对有糖尿病家族史而糖耐量正常者胰岛α细胞和β细胞第一时相分泌功能的研究

比较正常糖耐量者胰岛α细胞和β细胞第一时相分泌功能,探讨遗传因素对胰岛细胞功能的影响.分别检测有家族史而糖耐量正常者(FH+)40名、无家族史且糖耐量正常者(FH-)55名空腹及左旋精氨酸刺激后胰岛素、胰升糖素及空腹游离脂肪酸等指标的变化,以稳态模型评估的胰岛素抵抗指数评价胰岛素抵抗.校正性别、年龄、体重指数后,2组胰岛素均在2 min达分泌峰值,4min开始下降,且FH+组峰倍数明显小于FH-组(7.29倍对8.88倍,P＜0.05);2组胰升糖素均2min达分泌峰值,4min开始下降,空腹胰升糖素和峰值倍数均无显著性差异(P＞0.05);2组空腹胰岛素与空腹胰升糖素比值无显著性差异(P＞0.05).在糖尿病遗传背景下,即使糖耐量正常者胰岛β细胞的功能已有所下降.     

高尿酸血症病人胰岛β细胞功能分析

目的了解单纯高尿酸血症（HUA）病人胰岛β细胞功能,探讨血尿酸水平与胰岛素抵抗的关系.方法采用左旋精氨酸刺激法和口服75 g葡萄糖耐量试验（OGTT）,观察HUA组56例胰岛β细胞第一和第二分泌时相变化,并与正常对照组40例进行比较.结果经左旋精氨酸兴奋后两组均在2 min达分泌峰值,4 min开始下降,HUA组胰岛素峰值明显高于对照组（t=3.71,P＜0.01）;HUA组空腹胰岛素、OGTT120 min血糖、胰岛素、新β细胞功能指数、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）均明显高于对照组（t=2.46～5.56,P值均＜0.05）;多元回归分析显示血尿酸与低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、HOMA-IR、男性、平均动脉压及肌酐呈正相关关系（t=2.15～3.60,P＜0.05）.结论HUA病人胰岛β细胞功能代偿性增高,且血尿酸水平与胰岛素抵抗呈正相关.     

血清甘油三酯对初诊妊娠期糖尿病患者胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗的影响

目的 探讨血清甘油三酯（TG）水平对初诊妊娠期糖尿病（GDM）患者的胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗的影响.方法 纳入2012年1月至2014年4月入住于上海交通大学附属第一人民医院产科病房,孕24～ 30周的439例初诊GDM患者.收集其一般资料、血脂,行75 g口服葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验,分别计算稳态模型评估β细胞功能指数（HOMA-β）、稳态模型评估胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和定量胰岛素敏感性检测指数（QUICKI）,并将GDM患者以空腹血清甘油三酯（TG）水平分成下三分位T1（1.25 ～ 2.30 mmol/L,n=146）组、中三分位T2（＞2.30 ～ 3.10 mmol/L,n=146）组和上三分位T3（＞3.10 ～ 22.03 mmol/L,n=147）组.三组数据比较采用方差分析,并用逐步多因素线性回归模型分析影响初诊GDM患者HOMA-IR的相关因素.结果 与T1组相比,T2组和T3组GDM患者的体质指数（BMI）较高（均P＜0.05）;T3组的总胆固醇（TC）明显升高（P＜0.05）;T2组和T3组的TG水平明显升高（均P＜0.05）;T3组的高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显降低（P＜0.05）;T3组的空腹血糖（FPG）水平和服糖后1h血糖（1 hPG）水平较高（均P＜0.05）;T2组和T3组的空腹胰岛素（FINS）水平明显升高（均P＜0.05）;T3组的餐后1h胰岛素（1 hINS）水平较高（P＜0.05）;T2组和T3组的服糖后2h胰岛素（2 hINS）水平明显升高（均P＜0.05）.同时,与T1组相比,T2组和T3组HOMA-IR升高（分别为2.0±1.3、2.7±1.2、3.3±2.7）,QUICKI指数降低（分别为1.5±0.5、1.2±0.4、1.1±0.4）,差异均有统计学意义（F=16.745、21.110,均P＜O.05）;而三组间的HOMA-β无明显差异.逐步多因素线性回归模型显示：BMI[标准化回归系数（β）=0.210]、TG（β=0.135）、2 hINS （β=0.394）和年龄（β=-0.118）与初诊GDM患者HOMA-IR显著相关（均P＜0.05）.结论 随着空腹血清TG水平的升高,初诊GDM患者胰岛素抵抗加重,胰岛素敏感?     

脂质异位沉积与大鼠胰岛β细胞胰岛素抵抗的关系及其机制

目的 探讨高脂饲养大鼠胰腺甘油三酯沉积与胰岛β细胞胰岛素抵抗的关系及其机制.方法 40只8周龄健康雄性SD大鼠（体质量160～170 g）按数字表法随机分为高脂饲料组（n=20）和常规饲料组（n=20）,分别给予高脂饲料（热量构成为：碳水化合物占20%,蛋白质占21%,脂肪占66%）和常规饲料（热量构成为：碳水化合物占64%,蛋白质占23%,脂肪占13%）.20周时空腹采血,检测血糖及胰岛素水平.大鼠麻醉后摘取胰腺组织,测定血液及胰腺组织甘油三酯含量.胰腺组织切片行苏木素伊红染色,观察胰岛形态.行胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能.行正常血糖高胰岛素钳夹实验,评价外周组织胰岛素抵抗程度.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测胰岛素受体底物-1、胰岛素受体底物-2、磷酯酰肌醇3激酶和葡萄糖转运蛋白-2mRNA表达水平.两组间比较采用t检验,相关性分析采用Pearson相关分析法.结果 高脂饲料组空腹胰岛素、血液和胰腺组织甘油三酯水平均显著高于常规饲料组（t值分别为2.73、2.89、4.35,均P＜0.01）,胰岛内可见脂质沉积.高脂饲料组葡萄糖输注率明显低于常规饲料组[分别为（5.2±1.2）、（13.6±1.7）mg·min^-1·kg^-1,t=6.48,P＜0.01];葡萄糖刺激的胰岛素分泌明显降低,峰值增高比例不及对照组的1/4（t=7.36,P＜0.01）;胰岛β细胞胰岛素受体底物-1、胰岛素受体底物-2、磷酯酰肌醇3激酶、葡萄糖转运蛋白-2mRNA表达分别下降42.3%（t=8.53）、28.1%（t=3.94）、16.8%（t=2.79）、22.9%（t=5.62,均P＜0.05）.相关性分析显示,胰腺组织甘油三酯水平与胰岛β细胞胰岛素受体底物-1、胰岛素受体底物-2 mRNA表达呈负相关（r值分别为-0.623、-0.537,均P＜0.05）.结论 高脂饲养可导致大鼠胰岛β细胞胰岛素信号转导分子基因表达下降,可能与胰腺组织甘油三酯异位沉积有关.     

胰岛新生相关蛋白对胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌功能的影响

目的 观察胰岛新生相关蛋白对胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌功能的影响.方法 INS-1细胞购自上海拜力生物科技有限公司.葡萄糖刺激实验中,INS-1细胞被分为实验组（50 mg/L胰岛新生相关蛋白与INS-1共培养）和对照组,经2.8、16.7 mmol/L含葡萄糖1640培养液刺激1 h后,采用放射免疫法检测上清液中胰岛素含量.另设立24、48 h组,分别以1、10、25、50、100、250、500 mg/L胰岛新生相关蛋白、INS-1细胞共培养,24或48 h后检测吸光度值.逆转录聚合酶链反应中,INS-1细胞被分为实验组（50 mg//L胰岛新生相关蛋白与INS-1共培养）和对照组,检测PCNA、Cyclin d1、Cdk4、P27、p38MAPK、JNK mRNA表达水平.采用t检验和单因素方差分析进行数据统计.结果 2.8 mmol/L葡萄糖刺激下,实验组胰岛素释放量高于对照组[分别为（74±16）、（39±9）mU/L,t=3.96,P＜0.05];16.7 mmol/L葡萄糖刺激下,实验组胰岛素释放量亦高于对照组[分别为（78±9）、（46±10）mU/L,t=4.72,P＜0.01].随着胰岛新生相关蛋白浓度增加,INS-1细胞增殖更为明显,具有剂量依赖性,且刺激48 h的效应强于24 h.50 mg/L胰岛新生相关蛋白干预24 h后,实验组和对照组相比,PCNA、Cyclin d1、Cdk4 mRNA表达上调（t值分别为7.64、5.98、12.87,均P＜0.01）,P27、p38MAPK、JNK mRNA表达下降（t值分别为10.61、27.64、2.95,均P＜0.05）.结论 胰岛新生相关蛋白干预后,INS-1细胞胰岛素释放水平增加,胰岛细胞数量增多,这可能与其影响细胞周期调控基因的表达有关.     

解偶联蛋白2基因表达对游离脂肪酸升高所致β细胞功能障碍的影响

目的观察血浆游离脂肪酸（FFA）水平短期升高对β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨线粒体氧化应激在其中的作用及机制。方法将24只8周龄体重160-170g雄性SD大鼠采用随机数字表法分为脂肪乳输注组（FFA组,12只）和生理盐水输注组（NS组,12只）。分别输注48h,检测以下指标：（1）采静脉血检测胰岛素和FFA水平;（2）静脉葡萄糖耐量实验,评价活体胰岛β细胞分泌功能;（3）胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;（4）实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测胰岛细胞胰岛素受体底物1和2（IRS-1、IRS-2）和解偶联蛋白-2（UCP-2）mRNA表达的变化。两组间差异比较采用独立样本t检验。结果FFA组血胰岛素水平较NS组增高[（25．2±2．3）比（18．6±1．7）mU／L,t=7．9,P〈0．05],FFA水平也显著高于Ns组[（1．39±0．18）比（0．64±0．10）mmol／L,t=12．8,P〈0．05]。FFA刺激后,FFA组活体和离体的胰岛β细胞分泌功能均较NS组增强[活体分别为（137±24）、（80±16）mU／L,t=6．8,P〈0．05;离体分别为（272±4）、（227±4）mU／L,t=28．6,P〈0．05]。与NS组相比,FFA组胰岛细胞IRS-1mRNA表达增加了29．3％4-2．6％（t=2．2,P〈0．05）,IRS-2mRNA及UCP-2mRNA表达分别增加了345．1％±4．7％、228．4％±4．2％（t=3．4、3．0,均P〈0．05）。结论血浆FFA水平短期升高对β细胞胰岛素分泌有刺激作用,但同时激活线粒体氧化应激,使UCP-2表达相应增加。     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征糖耐量健康者血糖代谢情况的配对研究

目的评价阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAS)糖耐量健康者血糖代谢情况。方法选择按照体质量指数(body mass index,BMI)配对的不同程度OSAS糖耐量健康的男性患者共30例,进行睡眠呼吸暂停监测,并测定空腹血糖、空腹胰岛素水平,利用新稳态模型评估法(HOMA2)计算胰岛β细胞功能、胰岛素抵抗指数、胰岛素敏感指数,并作统计学分析。结果BMI配对的呼吸暂停低通气指数(apnea-hypopnoea index,AHI)＜15次/h与AHI＞15次/h的两组患者BMI、年龄、腰臀比、颈围差异均无统计学意义(P＞0.05);两组患者AHI水平差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者夜间最低血氧饱和度差异有统计学意义(P＜0.05)。两组患者空腹血糖水平及HOMA2-胰岛β细胞功能指数差异无统计学意义(P＞0.05);两组患者空腹胰岛素水平差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者HOMA2-胰岛素敏感性指数差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者HOMA2胰岛素抵抗指数差异有统计学意义(P＜0.05)。结论OSAS患者在糖耐量正常阶段存在代偿性高胰岛紊血症,但未出现胰岛β细胞功能缺陷。     

老年糖尿病患者胰岛β细胞功能及其与胰淀素和褪黑素的关系

目的观察新诊断老年糖尿病(DM)患者胰岛β细胞功能特点及其与胰淀素、褪黑素的关系。方法收集初诊DM患者60例,其中老年DM组27例,成年DM组33例,对照组30例。均行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),计算胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)。采用ELISA法检测患者空腹血清胰淀素、褪黑素水平。同时测定所有受试者的血脂、体重指数(BMI)和腰臀比(WHR),并对结果进行统计分析。结果 (1)老年DM组与成年DM组比较HOMA-β明显降低〔(58.20±24.89)vs(81.20±40.80),P0.01〕,而OGTT2h血糖、胰岛素值及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显升高(P均0.05)。(2)与对照组相比,老年DM组血清胰淀素水平显著增高〔(21.57±15.88)vs(17.82±12.15)ng/L,P0.01〕;而褪黑素水平明显降低〔(6.56±1.32)vs(7.65±1.39)pg/ml,P0.01〕。(3)老年糖尿病组HOMA-β与褪黑素呈正相关(r=0.403,P=0.016),与胰淀素(r=-0.461,P=0.003)、HOMA-IR(r=-0.238,P=0.009)呈负相关,与空腹血糖、胰岛素、甘油三酯(TG),WHR则无明显相关性。结论新诊断的老年DM患者存在明显的胰岛素分泌缺陷,胰淀素的增高和褪黑素的降低可能与老年糖尿病的发生有关。     

应用高葡萄糖钳夹技术评估高糖喂养小鼠胰岛细胞功能

目的利用高葡萄糖钳夹技术探讨高糖喂养小鼠胰岛B细胞功能。方法将16只4周龄C57BL／6J品系小鼠随机数字表法分为2组（各8只）,分别用高糖与普通饲料喂养,8周后行腹腔葡萄糖耐量实验比较2组小鼠葡萄糖耐量,行胰岛素耐量实验比较2组小鼠外周组织对胰岛素的敏感性,应用高葡萄糖钳夹技术比较模型小鼠在体胰岛β细胞第1时相和第2时相胰岛素分泌改变。钳夹实验结束3～4d后麻醉动物,取小鼠肝脏,利用庚烷-异丙醇-吐温的方法提取肝脏内甘油三酯及总胆固醇。组间数据比较采用t检验。结果喂养10周时,高糖组小鼠体质量[（18．0±0．8）g]低于普食组[（23．6±0．5）g],2组差异有统计学意义（扭5．595,P〈0．05）。高糖组糖耐量曲线下面积为（103±3）mmol／L,显著高于普食组的（91±3）mmol／L（t=2．487,P〈0．05）。普食组葡萄糖利用指数（KITT）与高糖组差异无统计学意义（分别为0．53±0．08和0．54±0．14,t=2．360,P〉0．05）。高葡萄糖钳夹显示,高糖组第1时相胰岛素水平较普食组下降了49．6％[分别为（0．71±0．26）和（I．41±0．44）μg/L;t=2．943,P〈0．05];高糖组平均葡萄糖输注率为（6．8±2．2）mg·kg-1·min-1,也较普食组的（20．2±2．3）mg·kg-1·min-1降低了66．3％（t=4．206,P〈0．05）。结论高糖喂养早期（8周）,小鼠发生葡萄糖耐量降低,主要为胰岛β细胞第1时相胰岛素分泌减弱所致,并非外周胰岛素敏感性改变引起。     

辛伐他汀抑制大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌的机制研究

目的 观察辛伐他汀对大鼠胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)的抑制作用及其机制.方法 8周龄健康雄性Wistar大鼠60只,体重250～300 g,饲养1周内分批处死.采用胆管注射胶原酶法提取大鼠胰岛,将新鲜分离或经24 h培养的大鼠胰岛按体积大小分为对照组(胰岛数=60)和辛伐他汀组(胰岛数=60),对照组给予Kreb-Ringer碳酸氢盐缓冲液,辛伐他汀组以100μmol/L辛伐他汀水浴30 min或过夜培养24 h.两组经2.8、5.5、11.1、16.7、25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,采用37 ℃水浴法观测胰岛β细胞GSIS变化,选用生物化学发光法测定腺苷三磷酸(ATP)含量.两组间数据比较采用t检验.结果 100 μmol/L辛伐他汀水浴30 min后,在25.0 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛β细胞ATP含量较相应对照组明显下降[(9.2±1.6)vs(12.1±1.9)pmol/胰岛,t=2.97,P＜0.05],GSIS较相应对照组明显减少(2.31±0.38 vs 3.19±0.41,t=3.154,P＜0.05).100μmol/L辛伐他汀过夜培养24 h后,在11.1 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛β细胞ATP含量较相应对照组明显降低[(9.2±1.4)vs(11.9±2.0)pmol/胰岛,t=2.514,P＜0.05];在2.8 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛素分泌即已明显受到抑制(0.28±0.03 vs 0.47±0.05,t=2.460,P＜0.05).辛伐他汀浓度超过30 μmol/L时,可剂量依赖性地抑制GSIS(2.49±0.21 vs 3.17±0.23,t=2.445,P＜0.05).结论 高浓度辛伐他汀可能通过抑制胰岛β细胞ATP生成而抑制GSIS.     

增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响

目的观察不同月龄大鼠的糖代谢指标变化,了解在基础和糖刺激下增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响。方法以4月龄（青年组,n=15）、14月龄（中年组,n=15）和24月龄（老年组,n=15）健康雄性Wistar大鼠为研究对象,进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素释放试验（IRT）,比较三组间基础血糖和胰岛素水平的差异,计算糖负荷后胰岛素增值与血糖增值的比值（ΔI10/ΔG10）,120min葡萄糖、胰岛素曲线下面积（AUCg,AUCi）,葡萄糖与胰岛素曲线下面积比值（AUCi/g）,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）等,以分析各组间胰岛功能的差异。结果随着月龄的增长,空腹血糖有升高的趋势,但未达到统计学差异。OGTT后老年组大鼠表现为血糖达峰时间延长,血糖峰值增加,OGTT2h血糖及AUCg增加,即老年组大鼠出现糖耐量异常状态,主要表现为餐后高血糖。青年组、中年组和老年组大鼠空腹胰岛素水平分别为（0.59±0.14）、（1.60±0.15）、（2.37±0.04）μg/L（两两相比均P〈0.01）;IRT中,老年组大鼠胰岛素达峰时间延迟,ΔI10/ΔG10降低,AUCi增加（P〈0.05）。使用稳态模型评估,HOMA-β在青年、中年和老年组中呈递增趋势,但未达到统计学差异;而HOMA-IR在青年、中年和老年组分别为3.09±0.80、8.34±0.72、13.14±1.59（两两相比均P〈0.01）。结论正常老龄大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,但由于胰岛素分泌的早期时相受损,仍然出现糖负荷后血糖增高状态。     

酰基化Ghrelin在体外拮抗巨噬细胞介导的炎症反应对胰岛β细胞功能影响的研究

目的 采用Transwell小室构建的小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7共培养系统,探讨酰基化Ghrelin能否保护胰岛β细胞免遭巨噬细胞介导的炎症损伤. 方法 实验分为单独RAW264.7巨噬细胞组、单独MIN6胰岛细胞组、共培养组和Ghrelin干预组.RT-PCR和Western blot 检测巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β、TNF-α的浓度,以及葡萄糖刺激后MIN6细胞上清液的胰岛素浓度. 结果 (1)共培养系统中,巨噬细胞TLR4[mRNA及蛋白水平分别为(1.35±0.13),(0.93±0.03)],A-FABP[(1.99±0.10)vs(0.91±o.01)]的表达],细胞上清液IL-1β[(10.47±1.11) pg/ml]、TNF-α[(917.54±9.09) pg/ml]蛋白水平较单独RAW264.7巨噬细胞组高(P＜0.05);(2)高糖刺激下,共培养系统中胰岛β细胞的胰岛素分泌水平较单独MIN6胰岛细胞组低(P＜0.05);(3)与共培养组比较,酰基化Ghrelin干预后共培养,巨噬细胞TLR4表达水平和TNF-α均降低(P＜0.05),且呈剂量依赖性,但胰岛β细胞的胰岛素分泌水平与共培养组比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,炎症通路活化,炎症因子释放,胰岛β细胞的胰岛素分泌功能受损;酰基化Ghrelin可剂量依赖性削弱巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,但不能完全阻止胰岛β细胞胰岛素分泌功能的降低.     

不同糖耐量人群胰岛β细胞功能特点及体脂的影响

目的 探讨不同糖耐量人群胰岛β细胞功能的特点以及体脂水平对其的影响.方法 2007年6月至2008年5月对新疆20～74岁以上的常住人口进行横断面多中心整群随机抽样调查.所有受试者均进行口服糖耐量试验(OGTT)及胰岛素检测,评估受试者胰岛β细胞功能.按糖代谢状态分为5组:正常糖耐量(NGT)组、空腹血糖受损(IFG)组、糖耐量减低(IGT)组、IFG+IGT组及新诊断2型糖尿病(T2DM)组.结果 (1)与NGT组相比,IGT、IFG、IFG+IGT和T2DM组的稳态模型胰岛细胞功能指数(HOMA-β)均较低[130±92比90±79、66±55、68±47、71±46(t=3.19～4.88,均P＜0.01)],同样低于NGT组的有,早相胰岛素分泌指数AUCins/gluc30[13±9比12±7、11±9、10±7、8±6(t=2.51 ～3.24,均P＜0.01)],总时相胰岛素分泌指数AUCins/gluc120[5.0±4.0比4.6±4.2、4.0±3.7、3.9±2.9、3.7±2.9(t=2.62～4.46,均P＜0.01)];早相胰岛素处置指数DI30[10.1±5.6比7.0±4.3、5.2±3.9、3.6±3.1、2.2±2.1(t=2.76～3.64,均P＜0.01)]及总时相胰岛素处置指数DI120[3.1±3.0比2.8±2.1、1.8±1.5、1.3±0.9、1.2±1.0(t=2.71～9.22,均P＜0.0l)].(2)在NGT、IFG、IGT和T2DM组中,体质指数(BMI)升高组的AUCins/gluc120水平显著增高(5.3±2.3、6.2±2.3、4.7±2.1、4.1±2.0; t=-4.48～-2.07,均P＜0.05).(3)Logistic多元回归分析提示BMI为HOMA-β和AUCins/gluc 120水平的相关风险因素(均P＜0.01).结论 随着T2DM进程的发展,胰岛β细胞功能逐渐减弱,体脂水平可能对不同糖代谢状态下的胰岛β细胞功能产生影响.     

吡格列酮对胰岛α细胞胰岛素抵抗的影响

目的 研究高脂饲养大鼠胰岛α细胞的分泌功能和胰岛素信号转导分子基因的表达变化以及吡格列酮干预的影响.方法 雄性SD大鼠分为正常饲养组(NC)、高脂饲养组(HF)、高脂+吡格列酮组(HP).喂养20周后检测空腹血胰岛素(FINS)、胰高血糖素、游离脂肪酸(FFA)水平;正常血糖高胰岛素钳夹试验评价外周胰岛素抵抗程度;胰岛表面灌注检测高糖状态胰高血糖素的动态分泌变化;同时各组大鼠随机人组8只给予大剂量链脲佐菌素去β细胞处理,得到去β细胞正常组(NC-B)、高脂组(HF-B),高脂+吡格列酮干预组(HP-B).实时定量PCR方法比较3组去β细胞大鼠α细胞胰高血糖素、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)、磷脂酰肌醇3激酶(P13K)的mRNA表达.结果 (1)HF组葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组,血FINS、胰高血糖素、FFA均显著高于NC组(P＜0.05或P＜0.01);而HP组以上各项指标较HF组均明显改善.(2)胰岛表面灌注HF组基础胰高血糖素的分泌高于NC组(P＜0.01),16.7 mmol/L葡萄糖灌注后NC组胰岛胰高血糖素的分泌明显下降,HF组胰岛的胰高血糖素分泌灌注后未受高糖抑制,HP组逆转了这种变化.(3)与NC-B组相比,HF-B组α细胞胰高血糖素mRNA的表达增高34.2%,IRS-2及P13K mRNA分别降低28.5%、21.3%(均P＜0.01),而IRS-1仅降低7-1%(P＞0.05).HP-B组较HF-B组胰高血糖素、IRS-2及P13K mRNA分别增加40.6%、57.2%、60.6%.结论 高脂饲料诱导的肥胖大鼠胰岛α细胞胰高血糖素分泌功能亢进并存在胰岛素信号转导分子表达降低,二者均与血FFA水平升高有关,而吡格列酮能逆转这种变化.     

胰升血糖素样肽-1改善波动性高糖诱导大鼠胰岛细胞增殖功能机制的研究

目的 研究胰升血糖素样肽-1 （GLP-1）对波动性高糖诱导大鼠胰岛细胞增殖功能的影响及机制. 方法 将获取的原代胰岛细胞分为5组,即正常葡萄糖（5.5 mmol/L）组、恒定高糖（30.0 mmol/L）组、波动高糖（每24 h轮换培养于5.5、30.0 mmol/L）组、恒定高糖＋GLP-1 （100 nmol/L）组和波动高糖＋GLP-1组.干预7d后检测细胞增殖活性、活性氧簇（ROS）、细胞周期及周期蛋白cyclinD1、p21、p27、Skp2的表达. 结果 GLP-1干预可降低波动性高糖诱导的细胞内ROS水平[（194.40±19.20）vs（406.78±18.40）,P＜0.05],上调促细胞周期cyclinD1、Skp2表达,下调周期抑制蛋白p21、p27表达,使停滞在G0/G1期的细胞比例减少,改善细胞增殖活性[（1.38±0.09）vs（0.44±0.10）,P＜0.05]. 结论 GLP-1可通过降低氧化应激水平及对不同细胞周期蛋白表达的调节改善波动性高糖抑制的胰岛细胞增殖活性.     

RNA干扰特异性阻断胰岛局部肾素-血管紧张素系统对胰升血糖素分泌功能的影响

目的 采用RNA干扰技术特异性阻断胰岛局部ATⅡ1型受体（AT1R）表达,观察其对小鼠离体胰岛胰升血糖素分泌功能的影响. 方法 分离培养db/db和db/m小鼠的胰岛细胞,采用RTPCR、Western blot检测AT1R表达.构建小鼠AT1R RNA干扰基因重组腺病毒（Ad-siAT1R）,将分离培养的db/db小鼠胰岛细胞分为Ad-siAT1R感染胰岛细胞组（Ad-siAT1R）组、空病毒感染胰岛细胞（Ad-siControl）组和空白对照（Mock）组,培养48 h后检测AT1R表达,利用胰岛灌流系统检测胰岛素和胰升血糖素动态分泌. 结果 db/db小鼠胰岛AT1R mRNA和蛋白的表达水平分别为db/m小鼠胰岛的3.2、3.1倍.腺病毒感染后,Ad-siAT1R组胰岛AT1R mRNA表达水平较Ad-siControl组下降70％～80％,蛋白表达水平下降60％～70％（P＜0.05）.胰岛灌流显示,Ad-siAT1R组在高糖刺激1～2 min后胰岛素分泌达峰值140 mU/L,胰升血糖素分泌立即出现下降,达14 pmol/L,较基础值下降13 pmol/L.Ad-siControl组在高糖刺激1～2 min时胰岛素分泌也出现一定程度升高,峰值仅为90 mU/L,为基础值的1.8倍,其胰升血糖素分泌逐渐降至35 pmol/L,仅较基础值下降5 pmol/L,提示Ad-siAT1R组胰岛素第一时相分泌和胰升血糖素过度分泌情况均改善. 结论 RNA干扰特异性阻断胰岛局部RAS可减轻胰升血糖素过度分泌.     

139例原发性痛风患者胰岛β细胞功能的分析

目的 探讨原发性痛风患者不同糖代谢状态胰岛β细胞功能的演变及高胰岛素血症（HIns）在其中的作用. 方法 纳入原发性痛风患者139例,分为正常血糖-非高胰岛素血症（A）组、正常血糖-高胰岛素血症（B）组、IGR（C）组及糖尿病（D）组.统计及测量相关指标,计算IR相关指标. 结果 （1）A、C、D、B组胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）依次升高,而ISI水平依次降低.除A组与C组外,其他组间HOMA-IR及ISI比较差异有统计学意义（P＜0.05）.B组HOMA-IR及早时相胰岛素分泌指数（△I30/△G30）高于A组,而ISI低于A组（P＜0.05）;B组胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）高于D组（P＜0.05）.（2）回归分析显示,FIns、Ins 120 min、HOMA-β、HOMA-IR、△I30/△G30与糖尿病独立相关,SUA水平与糖尿病无关. 结论 IR、胰岛β细胞分泌障碍及胰岛素水平升高是原发性痛风患者发展为糖尿病的主要代谢特征.早期预防糖尿病应更加关注出现HIns但血糖正常的人群.     

阿卡波糖片和非诺贝特对糖耐量异常合并高脂血症老年患者胰岛β细胞功能及胰岛素敏感性的作用

目的 比较阿卡波糖片(拜糖苹)和非诺贝特(力平之)对糖耐量异常合并高脂血症老年患者的胰岛素敏感性以及胰岛β细胞功能的作用.方法 99例入选者随机分为三组,每组33例,分别为拜糖苹组、力平之组和对照组,为期3个月.比较治疗前后各项指标变化并分析其对胰岛素敏感性和胰岛β细胞功能的影响.结果 拜糖苹组治疗后,三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)降低不明显,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)降低、胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)和血糖增重比(△I30/△G30)明显改善(P=0.001;P=0.002;P =0.005);力平之组治疗后,TG、TC降低较拜糖苹组明显(P=0.002);拜糖苹组HOMA-IR、HOMA-β改善效果较力平之组更明显(P=0.020).对照组各项指标无变化,差异无统计学意义(P＞0.05).拜糖苹治疗后老年组胰岛素抵抗(IR)改善情况优于中青年组(P=0.045).IGT患者治疗前后胰岛功能均有所改善(t=2.453,P=0.003).结论 拜糖苹和力平之均能改善糖耐量降低(IGT)合并高TG血症患者的胰岛细胞分泌功能,并能有效增强胰岛素敏感性,减轻IR.但拜糖苹的治疗效果优于力平之,可能与其减轻糖毒性的作用有关.     

曲古霉素A和5-氮杂胞苷对高糖诱导损伤的胰岛β细胞的保护作用

目的 探讨高糖诱导下曲古霉素A（TSA）和5-氮杂胞苷（5-AzaC）对胰岛β细胞增殖、凋亡及功能的影响. 方法 体外培养大鼠胰岛素瘤（RIN-m5f）细胞至指数增长期,根据干预方案分为空白对照（NC）组、高糖诱导（HG）组、0.05、0.10 μmol/L TSA干预组、0.63、1.25 μmol/L 5-AzaC干预组、0.10 μmol/L TSA＋1.25 μmol/L 5-AzaC联合干预组.检测RIN-m5f细胞增殖活性、细胞凋亡率、葡萄糖刺激胰岛素分泌能力. 结果 0.05、0.10 μmol/L TSA干预组、0.63、1.25 μmol/L 5-AzaC干预组及联合干预组的细胞增殖活性均高于HG组,而细胞凋亡率均低于HG组（P＜0.05）.在3.3 mmol/L及25 mmol/L葡萄糖刺激时,各组葡萄糖刺激胰岛素分泌量均高于HG组（P＜0.05）. 结论 TSA和5-AzaC可抑制高糖诱导的胰岛β细胞凋亡和恢复β细胞的胰岛素分泌功能.     

女性非酒精性脂肪性肝病脂联素水平与胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗的相关性

目的探讨女性非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）脂联素水平与胰岛β细胞功能、胰岛素抵抗之间的关系。方法应用高葡萄糖钳夹技术检测了9例NAFLD组和7例正常对照组（C）胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性,采用梯度回波化学位移MRI评估了肝脏inphase（IP）值和outphase（OP）值,并测定了皮下脂肪面积（SA）、内脏脂肪面积（VA）。用酶联免疫法测定脂联素（adiponectin）水平。结果 NAFLD组空腹胰岛素（FINS）、胰岛素分泌第一时相（1Ph）、葡萄糖代谢清除率（M）、胰岛素敏感指数（ISI）和脂联素水平低于C组（P〈0.05）。Spearman相关分析显示,脂联素与M（r=0.526,P=0.036）、ISI（r=0.682,P=0.005）、1Ph（r=0.676,P=0.003）、肝脏OP值（r=0.682,P=0.004）和肝脏OP/IP（r=0.594,P=0.015）呈正相关。结论女性NAFLD患者脂联素水平降低,低脂联素血症可能与胰岛素抵抗、胰岛功能早期损害密切相关。