家兔新型动脉粥样硬化狭窄模型的建立及其动态观察

目的　为血管成形术后再狭窄的研究提供非球囊扩张和动脉造影的简单易行的新型动脉粥样硬化斑块狭窄动物模型。方法　选择日本大耳白兔 18只 (含正常组 6只 ) ,用电刺激血栓形成仪刺激颈总动脉并在术后高脂饲料喂养 6周 ,模型分别于术后 3天、1周、3周、6周处死颈总动脉取材 ,常规病理切片行HE、弹力V G染色 ,光学显微镜观察病理变化。结果　术后 1周内动脉有血栓形成 ,内皮剥脱和部分内弹力板断裂 ,内皮细胞增生 ,中膜局部平滑肌细胞有少量水肿、消失 ,外膜有中性粒细胞浸润 ;术后 3周以上则内膜明显增生 ,内膜下脂质沉积 ,中膜平滑肌细胞核有轻度减少 ,纤维组织及基质增生 ,以损伤部位更明显 ,外膜刺激部位有轻度增厚。术后 6周 6只动物颈总动脉均形成管腔狭窄。结论　用电刺激加高脂饲料喂养的方法可成功建立动脉粥样硬化狭窄的动物模型 ;该模型的病理表现与人类动脉粥样硬化的病理过程相似 ,且避免了二次球囊造模法形成的血管盲端     

毛冬青甲素对兔颈总动脉球囊损伤后炎性因子IL-6和M-CSF的影响

目的：观察毛冬青甲素（Ilexonin,IA）对兔颈总动脉球囊损伤后炎性因子IL-6、M-CSF的影响,为冠脉内介入治疗提供实验依据。方法：日本大耳白兔30只,高胆固醇饲料喂养4周后随机分为3组（每组10只）：对照组,右颈外动脉切开后直接缝合切口;球囊扩张组,右颈外动脉切开并内膜球囊损伤后缝合动脉与伤口;IA治疗组,操作同球囊扩张组,缝合切口后静脉给予IA。三组实验兔继续高胆固醇饮食4周。术前1 d,术后1d、1周、2周、4周采集血清,放免法测定白细胞介素-6 （IL-6)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。取损伤血管段,病理观察动脉病理改变。结果：①球囊扩张组术后血清IL-6水平明显高于IA治疗组（P<0.05）,且较IA治疗组恢复延迟;②IA治疗组术后血清M-CSF水平虽增高,但低于球囊扩张组（P<0.05）,且恢复术前血清水平时间也较球囊扩张组明显提前（P<0.05）;③血管内皮病理变化：颈动脉损伤后对照组内膜光滑,未见泡沫细胞;球囊扩张组内膜增厚,血管平滑肌细胞增生,可见较多泡沫细胞,管腔狭窄;IA治疗组较球囊扩张组泡沫细胞减少,管腔狭窄程度明显减轻。结论：IA能降低动脉内膜球囊损伤后炎性因子IL-6、血清M-CSF水平,并抑制被损伤内膜血管平滑肌细胞增生。     

颜氏益心方对球囊损伤后大鼠颈总动脉血管内膜的影响

目的 探讨颜氏益心方对实验性球囊损伤后大鼠颈总动脉血管内膜的影响.方法 利用SD大鼠颈总动脉球囊损伤法造成颈动脉狭窄,观察颜氏益心方对颈动脉狭窄血管内膜厚度及管腔面积的影响.结果 与假手术组比较,模型组管腔面积明显缩小(P＜0.05),内膜显著增生(P＜0.05);与模型组比较,益心方低、高剂量组管腔面积及内膜增生程度均明显改善(P＜0.05).结论 颜氏益心方可改善球囊损伤后大鼠颈动脉血管内膜的厚度及管腔面积,从而抑制其内膜增生,减少其再狭窄程度.     

大鼠新型颈总动脉球囊损伤后狭窄模型的建立及其动态病理学观察

目的为经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄的研究提供新型的造模方法。方法SD大鼠24只，假手术组6只，模型组18只（分3个时相点5d、14d和28d，每个时相点6只动物）。用2．0Fogarty球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型。每组动物于相应时相点麻醉心脏放血处死后，取损伤颈总动脉。常规固定、包埋、切片，分别做HE染色、TR-A02弹力纤维染色和Masson三色染色，在光学显微镜下病理观察。结果球囊损伤大鼠颈总动脉后，5d可见内皮细胞脱落，表面炎性细胞浸润，附壁少量血栓形成。随着时间的延长，14d动脉内膜逐渐增厚，VSMC增殖。胶原和弹力纤维组织大量增生，28d可见内膜明显不规则增生，管腔明显变窄。结论本实验成功的复制了球囊损伤术后血管狭窄动物模型，其病理改变与临床经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄的病理改变相似。而且该造模方法与自颈外动脉插管建立颈总动脉再狭窄模型相比失血少。创面小，操作简便迅速，有利于提高手术成功率。     

独一味胶囊对冠心病介入治疗后再狭窄作用的动物实验研究

目的：观察独一味胶囊对大鼠实验性PTCA术后再狭窄的防治作用。方法：Wistar大鼠随机分为正常组、PTCA模型组、独一味胶囊（0.50、1.25、2.50g/kg）组,冠心丹参片（1.0g/kg,阳性对照组）。各组均于PTCA术前5天给药,末次给药2h后手术分离大鼠左颈总、颈外和颈内动脉。将2.0F球囊导管插入左颈总动脉,以1.5个大气压充盈球囊,来回拖动球囊3次以剥脱内皮,局部作用30min,建立颈动脉球囊损伤模型。于术后2周取损伤节段颈总动脉,进行病理检查及图像分析并测量内膜和中膜面积。结果：手术后2周大鼠颈总动脉损伤后引起血管内皮细胞剥脱,新生内膜形成并增生,导致管腔狭窄。经独一味胶囊治疗3周后,再狭窄大鼠动脉内膜面积、中膜面积及内膜/中膜面积比模型组显著减小,相对管腔面积增大,差异具有显著性。结论：藏药独一味胶囊可抑制内膜增生,对PTCA后的血管再狭窄具有防治作用。     

雷帕霉素洗脱支架抑制猪颈动脉成形术后近期再狭窄的实验研究

目的:研究自膨式雷帕霉素洗脱支架防治猪颈动脉血管成形术后近期再狭窄的有效性安全性,及其作用机制.方法:国产小型猪6只,分别行双侧颈总动脉球囊扩张损伤后,随机分为对照组(裸支架组)和实验组(雷帕霉素洗脱支架组),各置入6枚.术后4周重复动脉造影后处死动物.取出支架段血管,测算支架处血管管腔面积、新牛内膜厚度与面积及管腔狭窄百分比以评价内膜增生程度.应用TUNEL法检测新生内膜细胞凋亡指数(apoptotic index,AI),免疫组化检测血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bcl-2、Bax表达水平.结果:雷帕霉素洗脱支架组支架内管腔面积大于裸支架组(P<0.05);新生内膜面积小于裸支架组(P<0.05);新生内膜厚度小于裸支架组(P<0.05);细胞凋亡多于裸支架组(P<0.05):PCNA阳性细胞及Bcl-2表达低于裸支架组(P<0.05);Bax表达高于裸支架组(P<0.05).结论:雷帕霉素洗脱支架能抑制新生内膜形成.在支架植入后4周能预防猪颈动脉血管成形术后近期再狭窄的形成.可能通过上调Bax,下调Bcl-2的表达.从而抑制血管平滑肌细胞增殖发挥作用.     

Ⅰ型胶原与血管成形术后再狭窄的关系

目的探讨Ⅰ型胶原与血管成形术后再狭窄的关系。方法应用球囊拉伤动脉内膜加高脂饲养的方法建立兔髂动脉粥样硬化模型。对２４只模型兔进行球囊扩张血管成形术。采用核酸分子杂交技术对髂动脉壁平滑肌细胞（ＳＭＣ）的Ⅰ型胶原基因的表达情况进行观察。结果Ⅰ型胶原在术后１周开始表达，术后２周显著表达。结论血管成形术后晚期由于胶原增生促进了再狭窄的形成。     

188Re血管内照射对抑制血管内膜增生的影响

目的：研究188^Re血管内照射对新西兰白兔损伤血管内膜增生的影响,探 讨188^Re血管内照射对预防再狭窄的可行性。方法：将60只新西兰白兔随机分为对照组（n=30）和照射组（n=30）,均行腹主动脉球囊内皮拉伤术,照射组球囊损伤内膜后行188^Re照射治疗。分别于术后1、3、6周处死动物,取病理组织学标本进行分析。结果：与对照组比较,照射组第3、6周的新生内膜面积明显减小、管腔面积明显增加、管腔周径明显增大、管腔狭窄程度明显降低（P〈0.05）。结论：188^Re血管腔内照射能有效抑制损伤血管的新生内膜增生,为预防临床PTCA术后再狭窄提供了有力的实验依据。     

球囊扩张兔颈总动脉致动脉再狭窄的动物模型建立

目的：本实验通过球囊扩张兔颈总动脉建立动物模型,模拟PTA对动脉壁的损伤．探讨PTA后早期动脉壁内膜、中膜变化的特点。方法：用球囊扩张兔颈总动脉建立动脉损伤动物模型,术后普通饲料喂养,在术后2d、7d、14d取手术侧动脉壁标本,切片做HE染色观察测量动脉壁内膜厚度及中膜厚度的变化情况,以同只兔未手术侧动脉做为对照组,通过统计学计算．了解其变化特点。结果：①球囊扩张后兔颈总动脉内膜厚度在术后2d、7d与对照侧相比无差异（P〉0．05）,术后,14天球囊扩张侧动脉内膜厚度与对照侧相比有明显差异（P〈0．05）;②球囊扩张后兔颈总动脉内膜出现增厚,而对照侧的内膜厚度无明显改变;③球囊扩张后兔颈总动脉中膜厚度与对照侧相比有明显差异,球囊扩张后兔颈总动脉中膜厚度在术后2d及出现增厚,术后7d及术后14d较术后2d增厚明显（P〈0．05）,在术后14d与术后7d相比无明显差异（P〉0.05）。结论：本实验动物模型的建立方法是可行的,不但维持了血管在球囊扩张后正常的血流动力学,而且对于被球囊扩张血管段的定位也有帮助。     

小型猪颈动脉粥样硬化性狭窄模型的建立

目的：建立小型猪颈动脉粥样硬化性狭窄模型。方法：采用过大球囊扩张小型猪一侧颈总动脉后高脂饲养3个月。分别在球囊扩张前、扩张后2、4、8、12周末,取静脉血检测血脂水平;用彩色超声多普勒观察颈动脉粥样硬化及狭窄程度;第12周末处死动物,观察双侧颈总动脉的病理改变。结果：超声显示球囊扩张侧均出现不同程度的动脉粥样硬化并管腔狭窄：病理显示损伤侧颈总动脉明显粥样斑块形成,血管壁各层改变符合动脉粥样硬化特点。结论：通过过大球囊损伤加高脂饲养方法可成功建立小型猪颈动脉粥样硬化狭窄的动物模型。     

两种动脉粥样硬化兔模型制作方法的比较

目的通过对比单纯高脂饲养法与高脂饲养联合颈总动脉球囊损伤法建立动脉粥样硬化兔模型的试验研究,比较两种方法在制模时间,模型稳定性方面的差异.方法雌性新西兰兔20只,随机分成高脂饲养组（n=10）;高脂饲养＋颈动脉球囊拉伤组（n=10）,高脂饲养组给予高脂饲料喂养8周,颈动脉球囊拉伤组于喂养后第2周行颈动脉球囊拉伤术,术后继续喂养6周.所有试验兔在高脂喂养前后分别检测血脂水平,于第8周处死动物,取损伤段血管固定,切片,通过HE染色、弹力纤维染色后拍照,通过图像分析软件测量血管内膜厚度和泡沫细胞面积率的变化.结果高脂饲养8周形成明显的高脂血症;与单纯高脂饲养组相比,球囊损伤法颈动脉内膜明显增厚,泡沫细胞的阳性面积率高.结论与单纯高脂饲养法相比高脂饲养＋球囊损伤组试验兔8周即可形成明显的动脉粥样性血管病变,成膜时间快,泡沫细胞的阳性面积率高,模型稳定性好。     

四逆汤对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄和氧化应激的影响

目的通过球囊损伤兔髂动脉造成动脉损伤的动物模型,观察四逆汤对损伤后动脉内膜的保护和修复作用,以及对氧化应激的影响。方法雄性新西兰大白兔24只,随机分为对照组、模型组、四逆汤治疗组(四逆汤组),每组8只。对照组兔给予普通饲料,模型组、四逆汤组兔给予高脂饮食。饲养2周后模型组、四逆汤组兔行髂动脉内膜剥脱术。4周后,通过电镜观察髂动脉内膜的病变情况,光镜观察血管的病理变化,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和血脂的水平。结果扫描电镜发现,对照组兔髂动脉内膜内皮细胞形态正常,排列整齐;模型组可见内皮细胞脱落,内皮细胞增生形态各异,内皮下胶原纤维暴露;四逆汤组内皮细胞排列基本正常。光镜发现,对照组兔髂动脉管腔和管壁厚度正常,管壁光滑;模型组管壁明显增厚,管腔明显狭窄,内膜增厚;治疗组血管病变程度明显减轻。四逆汤可明显改善血脂的紊乱。对照组兔血清SOD活性明显高于四逆汤组和模型组,四逆汤组SOD活性又明显高于模型组。对照组兔血清MDA水平明显低于四逆汤组和模型组,四逆汤组MDA水平又明显低于模型组。结论四逆汤可减轻兔髂动脉剥脱术后的内膜增生和血管狭窄,其机制可能与抑制髂动脉剥脱术后兔的脂质过氧化反应、增强SOD活性有关。     

G-CSF对动脉粥样硬化兔颈总动脉球囊损伤后内皮修复的影响

目的研究重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的骨髓动员作用能否促进动脉粥样硬化性血管内膜损伤后的再内皮化过程,来预防损伤血管再狭窄.方法将35只新西兰雌性大白兔,随机分为正常饲养组（对照组）5只;高脂饲料喂养组30只在喂养10周后随机抽取20只行右颈总动脉囊扩张损伤,术后随机将其分为：G-CSF干预＋损伤组（n=10）,予静脉注射G-CSF50μg/d,连续7d,NS＋损伤组（n=10）,术后静脉注射生理盐水2mL/d,连续7d;第12周处死所有试验动物,取右颈总动脉、胸主动脉行HE染色观察血管粥样硬化病变评价模型制作情况,弹力纤维染色计算内膜（）I、中膜面积（M）比值I/M以评价内膜增生程度;伊文氏蓝染色并计算内皮再生面积（An）、内皮总面积（A）t比值An/At以评价再内皮化率;CD31免疫组化染色检测损伤局部CD31细胞表达的阳性率以评价G-CSF对EPCs动员效果以及EPCs对受损内皮的修复情况.结果 （1）高脂饲料喂养12周后可形成典型的动脉粥样硬化斑块.（2）G-CSF＋损伤组与NS＋损伤组相比I/M值降低,差异有统计学意义（P〈0.01）.（3）An/At明显升高,有统计学意义（P〈0.01）.（4）免疫组织化学染色显示颈动脉内皮CD31细胞表达阳性率G-CSF＋损伤组高于NS＋损伤组,有统计学意义（P〈0.01）.结论 G-CSF可以动员骨髓EPCs到外周血并迁移到血管内膜受损部位,促进再内皮化,抑制内膜增生,有效预防血管损伤后再狭窄的发生。     

全反式维甲酸对兔颈动脉粥样硬化模型内膜增殖的影响

①目的观察全反式维甲酸（ATRA）对兔颈动脉粥样硬化模型内膜增殖的影响。②方法36只新西兰大白兔随机分为假手术组、对照组和ATRA治疗组;假手术组给予高脂饮食但手术不损伤颈动脉内膜,余操作同对照组;对照组给予高脂饮食加空气干燥损伤颈动脉内膜;ATRA治疗组在高脂饮食加空气干燥损伤颈动脉内膜的同时给予ATRA治疗,内膜损伤后1周和4周观察平滑肌细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期素E（cyclin E）的表达及兔颈动脉内膜增殖的情况。③结果ATRA治疗组平滑肌细胞中的PCNA和cyclin E的表达较对照组明显减弱（F=7．65～8．89,q=4．27～10．33,P〈0．05、0．01）;颈总动脉病变也较对照组轻微（t=4．330～5．042,P〈0．01）。④结论ATRA能抑制兔颈动脉内膜损伤后内膜增殖,其机制可能为通过抑制cyclin E的表达而抑制平滑肌细胞的增殖。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对球囊损伤内膜修复的影响

目的建立兔髂动脉球囊损伤模型,观察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)对损伤内膜修复的影响。方法健康雄性新西兰大白兔24只随机分为GM CSF组和对照组。GM CSF组皮下注射GM CSF10μg·kg1·d1,对照组皮下注射同等量生理盐水。7d后球囊扩张损伤髂动脉。4周后提取损伤动脉标本,观察内皮修复、内膜增生情况并测定病理形态学参数。结果术后4周病理组织学见GM CSF组内膜增生程度明显轻于对照组,新生内膜中血管平滑肌细胞和纤维组织明显少于对照组,内皮较完整、光滑,管腔狭窄程度较轻。形态学参数见GM CSF组的管腔面积明显大于对照组(1.27mm2±0.31mm2vs0.92mm2±0.24mm2),新生内膜面积与内膜增生百分比明显小于对照组(0.85mm2±0.34mm2vs1.18mm2±0.38mm2;40%±7%vs55%±6%)。结论GM CSF能促进损伤内膜修复,减少内膜增生,降低再狭窄率。     

颈动脉内膜切除术不同方式血管重建后早期再狭窄的实验研究

目的在新西兰兔颈动脉粥样硬化性狭窄动物模型上行颈动脉内膜切除术,应用标准线缝合和胶粘合的方法进行血管重建,观察比较颈动脉内膜切除术后早期再狭窄过程。方法采用血管内膜气体损伤结合高脂饲料喂养的方法建立新西兰兔颈动脉粥样硬化性狭窄动物模型,在此动物模型上行颈动脉内膜切除术,应用标准线缝合和胶粘合的方法分别进行血管重建,观察比较不同重建方式术后动脉早期再狭窄过程。结果颈动脉内膜切除术后早期再狭窄过程可分为数个阶段,而不同的重建方式在每个阶段表现并不相同。在血栓形成阶段,胶粘合组的血栓面积较缝合组明显减小;在炎症反应阶段,胶粘合组动脉外膜的炎症反应较重;在内皮修复阶段,缝合组和胶粘合组内皮膜修复的过程相似;在血管平滑肌增殖阶段,缝合组的平滑肌细胞增殖程度较胶粘合组加重;基质形成、堆积阶段,胶粘合组基质产生较缝合组减少。胶粘合组颈动脉阻断时间较标准缝合组明显缩短。结论颈动脉内膜切除术后早期再狭窄可能是局部血管内膜损伤后的一种修复反应,采用新型粘合血管重建的方法比标准线缝合有一定的优越性。     

Experimental Study of Adenovirus Vector Mediated-hVEGF165 Gene on Prevention of Restenosis after Angioplasty

This study evaluated the effects of adenovirus vector mediated human vascular endotheli-al growth factor-165 (hVEGF165) gene on prevention of restenosis after angioplasty. Rabbit models of bilateral carotid artery injury were established by balloon denudation. The recombinant adenovi-ruses containing hVEGF165 cDNA was directly injected into left side of the injured carotid arteries.On day 3 and week 3 after transfection the expression of VEGF was observed by RT-PCR and im-munohistochemistry. The thrombokinesis, reendothelialization (rET) and intimal hyperplasia in ca-rotid arteries were evaluated by computerized image analysis system 3 weeks after gene transfer,The changes in the VEGF gene-treated side were compared with the control side. Our results showed that 3 days and 3 weeks after hVEGF165 gene transfer the VEGF mRNA and antigen ex-pression were detected in vivo. 3 weeks after the transfer, the carotid artery rET was markedly better in the VEGF gene-treated group compared with the control. The thrombokinesis, intima are-a/media area (I/M), maximal intimal and medial thicknesses (ITmax and MTmax) demonstrated a statistically significant decrease in arteries treated with VEGF gene as compared with the control group. It is concluded that VEGF gene transfer could be achieved by intra-arterial injection of re-combinant adenoviruses. It might accelerate the restoration of endothelial integrity, inhibit throm-bokinesis and attenuate intimal hyperplasia in the injured arteries after VEGF gene transfer. This procedure could be useful in preventing restenosis after angioplasty.     

辛伐他汀对大鼠损伤后狭窄颈总动脉中碱性成纤维细胞生长因子mRNA与细胞外信号调节激酶1/2mRNA表达的影响

目的观察辛伐他汀对大鼠损伤后狭窄颈总动脉中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)mRNA表达的影响。方法健康雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、辛伐他汀低剂量和高剂量组,制备颈总动脉狭窄模型,辛伐他汀低剂量组和高剂量组于术前3 d起分别给予辛伐他汀5、10 mg.kg-1.d-1进行灌胃,连续给药17 d后处死,苏木精-伊红染色观察左颈总动脉形态学变化;反转录聚合酶链式反应法测定血管壁组织的bFGF mRNA与ERK1/2 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组血管中膜血管平滑肌细胞(VSMC)增殖显著,排列紊乱,向管腔及内弹力板方向增生扩展,管腔严重狭窄;辛伐他汀低剂量组血管内膜相对光滑,中膜VSMC排列趋于规整,管腔狭窄程度较轻;辛伐他汀高剂量组血管内膜比较光滑,中膜VSMC增殖程度显著降低,VSMC排列规整,管腔狭窄程度明显减轻。与假手术组比较,其他各组颈总动脉bFGF mRNA、ERK1/2 mRNA的表达均有显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,辛伐他汀低剂量组bFGF mRNA、ERK1/2 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05),辛伐他汀高剂量组则明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);辛伐他汀高剂量组颈总动脉bFGF mRNA和ERK1/2 mRNA表达与低剂量组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论辛伐他汀可通过抑制bFGF mRNA和ERK1/2 mRNA的表达抑制VSMC增殖,实现其抗血管损伤后狭窄的作用。