共查询到10条相似文献,搜索用时 248 毫秒
1.
基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法进行肌红蛋白的从头测序 总被引:2,自引:0,他引:2
蛋白质的序列测定对于蛋白质的鉴定具有重要意义.传统的Edman降解测序法对样品纯度有很高的要求,而且操作比较繁琐.在蛋白质组研究中广泛采用串联质谱法测定蛋白质水解肽段的部分氨基酸序列(肽序列标签),通过数据库检索来鉴定蛋白质[1,2].本工作采用反相色谱法分离肌红蛋白的酶切肽段,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOFMS)技术测定各个肽段的氨基酸序列,拟提高蛋白质的序列覆盖率和鉴定的可靠性. 相似文献
2.
高效基质的发现和使用能够提高基质辅助激光解吸/电离(MALDI)的测定效果、扩展其应用范围.自基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)建立以来,寻找有效新基质一直都是MALDI-TOFMS研究的重要内容.目前测定多肽、蛋白质的常用基质主要是一些含苯环、羟基、氨基和羧基等官能基团的有机小分子化合物如SA和HCCA等.本工作拟设计、合成3-氨基(3-AC)、3-羟基(3-HC)、3-羧基(3-CC)和4-甲基-7-羟基香豆素(4-M-7-HC),并考察这几种香豆素衍生物作为基质应用MALDI-TOFMS测定多肽、蛋白质的结果. 相似文献
3.
促红细胞生成素(EPO)是一种糖蛋白,绝大部分由肾脏产生,少量来自肝脏(胎儿及新生儿则主要由肝脏产生)[1].其最主要的功能是促进红细胞的生成,提高机体血红蛋白的浓度,改善机体的携氧能力,从而增强人体的耐力.EPO的肽链由165个氨基酸构成,分子量约为30~39 kDa,具有3个N-连接糖基化位点(Asn24、38、83)和1个O-连接糖基化位点(Ser126),平均含糖量约为40%[2].研究表明,重组EPO(rhEPO)糖基化程度对EPO的体内活性有相当大的影响,rhEPO比内源性EPO含有更多的三天线及四天线低聚糖,并且二者在唾液酸含量上有明显的差别[3,4].本工作采用基质辅助激光解吸-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF-MS)测定重组EPO唾液酸含量,鉴定了三个N-连接糖基化位点,拟为重组EPO产品的质量控制以及与内源性EPO的区分提供新的思路及手段. 相似文献
4.
本文建立了基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的定坤丹中鹿茸的专属性鉴别及驯鹿茸投料的筛查方法。采用胰蛋白酶对定坤丹样品进行酶解处理,使用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm×1.7μm)分离,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,进样体积5μL。电喷雾离子源(ESI)正离子模式,多反应监测(MRM)模式。结果表明,鹿茸专属性鉴别及驯鹿茸的各监测离子对专属性良好,30批实际样品均检出鹿源性成分;其中,8批检出鹿茸,其余22批均检出驯鹿茸,表明目前市场上定坤丹样品中鹿茸多来源于驯鹿。该方法的专属性好、操作简便快捷,进一步完善了定坤丹质量标准,为含鹿茸中药制剂中鹿茸的鉴别及驯鹿茸筛查提供参考。 相似文献
5.
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALD I-TOF-MS)成功地对核糖核酸酶相对分子量进行测定。探讨三种不同基质对其分析结果的影响,实验中发现α-氰基-4-羟基肉桂酸是适宜的基质,该方法是传统生物方法无法比拟的。 相似文献
6.
7.
本文采用正交实验设计法对超声辅助提取的实验条件(试剂浓度、试剂体积、超声时间、超声温度)进行了优化,建立反相高效液相色谱测定冻干鹿茸中尿嘧啶,尿苷含量的方法.结果表明,1.000 g冻干鹿茸样品用40 mL 50%乙醇,60℃提取50 min时,提取效果最佳.采用反相高效液相色谱进行测定,尿嘧啶和尿苷在1.0mg/L~30 mg/L浓度范围内,其峰面积与浓度均具有良好的线性关系,加标回收率91.8%~102.9%.该方法可快速、准确测定鲜鹿茸经冷冻干燥处理后样品中尿嘧啶和尿苷的含量. 相似文献
8.
9.