脑缺血再灌注中nNOS介导的ASK1巯基亚硝基化促进其激活

目的本文主要研究在脑缺血再灌注早期,神经性一氧化氮合酶（nNOS）来源的NO是否能够引起凋亡信号调节激酶蛋白1（ASK1）巯基亚硝基化,以及ASK1的巯基亚硝基化与其激活的关系。方法 SD大鼠分为正常对照组,缺血复灌6 h组,7NI给药组,AMT给药组,生理盐水对照组。采用四动脉结扎去结扎法构建大鼠全脑缺血再灌注模型。运用SDS-PAGE、免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学方法对蛋白质的磷酸化以及蛋白质之间的相互作用进行研究;蛋白质的S-亚硝基化的检测主要是通过＂生物素转化法＂（Biotin-Swich method）。结果 nNOS的抑制剂7NI能够降低ASK1的亚硝基化水平,进而降低了ASK1的磷酸化水平（P〈0.05）即ASK1的活性。结论 7NI通过降低nNOS介导的ASK1巯基亚硝基化,对SD大鼠海马区脑缺血再灌注损伤的神经元起到保护作用。     

布地奈德对哮喘小鼠TNOS、cNOS、iNOS及内皮素的影响

目的观察吸入布地奈德（budesonide，BUD）对小鼠哮喘模型哮喘发作、血清及支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中总的一氧化氮合酶（total nitric oxide synthase，TNOS）、结构型一氧化氮合酶（constitutive nitric oxide synthase，cNOS）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、内皮素（andothelin，ET）的影响，探讨BUD防治哮喘的机制。方法30只BALB／c小鼠随机分为3组：哮喘模型组（A组，n=10）、BUD治疗组（B组，n=10）、正常对照组（C组，n=10）。以卵蛋白（ovalbumin，OVA）致敏及激发建立小鼠哮喘模型，观察哮喘发作及肺组织病理情况。采用放射免疫法测定3组小鼠血清及BALF中TNOS、iNOS、cNOS的活性及ET-1的水平。结果B、C2组血清及BALF中TNOS、cNOS、iNOS活性及ET-1的水平均明显低于A组（P均〈0．01），B组TNOS、iNOS、cNOS的活性与C组比较差异均无统计学意义（P均〉O．05），而B组ET-1水平明显高于C组（P〈0．05），B、C2组BALF中WBC总数均明显低于A组（P均〈0．01），血清中iNOS活性与ET-1水平呈正相关（r=0．827，P〈0．01），BALF中iNOS活性与ET-1水平呈正相关（r=0．776，P〈0．01）。结论吸入布地奈德防治哮喘的机制可能与抑制哮喘小鼠BALF、血清中TNOS、iNOS、cNOS活性及ET-1水平有关。但并不完全，气道炎症一旦形成，可能需要较长时间来控制。     

吡格列酮对早期糖尿病肾病大鼠血清一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的慢性并发症和主要死因,其发病机制复杂,缺乏明确有效治疗措施。文中探讨血清一氧化氮(nitric oxide,NO)、一氮化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)与DN的关系及吡格列酮(P ioglitazone)对其影响。方法采用链脲佐菌素诱导糖尿病模型,随机分为正常对照组、正常对照治疗组、糖尿病组、糖尿病治疗组,2治疗组给予吡格列酮10mg/(kg.d)灌胃,每组10只。第10周末测定血糖、肾重/体重、24 h尿蛋白定量;检测各组血清NO含量及总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthases,T-NOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthases,iNOS)和结构型一氧化氮合酶(constructure nitric oxide synthases,cNOS)活性。结果糖尿病治疗组与糖尿病组比较,血糖无显著差异(P>0.05),但肾重/体重和24 h尿蛋白定量明显降低(P<0.01)。糖尿病组NO水平和T-NOS、iNOS活性较正常对照组明显增加(P<0.05或0.01),糖尿病治疗组NO水平和T-NOS、iNOS活性较糖尿病组明显下降(P<0.05或0.01)。cNOS活性各组间比较无显著差异(P>0.05)。结论早期DN大鼠血清NO含量和iNOS活性明显升高。吡格列酮非降糖的肾保护作用可能与其抑制iNOS活性和减少NO生成有关。     

脑缺血／再灌注介导大鼠海马CA1区nNOS巯基去亚硝基化作用的研究

目的：探讨大鼠全脑缺血/再灌注介导的大鼠海马CA1区神经型一氧化氮合酶（ nNOS）巯基去亚硝基化对神经元损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组（ S组）、脑缺血/再灌注组（ I/R组）、给药组（ GSNO组、7-NI组、MK801组、NS102组、GYKI组）及溶剂对照组（生理盐水组、DMSO组）。采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血/再灌注模型。运用生物素转化法检测蛋白质的巯基-亚硝基化,聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹方法、焦油紫染色方法对nNOS巯基去亚硝基化水平以及大鼠海马神经元细胞的损伤进行研究。结果与S组相比,I/R组nNOS巯基亚硝基化水平明显降低（P＜0．05）;与I/R组相比,GSNO组、7-NI组以及MK801组nNOS巯基亚硝基化水平显著增高（P＜0．05）,但GYKI组、NS102组、DMSO组以及生理盐水组与I/R组相比,差异无统计学意义。说明外源性一氧化氮（NO）供体GSNO、nNOS抑制剂7-NI、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体抑制剂MK801能够抑制nNOS的去亚硝基化,对神经元起保护作用。结论大鼠全脑缺血/再灌注所致的大鼠海马CA1区nNOS巯基去亚硝基化在神经细胞损伤中有作用,其去亚硝基化是通过NMDA受体起作用;外源性NO供体GSNO、nNOS抑制剂7-NI也能够抑制nNOS的去亚硝基化从而对神经元起保护作用。     

缺血后处理对肾缺血/再灌注损伤后内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察缺血后处理对大鼠急性肾缺血/再灌注损伤的保护作用及缺血后处理对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响.方法 将2012年9月购自武汉大学动物实验中心的38只8周龄雄性Wistar大鼠依据随机数字表法分为4组：假手术组（8只）、缺血/再灌注组（10只）、缺血后处理组（10只）、缺血预处理组（10只）.建立原位大鼠单侧肾缺血/再灌注动物模型,摘除右肾后对左肾行缺血后处理,10 s再灌注,10 s缺血,6次循环后再灌注24 h.采用全自动生化分析仪检测血尿素氮、肌酐,比色法测定血浆一氧化氮.免疫组织化学法和反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测eNOS表达.蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胞质eNOS水平.结果 肾缺血/再灌注24 h后,缺血/再灌注组中血尿素氮、肌酐、一氧化氮较假手术组显著增高（P＜0.05）,组织中eNOS表达较假手术组升高（P＜0.05）,缺血后处理组和缺血预处理组中的血尿素氮、肌酐较缺血/再灌注组降低（P＜0.05）,血清一氧化氮和组织中eNOS较缺血/再灌注组中升高更显著（P＜0.05）.结论 缺血后处理对大鼠肾缺血/再灌注损伤有保护作用,具有临床应用价值.其保护机制可能与缺血后处理诱导eNOS的合成增多有关.     

雌二醇对大鼠缺血再灌注心肌诱生型及内皮型一氧化氮合酶活性的影响

目的 研究1713-雌二醇（E2）对缺血再灌注心肌诱生型一氧化氮合酶（iNOS）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性的影响,并探讨其心肌保护作用机制。方法采用Langendorff离体鼠心脏灌注模型,将40只卵巢切除（OVX）大鼠随机均分为心肌缺血前对照组（C组）：离体鼠心脏预灌注15min;缺血再灌注组（I—R组）：灌注改良St．ThomasⅡ停搏液,完成心肌缺血再灌注全过程;溶剂对照组（D组）：停搏液中含0．1％的二甲基亚砜（DMSO）,余同I—R组;E：组（E组）：停搏液中含0．1％DMSO及5μmol／L的E2,余同I—R组。检测缺血再灌注前后心肌iNOS和eNOS活性变化,测定冠状动脉流出液中肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）的含量以及心脏功能的变化,观察E2对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响。结果心肌缺血再灌注后eNOS活性下降（P〈0．01）,iNOS活性升高[C组（8．9±3．7）nmol·min^-1·g^-1,I—R组（15．8±2．4）nmol·min^-1·g^-1,D组（17．6±3．2）nmol·min^-1·g^-1,P〈0．01],E组iNOS活性升高更明显[（25．85±5．21）nmol·min^-1·g^-1,P〈0．01],I—R组及D组NO生成减少（均P〈0．05）,E组NO增加[C组（31±5）μmol／L,E组（33±6）μmol／L,P〈0．01],E组CPK和LDH产生减少（均P〈0．05）,E组心脏功能恢复良好（P〈0．05）。结论E2通过提高诱生型一氧化氮合酶活性,促进一氧化氮的产生,减轻心肌缺血再灌注损伤,促进心脏功能恢复。     

卡托普利对SHR大鼠eNOS、iNOS表达的影响

目的 探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)在高血压发展进程中,卡托普利对SHR内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,...     

电针内关穴对大鼠心肌缺血再灌注损伤中一氧化氮及其合酶的影响

目的研究观察电针大鼠内关穴对心肌缺血再灌注损伤 (MIRI)大鼠一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)与同功酶原生型 (cNOS)、诱生型 (iNOS)的变化 ,探讨电针内关穴对心肌细胞的保护作用。方法将大鼠分为 5组即假手术对照组、缺血再灌注模型组、电针内关保护组、电针列缺对照组、电针合谷对照组 ,每组 1 0只动物。检测各组大鼠血清中NO、NOS含量的影响。结果电针心包经内关穴升高心肌NO含量明显强于电针肺经列缺穴 (P <0 .0 5 ) ;电针心包经内关穴可使NOS、cNOS含量升高 ,与模型组比较差异显著 ,且升高心肌NOS及cNOS活性的效应亦明显强于电针列缺、合谷组 (P <0 .0 5 )。各组心肌iNOS变化不明显。结论电针内关穴可以减轻心肌缺血再灌注损伤的程度 ,对心肌细胞有良好的保护作用。     

大鼠全脑缺血再灌注后脑组织一氧化氮合酶的变化

目的 观察全脑缺血再灌注后神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthese，nNOS)与诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的变化，从而探讨一氧化氮在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 实验分为正常组、假手术组、缺血组，采用大鼠4血管夹闭方法制作全脑缺血再灌注模型，观察nNOS、iNOS在缺血20min再灌注2h、6h、1d、3d、5d、7d时的变化及大脑皮层、海马、丘脑的组织病理学改变。结果 nNOS在缺血再灌注后2h开始升高，1d达高峰，3d开始下降，iNOS在再灌注2h开始表达，3d达高峰，5d开始下降，并持续至7d。结论 脑缺血再灌流时nNOS和iNOS表达增强，尤其是iNOS在灌注后期表达，提示N0生成增多可能与缺血后迟发性神经元死亡有关。     

心肌缺血再灌注时氧化亚氮与氧化亚氮合酶的变化及L-精氨酸对其的影响

目的：观察大鼠心肌缺血再灌注时氧化亚氮（nitric oxide,NO）和氧化亚氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）的变化及L-精氨酸对其的影响,探讨心肌缺血再灌注损伤的可能机制。方法：大鼠80只,分为假手术对照（sham）组,心肌缺血再灌注组,肾脏缺血预处理＋心肌缺血再灌注组和L-精氨酸治疗＋心肌缺血再灌注组,检测血清NO及NOS水平,光镜下进行中性粒细胞计数。结果：缺血再灌注（MIR）组缺血30min时相点与对照组相比NO,NOS无差异,再灌注后NO,NOS开始下降,随时间延长,NO,NOS逐渐减少。与MIR组再灌注对应时相比较,肾脏缺血预处理＋MIR组及精氨酸治疗＋MIR组NO及NOS均显著增加。缺血后再灌注时随时间延长,中性粒细胞数量逐渐增加,给予精氨酸干预或肾脏缺血预处理后中性粒细胞数量显著下降。结论：心肌缺血后再灌注时有大量中性粒细胞浸润,与心肌损伤关系密切。缺血预处理可通过增加NO水平减轻随后的缺血再灌注损伤,L-精氨酸可通过增加NO,减少中性粒细胞浸润起心肌保护作用。     

11,12-环二十碳三烯酸对缺血/再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶的影响

目的观察11,12-环二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺血/再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法采用健康雄性Wistar大鼠制备心肌缺血/再灌注模型,实验分为5组:11,12-EET缺血/再灌注组(包括EET1、EET2、EET3)组,EET对照组,缺血/再灌注组,假手术组,正常对照组.观察缺血60min及再灌注30min两个时段心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率及舒张期左心室内压下降的最大变化速率;采用化学比色法观察大鼠心肌组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性.结果缺血/再灌注组缺血60min及再灌注30 min两个时段收缩期左心室内压上升的最大变化速率及舒张期左心室内压下降的最大变化速率均低于假手术组(P＜0.01);EET1、EET2及EET3组均高于缺血/再灌注组(P＜0.01).缺血/再灌注组心肌cNOS低于假手术组(P＜0.01),EET1、EET2及EET3组均高于假手术组(P＜0.01)及缺血/再灌注组(P＜0.01),EET2组高于EET对照组(P＜0.01).假手术组iNOS高于EET对照组(P＜0.05),缺血/再灌注组高于假手术组(P＜0.01);EET1、EET2及EET3组均低于缺血/再灌注组(P＜0.01).结论外源性11,12-EET改善缺血/再灌注心功能损伤同时出现cNOS增加及iNOS减少,提示11,12-EET拮抗缺血/再灌注损伤的作用可能与NOS同功酶改变有关.     

大鼠脑缺血再灌流脑区一氧化氮合酶的变化

研究大鼠脑缺血再灌注后大脑皮层,海马,纹状体和小脑组织一氧化氮合酶的变化。方法采用放射免疫法检测脑组织中ＮＯＳ的活性。结果大鼠脑缺血后５ｍｉｎ,各脑区结构型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）活性明显升高,持续到脑缺血３０ｍｉｎ,脑缺血３０－６０开始下降,诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）活性在脑缺血后１０－１５ｍｉｎ开始升高,并持以脑缺血６０ｍｉｎ;脑缺血３０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ,各脑区ｃＮＯＳ和ｉＮＯＳ活性明显高于缺血     

Kyoto Breast Cancer Consensus Conference

Background To date, there have been no reports on altered nitric oxide （NO） content in ischemia/reperfusion with regard to in vivo preconditioning procedures. These studies are important for understanding the mechanisms of NO during early myocardial ischemic preconditioning. The aim of the present study was to investigate the mechanisms of NO during early myocardial ischemic preconditioning by measuring levels of NO and cyclic guanosine monophosphate （cGMP）, as well as activity of nitric oxide synthase （NOS） in ischemia/reperfusion with respect to preconditioning in rats.
Methods Sixty-six female Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups： ischemic preconditioning group （IP）, ischemia/reperfusion group （I/R）, control group （CON）, and preconditioning procedure group （PC）. In the PC group, rats were further divided into PC1-, PC1＋, PC2-, PC2＋, PC3-, and PC3＋ subgroups. Rats underwent left coronary artery occlusion and reperfusion, and subsequently, NOS activity and levels were assessed with spectrophotometric analysis. cGMP contents were measured with radioimmunoassay.
Results The level of NO and cGMP, as well as the activity of NOS, were significantly higher in the IP group compared to the I/R and CON groups （P 〈0.05）. During preconditioning prior to prolonged ischemia, NO and cGMP levels varied markedly with ischemia and reperfusion. The levels of NO repeatedly increased when the heart was exposed to three episodes of 5-minute ischemia, and were almost completely reversed during each reperfusion period. NO and cGMP levels were significantly different between the 5-minute period of ischemia and the same period of reperfusion during preconditioning.
Conclusions NO plays an important role during early phase myocardial ischemic preconditioning in rats. NO and cGMP could be triggers and mediators of early phase myocardial ischemic preconditioning. Altered NOS activity following ischemic stress could be the primary inducer of higher NO levels detected. NO     

核黄素对心肌缺血再灌注损伤时一氧化氮及其合酶的影响

目的　探讨核黄素(riboflavin)对再灌注损伤心肌保护作用的机制。方法　通过结扎左冠状动脉前降支复制在体心肌缺血再灌注损伤动物模型。将家兔随机分为4组,即假手术组(SC组)、缺血再灌注组(IRI组)、缺血预处理组(IPC组)和核黄素干预组(RBF组) ,检测不同时间点血清中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的含量以及缺血区心肌组织匀浆中一氧化氮合酶(NOS)的活性。结果　与IRI组相比,RBF组在缺血后各时点血清中NO含量升高明显(P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,心肌组织匀浆中各型NOS检测结果示:RBF组cNOS的活性较高,与IRI组相比有显著性意义(P <0 .0 1)。结论　核黄素对再灌注损伤干预作用的部分机制是通过保护冠脉血管内皮,维持cNOS活性,增加NO的释放,从而对再灌注损伤的心肌有保护作用。     

心肌再灌注损伤中一氧化氮合酶及其基因异常表达的研究

目的用鼠的离体工作心脏研究心肌再灌注损伤中一氧化氮（ＮＯ）、ＮＯ合酶（ＮＯＳ）同功酶及其ｍＲＮＡ表达的变化。方法逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）定量检测心肌组织ＮＯＳ同功酶ｍＲＮＡ表达,测定心肌组织中的丙二醛（ＭＤＡ）、ＮＯＳ及冠脉流出液的ＮＯ、肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）的量,同时检测心脏缺血再灌注前后的心功能变化。并分别于冷停跳液中加用地塞米松（Ｄｅｘ）和缓激肽（ＢＫ）,观察其对心肌再灌注损伤的影响。结果心肌缺血再灌注后,结构型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达下调,诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达上调;ｃＮＯＳ活性下降,ｉＮＯＳ活性升高,ＮＯ量减少。使用Ｄｅｘ后,与缺血再灌注的对照组相比,ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达下调,ｉＮＯＳ活力下降,ＮＯ分泌减少,并且心功能恢复好转,ＭＤＡ、ＣＰＫ下降;使用ＢＫ后,ＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达无变化,ｃＮＯＳ活力升高,ＮＯ分泌增多,心功能恢复有好转,ＭＤＡ、ＣＰＫ亦下降。结论ＮＯＳ同功酶表达的变化可能是心肌再灌注损伤的重要机制之一,激活ｃＮＯＳ或下调ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达具有心肌保护作用     

一氧化氮在大鼠胰腺缺血/再灌注中的变化及作用

目的:探讨一氧化氮(NO)在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的变化及作用.方法:雄性Wistar大鼠随机分成3组:A、B组胰腺缺血30 min后,再灌注2,4,6,12,24h.B组再灌注前使用诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂,A组仅给与生理盐水.C组仅行假手术.进行大鼠血清中NO水平和淀粉酶活性检测,胰腺组织形态学观察和免疫组化分析.结果:再灌注4 h后,A组iNOS表达于胰腺组织,B组无表达.此时A组NO水平达到高峰,淀粉酶活性开始升高,均高于B组(P＜0.01).再灌注6 h后,A组显微镜下观察到胰腺损伤的表现,B组未见.C组无iNOS表达,血清NO水平和淀粉酶活性均在正常范围.结论:随着再灌注时间的延长,iNOS表达于胰腺组织,NO在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的有害作用占主导地位.     

卡托普利介导缓激肽诱导预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨卡托普利介导缓激肽诱导预适应对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法 将成年大鼠随机分成正常对照组、缺血再灌注（IR）组、卡托普利预处理组、缓激肽B2受体拮抗剂B1650加卡托普利组,麻醉大鼠冠脉结扎30min后,再灌60min,观察各组缺血再灌注实验动物前后心功能及一氧化氮合酶（NOS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量的变化。结果 缺血再灌注组心肌原生型NOS（cNOS）活性（P〈0．01）及总NOS活性（P〈0．01）显著下降,NO产生明显减少（P〈0．05～0．01）,卡托普利预处理组缺血再灌注期间NO水平高于IR组（P〈0．01）,再灌注30min心肌cNOS活性（P〈0．01）及总NOS活性（P〈0．05）显著高于DIR组,心肌损害较IR组为轻。先静滴B1650后再给予卡托普利,则卡托普利对心肌损伤的保护作用明显减弱。结论 NO产生不足是心肌再灌注损伤的主要因素,卡托普利通过调节缓激肽活性,维持正常NO水平对缺血再灌注大鼠心肌损伤可产生药理预适应保护作用,该作用可为或至少部分为缓激肽所介导。     

一氧化氮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察L-精氨酸(L-Arg)和氨基胍(AG)对大鼠局灶性脑缺血组织中一氧化氮(NO)含量的影响,探讨NO对脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、L-Arg组和AG组,每组15只。L-Arg组、AG组、模型组和假手术组用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型后,L-Arg组按500mg·kg-1腹腔注射1mLL-Arg注射液;AG组按100mg·kg-1术后腹腔注射1mLAG注射液;模型组和假手术组术后腹腔注射1mL灭菌生理盐水。观察缺血再灌注后12、24、72h大鼠行为学改变,血清中NO浓度和脑内一氧化氮合酶(NOS)分布的变化。结果与模型组相比,L-Arg组在缺血再灌注12h行为学评分显著降低(P<0.05),AG组在缺血再灌注24h行为学评分显著降低(P<0.05);AG组在缺血再灌注12h行为学评分高于L-Arg组(P<0.05)。与假手术组相比,模型组、L-Arg组和AG组缺血再灌注12、24、72h的NO含量均显著增加(P<0.05);与模型组相比,L-Arg组缺血再灌注12h的N0含量显著升高(P<0.05),AG组缺血再灌注24h的NO含量显著降低(P<0.05)。缺血再灌注12和24h,AG组的NO含量均显著低于L-Arg组(P<0.05);与假手术组相比,缺血再灌注12、24、72h的模型组、L-Arg组和AG组的iNOS阳性细胞均显著增加(P<0.05);与模型组相比,缺血再灌注12、24、72h的L-Arg组iNOS阳性细胞数差别无统计学意义(P>0.05);但AG组在3个时间点的iNOS阳性细胞数均显著低于模型组(P<0.05);AG组在3个时间点的iNOS阳性细胞数均低于L-Arg组(P<0.05)。结论脑缺血再灌注损伤后脑组织内NO和NOS的表达随时间动态变化,且NO在参与缺血性脑损伤过程中可能具有双重作用。L-Arg、AG通过不同的作用机制对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

Remote postconditioning induced by brief pulmonary ischemia and reperfusion attenuates myocardial reperfusion injury in rabbits

Background  The lung is one of the most important organs that are sensitive to ischemia. We hypothesized that remote postconditioning (RPostC) induced by brief occlusion and reperfusion of the pulmonary artery could attenuate myocardial reperfusion injury.

Methods  Thirty rabbits were randomized into three groups. Group ischemia-reperfusion (IR) (n=10) were anesthetized rabbits subjected to 30-minute occlusion of the left anterior descending coronary artery followed by 180-minute reperfusion. Group RPostC (n=10) had the left pulmonary artery blocked for five minutes followed by a 5-minute reperfusion, and the left anterior descending coronary artery (LAD) occluded for 30 minutes with a 180-minute reperfusion. Group L-N_w-nitro-L-arginine methylester (L-NAME) + RPostC (n=10) had the left pulmonary artery blocked for five minutes followed by a 5-minute reperfusion and intravenous infusion of L-NAME (10 mg/kg), and the LAD occluded for 30 minutes with a 180-minute reperfusion. Blood samples were taken for levels of creatine kinase (CK), superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) at three different time points. At the end of the experiment, tissue samples of the infarcted region were harvested to calculate the cardiomyocyte apoptosis index (AI) by TUNEL. A piece of left and right lung tissue was harvested to evaluate the damage to the lung.

Results  After reperfusion for 180 minutes, the concentration of CK was lower in group RPostC, (4.79±0.27) U/ml, than that in group IR, (6.23±0.55) U/ml (P <0.01), and group L-NAME + RPsotC, (5.86±0.42) U/ml (P <0.01). The concentration of MDA was lower in group RPostC, (6.06±0.36) nmol/ml, than that in group IR, (11.41±0.91) nmol/ml (P <0.01), and group L-NAME + RPostC, (11.06±0.62) nmol/ml (P <0.01). The activity of SOD was higher in group RPostC, (242.34±25.02) U/ml, than that in group IR, (148.05±18.24) U/ml (P <0.01), and group L-NAME + RPostC, (160.66±9.55) U/ml (P <0.01). The apoptosis index was lower in group RPostC, (14.25±5.20)%, than that in group IR, (35.77±10.09)% (P <0.01), and group L-NAME + RPostC, (30.37±7.76)% (P <0.01). No significant difference caused by pulmonary ischemia was found in the lung tissue among the three groups.

Conclusions  RPostC may attenuate myocardial ischemia-reperfusion injury connected to the activity of endothelial nitric oxide synthase. Brief pulmonary ischemia may not be harmful to lungs.