鸡致病性大肠杆菌油乳剂灭活苗的制备

从太谷某鸡场分离到疑似鸡大肠杆菌2株,经分离培养鉴定确认为大肠杆菌,血清型分别是O2和O78,将分离菌株经过致病性试验、增菌培养,制备了大肠杆菌灭活苗,经试验证明,本疫苗安全、有效。每只鸡免疫接种0.6mL以上临床无不良反应,对地方性鸡大肠杆菌病有较好的预防作用。     

鸡(肾型)传染性支气管炎及大肠杆菌病二联油乳剂灭活苗的研制和应用

用本地分离株及标准株筛选出4个IBV强毒株（呼吸型和肾型）及7个E．coli强毒菌株（血清型为O1、O2、O78）作为制苗基础毒株和菌株，并加入发病鸡场的自家分离株，作为制苗毒种和菌种，并将制成灭活的尿囊液和菌液以及油佐剂配成鸡（肾型）传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳剂苗。试验证明：该油苗可使鸡产生坚强的免疫力，二免后10个月攻毒保护率达100％，IBV抗体的HI效价为1：256，E．coli抗体直接凝集价为1：128。该苗经多项检验，对鸡安全有效、免疫力强、免疫期长、性能稳定、易于存放。免疫鸡群健康状况稳定、死亡率下降、生产性能提高，对鸡（肾型）传染性支气管及大肠杆菌病具有较好的预防效果。     

鸡(肾型)传染性支气管炎及大二联油乳剂灭活苗的研制和

用本地分离株及标准株筛选出4个IBV强毒株(呼吸型和肾型)及7个E.coli强毒菌株(血清型为O1、O2、O78)作为制苗基础毒株和菌株,并加入发病鸡场的自家分离株,作为制苗毒种和菌种,并将制成灭活的尿囊液和菌液以及油佐剂配成鸡(肾型)传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳剂苗.试验证明该油苗可使鸡产生坚强的免疫力,二免后10个月攻毒保护率达100%,IBV抗体的HI效价为1256,E.coli抗体直接凝集价为1128.该苗经多项检验,对鸡安全有效、免疫力强、免疫期长、性能稳定、易于存放.免疫鸡群健康状况稳定、死亡率下降、生产性能提高,对鸡(肾型)传染性支气管及大肠杆菌病具有较好的预防效果.     

IBD地方流行株油乳剂灭活苗的制备及免疫效果研究

将分离于齐齐哈尔市郊区的传染性法氏囊病病毒野毒株(QJ08),接种适龄易感鸡和SPF鸡胚,分别收集法氏囊和鸡胚组织,经病毒检测灭活后制备油乳剂灭活苗,并对其进行试验室和临床免疫效果比较。结果表明:该疫苗可提供90%以上的免疫保护。抗体转阳90%以上,琼脂扩散试验(AGP)抗体效价平均可达2.5log2;制备的油乳剂灭疫苗对当地流行的法氏囊病有良好的防制效果。     

IBD多价油乳剂苗的研制

选取从湖北、湖南两省区分离的三株ＩＢＤ强毒 株制成多价油乳剂灭活苗,对１日龄艾维茵肉仔鸡进行免疫 试验,保护率达９０％,而对照组发病率１００％,死亡率达６０％。     

鸡致病性大肠杆菌的分离、定型

鸡大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌的某些致病性菌株引起的多种病的总称,其特征是引起鸡的心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、眼球炎、关节炎及滑膜炎、输卵管炎、肠炎、肉芽肿、败血症等。近年来鸡大肠杆菌病有明显上升的趋势,已经成为危害养鸡业的主要细菌性传染病之一。目前国外已发现的大肠杆菌血清型有160多种,对鸡致病的约有15%左右;国内目前已报道的致病性大肠杆菌血清型有50多种,不同地区差别比较大。为此,我们对采自青岛、日照地区的病料进行了细菌的分离、定型。1鸡大肠杆菌致病株的分离1.1材料与方法1.1.1病料与来源:青岛和日照10个…     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研制

以禽流感(AI)的病毒株作为种毒,研制了禽流感油乳剂灭活疫苗,经免疫试验证明,该疫苗在免疫后第14d即可产生坚强的免疫力,HI效价为8.9log2,到第28dHI效价达到最高值9.0log2。该疫苗在4℃保存12个月,其免疫效力未见明显下降。     

鸡源致病性大肠杆菌的分离培养和药敏试验

为探究鸡源致病性大肠杆菌的特点和耐药性,试验通过对疑似病鸡进行病理剖解、病料采集,病原菌分离培养、形态染色鉴定、生化鉴定、致病力试验和药敏试验等方法。从12份病料中分离得到3株革兰氏阴性杆菌,3株菌均具备与大肠杆菌相符的生化特性和不同程度的致病力。药敏试验发现,3株致病性大肠杆菌中对29种药物的敏感性均不高,DGCP3只对6种药物高敏,DGCG1只对3种药物高敏,DZMG对9种药物高敏。可见,经过试验分离得到的3株鸡致病性大肠杆菌的耐药性较为严重。     

鸡大肠杆菌感染的诊治

鸡大肠杆菌病是由致病大肠杆菌引起的鸡的肠道传染病,主要引起鸡败血症、气囊炎、肝周炎、心包炎、脐炎。大肠杆菌是环境和鸡体消化道内的常在菌群,此病的发生与是否建立完善的兽医卫生制度、有良好的防疫条件、有效的消毒制度、科学的管理制度、科学的饲养方式、科学的鸡舍布局等措施,并把这些措施有效的实施,落到实处有着密切的关系。     

鸡大肠杆菌病的防治

在社会经济发展浪潮中,养鸡业日渐朝着规范化、规模化等方向发展,但鸡群疾病发生率明显提升且疾病情况日渐复杂化,极易给养殖人员带来不同程度经济损失。同时,大肠杆菌病属于细菌性疾病,对鸡群危害比较大,具有传染性,急需要多层次加强鸡大肠杆菌病防治,最大化控制发生率的同时促进养殖经济效益提升。     

锦鲤疱疹病毒组织灭活疫苗研制初探

本研究的目的是制备针对锦鲤疱疹病毒的组织浆灭活疫苗,用来控制目前集约化养殖鲤鱼大面积暴发的锦鲤疱疹病毒。利用现场采集的病死鱼内脏,匀浆后腹腔注射进行攻毒试验,采集攻毒后病死鱼的内脏匀浆后,加入0.5%甲醛制备组织浆灭活疫苗。确定所制疫苗无杂菌污染后,在实验室内对6组实验鱼采用不同的接种方法进行疫苗接种,同时设立阴性对照组。实验结果表明,所得疫苗可以在一定程度上降低死亡率,但不能100%的控制发病,具体原因有待进一步探讨。     

杀鲑气单胞菌灭活疫苗的制备及其在大菱鲆体内的免疫效果

为了预防大菱鲆疥疮病,本研究将杀鲑气单胞菌菌株HHSM1905经甲醛灭活制备成灭活疫苗,通过腹腔注射途径免疫健康大菱鲆;对免疫后大菱鲆血清抗体效价、血清溶菌酶(LZM)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性及疫苗保护率进行测定;以β-actin为内参,对免疫相关基因(IL-1β、TLR-5、MHCⅠ、MHCⅡ-α、CD4)表达情况进行定量PCR分析。结果显示,在免疫后2周时,疫苗组血清抗体效价显著高于对照组并达到最大值;疫苗组LZM活性在免疫2周时达到峰值,4周时仍与对照组保持显著差异;疫苗组ACP活性在免疫后的2周达到峰值,与对照组差异显著;灭活疫苗相对保护率(RPS)为72.72%。免疫组与对照组相比,IL-1β、TLR-5、MHCⅠ、MHCⅡ-α、CD4的表达量均呈上调趋势,与对照组差异显著。本研究成功制备了大菱鲆用杀鲑气单胞菌灭活疫苗,其对大菱鲆疥疮病能够起到一定的预防作用,可为大菱鲆养殖过程中疾病预防提供新方法。     

嗜水气单胞菌灭活疫苗对虹鳟免疫力和抗病力的影响

为研究嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)灭活疫苗对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)(250 g±12 g)免疫力和抗病力的影响,给试验鱼腹腔注射0.2 mL的灭活嗜水气单胞菌悬液(1.0×108cfu/mL)。分别在注射前(0 d)和注射后7、14、21、28、35、42 d取样,测定血液白细胞吞噬活性、血清溶菌酶(LZM)活力、补体C3含量以及头肾和脾脏中IgM、IgT基因表达情况。结果表明:注射嗜水气单胞菌疫苗能显著提高白细胞吞噬率(PP)和吞噬指数(PI)、LZM活力和补体C3含量,注射后21 d达峰值,PI、LZM和补体C3在42 d仍显著高于对照组。免疫后21 d头肾和脾脏中IgM基因上调表达,35 d达峰值(分别上升24倍和26倍),42 d下降但仍极显著高于对照组。头肾和脾脏中IgT的上调表达比IgM弱得多,头肾35 d达峰值(上升6.2倍),脾脏28 d达峰值(上升6.1倍)。免疫42 d后嗜水气单胞菌攻毒结果表明,嗜水气单胞菌灭活疫苗对虹鳟有较高的免疫保护作用,免疫保护率达到71.43%。     

Immune responses of Asian sea bass, Lates calcarifer Bloch, against an inactivated betanodavirus vaccine

Asian sea bass, Lates calcarifer (Bloch), exhibited strong immune responses against a single injection of the formalin-inactivated red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV), a betanodavirus originally isolated in Japan. Fish produced neutralizing antibodies at high titre levels from days 10 (mean titre 1:480) to 116 (1:1280), with the highest titre at day 60 post-vaccination (1:4480). When fish were challenged with the homologous RGNNV at day 54 post-vaccination, there were no mortalities in both the vaccinated and unvaccinated control fish. However, a rapid clearance of the virus was observed in the brains and kidneys of vaccinated fish, followed by a significant increase in neutralizing-antibody titres. Furthermore, the vaccine-induced antibodies potently neutralized Philippine betanodavirus isolates (RGNNV) in a cross-neutralization assay. The present results indicate the potential of the formalin-inactivated RGNNV vaccine against viral nervous necrosis (VNN) of Asian seabass.     

一株松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用

为探究松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用,本实验设计了注射感染实验、投喂感染实验和灭活疫苗保护实验,通过组织病理学观察、实时荧光定量PCR(qPCR)和酶活性检测等方法进行分析。结果显示,注射实验中鲫全身性出血、肝脏充血肿大,96 h LD50为5×10⁶ CFU/mL。投喂含不同浓度JS-1的饲料后,鲫肝脏、脾脏、肾脏出现病变,细胞坏死;血清中转氨酶呈先增加后减少的趋势,高浓度(HG)组降低趋势最明显,溶菌酶活性显著升高;鲫肝脏和脾脏中TNF-α和IFN-γ表达量均先增加后减少,且显著高于对照组。注射灭活疫苗后,血清中溶菌酶活性显著高于对照组,而碱性磷酸酶、转氨酶、超氧化物歧化酶活性显著低于对照组,过氧化氢酶活性显著升高;经灭活疫苗免疫后的血清中,特异性IgM和总IgM与对照组相比都显著增加,注射感染JS-1 10 d后鲫的存活率达83.3%。研究表明,松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性强,其灭活疫苗可为鲫提供有效的保护,为松鼠葡萄球菌疫苗的开发提供了理论基础。     

蜂胶佐剂对异育银鲫嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫增强试验

本文就蜂胶佐剂对鱼类细菌性疫苗的免疫增强作用进行了首次评价。试验以异育银鲫嗜水气单胞菌灭活疫苗为对象,比较了蜂胶佐剂、铝胶佐剂和无佐剂三种疫苗对银鲫的免疫效果。经抗体监测表明,免疫接种后第2周,蜂胶佐剂组银鲫已检测到血清抗体,随后抗体效价迅速上升,第4周达到峰值2^5：铝胶佐剂组和无佐剂组第3周检测到抗体．铝胶佐剂组第5周达到峰值2^5,无佐剂组第4周达到峰值2^4。银鲫免疫后第5周进行攻毒保护试验,发现蜂胶佐剂组、铝胶佐剂组和无佐剂组的免疫保护率分别为77．3％．65．0％和56．3％。试验结果表明,蜂胶佐剂能有效增强异育银鲫细菌性灭活疫苗的免疫保护力。     

鳗弧菌口服微胶囊疫苗的制备及其对鲈鱼的免疫效果

以分离自患病鲈鱼(Lateolabrax     

鳗弧菌O1/O2二价灭活疫苗免疫大菱鲆的抗体持续期和免疫保护期

本研究分析了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)O1/O2血清型二价灭活疫苗免疫大菱鲆后的抗体持续期和免疫保护期。以鳗弧菌O1血清型VAM003株和O2血清型VAM007株为抗原制备了福尔马林灭活二价疫苗,将疫苗按照三种剂量(10~7 cells/尾、10~8 cells/尾、10~9 cells/尾)以腹腔注射途径免疫大菱鲆,在免疫后3 d、7 d、14 d、30 d、60 d、90 d、120 d、150 d,用血清凝集实验检测了免疫鱼血清的VAM003和VAM007抗体效价,用攻毒实验检测了疫苗的免疫保护率(RPS)。结果显示,在免疫后7 d三个剂量组的大菱鲆均产生了特异抗体,并获得27%～60%的RPS。三个剂量组大菱鲆的O1血清型抗体持续期分别90 d (10~7 cells/尾组)、150 d (10~8 cells/尾组)、150 d (10~9cells/尾组),而三个剂量组大菱鲆的O2血清型抗体持续期均150 d。三个剂量组的大菱鲆获得的免疫保护持续期均150 d;以RPS75%为有效免疫保护,各剂量组大菱鲆抵抗O1血清型病原感染的有效免疫保护期为:14～120d(10~7 cells组)、14～120 d (10~8 cells/尾)、14～150 d (10~9 cells/尾),抵抗O2血清型病原感染的有效免疫保护期为:14～60 d (10~7 cells组)、14～120 d (10~8 cells/尾)、14～120 d (10~9 cells/尾)。研究结果表明鳗弧菌二价灭活疫苗可为大菱鲆提供有效而稳定的免疫保护,获得的抗体持续期和免疫保护期为该疫苗的临床中试研究提供了基础。     

山莨菪碱提高嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡免疫鲫的效果

为研究山莨菪碱作为佐剂在细菌灭活疫苗浸泡免疫中的作用,将山莨菪碱和嗜水气单胞菌全菌灭活疫苗联合浸泡免疫异育银鲫,首次浸泡免疫7d后加强免疫1次.通过实时荧光定量PCR检测第2、4、7、11、14和21天脾脏中IgM、IL-1β、C3、C-凝集素以及溶菌酶的mRNA表达量,并在第21天进行同源菌株活菌攻击实验.结果显示,山莨菪碱组第4天IgM和IL-1 β的表达量达到最高值,分别为28.3和332.7;而无佐剂疫苗组第11天IgM和IL-1β达到最高值,分别为56.1和791.8.山莨菪碱组的补体C3、C-凝集素以及溶菌酶的表达量都显著高于无佐剂组和对照组,且表达持续时间长.活菌攻击实验表明山莨菪碱组的相对免疫保护率可达80.0％,显著高于无佐剂组的56.0％.结果表明,山莨菪碱与嗜水气单胞菌灭活疫苗共同浸泡免疫银鲫,可以增强脾脏中IgM、IL-1β、C3、C-凝集素以及溶菌酶基因表达,提高银鲫相对免疫保护率.     

中华绒螯蟹嗜水气单胞菌微胶囊口服疫苗制备工艺及特性研究

以福尔马林灭活的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)腹水病及抖抖病并发病病原菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)CL99920菌株为芯材和海藻酸钠为壁材,采用乳化法制备嗜水气单胞菌微胶囊口服疫苗.通过单因素试验和正交试验,研究了海藻酸钠浓度、乳化时间、搅拌速度和菌胶比例对嗜水气单胞菌...