的系统总结。本文通过整理近年来基因组学、分子标记、分子鉴定、转录组学和功能基因克隆等方向的研究结果对蜡梅属药用植物的系统进化、遗传多样性、分类鉴定、次生代谢、抗逆机制及生长发育过程等多个方面的研究进展进行系统梳理，并就当前亟需解决的问题和研究前景进行展望，以期为加快蜡梅属药用植物的深度开发应用提供理论参考和研究思路。     

发根农杆菌对药用植物遗传转化研究进展

就发根农杆菌转化药用植物机制，感染植物的方法，影响遗传转化的因素，毛状根培养以及获得药用植物次生代谢产物等方面作了详细的综述。     

药用植物内生真菌—生物活性物质的新来源

药用植物内生真菌资源丰富,具有潜在的应用前景。利用内生真菌发酵实现生物活性物质的工业化生产,可以提高其产量,同时有利于珍稀、濒危药用植物资源的保护,对减少野生药用植物多样性的破坏具有重要意义。文章综述了近年来国内外药用植物内生真菌及其次生代谢产物的研究概况和最新进展,并对研究中存在的问题进行了讨论及展望。     

乙型肝炎病毒PreS/S基因真核表达质粒的构建

目的克隆乙肝病毒PreS/S基因及构建真核表达质粒。方法以HBSAg阳性患者DNA为模板PCR法扩增PreS/S基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pcDNA3.1。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含PreS/S基因。结论 PreS/S基因克隆及其真核表达质粒构建成功可用于肝癌发生发展的分子生物学研究。     

气候变暖对药用植物次生代谢产物的影响

气候是决定植物赖以生存的水、热立地条件的主要生态因子。随着全球气候变暖,其对药用植物的生长、代谢、繁衍是否产生影响?其表现特征是否反映在其药用植物次生代谢产物的变化?本文综述了CO2等温室气体增加引起气候变暖,高温对植物类药用植物生长及有效成分积累的影响。     

植物皂苷生物合成中UGT功能研究进展

植物皂苷(Saponins)是广泛存在于绝大多数植物体中不可或缺的一类次生代谢产物。其中多种植物皂苷具有重要的药理活性。尽管皂苷的生物合成途径还未彻底解析,但近年来,皂苷生物合成途径研究,尤其是合成途径下游多基因家族编码酶催化的反应,取得了很大进展。目前,已在个别植物中克隆到了催化个别单体皂苷生物合成的UGT基因,其功能研究取得了一定进展。本文就皂苷合成途径下游催化皂苷元糖基化的糖基转移酶基因克隆和功能研究做一综述,为加快皂苷生物合成途径的解析提供借鉴。     

老鼠簕内生真菌及其次生代谢产物研究进展

老鼠簕是一种药用红树植物，具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化和保肝等药理作用，然而其资源匮乏，发展与应用受到限制。已有研究表明，内生真菌可与宿主植物产生相似或相同的次生代谢产物，利用其次生代谢产物发现药理活性分子或先导化合物是解决药用植物资源匮乏问题的重要举措之一。本文系统地总结了过去20年老鼠簕内生真菌的国内外研究文献，从内生真菌分类及其次级代谢产物的化学成分与药理活性方面进行综述，旨在为老鼠簕内生真菌进一步开发和利用提供参考。     

放线菌次生代谢的分子遗传学研究进展（上）

1　绪论 根据Mann的简单定义,次生代谢并非细菌自身生长、繁殖所必需的代谢,但是,次生代谢并不能够和初生代谢绝然分开来,它们之间有着直接的联系,初生代谢的大多数酶存在于所有细菌细胞中,而次生代谢途径中的酶,以及编码这些酶的基因,仅局限于少数种类的细菌中,这些基因可能来自初生代谢途径中基因的复制和趋异。     

丙型肝炎病毒IRES基因T载体克隆及序列分析

目的构建含丙型肝炎病毒（HCV）核糖体插入位点（IRES）序列的基因克隆,为以后的亚克隆和抑制肝炎病毒作用的研究提供实验材料。方法以含HCV全长基因的质粒为模板,用PCR技术扩增出HCV的IRES序列,将扩增产物IRES基因插入到PMD18T载体后转化DH5α,筛选阳性克隆,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定,再行序列分析。结果经PCR获得355bp含限制性内切酶位点的阳性产物,T载体克隆、PCR及酶切鉴定和序列分析后证实,克隆片段与GeneBank中该基因的序列同源性为99%。结论该实验成功构建了含HCV IRES基因序列的T载体克隆,提示该克隆是用作亚克隆和抑制肝炎病毒研究的理想克隆。     

利用药用植物组织培养生产次生代谢产物的研究进展

本文论述了药用植物组织培养生产次生代谢物的研究进展,包括影响次生代谢产物的因素、提高产量的途径、生物反应器技术的应用等.     

利用增强型绿色荧光蛋白基因作筛选标记克隆载体的构建及鉴定

目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记的新型pUC18筛选载体。方法将EGFP基因克隆至pUC18载体的PstI/HindⅢ位点,构建筛选载体pUC18-EGFP,并验证pUC18-EGFP能否利用EG-FP的荧光特性筛选出含基因重组体的阳性克隆。结果经酶切和基因测序鉴定pUC18-EGFP载体构建正确;在外源基因插入该载体后,对LB氨苄平板上的绿色菌落进行酶切和基因测序鉴定,结果证明LB平板上的绿色菌落即为含有重组质粒的克隆。结论成功构建pUC18-EGFP筛选载体,利用EGFP的绿色荧光可筛选出阳性克隆。