孝感地区孕妇感染戊型肝炎病毒流行病特征和母婴HEV IgG传递率调查

目的调查湖北省孝感地区孕妇戊型肝炎病毒感染状况及流行特征、母婴抗-HEV IgG传递率和抗-HEV IgG在婴幼儿体内的消长。方法孕妇446例和相对应年龄的普通健康女性463例,收集其人口统计学数据并采集其血清标本;采集20例抗-HEV IgG阳性孕妇分娩的新生儿血清,并追踪收集25例抗-HEV IgG阳性婴幼儿血清(每两月采集一次,共采集7次),采用ELlSA法检测血清抗-HEV IgG和抗-HEV IgM,对抗-HEV IgM阳性标本进行HEV基因分型。结果对照人群抗-HEV IgG阳性率19.22%(89/463);抗-HEV IgM阳性率1.08%(5/463)),孕妇抗-HEV IgG阳性率为19.73%(88/446),抗-HEV IgM阳性率1.57%(7/446),两组相比差异无统计学意义(P0.05)。孕妇和对照人群随年龄增长抗-HEV IgG阳性率增高,26-30年龄段孕妇抗-HEV IgG阳性率高于对照人群。农民孕妇抗-HEV IgG阳性率高于其他职业孕妇。母婴抗-HEV IgG传递率为80.00%(16/20)。追踪检测婴幼儿抗-HEV IgG体内存在时间为4~12月。孕妇和对照人群中各有1个HEV RNA阳性标本,HEV基因序列同源性为99.34%,基因型为IV d亚型。结论孝感地区孕妇人群存在HEV散发感染,以无症状的隐性感染为主;抗-HEV IgG母婴传递率较高,但该抗体在婴幼儿体中存在的时间较短。     

用不同基因型戊型肝炎病毒重组蛋白建立酶联免疫吸附测定一步法

目的 以7种不同基因型和亚型的HEV重组蛋白作为包被抗原,建立HEV抗体检测ELISA一步法.方法 通过方阵滴定法确定包被抗原浓度,确定临界值,并进行敏感度、特异度和热稳定性试验.结果 7种重组抗原混合物(Mix166)最佳包被浓度为1.5 mg/L.抗-HEV IgG检测试剂的批内、批间变异系数分别为8.67%和10.85%,抗-HEV IgM检测试剂的批内、批间变异系数分别为4.56%和5.99%.一步法检测50份HEV RNA阳性血清的HEV IgG和HEV IgM抗体,阳性率均为94%.一步法检测674份健康者血清,52份抗-HEV IgG阳性,3份抗-HEV IgM阳性.一步法检测HEV墨西哥株攻击黑猩猩后收集的系列血清发现,病毒攻击后1～6周抗-HEVIgM阳性,2～76周抗-HEV IgG阳性,而进口试剂盒缺乏对抗-HEV墨西哥株IgG、IgM的反应性.结论 Mix166作为包被抗原建立的HEV抗体ELISA一步法具有较好的敏感性和特异性,可用于HEV感染的诊断.     

与人类关系密切的7种动物对戊型肝炎病毒易感性的初步研究

目的　用双抗原夹心法ELISA (DS -ELISA)和逆转录巢式PCR法 (RT -nPCR)研究与人类生活关系密切的猪、犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等 7种动物对戊型肝炎病毒 (HEV)的易感性。方法　用多基因型HEV重组蛋白建立检测HEV抗体的DS -ELISA ,并用于 5 91份猪、警犬、家犬、宠物犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等多种动物血清标本的HEV抗体检测 ;用HEV多基因型通用性引物RT -nPCR扩增 14 3份犬血清标本HEVRNA。结果　在猪、家犬和宠物犬血清标本中检测到HEV抗体 ,阳性率分别为 4 3 93%、15 19%和 4 6 5 % ,但在警犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔血清标本中未检测到HEV抗体 ;14 3份犬血清标本用RT -nPCR未扩增出HEVRNA。结论　用多基因型HEV重组蛋白建立的双抗原夹心法ELISA适用于多种动物血清标本HEV抗体的检测 ;猪和犬对HEV易感 ,在HEV传播中可能起重要作用。     

不同抗囊尾蚴抗体检测试剂盒用于囊尾蚴病血清学诊断效果评价

目的　评价不同厂家生产的4种抗囊尾蚴IgG、IgG4和IgM抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒的诊断效果,为囊尾蚴病流行病学调查和临床检测提供参考。方法　采用A品牌3种抗囊尾蚴抗体（IgG、IgG4和IgM抗体）ELISA检测试剂盒以及B品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA检测试剂盒,同时检测40份脑囊尾蚴病患者、100份健康人、30份斯氏并殖吸虫病患者、17份细粒棘球蚴病患者和19份皮下或脑裂头蚴病患者血清,比较不同试剂盒检测囊尾蚴病的敏感度、特异度和假阳性率。结果　A品牌抗囊尾蚴IgG、IgG4和IgM抗体ELISA试剂盒以及B品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒检测囊尾蚴病的敏感度分别为95.00%（38/40）、87.50%（35/40）、7.50%（3/40）和75.00%（30/40）,特异度分别为98.00%（98/100）、100.00%（100/100）、100.00%（100/100）和100.00%（100/100）;A品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒检测囊尾蚴病的敏感度高于B品牌（[χ2] = 6.28,P < 0.05）,两者特异度差异无统计学意义（[χ2] = 2.01,P > 0.05）。4种试剂盒检测并殖吸虫病、细粒棘球蚴病、裂头蚴病患者血清总假阳性率分别为37.88%（25/66）、22.73%（15/66）、62.12%（41/66）和15.15%（10/66）（[χ2] = 37.61,P < 0.05）;其中A品牌抗囊尾蚴IgM抗体ELISA试剂盒检测总假阳性率最高（[χ2] = 7.56,P' < 0.008）,A品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒检测总假阳性率高于B品牌（[χ2] = 8.75,P' < 0.008）。4种试剂盒检测并殖吸虫病患者血清假阳性率分别为40.00%（12/30）、16.67%（5/30）、76.67%（23/30）和13.33%（4/30）（[χ2] = 32.88,P < 0.05）,检测裂头蚴病患者血清假阳性率分别为21.05%（4/19）、26.32%（5/19）、73.68%（14/19）和15.79%（3/19）（[χ2] = 19.97,P < 0.05）,均以A品牌抗囊尾蚴IgM抗体ELISA试剂盒检测假阳性率最高（P' 均 < 0.008）。4种试剂盒检测细粒棘球蚴病患者血清假阳性率分别为52.94% （9/17）、29.41%（5/17）、23.53%（4/17）和17.65%（3/17）,差异无统计学意义（[χ2] = 8.24,P > 0.05）。A品牌抗囊尾蚴IgM抗体ELISA试剂盒检测并殖吸虫病、棘球蚴病和裂头蚴病患者血清假阳性率分别为76.67%（23/30）、23.53%（4/17）和73.68%（14/19）（[χ2] = 14.537,P < 0.05）,其中检测棘球蚴病患者血清假阳性率最低（[χ2] = 14.537,P' < 0.014）;其他3种试剂盒检测并殖吸虫病、棘球蚴病和裂头蚴病患者血清假阳性率差异均无统计学意义（P 均> 0.05）。 结论　不同囊尾蚴病免疫学诊断试剂各有优劣;A品牌抗囊尾蚴IgG抗体ELISA试剂盒敏感度较高,但需进一步解决与其他寄生虫病的交叉反应和稳定性问题。     

广西地区5种动物戊型肝炎病毒RNA的检测

目的了解广西地区与人关系密切的猪、鼠、狗、猕猴和鱼等5种动物戊型肝炎病毒（HEV）。方法对广西地区3月龄以下狗、猪粪便标本及龙虎山自然景区猴粪便标本，鱼胆汁标本，鼠肝组织，猪、鼠、狗HEV抗体阳性血清，用巢式逆转录聚合酶链反应法（RT—nPCR）检测戊型肝炎病毒核糖核酸（HEVRNA）。结果在3月龄以下猪粪便标本检测出HEVRNA，阳性率为10．08％（13／129），其余各种动物粪便、肝组织、胆汁、HEV抗体阳性血清标本均未检测出HEVRNA。结论猪粪便标本存在HEVRNA，该地区应加强动物粪便特别是猪粪便的管理，以预防戊型肝炎病毒的感染。     

云南省边境地区人群弓形虫感染血清流行病学调查

目的 了解云南省3个边境地区不同性别、年龄和民族的人群弓形虫感染状况,为该地区弓形虫病防控提供实验依据。方法 2015?11–2016?05在云南省中老、中越、中缅3个边境地区采集人群血样561份（中越边境222份、中老边境170份、中缅边境169份）,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中抗弓形虫IgG抗体。结果 云南省边境地区人群抗弓形虫IgG抗体总阳性率为7.84%(44/561) ,其中中越、中老、中缅边境地区人群抗弓形虫IgG抗体阳性率分别为8.56%（19/222）、8.82%（15/170）和5.92%（10/169）。汉族、哈尼族、傣族、苗族、拉祜族、基诺族、瑶族、彝族居民血清抗弓形虫抗体阳性率分别为5.63%（16/284）、10.96%（8/73）、13.70%（10/73）、4.17%（2/48）、11.11%（1/9）、7.69%（1/13）、12.00%（3/25）和11.11%（3/27）;少数民族居民血清抗弓形虫抗体总阳性率（10.11%,28/277）显著高于汉族（[χ2] = 3.884,P < 0.05）,傣族居民血清抗弓形虫抗体阳性率显著高于汉族（[χ2] = 5.594,P < 0.05）。11 ~ 20岁年龄组人群血清抗弓形虫IgG抗体阳性率最高,为23.53%（4/17）,显著高于0 ~ 10岁年龄组[4.23%（3/71）]（[χ2] = 4.593,P < 0.05）和31 ~ 40岁年龄组[4.00%（3/75）]（[χ2] = 4.997,P < 0.05）。结论 云南省边境地区人群存在不同程度弓形虫感染,少数民族居民感染率明显高于汉族,有必要加强对少数民族居民的弓形虫病防控健康宣教。     

3 种免疫诊断试剂检测人群血清中日本血吸虫抗体的效果比较

目的  评价斑点免疫金渗滤法（DIGFA）、胶体染料法（DDIA）和间接血凝试验（IHA）三种方法在我县不同流行程度、不同流行类型地区中检测人群血清中血吸虫抗体的效果。方法  按照整群抽样的方法,分别在洲滩型传播控制地区的群心村、山丘型传播控制地区的金塔村和传播阻断地区的郎坑村各随机抽取150人作为检测对象,分别用DIGFA、DDIA和IHA检测待检对象血清中血吸虫抗体,并对检测结果进行统计分析。结果   DIGFA、DDIA和IHA 对传播阻断村人群血清均未检出血吸虫抗体;对山丘型传播控制村人群血清血吸虫抗体检测阳性率分别为13.3%（20/150）、2.0%（3/150）和12.0%(18/150);而三种方法组合检测的阳性率提高至19.33%（29/150）,用DIGFA和IHA组合检测的阳性率提高至17.33%(26/150)。对洲滩型传播控制村人群血清血吸虫抗体检测阳性率,DIGFA、DDIA和IHA分别为26.7%（40/150）、9.3%（14/150）和24.7%（37/150）;而三种方法组合检测的阳性率提高至36.0%（54/150）,用DIGFA和IHA组合检测的阳性率提高至34.0%(51/150)。结论  由于铜陵县疫情已达到传播控制,人群感染率和感染度逐年下降,采用多种方法组合检测,可以提高人群血吸虫抗体的检出率。     

妇科恶性肿瘤患者弓形虫感染血清流行病学调查

目的 了解妇科恶性肿瘤患者弓形虫感染情况,为后续该类人群弓形虫感染防控提供依据。方法 收集327例临床妇科恶性肿瘤患者血清样本,同时收集200例女性体检正常者血清作为对照,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清抗弓形虫IgG和IgM抗体,分析不同人群抗弓形虫抗体阳性率差异。结果 327例妇科恶性肿瘤患者总体弓形虫感染率为26.91%（88/327）,高于健康体检者的5.00%（[χ2] = 39.36,[P< 0.01]）;其中血清抗弓形虫IgG抗体阳性率高于健康体检者（26.30% vs. 5.00%;[χ2] = 37.79,[P< 0.01]）,血清抗弓形虫IgM抗体阳性率与健康体检者差异无统计学意义（0.92% vs. 0;校正[χ2] = 0.58,[P> 0.01]）。卵巢癌、子宫颈癌和乳腺癌患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率分别为27.68%、25.47%和25.69%,均高于健康体检者（[χ2] = 32.35、27.32、28.00,P 均 < 0.01）,但卵巢癌、子宫颈癌和乳腺癌患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率差异无统计学意义（[χ2] = 0.17,[P> 0.05]）。卵巢癌、子宫颈癌和乳腺癌患者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率分别为1.79%、0和0.92%,与健康体检者差异均无统计学意义（P 均 > 0.05）。结论 妇科恶性肿瘤患者弓形虫感染率较高,应加强妇科恶性肿瘤患者弓形虫感染防控。     

急性戊型肝炎血清抗-HEV IgM、IgG和HEV RNA动态变化及其诊断价值

目的 分析急性戊型肝炎(AHE)患者血清抗-HEV IgM、抗HEV-IgG和HEV RNA变化规律。方法 2016年1月～2018年3月北京佑安医院就诊的AHE患者217例,动态检测血清抗-HEV IgM、抗HEV-IgG和HEV RNA变化。结果 首次检测血清抗-HEV IgM、IgG和HEV RNA均阳性31例(14.3%),抗-HEV IgM和IgG阳性99例(45.5%),抗-HEV IgM阳性8例(3.7%),抗-HEV IgG阳性72例(33.2%),抗-HEV IgM和HEV RNA均阳性3例(1.5%),抗-HEV IgG和HEV RNA均阳性2例(0.9%),抗-HEV IgM、IgG、HEV RNA均阴性2例(0.9%);在75例患者二次检测中,显示血清抗-HEV IgG阳性增多;在138例有准确的发病日期患者,在第1、2、3、4病周和第4病周后,血清HEV RNA阳性检出率分别为49.0%(25/51)、10.2%(6/59)、3.1%(1/32)、4.0%(1/25)和0.0%(0/0);血清抗-HEV IgM阳性检出率分别为70.6%(36/51)、69.5%(41/59)、65.6%(21/32)、48%(12/25)和56.5%(13/23);血清抗-HEV IgG阳性检出率分别为90.2%(46/51)、88.1%(52/59)、96.9%(31/32)、100%(25/25)和100.0%(23/23)。结论 AHE患者血清抗-HEV IgM、IgG和HEV RNA存在一定的变化规律,血清抗-HEV IgG阳性,结合典型的急性肝炎过程和排除其他病因后,可以诊断为AHE。     

重组抗原检测戊型肝炎病毒IgM抗体及其意义

用戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原建立酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测肝炎患者和健康供血人群血清中抗戊型肝炎病毒IgM类抗体(抗-HEV IgM)，并评价其检测意义。在与合成肽抗原比较检测的77份急性戊型肝炎患者血清中，有54份(70.1%)由重组抗原捡测抗-HEV IgM阳性。其阳性率明显高于台成酞抗原(21/77,27．3％)。15例戊型肝炎患者双份血清用重组抗原ELISA检铡，急性期血清有11份抗-HEV IgM阳性，恢复期血清仅1份阳性。抗-HEV IgG阳性的健康供血者(8人)和甲、乙、丙型肝炎患者(11例)无1例IgM抗体阳性。结果表明，抗-HEV IgM可以作为戊型肝炎病毒新近感染的标志。HEV重组抗原检铡抗-HEV IgM敏感性高，特异性强，有助于戊型肝炎病毒感染的早期诊断。     

抗戊型肝炎病毒IgG和IgM抗体对诊断急性戊型肝炎的意义

目的 探讨抗戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体对诊断急性戊型肝炎（ＨＥ）的意义。方法 应用酶联免疫法（ＥＩＡ）检测我国７个城市共计１４３例散发性ＨＥ病人急性期血清和其中５６例病人的３５９份系列血清,以及４只实验感染ＨＥＶ猕猴的６８份系列血清的抗－ＨＥＶＩｇＭ和ＩｇＧ。结果 ７个城市１４３例散发性ＨＥ病人急性期血清抗－ＨＥＶＩｇＧ阳性率为１００．０％,明显高于抗－ＨＥＶＩｇＭ（７３．４％）,９     

Hepatitis E virus infection among animals in northern India: an unlikely source of human disease

Hepatitis E virus (HEV) is a major cause of acute hepatitis in many developing countries. Based on data from nonendemic regions, an animal reservoir of HEV has been proposed; however, data from HEV-endemic regions are limited. We tested sera from 200 pigs, 98 chickens, 86 goats, 58 sheep and 30 buffaloes for anti-HEV IgG using two different enzyme immunoassays. Specificity of the detected antibodies was confirmed using inhibition assays. Stool specimens from 210 pigs, 94 piglets and 37 sheep were tested for HEV-RNA using nested amplification methods; the polymerase chain reaction products were sequenced and compared with known human and swine HEV sequences. Of the 200 swine sera, 193 and 195, respectively, tested positive in the two assays. All goat sera showed anti-HEV reactivity in both the assays. Inhibition studies confirmed the HEV specificity of antibodies detected in swine and goat sera using both the assays. Sera from sheep, buffalo and chickens also showed high rates of apparent reactivity, but inhibition studies were unable to confirm the specificity of reactions in these species. One faecal specimen showed amplification using Indian swine HEV-specific primers. The genomic sequence of the amplicon from this isolate had only 76-79% nucleotide and 93% amino acid homology with human HEV isolates reported from India and other parts of the world, and most closely resembled swine HEV isolates from other parts of India. Infection with HEV or a related agent is widespread among animals in northern India. However, the swine HEV in India differs genetically from human HEV isolates, indicating that pigs may not play an important role in the spread of human hepatitis E in endemic regions.     

戊型肝炎病毒变异株的血清学特征

探讨戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）患者血清学特征。方法用逆转录聚合酶链反应法（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ,并对阳性产物进行克隆和测序;对部分ＨＥＶＲＮＡ阳性者进行追踪并检测抗一ＨＥＶ。结果１５例（２３.４％）为ＨＥＶＲＮＡ阳性,其中９例为典型的中国ＨＥＶ株基因序列,６例变异较大,与典型的中国株基因序列的同源性仅为８０％左右。感染原型ＨＥＶ株的４例中,３例于１月后抗一ＨＥＶ阳转;而２例感染变异ＨＥＶ株的患者于１月或３月时,抗－ＨＥＶ仍为阴性。结论现行的抗一ＨＥＶＥＩＡ试剂尚不能诊断变异的ＨＥＶ株。     

猪戊型肝炎病毒IgG抗体检测和部分核酸序列分析

目的 了解猪戊型肝炎病毒(HEV)感染情况,探讨猪HEV基因型与人HEV的关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录巢式聚合酶链反应法(RT-nPCR)分别检测猪血清抗-HEV IgG抗体和猪HEV RNA,并用Vector NTI Suite 7和TreeView软件进行人与猪HEV核酸序列和基因进化树分析。结果 猪抗-HEV抗体阳性率为16.67%(18/108),并从18份抗-HEV IgG阳性的猪血清中扩增到2株(11.11%,分别命名为S18和S43)HEV 开放读码框(ORF)1片段(102～387bp),两者核苷酸序列同源性为99%,与HEV基因型1～8的核苷酸序列同源性分别为76%～77%、78%、76%～79%、85%～86%、77%、80%、79%和75%～79%。其中1株(S18)还扩增出HEV ORF2片段(5994～6297bp),与HEV基因型1～4的核苷酸序列同源性分别为76%～78%、74%、74%～77%、85%～94%。结论 分离的2株猪HEV属于HEV基因型4。     

Significance of serum IgA in patients with acute hepatitis E virus infection

AIM: To study the significance of serum anti-hepatitis E virus (HEV) IgA in patients with hepatitis E. METHODS: A new method was established to assay anti-HEV IgA, which could be detected in the middle phase of the infection. We compared anti-HEV IgA assay with anti-HEV IgM and anti-HEV IgG assay in sera from 60 patients with positive HEV-RNA. RESULTS: The 60 patients with positive HEV-RNA had both anti-HEV IgA and anti-HEV IgM and 410 patients with negative HEV-RNA were used as control. Periodic serum samples obtained from 60 patients with hepatitis E were tested for HEV RNA, anti-HEV IgM, anti-HEV IgA and anti-HEV IgG. Their HEV-RNA was detectable in the serum until 20±11 d. We used anti-HEV IgM and anti-HEV IgA assay to detect HEV infection and positive results were found in 90±15 d and 120±23 d respectively, the positive rate of anti-HEV IgA was higher than that of anti-HEV IgM and HEV-RNA (P <0.05). CONCLUSION: The duration of anti-HEV IgA in serum is longer than that of anti-HEV IgM, and anti-HEV IgA assay is a good method to detect HEV infection.     

International collaborative survey on epidemiology of hepatitis E virus in 11 countries

We conducted seroepidemiological studies on antibody prevalence to hepatitis E virus (HEV) in 5,233 sera from 11 countries to ascertain the present state of HEV infection on a global basis. The prevalence of anti-HEV IgG increased with age in these tested countries, but the rate of antibody positivity was over 20% in the 16-30 year-old group in most of the participating countries, except for Japan, the USA, and Spain. Of patients with acute hepatitis of unknown etiology from Nepal, 56% (14/25) were positive for the IgM class of anti-HEV antibody. In addition, HEV RNAs in the serum from 3 Nepali patients who had the IgM antibody were detected by nested PCR and all of the HEV genes isolated belonged to genotype 1. Our results indicate that HEV is spreading worldwide, not only in developing countries, but also in more industrialized countries than previously thought.     

Prevalence of antibody against hepatitis E virus in various species of non-human primates: evidence of widespread infection in Japanese monkeys (Macaca fuscata)

We screened 495 serum samples from 20 species of non-human primates for the antibody against hepatitis E virus (HEV). Anti-HEV IgG was detected in 84 of 232 (36.2%) Japanese monkeys, 2 of 19 (10.5%) cynomolgus monkeys, 3 of 83 (3.6%) rhesus monkeys, and 1 of 1 (100%) Taiwanese monkey, respectively. These results suggest that HEV is circulating among monkeys belonging to the genus macaca. A high prevalence of anti-HEV IgG was observed in Japanese macaques (M. fuscata) despite the fact that Japan is non-endemic for hepatitis E. It is possible that HEV can be transmitted from Japanese macaques to humans. Further, the rate of antibody positivity was found to increase with age in Japanese macaques. Seropositive macaques were found throughout Japan, but the seroprevalence rate differed among geographic regions.