鸢尾素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用及机制

目的 探索鸢尾素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用和机制。方法 将248只7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、鸢尾素干预低剂量组及高剂量组（n=62）。模型组和鸢尾素干预组大鼠行右侧颈总动脉结扎后再行缺氧处理，建立缺氧缺血脑损伤模型。假手术组只分离右侧颈总动脉而不做结扎和缺氧处理。高、低剂量组大鼠分别于侧脑室注射0.15 μg、0.30 μg重组鸢尾素多肽，模型组及假手术组注射等量PBS。采用水迷宫实验检测各组大鼠神经行为学差异；采用TTC染色、苏木精-伊红染色和TUNEL染色检测各组大鼠脑组织病理改变；采用Western blot检测凋亡相关分子cleaved-caspase-3（CC3）及BCL-2/BAX的表达差异。结果 与假手术组相比，模型组大鼠潜伏期延长，穿越平台次数减少（P < 0.05）；高剂量组大鼠潜伏期较模型组缩短，穿越平台次数较模型组增加（P < 0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠右侧大脑半球出现大面积梗死，细胞核固缩及核裂解明显增多；高剂量组大鼠与模型组大鼠相比，右侧大脑半球梗死面积减少，细胞核固缩及核裂解减少。模型组大鼠右侧大脑皮层及海马区细胞凋亡率明显高于假手术组，高剂量组细胞凋亡率明显低于模型组（P < 0.05）。造模后24 h及48 h，假手术组CC3水平明显低于模型组（P < 0.05）；高剂量组CC3水平明显低于模型组，BCL-2/BAX值明显高于模型组（P < 0.05）。低剂量组上述实验指标及脑组织病理变化情况与模型组类似。结论 鸢尾素可以有效减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤，且疗效与鸢尾素使用剂量有关，其作用机制可能与减少大脑皮层及海马区域细胞凋亡相关。     

咪康唑对大鼠缺氧缺血性早产儿脑白质损伤的保护作用

目的探讨咪康唑对早产儿脑白质损伤(WMD)大鼠髓鞘的保护作用。方法新生3日龄SD大鼠随机分为假手术组、WMD模型组、10 mg/(kg·d))和40 mg/(kg·d)咪康唑组,每组15只;采用结扎右侧颈总动脉,缺氧80 min的方法制作早产儿WMD模型。咪康唑组于建模后第1~5天腹腔注射10 mg/(kg·d)和40 mg/(kg·d)咪康唑,WMD模型组注射等浓度二甲基亚砜(DMSO)。采用髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫荧光染色及Western blot检测脑白质特异性MBP表达量,超微结构电镜观察髓鞘超微结构变化,并比较各组幼鼠体质量变化。结果 WMD大鼠经咪康唑治疗后,胼胝体MBP表达量较WMD模型组高,差异有统计学意义(P0.05)。咪康唑治疗组MBP的表达量较模型对照组增高。模型对照组胼胝体髓鞘疏松,髓鞘内小空泡形成,呈筛网状改变,髓鞘厚度明显降低,结构紊乱。经咪康唑治疗后可明显改善缺氧缺血所致的脱髓鞘改变。WMD模型组幼鼠体质量增长速度较假手术组明显减慢,咪康唑治疗后大鼠的体质量生长速度增快。结论咪康唑可通过促进髓鞘形成保护新生大鼠脑缺氧缺血诱导的白质损伤,并改善大鼠的生长发育情况。     

内脏痛高敏感模型幼鼠脊髓背角脑源性神经营养因子表达变化及意义

目的 采用新生期母婴分离(NMS)建立幼鼠内脏痛高敏感模型,探讨脊髓背角脑源性神经营养因子(BDNF)表达和幼鼠内脏痛敏感性增高的关系。方法 将32 只新生Sprague-Dawley 大鼠按2×2 析因设计随机分成对照组、NMS 组、结直肠扩张刺激组(CRD 组)和CRD+NMS 组,每组8 只。NMS 组和CRD+NMS组新生大鼠出生后第2~14 天,每天与母鼠分离3 h 建立内脏痛高敏感模型,CRD 组和对照组大鼠出生后不予任何处理;仅CRD 组和CRD+NMS 组大鼠在6 周龄时接受CRD 刺激。采用SABC 免疫组织化学方法检测各组幼鼠脊髓背角BDNF 表达情况;根据BDNF 阳性细胞百分比及显色强度计算免疫化学分数(IHS)。采用析因设计方差分析对脊髓背角BDNF 阳性细胞百分比和IHS 进行分析。结果 4 组幼鼠两侧脊髓背角均有不同程度的BDNF 阳性细胞表达,NMS 组和CRD+NMS 组幼鼠BDNF 阳性细胞百分比和IHS 值均明显高于对照组(P<0.05)。析因设计方差分析结果显示:NMS 可导致幼鼠脊髓背角BDNF 阳性细胞百分比和IHS 值明显增加,单次CRD刺激不影响幼鼠脊髓背角BDNF 阳性细胞IHS 值,NMS 和单次CRD 刺激间不存在交互作用。结论 NMS 导致幼鼠内脏痛高敏感可能与脊髓背角BDNF 过度表达有关。     

琥珀酸对惊厥幼鼠小脑浦肯野细胞的保护作用

目的 探讨琥珀酸(SA)对惊厥幼鼠小脑浦肯野细胞(PC)的保护作用。方法 将健康新生7 d Sprague-Dawley(SD)幼鼠120 只随机分为新生期组和发育期组,两组再随机分为正常对照组、惊厥模型组、小剂量苯巴比妥(PB)组(30 mg/kg)、大剂量PB 组(120 mg/kg)、小剂量琥珀酸(SA)组(30 mg/kg)、大剂量SA 组(120 mg/kg)。利用腹腔注射戊四氮制备幼鼠惊厥模型,正常对照组应用生理盐水替代。新生期各组大鼠分别在注射PB 或SA 或生理盐水后30 min 处死取小脑,发育期各组大鼠分别在注射PB 或SA 或生理盐水后养至30 d 时处死取小脑。采用全细胞膜片钳技术,在各组幼鼠小脑脑片上记录PC 动作电位(AP);采用低频刺激平行纤维(PF)诱发兴奋性突触后电流(EPSC),观察SA 对各组大鼠PC 长时程抑制(LTD)的影响。结果 与对照组相比,新生期和发育期惊厥幼鼠PC AP 频率均明显增高(P<0.05),发育期惊厥幼鼠PC AP 阈刺激明显降低(P<0.01),且PC EPSC 的幅值抑制程度明显增强(P<0.05);与对照组相比,新生期和发育期大剂量PB 组惊厥幼鼠PC AP 阈刺激明显降低(P<0.01),PC AP 频率明显增高(P<0.05),PC EPSC 抑制程度明显增强(P<0.05);新生期和发育期大剂量SA 组惊厥幼鼠PC AP 频率与惊厥组相比均明显降低(P<0.05);发育期两种剂量SA 组AP 产生的阈值与惊厥组相比均明显增高(P<0.05)。结论 SD 幼鼠新生期惊厥导致的小脑PC 兴奋性增高和PF-PC 突触可塑性异常可持续至发育期,PB 可能加重这种异常,而SA 能降低惊厥幼鼠小脑PC 的兴奋性,并对惊厥造成的PC LTD 的近期和远期异常有明显的修复作用。     

TXNIP/Trx-1/GPX4通路促进新生大鼠缺氧缺血后海马神经元铁死亡的作用机制

目的 观察新生大鼠缺氧缺血后海马神经细胞铁死亡的变化,并从TXNIP/Trx-1/GPX4信号通路探讨其机制。 方法 将健康7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组（n=30）、缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）组（n=30）及siRNA（TXNIP siRNA）组（n=12）。采用经典Rice-Vannucci法建立新生大鼠HIBD模型。造模后6 h、24 h、72 h、7 d,Western blot法检测新生大鼠损伤侧海马组织铁死亡蛋白GPX4蛋白表达水平变化;造模后24 h,采用激光散斑成像结合苏木精-伊红染色法鉴定模型;采用NeuN/GPX4、GFAP/GPX4免疫荧光双标染色结合Western blot等方法检测各组新生大鼠损伤侧海马组织GPX4、TXNIP、Trx-1蛋白表达水平;检测新生大鼠血清铁和损伤侧海马组织铁含量的变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组新生大鼠TXNIP、Trx-1、GPX4 mRNA的表达水平。 结果 造模后6 h、24 h、72 h、7 d,HIBD组GPX4蛋白表达水平低于假手术组（P<0.05）。造模后24 h,HIBD组损伤侧脑血流量低于假手术组（P<0.05）,HIBD组损伤侧海马CA1区神经细胞排列疏松紊乱,形态不规则。HIBD组损伤侧海马CA1区TXNIP⁺细胞数高于假手术组,Trx-1⁺细胞数、NeuN⁺GPX4⁺/NeuN⁺低于假手术组（P<0.05）,海马CA1区几乎未见GFAP⁺GPX4⁺细胞。HIBD组和siRNA组血清铁、损伤侧海马组织铁含量高于假手术组,且siRNA组血清铁、损伤侧海马组织铁含量低于HIBD组（P<0.05）。HIBD组和siRNA组TXNIP mRNA及蛋白表达水平均高于假手术组,且siRNA组TXNIP mRNA及蛋白表达水平低于HIBD组（均P<0.05）;HIBD组和siRNA组损伤侧海马组织Trx-1、GPX4 mRNA及蛋白表达水平均低于假手术组,且siRNA组损伤侧海马组织Trx-1、GPX4 mRNA及蛋白表达水平高于HIBD组（均P<0.05）。 结论 新生大鼠缺氧缺血通过激活TXNIP/Trx-1/GPX4通路,导致新生大鼠海马神经元铁死亡,进而导致HIBD。 ［中国当代儿科杂志,2022,24（9）：1053-1060］     

白藜芦醇对高氧诱导早产儿外周血单个核细胞氧化应激损伤的影响及其机制研究

目的 探讨沉默接合型信息调节因子2 同源蛋白1(SIRT1)激动剂白藜芦醇(Res)对高氧诱导早产儿外周血单个核细胞(PBMC)中SIRT1 表达和活性氧簇(ROS)产生的影响。方法 采集胎龄<32 周且未吸氧的早产儿外周血分离PBMC,随机分为对照组、空气+Res 组、高氧组和高氧+Res 组,在体外建模及培养48 h 后,采用激光共聚焦显微镜检测PBMC 内ROS 水平,全光谱分光光度仪检测培养液中丙二醛(MDA)含量,细胞免疫荧光检测SIRT1 定位,Western blot 检测PBMC 内SIRT1 蛋白表达水平。结果 与对照组相比,空气+Res 组中SIRT1 表达水平明显增加(P<0.05);高氧组中ROS、MDA 水平及SIRT1 转位率明显增加(P<0.05),SRIT1 蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与高氧组相比,高氧+Res 组中ROS、MDA 水平及SIRT1 转位率明显降低(P<0.05),SIRT1 蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。结论 在高氧诱导下,Res 可以通过提高早产儿PBMC 的SIRT1 表达并抑制SIRT1 核-浆穿梭从而增加早产儿抗氧化应激的能力,进而减少早产儿氧化应激损伤。     

早产儿脑白质损伤的发病机制

早产儿脑白质损伤可造成神经系统发育障碍 ,其中包括永久性伤残 ,即脑性瘫痪。近年来关于早产儿脑白质损伤发病机制的研究有了新的进展 ,众多研究结果表明缺氧缺血和宫内感染是导致早产儿脑白质损伤的主要病因。该文主要综述了早产儿脑白质损伤的定义、病因、病理特点及发病机制的研究进展     

缺氧时间对脑白质损伤程度影响的实验研究

目的探讨不同缺氧时间对3日龄SD大鼠脑白质损伤程度的影响。方法新生大鼠随机分为正常组(n=24)、模型组(n=45),其中模型组再根据缺氧时间50、70、90 min分为3个亚组(n=15);模型组采用单侧结扎颈总动脉的方法制作脑白质损伤动物模型。经过不同时间缺氧后,统计造模死亡率,苏木精-伊红(HE)染色观察脑病理形态改变,免疫荧光染色检测脑白质特异性标志物髓鞘碱性蛋白(MBP)变化,爬坡试验检测运动功能。结果随着缺氧时间延长造模死亡率明显升高,90 min组死亡率高达60%;HE染色结果显示,50 min组白质和海马基本无损伤,70 min组手术侧选择性白质损伤,而90 min组白质、海马、皮质均发生大范围梗死。MBP半定量白质损伤评分显示,70 min组(3.89±0.47)和90 min组(4.72±0.57)明显高于正常组(0.06±0.24),差异有统计学意义(P0.05)。爬坡实验,模型组各亚组大鼠均出现不同程度的患侧运动功能障碍,以90 min组较为严重。结论采用单侧结扎颈总动脉法成功制作脑白质损伤模型;不同缺氧时间对模型病变范围以及损伤程度具有重要影响。     

脑白质损害新生大鼠脑组织ephrin-B3表达及意义

目的 建立新生大鼠脑白质损害(white matter damage,WMD)模型,探讨WMD新生大鼠脑组织ephrin-B3 mRNA的表达变化及意义.方法 采用2日龄SD大鼠,通过结扎右侧颈总动脉并吸入6%氧气4 h建立WMD模型(WMD组),分别于模型后0、8、24、48、72 h及7 d处死,同时设立相应假手术对照组.脑组织HE染色检测病理变化,荧光定量RT-PCR检测ephrin-B3 mR-NA表达.结果 WMD组缺氧缺血8 h可见纹状体内细胞胞体肿胀、细胞稀疏、间隙增宽,7 d可见缺氧缺血侧侧脑室旁白质呈筛网状坏死.与假手术组比较,WMD组脑白质ephrin-B3 mRNA在缺氧缺血后8、24、48、72 h及7 d表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 新生大鼠WMD时,脑白质ephrin-B3 mRNA表达显著增加,提示ephrin-B3参与了WMD过程中神经细胞的损伤及再生抑制机制.     

脑白质损伤新生大鼠脑白质P75NTR蛋白与RhoA mRNA的表达及意义

目的：最近研究发现NgR-P75NTR- RhoA信号通路在神经损伤和重塑方面发挥关键作用,但其确切传导机制及在缺氧缺血后新生动物P75NTR对下游分子RhoA调控变化尚不清楚。该实验在建立新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤(WMD)模型基础上,观察WMD新生大鼠脑白质P75NTR和RhoA mRNA表达变化, 探讨WMD时两者的关系及意义,为临床治疗早产儿WMD提供新思路和实验依据。方法：制备新生大鼠WMD模型,光镜及电镜观察脑组织形态学改变。应用免疫组织化学方法及荧光定量RT-PCR检测对照组及WMD 12,24,48,72 h和7 d组病变侧脑白质P75NTR蛋白及RhoA mRNA表达变化。结果：光镜和电镜形态学发现WMD组缺氧缺血48 h后即有显著的脑室周围脑白质损伤。WMD组大鼠纹状体和胼胝体P75NTR蛋白水平12 h开始升高,48 h达峰值,至72 h略有下降,与对照组比较差异有显著性,均P<0.01,之后下降明显,第7天与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。WMD组大鼠脑白质RhoA mRNA 表达12 h开始升高,48 h达到峰值,与对照组比较,差异有显著性,均P<0.05。72 h仍高于对照组水平,之后开始下降,第7天与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：WMD新生大鼠脑白质中P75NTR蛋白水平呈现先上升后下降的趋势。其升高与介导神经细胞凋亡和抑制神经轴突再生可能有关,表达下降则与缺氧缺血性损伤加重神经细胞坏死相关。RhoA mRNA的表达变化趋势与P75NTR一致,提示P75NTR水平升高可促使RhoA mRNA高表达。［中国当代儿科杂志,2007,9（4）：317-320］     

少突胶质前体细胞移植治疗早产儿脑白质损伤大鼠模型

目的探讨少突胶质前体细胞(OPCs)移植对治疗早产儿脑白质损伤(WMI)模型大鼠的长期作用。方法将80只3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型对照组、5 d脑室/白质移植组、9 d脑室/白质移植组、14 d脑室/白质移植组(n=10);除假手术组外其余各组行右侧颈总动脉离断并缺氧80 min制备早产儿WMI模型;采用孕10~12周人胚胎脑组织制备OPCs。各移植组分别在造模后5 d、9 d和14 d将3×105OPCs注入右侧脑室/脑白质中,待大鼠60日龄和90日龄时分别对各组行电镜下脑髓鞘评估和神经功能评估。结果电镜下,大鼠60日龄时各移植组髓鞘损害程度相比模型组略有改善;无论是与同组60日龄大鼠还是与同日龄模型组大鼠比较,90日龄时各移植组的髓鞘均明显增厚,结构破坏更少,其中14 d移植组变化最为明显;但不同移植时间脑室和白质移植组间的髓鞘损害程度未见有明显差异。60及90日龄各移植组大鼠的神经功能缺陷评分(m NSS)均高于假手术组,但均低于模型组(P0.05)。结论 OPCs移植可能对治疗早产儿WMI存在长期效应,延迟移植时间可能增强疗效。     

枸橼酸咖啡因对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后髓鞘碱性蛋白的影响

目的研究枸橼酸咖啡因对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑白质髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响及其相关机制。方法将48只7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组和枸橼酸咖啡因干预组,每组16只。左侧颈总动脉结扎并缺氧(80 m L/L氧气和920 m L/L氮气)2 h制作HIBD模型;假手术组仅分离左侧颈总动脉,不行结扎及缺氧处理;干预组在缺氧缺血前、缺氧缺血后0、24、48、72 h给予枸橼酸咖啡因(20 mg/kg)腹腔注射,HIBD组分别在同一时间点以等量生理盐水行替代腹腔注射。各组大鼠于12日龄处死,采用免疫组织化学法检测左侧脑皮层下白质MBP的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应技术(Real-time PCR)检测各组大鼠左侧脑组织腺苷A1受体(A1R)和A2a受体(A2a R)m RNA的含量。结果 HIBD组左侧脑皮质下白质MBP表达较假手术组明显减少(P0.05),干预组较HIBD组MBP表达增多,但仍低于假手术组(P0.05);HIBD组A1R m RNA较假手术组显著上调(P0.05),干预组A1R m RNA较HIBD组显著下降(P0.05)。结论枸橼酸咖啡因能减轻缺氧缺血后新生大鼠脑白质损伤,这种保护作用可能与下调腺苷A1R表达有关。     

3日龄未成熟大鼠缺血性脑损伤后少突胶质细胞超微结构变化

目的：少突胶质细胞是脑白质的主要细胞成分,了解少突胶质细胞损伤的病理过程有助于研究早产儿脑损伤的发生机制。该实验目的在于了解3日龄未成熟大鼠双侧颈总动脉结扎造成脑白质损伤后少突胶质细胞超微结构的变化。方法：将3日龄未成熟SD新生大鼠随机分为对照组和实验组。对照组仅切开颈部皮肤,而实验组结扎双侧颈总动脉。术后6,12,24 h分别取实验组和对照组存活大鼠8只,将脑组织的超微切片进行透射电镜检查。结果：对照组存活率为100％,实验组存活率为51%。透射扫描电镜发现实验组大鼠术后6 h脑白质少突胶质细胞普遍水肿,细胞器 (线粒体、内质网、高尔基体)水肿明显,数量减少,线粒体数目减少及水肿尤为多见,有的线粒体出现空泡现象,粗面内质网脱颗粒。术后12 h少突胶质细胞水肿更加明显,细胞器进一步减少,可见细胞核染色质分布不均,少数细胞已经出现核固缩。术后24 h实验组少突胶质细胞广泛核固缩、核溶解, 细胞器广泛缺失。结论：3日龄未成熟大鼠双侧颈总动脉结扎后,大鼠脑白质少突胶质细胞损伤。损伤数小时内少突胶质细胞的细胞器受损,随时间延长进行性加重,直至出现少突胶质细胞核固缩。该研究显示了脑缺血性损伤时,脑白质内少突胶质细胞的超微结构病理变化的全过程。［中国当代儿科杂志,2007,9（3）：225-228］     

不同程度缺氧缺血对新生大鼠脑损伤的影响及机制探讨

目的比较不同程度的缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)对新生大鼠脑损伤的影响,探讨胶质细胞活化和细胞因子所起的作用。方法 120只7日龄Wistar大鼠随机分为对照组、轻度HI组和重度HI组。两组HI大鼠行右颈总动脉结扎,分别置于含8%氧的密闭氧舱内34.5℃,40min和35.5℃,65min。用MRI、微管相关蛋白(MAP2)和TUNEL染色评估脑损伤;免疫组化法检测巨噬细胞激活抗原(ED1)、TNF-α和硝基酪氨酸(NT)表达的变化。结果轻度HI组大鼠MRI显示缺血侧皮质T2强度轻度下降,皮层下白质T2值增加,皮质MAP2染色中度下降,皮层下白质TUNEL阳性细胞数量明显增多;重度HI组大鼠缺血侧半球的大部分T2值均增加,皮质与白质MAP2染色均明显减少,TUNEL阳性细胞数量均明显增加。轻度HI后ED1、TNF-α与NT表达仅在急性期增加,且多局限于皮层下白质;而重度HI后其增加出现得较晚且持久,见于整个缺血侧半球。结论轻度HI可引起相对选择性的白质损伤,重度HI则引起缺血侧半球的广泛损伤,胶质细胞活化和细胞因子异常表达可能起了一定作用。     

Selective cortical alteration after hypoxic-ischemic injury in the very immature rat brain

Distinctive cerebral lesions with disruptions to the developing white matter are found in very low birth weight (VLBW) infants. Although hypoxia-ischemia (HI) is a causal pathway, the pathogenesis of cerebral white matter injury in the VLBW infant is not fully understood. Pertinent murine models would facilitate the investigation of the processes leading to these cerebral lesions and enable the evaluation of therapeutic strategies. Postnatal d 3 (P3) rats are at a stage of cortical oligodendroglial maturation and axonal outgrowth similar to very preterm infants. Our aim was to characterize the effects of a focal hypoxic-ischemic injury at P3 on subsequent cerebral development. Three groups of P3 Wistar rats were investigated: group I underwent right carotid ligation followed by 6% hypoxia for 30 min (HI), group 2 had carotid ligation only, and group 3 had no intervention. At P21, in the HI group, the right cortical area was reduced compared with controls (p < 0.01). There were no significant alterations in the size of the dorsal hippocampus, striatum, and thalamus. The cortical myelinated area was reduced in the HI animals compared with controls (p < 0.01). There was a corresponding loss of myelinated axons extending up into the cortex, with deep cortical neuronal and axonal architecture markedly disrupted. Glial fibrillary acidic protein immunohistology showed a reactive gliosis in the deep parietal cortex (p < 0.01). Moderate HI injury in the immature rat brain compromised cortical growth and led to a selective alteration of cortical myelinated axons with persistent gliosis. These alterations induced at P3 by unilateral HI share neuropathological similarities with the diffuse white matter lesions found in VLBW infants.     

人少突胶质前体细胞移植对脑白质损伤大鼠的保护作用

目的 探究移植人少突胶质前体细胞（hOPCs）治疗早产儿脑白质损伤（WMI）的疗效。方法 将新生大鼠随机分为假手术组、模型组和移植组（n=10）;模型组和移植组大鼠在3日龄时行右侧颈总动脉离断后缺氧2 h,制备WMI模型;从自然流产的11周人类胎儿脑中分离培养hOPCs,将hOPCs移植到WMI模型大鼠中。移植后3个月通过水迷宫实验评估大鼠神经功能,电镜观察大鼠髓鞘厚度和增生情况。结果 在Morris水迷宫定位航行实验中,模型组的逃避潜伏期比假手术组增加;与模型组相比,移植组的逃避潜伏期缩短（P < 0.05）。hOPCs移植在一定程度上减轻了90日龄WMI模型大鼠的认知功能障碍。电镜图像显示,移植hOPCs促进了WMI模型大鼠的大脑髓鞘再生。与假手术组相比,模型组的g-ratio（轴突总直径/纤维总直径）增加,提示髓鞘厚度减小;与模型组相比,移植组的g-ratio降低,提示髓鞘厚度增加（P < 0.05）。结论 鞘内移植hOPCs可以减轻WMI模型大鼠的神经损害并促进髓鞘再生。     

普仑司特对脑室周围白质软化新生大鼠的作用

目的 探讨普仑司特（Pran）对脑室周围白质软化（PVL）新生大鼠的作用。方法 将3日龄大鼠随机分为假手术（Sham）组、PVL组和Pran组。通过右侧颈总动脉结扎及术后缺氧建立PVL模型，Sham组大鼠仅游离右侧颈总动脉，不予结扎，也不进行缺氧处理。Pran组缺氧后经腹腔注射Pran（0.1 mg/kg），每12 h注射1次，连续注射3 d，Sham组和PVL组分别给予等量生理盐水腹腔注射。造模后14 d，通过苏木精-伊红染色法观察脑组织病理变化，免疫荧光染色法检测脑组织髓鞘碱性蛋白（MBP）表达（n=8），免疫印迹法测定环核苷酸磷酸二酯酶（CNPase）、MBP和G蛋白偶联受体17（GPR17）表达（n=8）。造模后21 d，应用Morris水迷宫实验评价各组大鼠的学习记忆能力（n=8）。结果 HE染色结果表明：PVL组与Sham组比较脑白质出现明显病理性改变，Pran组病理变化较PVL组明显改善。免疫荧光结果显示：PVL组MBP平均荧光强度低于Sham组，Pran组MBP平均荧光强度高于PVL组（P < 0.05）。Western blot结果显示：PVL组MBP和CNPase蛋白相对表达均低于Sham组，GPR17蛋白相对表达高于Sham组（P < 0.05）；Pran组MBP和CNPase蛋白相对表达均高于PVL组，GPR17蛋白相对表达低于PVL组（P < 0.05）。Morris水迷宫实验结果显示：PVL组与Sham组比较，逃避潜伏期延长，穿越平台次数减少；Pran组与PVL组比较，逃避潜伏期缩短，穿越平台次数增加（P < 0.05）。结论 Pran可减轻PVL新生大鼠的脑损伤，促进髓鞘形成，改善远期学习记忆能力。其作用机制可能与下调GPR17的表达有关。     

缺血启动未成熟大鼠脑白质内源性修复功能的研究

目的：探讨缺血启动未成熟脑白质的内源性修复机制。方法：5日龄 Sprague-Dawley 新生大鼠随机分为假手术（Sham）组和PVL组。分别于建模后7 d及21 d光镜、电镜下评估脑白质病变及髓鞘形成情况,免疫组化检测脑白质O4+少突胶质细胞（OL）前体,观察SVZ区祖细胞的激活、增殖、迁移和分化情况。结果：与Sham组比较,PVL组在建模后7 d和21 d光镜下脑白质病理均呈轻或重度病变;病理评分均明显增高;髓鞘形成数量明显减少,厚度变薄;免疫组化显示O4+OL前体明显减少。建模48 h后,PVL组SVZ 区 BrdU、NG2共阳性祖细胞明显增殖并向脑室周围迁移,至7 d达到高峰;从72 h开始,脑室周围出现呈BrdU、O4共阳性OL前体,至21 d,新生OL前体明显多于同时段Sham组。结论：缺血可启动新生大鼠脑白质的内源性修复机制,诱导SVZ 区胶质源性神经祖细胞激活、增殖、迁移至脑室周围和分化为OL前体。     

UDP-糖、GDNF和美金胺改善新生大鼠缺血性脑白质病变的光电镜病理评估

目的：通过光镜和电镜下脑病理研究,评估单用或联用UDP-糖、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）和美金胺对缺血型脑室周围白质软化（PVL）新生大鼠脑白质病变的改善效果。方法：一侧颈总动脉结扎伴缺氧2 h,建立5日龄新生大鼠PVL模型,随机分为假手术（Sham）组、PVL组、UDP-糖组（PVL后即刻腹腔注射UDP-糖2000 mg/kg）、GDNF组（PVL后即刻脑内注射GDNF 100 μg/kg）、美金胺组（PVL后即刻腹腔注射美金胺20 mg/kg）以及三联药组（PVL后即刻联用UDP-糖、GDNF和美金胺）,每组各30只。每组大鼠分别于造模后7 d及21 d断头取脑,电镜下观察髓鞘形成情况,计算髓鞘数目及厚度;光镜下对脑白质病变进行病理分级及评分。结果：造模后7 d及21 d电镜结果显示,PVL组大鼠罕见髓鞘形成,排列松散,髓鞘壁明显变薄,髓鞘数量及厚度均明显少于Sham组、UDP-糖组、GDNF组、美金胺组及三联药组（P<0.01）。光镜下脑白质病理分级结果显示,PVL组大鼠在造模后7 d和21 d,其脑白质均呈轻度病变（38%~50%）或重度病变（50%~62%）。4个用药组大鼠在造模后7 d和21 d有50%~88%呈正常脑白质,呈重度病变的比例为13%~25%。病理评分显示,PVL组在造模后7 d及21 d的病理评分最高,显著高于其他5组（P<0.05）。结论：单用或联用UDP-糖、GDNF和美金胺可明显改善PVL大鼠脑白质病变。推测良好的改善作用与这些药物能促进脑内源性的神经再生及改善脑微环境密切相关。