关中奶山羊CSN1S1基因克隆、生物信息学及组织表达谱分析

【目的】 通过分析关中奶山羊αs1-酪蛋白（alpha-s1 casein，CSN1S1）基因组织表达谱及其生物信息学功能，初步探究CSN1S1基因在奶山羊乳成分合成中发挥的作用。【方法】 以关中奶山羊为研究对象，利用PCR扩增并克隆CSNIS1-1和CSN1S1-2 2个突变形态，并利用ProtParam、NetPhos、SingalP 4.1 Server、NPS和Phyre2等多种生物信息软件和在线工具对CSN1S1基因及其突变形态的蛋白质结构、理化性质、磷酸化位点等进行分析，通过实时荧光定量PCR检测CSNIS1-1和CSN1S1-2在关中奶山羊肝脏、脾脏、乳腺、肾脏、子宫、输卵管6个组织中的相对表达量。【结果】 关中奶山羊乳腺上皮细胞中存在CSN1S1-1和CSN1S1-2 2种突变形态。对测序结果比对显示，CSN1S1-1存在3个碱基的突变，CSN1S1-2不仅存在3个碱基的突变，还存在6个碱基的缺失。CSN1S1-1与CSN1S1蛋白相似性为99.07%，CSN1S1-2与CSN1S1蛋白相似性为97.20%。蛋白理化性质分析显示，CSN1S1-1中碱基的突变导致第31位亮氨酸变成脯氨酸、第92位谷氨酰胺变成谷氨酸；CSN1S1-2除上述改变之外，第83位由丝氨酸变成半胱氨酸、第84位由谷氨酸变成谷氨酰胺，还存在第81和82位2个丝氨酸的缺失。实时荧光定量PCR结果显示，CSN1S1-1和CSN1S1-2在关中奶山羊各组织中相对表达趋势基本相同，其中在乳腺、子宫、输卵管中相对表达量较高，在肝脏、脾脏和肾脏中基本不表达，在子宫中CSN1S1-2的表达量显著高于CSN1S1-1（P<0.05）。【结论】 关中奶山羊乳腺上皮细胞中存在CSN1S1-1和CSN1S1-2 2种突变形态，且2种突变形态与CSN1S1的蛋白相似性均达到97%以上。CSN1S1-1在蛋白结构上与CSN1S1已有明显区别，而CSN1S1-2中6个碱基的缺失是导致氨基酸改变、磷酸化位点缺失与移位的直接原因。CSN1S1-2在子宫中表达显著高于CSN1S1-1，其可能在子宫中发挥潜在功能，还有待进一步探索。     

提高鹌鹑育雏期成活率的关键措施

1育雏前的准备工作 1．1育雏室的准备 1．1．1育雏室的大小要根据养殖量的多少而配套完成，在鹌鹑出壳前1周就应对育雏室进行消毒准备。     

不同比例牛角瓜与皇竹草混合青贮品质研究

【目的】探讨不同比例牛角瓜和皇竹草混合青贮的品质,为调制高质量的混合青贮饲料和开发新型饲料资源提供理论依据。【方法】将牛角瓜和皇竹草按照1∶0、2∶1、1∶1、1∶2、0∶1(分别对应1C0P、2C1P、1C1P、1C2P、0C1P组)比例混合调制青贮饲料,青贮60 d后测定混合青贮饲料的感官评分、营养成分、发酵品质和强心苷含量。【结果】1C1P、1C2P和0C1P组的感官评价均优于1C0P和2C1P组,达到了优良等级;不同混合比例对混合青贮饲料中的营养成分均存在显著影响(P<0.05);1C1P组的乳酸含量显著高于其他各组(P<0.05),未检出丁酸;1C0P、2C1P、1C1P、1C2P组强心苷含量比青贮前分别降低了4.87%、6.59%、11.49%和9.52%。【结论】混合青贮对改善牛角瓜青贮品质具有显著效果,同时对强心苷毒素有降解作用,当牛角瓜和皇竹草比例在1∶1时青贮效果最佳。     

鸭1型甲肝病毒亚型的鉴定

为了明确引起雏鸭胰腺炎的新型鸭1型甲肝病毒(duck hepatitis A virus 1,DHAV-1)的分类地位,通过鸭胚血清交叉中和试验测定并分析其与经典的肝炎型DHAV-1的抗原相关性。经血清交叉中和试验测得抗胰腺炎型DHAV-1阳性血清对胰腺炎型DHAV-1、经典的肝炎型DHAV-1的中和效价分别为1∶169.8、1∶91.2,而抗肝炎型DHAV-1阳性血清对经典的肝炎型DHAV-1、胰腺炎型DHAV-1的中和效价分别为1∶125.9、1∶89.1。参照同属小RNA病毒科的口蹄疫病毒血清型、亚型的划分标准,计算得出胰腺炎型DHAV-1与经典的肝炎型DHAV-1间的抗原亲源值(R)为0.62,介于0.32~0.7之间,表明胰腺炎型DHAV-1与经典的肝炎型DHAV-1相比其抗原性发生了较大变异,定名为鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)。     

牛、羊POU1F1基因的研究进展

POU1F1基因是 POU 基因家族的重要成员.POU1F1蛋白在哺乳动物胚胎分化和生长发育过程中起着关键作用.本文综述POU1F1基因的结构特征与功能,POU1F1蛋白的结构特征与作用方式,POU1F1蛋白的调控机制以及近年来对牛、羊POUlFl基因遗传变异及其与经济性状关系研究的最新进展.     

重复交配对雌性金州黑色标准水貂繁殖性能的影响

为建立完善的金州黑色标准水貂交配体系,选择性成熟的雌性和雄性金州黑色标准水貂,采用同一雄性的2次交配("1+1"、"1+7"或"1+8")、同一雄性3次交配("1+7+1'或"1+8+1")、不同雄性2次交配("A1+B7"或"A1+B8")和不同雄性3次交配("A1+A7+B1'、"A1+B7+B1"或"A1+B7+...     

E3泛素连接酶Nrdp1和SOCS-1对布鲁氏菌诱导细胞凋亡的影响

为了探讨E3泛素连接酶Nrdp1、SOCS-1基因在布鲁氏菌侵染巨噬细胞过程中对细胞凋亡的影响,构建Nrdp1、SOCS-1基因的干扰和过表达细胞模型(简称为pLL3.7-N1、pLL3.7-S1和pLEX-Nrdp1、pLEX-SOCS-1);羊种布鲁氏菌16M(简称16M) 侵染正常细胞RAW264.7及pLL3.7-N1、pLEX-Nrdp1、pLL3.7-S1、pLEX-SOCS-1组细胞,qRT-PCR检测Bax、Bcl-2、TNF-α的mRNA表达量,并通过流式细胞仪术检测细胞凋亡率。结果显示,试验成功构建并筛选出干扰和过表达Nrdp1、SOCS-1效果最好的pLL3.7-N1、pLEX-Nrdp1、pLL3.7-S1、pLEX-SOCS-1细胞模型;16M侵染各组细胞,与对照组相比,在不同的时间段pLL3.7-N1、pLL3.7-S1、pLEX-Nrdp1、pLEX-SOCS-1组细胞的Bcl-2和Bax的mRNA表达量差异显著(P < 0.05);pLL3.7-S1组细胞的TNF-α mRNA显著降低(P < 0.05),而pLEX-SOCS-1组显著升高(P < 0.05);pLEX-Nrdp1、pLEX-SOCS-1组细胞凋亡率显著升高(P < 0.05),而pLL3.7-S1组显著降低(P < 0.05)。研究结果表明,Nrdp1、SOCS-1基因与16M诱导的细胞凋亡密切相关,为16M胞内寄生机制的研究奠定了基础。     

甲型H1N1与季节性H1N1流感病毒检测基因芯片的制备与初步应用

建立DNA微列阵技术检测甲型H1N1和季节性H1N1流感病毒的方法,进而探讨该方法用于检测临床标本的可行性。通过生物医学数据库甲型H1N1流感病毒及季节性H1N1亚型流感HA与NA基因进行检索和筛选,应用分子生物学软件,进行序列分析、引物及探针设计,并进行验证。试验所设计的探针可以对甲型H1N1流感与季节性H1N1流感病毒进行区分,用该方法检测了长春市CDC送检的6份疑似甲型H1N1流感病毒临床病例,4份阳性,检测结果同实时荧光定量PCR方法一致。结果表明,利用本研究建立的DNA微列阵技术检测甲型H1N1流感病毒方法,特异性和敏感性强,可作为甲型H1N1流感病毒临床标本检测方法。     

规模化猪场主要疫病免疫程序及注意事项

1主要免疫程序 1．1种公猪 1．1．1猪瘟、猪丹毒、猪肺疫的预防：每年春、秋两次免疫接种或每半年免疫接种1次（可用三联苗4—5头份／头）。1．1．2猪细小病毒病、伪狂犬病和繁殖与呼吸障碍综合征的预防：每年免疫接种1—2次。后备公猪应在配种前4～6周免疫1次，间隔10～15天再免疫接种1次：或者5月龄第一次免疫，间隔4～6周再加免1次。     

奶牛各阶段饲养管理

1犊牛饲养管理 1．1犊牛生长发育特点1．1．1增长迅速，6月龄达成年体质量的30％。1．1．2抗病力弱：出生犊牛组织器官末充分发育，对外界不良环境适应性较差，因而易患病。     

家兔溴敌隆中毒的诊疗试验报告

1材料与方法 1．1药品与设备1．1．1药品0．005％溴敌隆棒状毒饵，维生素K1注射液。     

鸡chUSP1 His594Ala突变使其去泛素化酶活性丧失

泛素特异性蛋白酶1(ubiquitin-specific proteases 1,USP1)是一种去泛素化酶,它在DNA损伤修复应答过程中发挥重要功能。已证明USP1与UAF1(USP1-associated factor 1)形成复合物后,其酶活性会得到极大的提升。chUSP1为在鸡细胞中发现的一种去泛素化酶,生物信息学分析发现它与人USP1同源性高达72%。本研究以本室扩增的chUSP1基因和chUAF1基因,使用bac-to-bac系统表达了chUSP1GG680,681AA单体及chUSP1GG680,681AA/chUAF1复合体。并根据人USP1预测将chUSP1一个可能的活性中心位点第594位组氨酸突变为丙氨酸,并纯化了此突变型的单体和复合体。应用底物Di-Ub/Ub2 WT Chains(K63-linked)及Di-Ub/Ub2 WT Chains(K48-linked)对chUSP1GG680,681AA和突变型chUSP1HGG594,680,681AA进行酶活性分析。试验结果表明chUSP1具有切割Ub链底物的酶活性,且第594位组氨酸残基突变影响chUSP1的去泛素化酶活性。而chUAF1可以与chUSP1相互作用形成复合体,并且明显提高chUSP1酶活性。     

甘露寡糖对犊牛血液免疫球蛋白的研究

选择 30头犊牛 ,随机分成 5组 ,每组 6头。对照组饲喂不含甘露寡糖的牛奶 ,试验 1、2、3、4组分别喂含甘露寡糖 1、2、3、4 g的牛奶 ,通过 30d的试验。结果表明 ,其头平均增重对照组和试验 1、2、3、4组分别为 1 1 .0 2、1 2 .1 2、1 2 .2 5、1 0 .6 2和 1 1 .30kg ,试验 1、2、3、4组增重分别比对照组增加 1 0、1 1 .2、- 3.6和 2 .5 %。试验 1、2、3、4组经济效益分别比对照组提高 1 4 .4、1 3.6 8、-1 5 .4、和 - 7.5 2元。试验结束后对试验 1组和对照组犊牛血液免疫球蛋白IgG、IgA进行测定 ,发现试验 1组比对照组IgA水平提高 2 2 % ,IgG提高 0 .6 % ,研究证明 ,饲喂 1g甘露寡糖效果最好     

分子佐剂Cal对弓形虫SAG1亚单位疫苗的影响

构建分子佐剂钙网蛋白Cal与弓形虫SAG1基因的真核表达载体,探讨其对小鼠的免疫原性。采用PCR扩增Cal和SAG1基因并将其克隆至Pvax1载体中,构建出重组质粒pVAX1-Cal-SAG1和pVAX1-SAG1。将构建质粒pVAX1-Cal-SAG1、pVAX1-SAG1同空载体pVAX1通过肌肉注射的方式免疫小鼠,通过ELISA、CCK-8法和小鼠攻虫试验对该DNA疫苗的免疫效果进行评价。结果显示:SAG1片段为855 bp,Cal-SAG1片段为1 566 bp,成功构建了真核表达质粒pVAX1-Cal-SAG1、pVAX1-SAG。小鼠免疫后pVAX1-Cal-SAG1诱导的特异性抗体水平、脾脏淋巴细胞增殖反应和IL-4、IL-10、IL-12 p70及IFN-γ细胞因子水平均高于pVAX1组、pVAX1-SAG1和空白对照PBS组。攻虫后,佐剂组小鼠存活时间最长,较空白对照组多存活5 d。本研究表明:制备的重组核酸疫苗免疫小鼠后能够诱导机体产生体液和细胞免疫,分子佐剂Cal可以显著地增强弓形虫表面膜蛋白SAG1的免疫原性。     

不同混播模式对播种当年牧草产量和营养价值的影响

为探究不同混播模式对牧草产量和营养价值的影响,本试验通过设置11种混播模式,即4个豆科牧草混播模式[杂花苜蓿(Medicago varia)+红豆草(Onobrychis viciaefolia)+百脉根(Lotus corniculatus)混播比例为1∶1∶1,1∶1∶2,1∶2∶1,2∶1∶1(Z1H1B1,Z1H1B2,Z1H2B1,Z2H1B1)],4个禾本科牧草混播模式[披碱草(Elymus dahuricus)+无芒雀麦(Bromus inermis)+扁穗冰草(Agropyron cristatum)混播比例为：1∶1∶1,1∶1∶2,1∶2∶1,2∶1∶1(W1P1B1,W1P1B2,W1P2B1,W2P1B1)]和3个豆科禾本科牧草混播混播模式[杂花苜蓿+红豆草+百脉根+披碱草+无芒雀麦+扁穗冰草豆禾比为1∶3,1∶1,3∶1(L25G75,L50G50,L75G25)],分析研究不同混播模式对牧草产量和营养价值的影响。结果表明：6种牧草混播模式下各牧草株高、密度、干物质产量均显著低于3种豆科牧草混播模式和3种禾本科牧草混播模式(P<0.05),且牧草粗蛋白含...     

甲型流感蔓延至美国所有50个州

美国疾病控制和预防中心6月1日公布的最新数据显示．甲型H1N1流感疫情已经蔓延至美国所有50个州以及首都华盛顿哥伦比亚特区。美国甲型H1N1流感确诊和疑似病例数量达到10053例．其中包括17名死亡病例。美国疾控中心预计．随着疫情进一步发展．美国可能会出现更多甲型H1N1流感确诊和死亡病例。美国疾控中心此前曾表示．美国甲型H1N1流感确诊病例的数量可能只占所有感染者数量的1／20．     

新疆褐牛不同杂交组合生产性能分析

为了研究夏季放牧冬季舍饲饲养环境下美国瑞士褐牛、德国瑞士褐牛、加拿大瑞士褐牛与新疆褐牛杂交F1代(MXHF1、DXHF1、JXHF1)母牛综合生产性能,选取3种F1代母牛各18头,分别测定0、6、12、18、24月龄体尺、体重,计算体尺指数,并测定18月龄肉质性状。结果显示:6月龄DXHF1体斜长显著高于JXHF1(P0.05),12月龄DXHF1体高极显著高于MXHF1和JXHF1(P0.01),12月龄JXHF1胸围显著高于DXHF1(P0.05),18月龄、24月龄MXHF1和DXHF1体高显著高于JXHF1(P0.05),24月龄MXHF1、DXHF1体斜长极显著高于JXHF1(P0.01);DXHF1初生重显著高于MXHF1和JXHF1(P0.05),18月龄JXHF1体重显著高于MXHF1、DXHF1(P0.05),12～18月龄段JXHF1日增重显著高于MXHF1、DXHF1(P0.05);JXHF1各月龄的体长指数、胸围指数均高于MXHF1和DXHF1;18月龄JXHF1眼肌高度、眼肌面积显著高于MXHF1和DXHF1(P0.05)。从体型外貌上看,JXHF1更偏向肉用类型,MXHF1和DXHF1更偏向于乳肉兼用类型,今后可利用美国瑞士褐牛、德国瑞士褐牛选育新疆褐牛乳用类型,利用加拿大瑞士褐牛选育新疆褐牛肉用类型,同时可利用加拿大瑞士褐牛与新疆褐牛进行杂交育肥,以期获得更高的养殖效益。     

我国猪群H1N1亚型流感病毒流行情况与生物学特性

感染猪群的流感病毒（swine influenza virus,SIV）对养猪业和公共卫生均构成一定威胁。对H1N1亚型SIV监测发现,经典猪H1N1(classical swine H1N1,CS H1N1)、欧亚类禽H1N1(Eurasian avian-like H1N1,EA H1N1)、人源H1N1和2009年大流行H1N1(2009 pandemic H1N1,pdm/09 H1N1)亚型流感病毒均在我国猪群内传播,并且这些SIV相互间不断发生基因重组。一些H1N1亚型SIV会偶发性引起人类感染,对公共卫生存在潜在威胁。此外,H1N1亚型SIV还会引发犬和水貂等动物的感染。经动物模型试验发现,不同H1N1亚型SIV在小鼠、鸡、猪和雪貂中的致病性及传播能力不同,其中一些SIV分离株显示出致死性,需要对其进行生物学特征研究,评估其对人类的潜在风险。SIV导致的猪死亡率不高,因而对其关注较少。但是禽源和哺乳动物源流感病毒可以在猪体内重组为可引起人类大流行的流感病毒毒株,因此应该及时了解SIV的流行情况与生物学特性,并做好相应的控制措施,以减少经济损失,避免具有大流行潜力毒株出现。...     

球虫消杀剂（Oo-stat）的配方优化研究

为获得对鸡球虫卵囊有良好抑杀作用的球虫消杀剂最佳配方,将3种不同配方的球虫消杀剂配成1:20、1:30、1:40、1:50、1:60、1:80、1:100、1:150、1:200、1:300及1:400.分别对柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊体外相互作用6h、12h和24h之后,培养观察其孢子化率.结果表明,配方一、配方二除1:300和1:400处理6h组及1:400处理12h组与对照组差异不显著外,其余各组均显著低于生理盐水对照组(P<0.05);1:20、1:30、1:40、1:50、1:60及1:80的球虫消杀剂溶液分别处理卵囊6h、12h和24h后孢子化率均低于5%;配方三1:20、1:30、1:40、1:50、1:60及1:80的球虫消杀剂溶液分别处理卵囊12h和24h后孢子化率均低于5%,但是当处理时间为6h时,其孢子化率较高.研究表明配方二具有优良的抑杀鸡球虫卵囊的作用.     

北方花面狸在南方繁殖的观察

深圳养殖的 9～ 1 2月龄花面狸 ,比陕西同种群提早 1个月左右性成熟。雄兽 1～ 8月中旬发情 ,雌兽 1月 1 1日～ 7月 1 4日发情 ,比北方提早 30～ 40天 ;可见花面狸发情的开始时间受气温影响大。性周期 8～ 2 3天 ,平均 1 4天 ,发情持续 1～ 1 1天 ,平均 4.41天 ,与北方差别不大。4月 3日～8月 1 1日产仔 ,比北方提早了 2 0天左右 ;妊娠期 51～ 59天 ,与北方一样。每胎产 1～ 6仔 ,一般一年繁殖 1次 ,也可繁殖 2次