ERRFI1在成年昆明小鼠脑组织中的表达定位研究

目的:探讨ErbB受体反馈抑制物1(ERRFI1)在成年昆明小鼠脑组织不同部位的mRNA和蛋白质表达情况。方法:选用成年健康雌性昆明小鼠,取脑组织的额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑、小脑和海马等部位,采取RT-PCR、real time RT-PCR检测ERRFI1 mRNA在各脑区的表达情况;采取Western Blot检测ERRFI1蛋白质在各脑区的表达情况;再采取免疫组织化学技术的方法对不同部位脑组织ERRFI1蛋白质进行表达与定位情况的研究。结果:ERRFI1 mRNA在小鼠脑组织的额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑、小脑和海马等部位均有表达,且表达没有显著差异;而ERRFI1蛋白质在小脑的表达显著高于额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑和海马(P 0. 05);免疫组化结果显示,ERRFI1在大脑皮质及脑干的部分神经元、海马少数锥体细胞及颗粒细胞、海马分子层及多形层的胶质细胞、小脑的部分神经元、浦肯野细胞、高尔基细胞等呈阳性表达,嗅球的小球周细胞、僧帽细胞、颗粒细胞等也呈阳性。结论:ERRFI1在成年昆明小鼠的脑组织中广泛表达。     

衰老晚期大鼠脑组织丙二醛及非水溶性蛋白的变化

选用ＳＤ大白鼠青年组（３个月）、衰老晚期组（３４－３６个月）各１０只，测定各组大海马、前额皮质、小脑皮质丙二醛（ＭＤＡ）和蛋白质含量的变化。结果如下：与青年组比较，衰老晚期鼠海马、前额皮质、小脑皮质ＭＤＡ和非水溶性蛋白、组织总蛋白含量均明显增多，海马的非小溶性蛋白在２年年龄组均高于其余２个脑区。衰老晚期前额皮质非小溶性蛋白含量明显高于小脑皮质本语文对ＭＤＡ和非小溶性蛋白在衰老晚期的改变的意义进行了     

大白鼠与松果体β肾上腺素能受体的老年性变化

目的 研究老年大鼠大脑皮质、海马、小脑皮质和松果体β肾上腺素能受体的变化。方法 选用老年（２０个月）和青年（３个月）ＳＤ大白鼠,以放射配基受体结合分析法测定大鼠大脑皮质、海马、小脑皮和松果体β受体密度、比较２个年龄组上述脑区β受体含量变化及松果体β受体日周期变化。结果 与青年组比较,老年组大脑皮质、海马β受体含量明显降低（Ｐ〈０．０１）,小脑皮质β受体含量变化不明显（Ｐ〉０．０５）,松果体β受体含     

衰老晚期大鼠脑组织丙二醛及非水溶性蛋白的变化

选用SD大白鼠青年组(3个月)、衰老晚期组(34～36个月)各10只,测定各组大鼠海马、前额皮质、小脑皮质丙二醛(MDA)和蛋白质含量的变化.结果如下:与青年组比较,衰老晚期鼠海马、前额皮质、小脑皮质MDA和非水溶性蛋白、组织总蛋白含量均明显增多,海马的非水溶性蛋白在2个年龄组均高于其余2个脑区.衰老晚期前额皮质非水溶性蛋白含量明显高于小脑皮质.本文对MDA和非水溶性蛋白在衰老晚期的改变的意义进行了讨论.     

高压氧对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨高压氧（HBO）对脑缺血再灌注小鼠神经元的保护作用。方法选取昆明小鼠27只，采用无创微动脉夹阻断双侧颈总动脉血流的方法建立脑缺血再灌注模型。采用HE染色、透射电镜观察脑缺血再灌注小鼠神经元的损伤及HBO干预后的改变，结果光镜显示3组小鼠额叶皮层及海马有不同程度的神经细胞变性、坏死；实验组与对照组异常细胞数比较羞异有统计学意义（P〈0．05）：同组小鼠的皮质和海马比较差异无统计学意义（P〉0．05）。电镜观察显示再灌注后额叶皮质及海马有不同程度的神经元变性、坏死，实验组损害明显减轻，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；同组小鼠的皮质和海马损伤程度比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HBO治疗可对小鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用．可促进损伤的修复。     

大鼠中缝大核神经元向额叶皮质、海马、丘脑、小脑及脊髓的分支投射——荧光素双标记法研究

将荧光素FB-NY、PI-Bb及EB-DAPI-Pr分别注射于31只大鼠的额叶皮质、诲马、丘脑、小脑及颈髓,观察中缝大核中荧光素双标记细胞的分布情况。结果表明大鼠中缝大核神经元可分支投射到丘脑—小脑、丘脑—海马、额叶—丘脑、额叶—小脑、海马—小脑、海马—颈髓、小脑—颈髓、丘脑—颈髓以及两侧的海马和丘脑等许多部位。并有一定的局部定位关系。     

慢性吗啡处理及戒断后大鼠前额皮质、海马和杏仁核中Parvalbumin的表达变化

为了观察慢性吗啡处理及戒断后大鼠前额皮质、海马和杏仁核中parvalbumin(PV)的表达变化,为其功能的研究提供形态学依据,本实验将30只雄性SD大鼠随机分为吗啡依赖组和生理盐水对照组。吗啡依赖组大鼠腹膜腔注射吗啡,2次/d,起始剂量为5mg/kg,逐日递增5mg,至第10d为50mg/kg;对照组注射同体积的生理盐水。于末次注射后动物分别存活3h、3d和14d。用免疫组化方法和相对平均灰度值检测前额皮质、海马和杏仁核内PV的表达。结果显示:在生理盐水处理组各存活时间点,前额皮质、海马和杏仁核内PV的表达相同。和生理盐水对照组相比,3h时海马和杏仁核内PV的表达明显增加(P<0.05),但前额皮质内PV的表达减少。第3d时,海马CA1、CA3、CA4、齿状回和杏仁核内PV的表达减少,但CA2区PV表达继续增加,而前额皮质的表达开始恢复。至第14d时,CA2区PV的表达开始恢复,但CA1、CA4和杏仁核内PV的表达又开始增加,明显高于第3d组(P<0.05)。以上结果提示慢性吗啡处理及戒断后PV的表达具有区域特异性和时相特异性;这种变化在戒断早期可能主要与躯体依赖相关,而戒断晚期主要与精神依赖相关。     

芳香化酶mRNA在小鼠脑内的表达及其分布

目的 研究芳香化酶ｍ（ＲＮＡ（ａｒｏｍａｔａｓｅ ｍＲＮＡ）在小鼠脑内的基因表达。方法 原位杂交组织化学和ＰＮＡ斑点杂交。结果 （１）斑点杂交结果显示,脑内芳香化酶ｍＲＮＡ在小鼠Ｅ１６－Ｐ３００整个发育过程中均有表达,表达高峰在生后６ｄ左右,成年后降至最低;（２）脑内芳香化酶ｍＲＮＡ主要定位于神经元;（３）芳香化酶ｍＲＮＡ在脑内的表达,阳性区域主要分布于大脑皮层,丘脑、下丘脑及边缘系统。其中,皮质锥体细胞层、内侧视前区、隔内侧核、海马各区锥体层、杏仁核群、扣带皮质、梨状前皮质及杏仁周皮质等部位阳性信号较强;中等强度的阳性信号见于丘脑腹内、外侧核,丘脑外侧背核、下丘脑室旁核、室周核等处。结论 以上结果进一步证明脑内芳香化酶的表达与脑发育存在一定的相关性,芳香化酶ｍＲＮＡ的表达部位与文献报道酶的活性分布基本一致;海     

霍乱毒素佐剂联合弓形虫ESA鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染作用

目的 观察霍乱毒素（cholera toxin,CT）佐剂和弓形虫排泄-分泌抗原（ESA）鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用。方法 6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为3组,每组20只。分别用PBS 20μl、ESA 20μg或CT 1.0μg＋ESA 20μg每只滴鼻免疫2次,间隔2周。末次免疫后14 d,用4×104个弓形虫速殖子每只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康及死亡情况。速殖子攻击后30 d,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子。结果 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠的健康状况明显好于PBS组和ESA组,存活率（95%）也显著高于PBS组（55%）。与PBS组相比,CT＋ESA组肝和脑组织内速殖子数分别减少了80.19%（P〈0.001）和78.24%（P〈0.005）。CT作为佐剂联合ESA滴鼻免疫小鼠诱导了高水平的黏膜免疫应答和系统免疫应答。结论 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答可有效抵抗弓形虫速殖子攻击。     

颅内脑电图的临床应用

颅内脑电图（Intracraniald ectroencepholography IEEG）主要包括术前侵人性评估，是指通过颅骨钻孔或立体定向仪把深部电极安放到脑的深部组织，如海马、杏仁核等部位，直接记录这些部位的脑电活动，和通过颅骨钻孔或开颅手术，将条型或网络状电极安置在脑表面（硬膜外或硬膜下）记录脑各个不同部位的发作间期以及发作期的脑电活动。同时，还可以通过这些电极电刺激局部脑组织，以了解它们的功能，进一步描绘出脑皮质功能图，帮助确定手术切除的范围。癫痫的手术治疗，按手术原理治疗方式可分为三种（1）切除癫痫致痫灶。如颞叶切除术，脑皮质致痫灶切除术，选择性杏仁核、海马切除术，大脑半球切除术等。（2）破坏癫痫放电的扩散通路。胼胝体切开术（联合纤维切断术）。（3）强化抑制结构。如慢性小脑电刺激和迷走神经刺激术等。     

上海市人群附红细胞体感染状况的调查

目的了解上海市人群附红细胞体的感染状况。方法按照分层抽样调查的方法在地处中心城区、城郊结合区、郊区的3个区各抽取4个村或居委会作为调查点，血涂片镜检附红细胞体。结果共调查1603户的3003人，人群附红体的标化感染率为17．81％，3个区的标化感染率分别为29．50％、11．89％、7．73％，其差异具有统计学意义（Х^2=196．34，P〈0．05），且有从中心城区向郊区降低的趋势（Х^2=173．88，P〈0．05）；男女感染率（经年龄标化）分别为16．50％和19．82％，差异具有统计学意义（Х^2=5．18，P〈0．05）；年龄组感染率中以10～19岁组最高，与其余年龄组的感染率差异具有统计学意义（Х^2=213．59，P〈0．05）。感染人群总的平均感染度为1．66％，3个区的平均感染度分别为2．06％、1．20％、1．04％（F=8．19，P〈0．05）；年龄、性别感染度差异无统计学意义（F=1．27，P〉0．05；t=1．76，P〉0．05）；感染者具有家庭聚集性分布（Х^2=96．95，P〈0．05）。结论上海市人群中存在附红细胞体感染。主要表现为轻度感染，且具有地区、年龄分布差异和家庭聚集性等特点。     

c—Jun氨基末端激酶选择性抑制剂对哮喘小鼠肺组织IL-2表达的影响

目的探讨c-Jun氨基末端激酶选择性抑制剂（SP600125）对哮喘小鼠肺组织白介素-2（IL-2）表达的影响。方法30只BALB／c小鼠随机分为对照组、哮喘组和SP600125组，制作哮喘模型及干预处理后，处死小鼠，取肺组织，采用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组小鼠肺组织内IL-2的表达。结果免疫组化结果显示，哮喘组小鼠肺组织IL-2表达的平均光密度值为0．76＋0．11，显著高于对照组0．25±0．04，P〈0．01；而SP600125组小鼠肺组织IL-2表达的平均光密度值为0．45±0．08，与哮喘组相比明显降低，P〈0．01。Westernblot结果显示，哮喘组小鼠肺组织IL-2表达的平均光密度值为1．26±0．21，显著高于对照组0．36±0．05，P〈0．01；而SP600125组小鼠肺组织IL-2表达的平均光密度值为0．88±0．11，与哮喘组相比明显降低，P〈0．01。结论c．Jun氨基末端激酶选择性抑制剂能降低哮喘小鼠肺组织IL-2的表达。     

磁共振成像、FLAIR序列及弥散加权成像技术对多发性硬化的诊断价值分析

目的比较常规磁共振成像（MRI）、液体衰减反转恢复（FLAIR）序列及弥散加权成像（DWI）检查技术对多发性硬化（MS）的诊断价值。方法58例MS患者，其中男性34例，女性24例，年龄4～70岁，平均年龄35．95岁。使用MRI进行T1加权、T2加权、FIAIR序列及弥散加权成像检查。将4种序列图像进行比较，同时使用软件进行DWI的弥散系数（ADC）及影像分析。结果①FLAIR序列共检出病灶877个，而T1WI、T2WI和DWI分别检出病灶651、776和537个，分别为FLAIR序列检出病灶数的74％、88％和61％。各成像序列对病灶的检出率之间的差异有显著统计学意义（P〈0．0001）。②MS病灶主要分布在脑室周围白质和半卵圆中心区，占总病灶数的96．1％。其中分布在脑室周围白质的病灶数与半卵圆中心区者相比，差异无统计学意义（P〉0．05），而与脑干、小脑和胼胝体相比，差异均有显著统计学意义（均P〈0．01）。③T1WI信号多为低信号、略低信号和等信号，T2WI及FLAIR序列为高信号，DWI在急性期病灶显示为略高信号影，在慢性期可表现为等信号或低信号。④MS急性期病灶平均ADC与急性脑梗死相比差异无统计学意义（P〉0．05）。亚急性和慢性期平均ADC高于脑缺血的ADC（P〈0．001），但低于脑肿瘤的ADC（P〈0．05）。结论对MS病灶的阳性检出率，FLAIR序列优于其余3个序列；DWI可以较好地区分MS病灶分期，同时应用DWI、ADC检查对判别病灶的性质、鉴别诊断有较大帮助，是诊断MS等脱髓鞘疾病的有效影像学方法。     

Prevention of peroral and congenital acquisition of Toxoplasma gondii by antibody and activated macrophages.

Intramuscular administration of Toxoplasma gondii lysate antigens to mice produced titers of T. gondii-specific antibody (measured by Sabin-Feldman dye test) greater than or equal to 1:1,024 in their sera. Intravenous administration of heat-killed Propionibacterium acnes to mice produced peritoneal macrophages with enhanced microbicidal capacity against T. gondii. Mice with high antibody titers or activated peritoneal macrophages or both had reduced numbers of Toxoplasma cysts in their brains 30 days after peroral challenge. Specific antibody and activated macrophages appeared to act together to significantly (P = 0.01) reduce the numbers of Toxoplasma cysts. A reduction in tissue infection as a result of these treatments was also demonstrated by subinoculation of brain tissue. A high antibody titer alone did not protect against congenital infection. Mice treated with P. acnes delivered reduced numbers of T. gondii-infected pups (P greater than 0.05). Treatment that produced high titers of Toxoplasma antibody and activated macrophages provided significant protection against congenital infection (P less than 0.05).     

Rack1对慢性吗啡成瘾小鼠海马BDNF表达和动物行为偏爱的影响

目的：通过干扰C激酶受体1蛋白（Rack1）的表达,探讨Rack1对慢性吗啡成瘾小鼠海马的作用。方法：建立慢性吗啡成瘾小鼠模型,并分析条件性位置偏爱（CPP）效应。应用RT-PCR检测慢性吗啡成瘾小鼠海马中Rack1和脑源性神经营养因子（BDNF）的mRNA表达水平以及免疫组化观察海马中BDNF蛋白的表达情况。结果：与生理盐水组相比,慢性吗啡成瘾组小鼠海马中Rack1和BDNF mRNA和蛋白表达水平升高（P〈0．05）,且吗啡诱导的CPP效应上升（P〈0．05）,与慢性吗啡成瘾组相比,Rack1干扰质粒组小鼠海马中Rack1和BDNF mRNA和蛋白表达水平均明显下降（P〈0．05）,吗啡诱导的CPP效应下调（P〈0．05）。结论：在慢性吗啡成瘾小鼠海马中,Rack1是一个关键因子。     

Detection of Toxoplasma cysts and oocysts in an urban environment in a developed country

Feces of 115 stray or unwanted cats were screened for Toxoplasma oocysts by sucrose density centrifugation and inoculation into mice. None of the feces examined contained detectable levels of viable oocysts. Using a laboratory infected cat, the sensitivity of this detection technique was found to be about 250 oocysts/g of feces by microscopic analysis and about 2 oocysts by mouse inoculation. Samples of pork and lamb chops bought from suburban butcher shops were screened for Toxoplasma cysts by pepsin digestion and mouse inoculation. One of the 30 pork and none of the 30 lamb chops contained viable cysts. Experimental studies determined that the sensitivity of this method of detection was about 1 cyst/100 g of tissue. The relative likelihood of each route of Toxoplasma infection for members of an urban community in a developed country is discussed.     

细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞增殖变化的研究

目的探讨细粒棘球绦虫（Eg）重组双歧杆菌（Bb）-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞增殖的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB／c小鼠,免疫后8周每鼠用50个Eg原头节攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原（EgAg）或刀豆素A（ConA）刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测免疫小鼠脾细胞增殖反应,同时设有空载体、Bb和MRS对照。结果以上4种疫苗接种组小鼠的囊重抑制率分别为45．33％、41．33％、70．67％和62．67％;疫苗接种组的脾细胞明显增殖;鼻腔内接种和口服免疫组的脾细胞增殖显著高于皮下和肌肉注射组。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生特异性的细胞免疫反应。     

不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用

目的比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果。方法将5-6周龄雌性BALB／c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20雌可溶性速殖子抗原（STAg）、20μg STAg＋40μg蜂胶、20μgSTAg＋1000U IFN-γ或20μgSTAg＋40μg蜂胶＋1000UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次．间隔14d。末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×10^4个／只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子。结果STAg＋IFN-γ组、STAg＋蜂胶＋IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组（P〈0．05）;组织内速殖子虫荷显著降低（P〈0．01）,STAg＋IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57．00％和79．06％;STAg＋蜂胶＋IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68．30％和79．06％。STAg＋蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义。结论在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ辅助STAg显著提高小鼠胸腺、脾比重,增强机体免疫能力,有效抵抗弓形虫的感染攻击,脑、肝组织速殖子虫荷显著减少。     

不同毒力株弓形虫速殖子排泄分泌抗原（ESA）对小鼠自然杀伤细胞（NK）作用的比较

为观察不同毒力株弓形虫排泄分泌抗原（Excretory—Secretory antigen,ESA）对小鼠NK细胞的作用,将18只雌性C57BL／6J小鼠随机分为3组,各组每鼠分别腹腔注射刚地弓形虫RH株ESA200μL（含ESA0．002mg）,PRU株ESA200μL（含ESA0．002mg）和PBS200μL。于注射后6天取脾,流式细胞仪检测脾脏NK细胞的比例,并用乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）法检测各组NK细胞的杀伤活性,ELISA检测血清IFN-γ水平。结果显示,RH株ESA处理组NK细胞比例（5．974-0．26）％,PRU株ESA处理组NK细胞比例（3．32±0．29）％,两组均明显高于PBS对照组（3．084-0．39）％（P〈0．001）,其中RH株ESA处理组明显高于PRU株ESA处理组,差异有统计学意义（P〈0．001）;不同毒力株ESA处理的小鼠NK细胞杀伤能力较对照组有明显的升高,3组间差异有统计学意义（P〈0．01）;不同毒力株ESA处理后小鼠血清的IFN．1水平升高,与PBS组相比差异有统计学意义（P〈0．01）,其中RH组小鼠血清中IFN-1浓度较PRU组升高更为明显,差异存在统计学意义（P〈0．05）。结果表明,弓形虫ESA有活化小鼠NK细胞的作用,且RH株ESA的作用强于PRU株ESA。     

抗病毒治疗对慢性乙型肝炎肝衰竭1年的疗效

目的探讨抗病毒治疗对慢性乙型肝炎肝衰竭的1年疗效。方法收集慢性乙型肝炎肝衰竭病例,选取54例为抗病毒治疗组,选取历史病例67例为对照组。抗病毒治疗组在常规内科治疗的基础上加用抗病毒药物治疗（拉米夫定、恩替卡韦、替比夫定）,对照组仅使用内科常规治疗。分析两组患者在不同时间点病死率、HBVDNA水平、INR、MELD评分及肝功能结果。结果治疗1个月后,两组死亡率差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗3个月后,抗病毒治疗组死亡15例（27．8％）,显著低于对照组（32例,47．8％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗1年后抗病毒治疗组死亡15例（27．8％）,显著低于对照组（37例,61．7％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗1个月后,两组患者ALT、AST、TBIL、INR水平及MELD评分差异无统计学意义（P〉0．05）;抗病毒治疗组HBVDNA水平显著低于对照组．差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗3个月及1年后抗病毒治疗组AⅡ、AST、TBIL、INR、HBVDNA水平及MELD评分显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论抗病毒治疗可降低慢性乙型肝炎肝衰竭患者的死亡率,加快肝功能好转,抑制病毒复制,具有肯定的治疗作用。病情好转后维持抗病毒治疗,可以明显改善慢性乙型肝炎肝衰竭患者的长期预后。