检测猪伪狂犬病血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验方法的建立和评价

以斑点酶联免疫吸附试验(简称 Dot-ELISA)检测128份接种伪狂犬病病毒(PRV)前后的实验猪血清及49头份现地猪血清,并与微量病毒中和试验(MIVN)作比较.结果,Dot-ELISA 能检出抗 PRV 特异抗体,与MIVN 的检出符合率为95.9%,两种方法无显著性差异(P>0.05).Dot-ELISA 检出人工感染猪血清抗体的时间(接毒后第5天)早于 MIVN(接毒后第9天).Dot-ELISA 检测猪血清 PRV 抗体,具有特异性强、敏感性高、快速简便等优点,适合于大批检疫和流行病学调查.     

猪人工感染弓形虫病血清抗体消长规律的研究

根据10头人工感染弓形虫病猪的间接血凝试验（IHAT）和酶联免疫吸附试验（ELISA）血清抗体检测结果表明．所有被检猪感染后第14天血清抗体达到阳性滴度．第21天抗体滴度达到高峰．第28天开始下降。猪弓形虫病血清学诊断的最佳时间为感染后14～28天。ELISA比IHAT抗体检出时间早．抗体滴度高．维持阳性抗体滴度的时间长。     

人工感染猪弓形虫病血清抗体消长规律的研究

根据１０头人工感染猪ＩＨＡＴ和ＥＬＩＳＡ血清抗体检测结果表明，所有被检动物感染后第１４天血清抗体达到阳性滴度，第２１天抗体滴度达到高峰，第２８天开始下降。ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡＴ抗体检出时间早，抗体滴度高，维持阳性抗体滴度的时间长。本试验研究结果表明，猪弓形虫病血清学诊断的最佳时间为感染后１４￣２８天。     

应用ELISA检测特异性循环免疫复合物诊断弓形体病的研究

应用单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELI-SA)的单抗第二抗体夹心法(单抗二抗法),检测人工感染弓形体病兔血清特异性免疫复合物(CIC),并与多抗(PcAb)第二抗体夹心法(多抗二抗法)及间接法进行比较.其结果显示:1.应用单抗二抗法检测感染弓形体后第4天,兔血清 CIC 阳性率为38%,至第6天阳性率达95.2%.显示了高度敏感性。2.单抗二抗法与多抗二抗法相比.在1～60天 CIC 的累积阳性率、OD 均值,前者均高于后者(P<0.01).有显著差异.3.交叉反应:与血吸虫病,本法为4.8%,间接法为21.4%;球虫病,本法为0%,间接法为12.1%.     

猪繁殖与呼吸障碍综合症的防治(下)

(接上期)5.1.3血清学检查可用四种方法检测血清中的PRRS病毒抗体。免疫过氧化物酶试验(IPMA):本方法特异性和敏感性较好,但操作复杂、费用高;间接荧光抗体试验(免疫荧光染色法-IFA):本方法可最早于感染后6d,一般于感染后两周检出抗体,抗体效价于感染后5～6周达到峰值(1∶40000);血清中和试验(SN):因SN抗体比IFA出现得晚,所以本法对急性感染的检出率较低。Yoon氏等于1994年对本法进行了改进,加入了20%的新鲜猪血清,从而提高了本法的敏感性,可于感染后10d左右检出抗体;酶联免疫吸附试验(ELISA):本法的特异性比IPMA法更敏感,且操作…     

不同ELISA试剂盒检测感染猪口蹄疫病毒3ABC抗体效果比较

为更准确研究口蹄疫病毒(FMDV)感染猪非结构蛋白抗体变化规律,选取3种不同的试剂盒,分别检测接种O型口蹄疫病毒猪FMDV非结构蛋白3ABC抗体。试验数据表明,人工感染O型口蹄疫病毒猪最早在感染后第5天检测到非结构蛋白抗体,至第7天3ABC抗体全部转为阳性;3种试剂盒检测最早3ABC抗体与症状对应关系有差异,每两种商业试剂盒呈现不同程度的相关性。其中A试剂盒显示出最大的灵敏度,而B试剂盒显示最高的特异性,C试剂盒的敏感性依可疑样品的处理方式而变化,因此对3种试剂盒进行比较,发现A试剂盒更稳定,更适合于猪FMDV非结构蛋白抗体检测。     

眼结膜病料作荧光检测诊断猪瘟的研究

作者采集自然感染猪瘟患猪20头发病后各日眼结膜上皮细胞作直接免疫荧光检验,发现随着病程的延长,检出率随之提高,其中发病第2天检出率28.6％,第3天31.25％,第4天50％,第5天78.5％,第6天90％,第7天88.9 ％,明确了应用本法诊断猪瘟的标准时间在发病第5天以后,检出率达78.5％以上。还用本法检验兽医技术人员临床诊断判定为猪瘟的患猪521头,获得了发病后各日病料的阳性率,临床诊断猪瘟的可信度,其中发病第2天为23.8％,第3天以后为 42.4 ％～ 62.8％。     

检测PCV2抗体水平的两种ELISA方法对比分析

试验采用阻断ELISA试剂盒和间接ELISA试剂盒,分别对人工感染猪和自然感染猪进行了猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2, PCV2)抗体检测。结果显示:PCV2攻毒组和PCV2攻毒后佐剂KHL刺激组试验猪用两种ELISA试剂盒检测,检测结果基本一致。PCV2抗体均于攻毒后2～3周出现,6～8周达到最高,至第16周仍维持较高水平。PCV2攻毒后佐剂刺激组猪产生的抗体水平明显高于PCV2攻毒组。PCV2自然感染猪用两种ELISA试剂盒检测,检测结果一致。断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)发病猪抗体阳性率为99%,PMWS亚临床感染猪抗体阳性率为95%,PMWS发病猪抗体水平多数高于亚临床感染猪。     

猪圆环病毒2型高免卵黄抗体的研制与应用

为制备猪圆环病毒2型(porcine circovirus serotype2,PCV-2)高免卵黄抗体,并对其治疗效果进行研究,通过自制猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活苗,免疫SPF产蛋鸡,收集高免蛋,制备PCV-2高免卵黄抗体,对高免卵黄抗体进行无菌检验、活体动物安全性检测,用琼脂扩散方法进行效价检验和人工感染保育猪治疗试验,并将其应用于临床实践,观察其治疗效果。结果抗体效价达到1∶64;人工感染治疗试验治愈率达100%;临床试验治愈率为96%,应用效果良好。     

免疫扩散法诊断“兔瘟”的研究

用“兔瘟”病兔肝脏乳剂制备的冻融抗原对感染“兔瘟”毒的兔血清进行琼脂糖免疫扩散检查,检出特异性抗体。各批抗原对阴、阳性血清检验结果一致.对人工感染耐过兔血清,在接毒后第7～9天可检出沉淀抗体,抗体持续期最少可达80天。     

猪流行性腹泻病毒实验感染猪血清抗体的消长规律

应用微量中和试验(MT)、间接血凝试验(IHA)和间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)对三种不同途径即滴鼻、口服和肌肉注射人工感染猪流行性腹泻病毒的12头仔猪的血清抗体进行了检测。感染猪在第1～2周时即可测出抗体,3～5周后抗体滴度达高峰,抗体持续时间最短为18周,最长可达22周以上。其中以肌注和滴鼻组抗体产生较早,而口服组稍晚。肌注组抗体上升较快,抗体持续时间较短,而滴鼻和口服组抗体上升稍慢,抗体持续时间较长。     

屠宰狗的旋毛虫病

<正> 旋毛虫病是一种比较严重的人兽共患寄生病。目前已发现有60多种哺乳动物为其宿主,肉用动物中主要是狗和猪。关于人感染旋毛虫的事例,世界各国报道很多,对人的健康危害很大。近年来,我国发生人感染旋毛虫病的事例日益增多,地区范围也日益扩大。其中狗肉在旋毛虫对人的感染上具有重要的作用,据报道吉林省大安县(1975)、辽宁省抚顺市(1979)、吉林省舒兰县(1981)均因吃狗肉而发生人感染旋毛虫病。因此,对狗旋毛虫病必须引起重视。1983年我厂为生产出口狗肉,屠宰狗1000只,通过宰后旋毛虫检验,我们对吉林省部分地区狗感染旋毛虫病的感染情况进行了调查研究,现将其结果报道如下。     

德令哈市猪旋毛虫感染情况调查

猪旋毛虫病是由旋毛形线虫的成虫寄生于多种动物的小肠,幼虫寄生于猪的横纹肌引起的一种重要人畜共患病.猪的感染较为普遍,人、鼠、犬、猫都可感染.本病在公共卫生上极为重要,肉品卫生检验中将旋毛虫检验项目列为首要检验项目.     

流行性出血热病毒在猪体液中的分布及排毒途径的研究

用流行性出血热病毒(EHFV)进行人工感染猪实验。以RPHA和RPHIA检测体液EHFV抗原与抗体,IFA检测组织中EHFV抗原。结果分别在人工感染后第3天和第7天开始从血清、尿、粪、唾液等样品均检出EHFV抗原与抗体,而且从肺、脾、肾、脑、淋巴结检出EHFV抗原,对照组均为阴性。选用EHFV抗原阳性样品再次感染乳鼠脑,可检出特异性荧光物质。结果表明,猪感染EHFV后,在体液中分布广泛,既能在体内复制增殖,又能通过多种途径排出感染性病毒抗原,污染外环境,具备作为EHFV传染源的条件,而且是EHFV的敏感动物。然而从猪脑组织中检出EHFV抗原,说明EHFV可通过血脑屏障进入中枢神经系统参与损害,由此提示EHF病人早期出现神经症状,似乎病毒作用是不可忽视的原因之一。     

猪旋毛虫病与毛细血管出血的鉴别诊断

猪旋毛虫病是一种人兽共患病，发病较普遍。人感染旋毛虫病后治疗困难，医药费用较高，治疗不当甚至引起死亡。故肉食品检疫中，猪旋毛虫的检验是进行检查的首要项目。笔者13a来共参与检疫检验猪胴体9．5万多头次，累计检出猪旋毛虫135头次，占检出寄生虫病变的5％。猪旋毛虫病与毛细血管出血有很多相似点。为了提高检出率和准确性。现将鉴别方法陈述如下。     

云南地方株PRRSV感染对猪细胞因子表达的影响

为了探究云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)毒株对猪部分细胞因子的影响,试验用Marc-145细胞培养云南地方株YN-2011PRRSV毒株,攻毒组仔猪通过口服和腹腔注射方式感染毒株,对照组仔猪以相同方式用生理盐水进行处理,观察仔猪体温、临床状态,分别在感染后第3,7,14,20,30天采集仔猪血清,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中PRRSV抗体、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-α(IFN-α)的水平,荧光定量PCR检测血清中PRRSV的病毒载量。结果表明:攻毒组仔猪出现精神沉郁、腹泻、耳朵发红、皮肤发绀等猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)临床症状;血清中PRRSV抗体水平在感染后第20天极显著上升且达到抗体阳性临界值(P0. 01); TNF-α水平在感染后第3,7,14,20,30天高于对照组,除第14天外均差异极显著(P0. 01); IL-1β及IFN-α水平在各时间点均高于对照组且差异极显著(P 0. 01),二者在感染后第7天达到最高水平;在感染后第7天攻毒组仔猪出现病毒血症,第14天病毒血症消失。说明云南地方株PRRSV YN-2011对仔猪有致病力,使仔猪PRRSV抗体及细胞因子TNF-α、IL-1β、IFN-α水平均明显上调。     

猪旋毛虫病的诊断与防治

旋毛虫病是由旋毛形线虫引起的一种严重的人畜共患寄生虫病,成虫寄生于肠道,幼虫寄生于横纹肌.猪旋毛虫病的流行和蔓延,不但危害养猪业健康、有序的发展,更重要的是威胁到人们日常的食品安全.人一旦摄食了生的或未完全煮熟的含旋毛虫包囊的猪肉,很容易感染发病,甚至死亡.因此,猪旋毛虫病在食品卫生检验中被列为首要项目.为更好地控制和消灭猪旋毛虫病,保障人民生命安全,主要从该病痛原、生活史、流行特点以及防治等方面进行了综述.     

应用酶联免疫吸附试验快速诊断猪囊虫、旋毛虫的研究

猪囊虫、旋毛虫病严重威胁着人体健康,传统的检验方法是屠宰后剖检、压片镜检,检出病猪销毁处理,造成了很大积极损失.应用酶联免疫吸附试验活体检验猪囊虫、旋毛虫病,对病猪进行有效治疗,减少经济损失.     

猪传染性胸膜肺炎疫苗免疫仔猪后抗体消长规律的研究

为了给猪传染性胸膜肺炎制订合理的免疫程序提供依据,试验检测了仔猪接种两种猪传染性胸膜肺炎多价疫苗(1-2-7型)后的抗体消长规律。结果表明:接种两种不同猪传染性胸膜肺炎疫苗后,仔猪的抗体平均阻断率和阳性率变化趋势基本相同,在首免后第21天,仔猪传染性胸膜肺炎抗体平均阻断率和阳性率达到峰值,随后逐渐下降;二免后仔猪传染性胸膜肺炎的抗体平均阻断率和阳性率逐渐升高,在二免后第30天(即首免后第60天)达到第2次高峰,随后抗体平均阻断率逐渐下降,但仍维持在较高水平,抗体阳性率的变化幅度不大;1型胸膜肺炎放线杆菌抗体平均阻断率在首免后第44天略低于抗体保护临界值,抗体阳性率在首免后第37天稍高于合格率;7型胸膜肺炎放线杆菌抗体平均阻断率在首免后第30天时已经接近抗体保护的临界值。说明在猪的整个生长阶段,猪传染性胸膜肺炎多价疫苗需要免疫2次,且二次免疫的时间应在首免后第30~37天为宜。     

蓝耳病阴性猪PRRSV攻毒试验结果及在血清驯化中的应用

良圻原种猪场2009年在后备猪采用血清驯化,以保持猪群蓝耳病的稳定。为进一步了解公司内部所用猪蓝耳病病毒的特性,用同一猪蓝耳病病毒的不同拷贝数(0、20、40、400、4 000和20 000)分别对6头蓝耳病抗原抗体双阴性仔猪进行攻毒试验。病原检测:攻毒24h后,除阴性猪外,5头猪均抗原检测到PRRSV病毒核酸,抗体检测;攻毒后的前6 d抗体均为阴性,7 d后攻毒猪只抗体逐渐转阳;第9天抗体全部转阳且较第7天有大幅升高第11天后,整体抗体稍有上升但较缓慢,攻毒21 d后,各猪只抗体值在1.7~2.3之间。表明20个病毒拷贝数就足以感染猪只。