乙型肝炎病毒X抗原、X抗体检测的临床意义

目的了解乙型肝炎病毒X抗原（HBxAg）、X抗体（HBxAb）在乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中的表达情况,探讨HBxAg和HBxAb与上述疾病的相关性和临床意义。方法应用大肠埃希菌合成重组HBxAg,用该抗原免疫动物获得的HBxAb分别包被反应板以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者（171例乙型肝炎、70例肝硬化和38例肝癌）血清中HBxAg和HBxAb。结果在乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中HBxAg和HBxAb阳性率分别为8.8%、18.6%、7.9%和10.5%、47.1%、34.2%,HBxAg在肝硬化患者中检出率较高（P〈0.025）;与乙型肝炎组比较,HBxAb阳性率在肝硬化和肝癌患者均有显著增高（P〈0.005）。结论HBxAg在肝硬化患者检出率较高,而HBxAb则在乙型肝炎后的肝硬化和肝癌患者检出率较高,提示HBxAg和HBxAb可能参与肝组织的免疫病理性损伤过程。     

乙型肝炎病毒X抗体检测的临床意义

[目的]了解乙型肝炎病毒X抗体（HBxAb）在急慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中的表达情况，探讨HBxAb与上述疾病的相关性及临床意义。[方法]应用单克隆HBxAg包被反应板，检测患者血清中HBxAb的酶联免疫吸附方法。共检测33例急性乙型肝炎、44例慢性乙型肝炎、39例肝癌、59例肝硬化患者血清中抗HBx的分布情况。[结果]在急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝癌、肝硬化患者血清中抗HBx的阳性率分别为27．8％、52．2％、66.7％、64.4％，以在肝癌中的检出率最高。上述抗HBxAb阳性检出率与42例乙型肝炎表面抗原阴性结果比较P〈0．01，有统计学意义。[结论]HBxAb在乙型肝炎后的肝硬化和肝癌患者检出率高。可提示，随着肝病的发展与迁延，抗HBx的表达似乎在增加，提示抗HBx可能参与肝组织的免疫病理性损伤。     

HBV前基因组RNA、甲胎蛋白异质体3和乙型肝炎X抗体水平与HBV所致肝癌的关系及对患者预后的预测

目的研究血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(HBV-pgRNA)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)和HBV X抗体(HBxAb)水平与HBV所致肝癌的关系及对患者预后的预测。方法选取该院2015年1月至2017年6月诊断的HBV所致肝癌患者60例作为肝癌组,另选择HBV所致肝硬化患者及单纯性乙型肝炎患者各60例作为肝硬化组和乙型肝炎组,比较3组患者HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平之间的差异,分析不同病理分期、组织分化及生存状况患者的HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平差异。结果不同疾病、分化程度、生存情况组患者的HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平比较,差异均有统计学意义(P0.05)。HBV-pgRNA、HBxAb水平从高到低依次为乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组,AFP-L3水平从高到低依次为肝癌组、肝硬化组、乙型肝炎组;HBV-pgRNA、HBxAb水平从高到低依次为低分化组、中分化组、高分化组,AFP-L3水平从高到低依次为高分化组、中分化组、低分化组;Ⅰ～Ⅱ期患者的HBV-pgRNA、HBxAb水平明显高于Ⅲ～Ⅳ期(P0.05),Ⅰ～Ⅱ期患者的AFP-L3水平明显低于Ⅲ～Ⅳ期(P0.05)。HBV-pgRNA和HBxAb水平与肝癌患者的病理分期、组织分化及生存状态均呈负相关(r=-0.771～-0.441,P0.05),AFP-L3与肝癌患者的病理分期、组织分化及生存状态均呈正相关(r=0.339、0.521、0.664,P0.05)。结论血清HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平与HBV所致肝癌进展明显相关,同时,以上指标可作为患者生存预测的重要指标。     

乙型肝炎X蛋白的检测及其对乙型病毒性肝炎影响的探讨

目的通过检测乙型肝炎患者的X蛋白,探讨其对疾病的影响。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎患者血清中X蛋白,分别比较健康对照组、肝癌组与肝炎组的X蛋白检测阳性率的差异;分析乙型肝炎DNA测定值阳性和阴性中X蛋白阳性率的差异以及e抗原(HBeAg)阳性和阴性中X蛋白检出率的差异,探讨乙型肝炎X蛋白对疾病的影响。结果肝炎组患者的X蛋白阳性率高于健康对照组,肝癌组X蛋白阳性率高于肝炎组,乙型肝炎DNA测定值阳性X蛋白阳性率高于阴性,HBeAg抗原阳性中X蛋白的检出率也高于阴性,并且差异均有统计学意义。结论乙型肝炎X蛋白在疾病监测中有一定的临床意义,并且可能对病毒的复制有影响。     

慢性乙型肝炎和肝硬化及肝癌患者血清中anti-HBx测定及其临床意义

目的建立检测患者血清中HBV的x抗原（HBxAg）及其抗体（anti-HBx）的方法，阐明其在慢性肝炎、肝硬化和肝癌患者血清中的临床意义。方法将HBV的x基因全长克隆至原核表达载体pET30a（＋）中，构建pET30a-X原核表达载体，转化人大肠杆菌BL21（DE3）后，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达His-HBx融合蛋白，纯化后将重组蛋白免疫家兔，制备兔抗HBx多克隆抗体。应用纯化后的兔抗HBx多克隆抗体和纯化后的重组蛋白，建立检测血清中HBxAg和anti-HBx的方法。应用建立的ELISA法，分别对慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者组及正常对照组血清中HBxAg和anti-HBx进行检测。结果HBxAg／anti-HBx在慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中的阳性率分别为8．7％／10．4％，17．9％／40．6％，9．8％／34．4％。统计学分析显示，与慢性乙型肝炎相比，肝硬化或肝癌患者血清中anti—HBx的阳性率较高（P〈0．01）。结合临床检测的其他HBV血清学指标，发现在anti-HBs阳性病例中，anti-HBx阳性率为5．2％（1／19）；而在HBsAg、HBeAg和anti-HBc3项同时为阳性的病例中，anti-HBx的阳性率为28．9％（39／135），二者相比，差异具有统计学意义（P〈0．05）。213名正常对照血清中HBxAg和anti-HBx均为阴性。结论血清中anti-HBx并非一个保护性抗体，标志HBV的感染和复制，是从慢性乙型肝炎向肝硬化和（或）肝癌发展的血清标志之一。     

肝癌患者外周血白细胞中p16蛋白的表达及其意义

目的了解肝癌患者外周血白细胞中P16蛋白的表达及其意义。方法对20例正常献血员,32例慢性乙型肝炎,28例肝硬化,35例肝癌患者外周血白细胞进行P16蛋白的流式细胞荧光染色检查。结果P16蛋白在正常献血员,慢性乙型肝炎,肝硬化,肝癌中阳性率分别为(76.57±6.07)%、(43.09±8.08)%、(30.54±10.61)%、(16.29±6.86)%,正常献血员中的阳性率明显高于后三者(P<0.05),慢性乙型肝炎阳性率明显高于肝硬化和肝癌(P<0.05)。结论肝细胞癌的发生可能与P16表达减少有关。     

AFP、CEA、CA199、CA-125联合检测对肝癌、肝硬化诊断的临床价值

目的 探讨肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA-199)、糖类抗原125(CA125)联合检测对肝癌、肝硬化诊断的临床价值.方法 抽取37例肝癌、40例肝硬化、40例健康对照者血清,利用罗氏e601全自动电化学发光仪进行AFP、CEA、CA-199、CA125的联合检测.结果 37例肝癌患者血清AFP、CEA、CA-199、CA125水平显著高于健康对照组(t分别为1.35,3.51,1.88,2.74,P<0.05),阳性率分别为59.4%,37.8%,45.9%,42.3%,联合检测AFP、CEA、CA-199、CA125诊断肝癌阳性率为78.3%;肝硬化患者的阳性率分别为32.5%,30.0%,42.5%,72.5%,肝硬化患者血清CA125水平明显高于肝癌患者及健康对照组,阳性率分别为72.5%,42.3%,2.5%.结论 AFP、CEA、CA199、CA125联合检测可提高肝癌的阳性诊断率;CA125对诊断肝硬化较肝癌敏感性高,对鉴别诊断有一定意义.     

不同肝病患者血清中HBV DNA检测结果及其同HBV标志物相互关系的探讨

目的探讨不同肝病患者血清中HBV DNA检测结果及其同HBV标志物相互关系。方法采用FQ-PCR法和酶联免疫吸附试验(ELISA)对250例不同的肝病患者进行HBV DNA定量以及乙型肝炎病毒标志物(HBVM)检测。结果急性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中HBV DNA水平明显高于慢性乙型肝炎患者,差异有统计学意义(P0.01)。阳性检出率分别为急性乙型肝炎79.4%、肝硬化81.8%、肝癌80.0%慢性乙型肝炎54.7%。ELISA检测结果为"HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)"、"HBsAg(+)、HBeAg(+)"阳性模式者,HBV DNA阳性检出率及体内HBV DNA水平明显高于其他模式;e抗原阳性和阴性患者体内HBV DNA的差异具有统计学意义(P0.05)。结论 FQ-PCR法定量检测HBV DNA可真实反映病毒感染和复制状态,对乙型肝炎的早期临床诊断、病情评估、疗效观察、预后判断和新药验证都具有十分重要的意义。     

AFP联合三种肿瘤标志物检测对原发性肝癌诊断价值的研究

目的 探讨甲胎蛋白(AFP)联合γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、癌抗原CA50检测对提高原发性肝癌(PHC)检出率的临床诊断价值.方法 对77例原发性肝癌患者和61例肝硬化患者进行血清AFP,GGT,ALP和CA50定量检测,各组间进行对比分析.结果 原发性肝癌组血清AFP,GGT,ALP和CA50水平与肝硬化组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),原发性肝癌组患者血清AFP,GGT,ALP和CA50单项检测阳性率分别为77.9％,63.6％,55.8％和66.2％,明显高于肝硬化组(P＜0.01) ;AFP与三种肿瘤标志物联合检测阳性率为94.8％,显著高于TM单项检测阳性率(P＜0.01).结论 AFP联合GGT,ALP和CA50检测能显著提高原发性肝癌的检出率.     

自身抗体在肝病患者诊断中的意义

目的探讨肝病患者血清中是否出现自身抗体及该抗体与疾病的关系。方法收集肝病患者血清,以HEP-2细胞、鼠肝和猴肝组织切片和可溶性肝抗原为抗原基质,用间接免疫荧光法、蛋白质印迹法检测肝病患者血清中的自身抗体。结果①间接免疫荧光法检测自身抗体显示:慢性肝炎、肝硬化、肝癌三组阳性率分别为22.3%(29/130),30.9%(30/97),34.1%(14/41),它们之间无显著性差异(P>0.05),但三组阳性率与急性肝炎(7.0%)、正常对照组(1.5%)比较有显著性差异(P<0.01)。②蛋白质印迹法检测肝特异性自身抗体靶抗原时发现慢性肝炎、肝硬化患者约66.0%,的抗原相对分子质量多集中在47kD及52kD上,两组抗原条带分布相似,有30.0%的肝硬化、肝癌患者在20kD及32kD分子质量之间的阳性条带上、下处多出现1~2条无对应条带。结论慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中自身抗体的阳性率明显高于急性肝炎和正常对照组。患者血清中存在抗肝组织自身抗体,其相对应的靶抗原有多种,如能进一步鉴定靶抗原有望成为诊断肝脏疾病的免疫学标志物。     

Case-control study of hepatitis B virus infection in chronic liver disease and hepatocellular carcinoma

Summary The prevalence of serum hepatitis B virus markers was studied in three groups of age- and sex-matched patients:a. 31 patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma (c-HCC);b. 31 patients with chronic liver disease (CLD) andc. 62 hospitalized control subjects. The overall exposure rate to the hepatitis B virus was 90% in c-HCC, 80% in CLD and 58% in control subjects. The prevalence of hepatitis B surface antigen (HBsAg) was 29%, 13% and 1.6% in the three groups, respectively. The prevalence of hepatitis B surface antibody was significantly lower in c-HCC (9.6%) than CLD (42%) and control subjects (40%). The serological evidence of continuous viral replication (HBsAg positivity or isolated high titre hepatitis B core antibody positivity) was more common in c-HCC (39%) than CLD (12%) and control subjects (1.6%). The prevalence and patterns of aggregation of serum hepatitis B virus markers were similar in the 31 patients with c-HCC and in 11 patients with HCC without concomitant liver cirrhosis (n-HCC). In conclusion, the overall exposure rate to the hepatitis B virus is similar in c-HCC and CLD. However, serological evidence of continuous viral replication is more common in the former group. A defective clearance of the hepatitis B virus in hepatocellular carcinoma is a possible explanation of the phenomenon. The strength of the association between hepatitis B virus infection and hepatocellular carcinoma appears to be similar in c-HCC and n-HCC.     

各类慢性乙型肝炎患者HBV前S2抗原与HBV感染血清标志物及HBVDNA的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S2抗原(preS2Ag)与HBV感染5项标志物(HBV-M)、HBV DNA之间的关系及对慢性乙型肝炎分类诊断的临床意义。方法对584例各类慢性乙型肝炎患者血清采用放射免疫法(R IA)检测preS2Ag,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV-M(HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc),用聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA。结果慢性乙型肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化患者preS2Ag的检出率分别为45.98%、67.10%、83.87%及92.86%;preS2Ag在HBeAg阳性、HBV DNA>105拷贝/mL患者中检出率明显高于HBeAg阴性、HBV DNA<105拷贝/mL患者,差异有统计学意义(P<0.001)。结论preS2Ag的检出意味着病毒有复制或有传染性;开展preS2Ag的检测有助于慢性乙型肝炎的分类、慢性乙型肝炎急性发作和预后的判断。     

Virological classification of autopsy livers with hepatic disorders

Forty six selected autopsy livers with hepatic disorders were classified histologically into three groups, i.e., hepatitis 8, liver cirrhosis 16 and hepatocellular carcinoma 22, chiefly by histological findings. These groups were subdivided into two categories after determining the presence or absence of three HBV associated markers, i.e., the hepatitis B surface antigen (HBsAg), the antibody to hepatitis B surface antigen (anti-HBs) and the antibody to hepatitis B core antigen (anti-HBc) in the sera and liver homogenates. At least one of these markers was found to be present in the sera and homogenates of 38% of the livers with hepatitis, 69% of the livers with liver cirrhosis and 77% of the livers with hepatocellular carcinoma. When the liver tissues were examined for the presence of HBV DNA using Southern blot technique, the majority of them (10 out of 11) which proved to be positive for at least one HBV associated marker were also positive for HBV DNA. However, HBV DNA could not be detected in the other 10 livers which contained no HBV associated markers. These results showed that a HBV associated serological marker was always expressed, when liver tissue HBV DNA was demonstrable. The results of the two detection methods we used in this study were found to be almost equivalent. These results showed no evidence of nucleic acid homology between DNA from the liver of patients with non-B type liver disorders and HBV DNA.     

重组抗原在戊型肝炎病毒感染诊断中的应用

目的探讨重组抗原在戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）感染诊断中的应用。方法用ＨＥＶ重组抗原建立酶免疫试验（ＥＩＡ）检测肝病患者和健康人群血清中抗戊型肝炎病毒抗体（抗－ＨＥＶ）。结果５５份用新加坡ＤＢＬ公司抗－ＨＥＶ诊断试剂盒检测为抗－ＨＥＶ阳性的肝炎患者血清中，５３份（９６．４％）用本方法检测也为阳性；４５份ＤＢＬ试剂盒检测为抗－ＨＥＶ阴性的血清中，本法检测有３份为抗－ＨＥＶ阳性。检测甲、乙、丙型肝炎患者血清各３０份，抗－ＨＥＶ阳性率分别为１３．３％（４／３０）、１３．３％（４／３０）和１０．０％（３／３０）。健康人抗－ＨＥＶ阳性率为５．０％（８／１６０）。重组抗原与合成肽抗原混合用于ＥＩＡ，可以检出两种抗原单独阳性的抗－ＨＥＶ。结论以重组抗原为基础的ＥＩＡ特异性强、灵敏度高、快速简便，是戊型肝炎血清学诊断及流行病学调查的一种可靠方法     

HBV前S_2抗原、前S_2抗体与其病毒标志物的关系

目的　探讨乙型肝炎患者前S2 抗原、抗体与HBVM、HBV DNA之间关系。方法　对 14 6例乙型肝炎患者用ELISA法检测前S2 抗原、前S2 抗体及乙型肝炎病毒标志物 (HBVM ) ;用聚合酶链反应 (PCR)法检测乙型肝炎病毒HBV DNA。结果　急性肝炎、慢性肝炎、肝硬变患者前S2 抗原检出率分别为 8.33 %、71.96 %、77.0 7% ;前S2 抗体的检出率分别为 75 %、9.34%、3 .7%。前S2 抗原在HBV DNA、HBeAg阳性病例中检出率明显高于阴性组 (P <0 .0 0 1)。前S2 抗体阳性病例HBV DNA、HBeAg均为阴性。 结论　前S2 抗原的检出意味着病毒有复制或有传染性。前S2 抗体的出现标志着病毒被清除 ,在慢性肝病中检出并不意味病情稳定 ,同时发现该抗体可以在急性乙型肝炎急性期及血清HBVM全部阴性的患者中检出。     

乙型肝炎病毒 PreS1抗原及抗体检测应用价值分析

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前S1（PreS1）抗原及抗体检测的临床应用价值。方法于2013年3～11月,随机选择具有不同乙型病毒性肝炎（简称乙肝）两对半检测结果的患者120例进行PreS1抗原及抗体检测,分析PreS1抗原及抗体检测结果与两对半检测结果的关系。结果大三阳及小三阳患者 PreS1抗原阳性检出率为89％和7％,乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝核心抗体（HBcAb）阳性患者阳性检出率为14％,单纯 HBsAg阳性患者阳性检出率为5％。PreS1抗原与 HBsAg、乙肝 e抗原和 HBcAb具有一定的相关性。结论两对半联合PreS1抗原、抗体检测能够更灵敏、准确地反映乙肝患者的病情和预后,在HBV感染早期诊断方面也具有一定的临床应用价值。     

不同临床类型慢性乙肝患者乙肝病毒基因型检测

目的探讨本院慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因型分布特征及与临床类型的关系。方法利用线性探针分析法进行乙肝病毒基因分型。结果52例慢性乙肝患者检出乙肝病毒基因型B型24例（46．2％）,C型26例（50％）,A、B混合型2例（3．8％）,B、C两型均以男性多见,两型间性别比例差异无统计学意义（X2=0．65,P〉0．05）;在慢性肝炎轻度、中度、重度、肝硬化及肝癌中,B和C基因型的分布差异无统计学意义（P〉0．05）;A、B混合型2例分别为慢性乙型肝炎轻度和慢性乙型肝炎中度。C型HBeAg阳性率高于B型,差异有统计学意义（P〈0．05）,HBVDNA载量两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论本组慢性乙肝患者的乙肝病毒基因型以B、C为主要亚型,且C型稍多,C型HBeAg阳性率高于B型。     

应用型特异性引物巢式PCR分析温州地区乙型肝炎病毒基因型及其临床意义

目的了解温州地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布及其与临床的相关性。方法选取温州地区HBVDNA阳性的慢性HBV感染者202例,其中慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者52例,慢性乙型肝炎103例,肝硬化27例,肝细胞癌20例,应用型特异性引物巢式PCR检测HBV的基因型。结果202例HBVDNA阳性血清标本中,B型37例（18．3％）,C型123例（60．9％）,B／C混合型41例（20．3％）,D型1例（0．5％）,未发现A、E、F和G型;与B基因型、B／C混合型相比,C基因型在慢性乙型肝炎和肝细胞癌中明显升高,分别为56．1％和14．6％（P〈0．05）;C基因型感染者血清丙氨酸氨基转移酶水平（226±268）U／L高于B基因型的（114±183）U／L和B／C混合型的（130±222）U／L,差异有统计学意义（P〈0．05）;C基因型感染者HBeAg阳性率和HBVDNA含量明显高于B基因型和BC混合型感染者相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论温州地区存在HBV的B、C、D和B／C混合基因型,C型为本地区的优势基因型．并且C型HBV感染易引起较重肝脏损伤。     

乙肝相关性肝病患者幽门螺杆菌感染的研究

目的研究慢性乙型肝炎(乙肝)、乙肝肝硬化、乙肝后肝癌等肝病患者幽门螺杆菌(Hp)感染情况。方法收集慢性乙肝、乙肝肝硬化、乙肝后肝癌等肝脏疾病患者273例,日期正常体检人群60例,采用免疫层析法检测患者血清中抗Hp抗体(Hp-IgG),定量PCR检测HBV DNA。结果乙肝相关性肝病患者Hp感染率73.3%,正常体检人群为40.0%,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);慢性乙肝、乙肝肝硬化、乙肝后肝癌3组患者Hp感染率分别为62.7%、77.0%、79.7%,后二者Hp明显高于慢性乙肝患者(P<0.05);按病毒载量分级,HBV DNA阴性组Hp感染率低于HBV DNA阳性组,而阳性组按低、中、高分组,各组间Hp感染率分别为69.4%、65.0%、66.1%(P>0.05);乙肝肝硬化患者按Child-push分级后,A、B、C各级之间的Hp感染率分别为51.9%、63.4%、65.6%(P>0.05)。结论 Hp感染可能参与乙肝肝病患者肝脏损伤,显示Hp具有肝细胞毒性作用;肝硬化、肝癌感染率高于慢性乙型肝炎,提示Hp感染与慢性肝病疾病进展和肝癌的发生有一定相关性。     

健康体检者乙肝血清标志物检出状况分析

目的研究健康体检者乙肝血清标志物检出状况。方法对25 302份体检标本进行乙肝两对半检测,并对检测结果进行分析。结果乙型肝炎病毒感染率为2.73%,乙型肝炎表面抗体阳性率为63.96%。结论乙型肝炎病毒感染率呈逐年递增的趋势。乙型肝炎表面抗体阳性率从2009年到2012年均呈现缓慢增长趋势,但从2012年到2013年却出现回落。