中药银杏叶对老年痴呆症小鼠学习记忆能力的影响

目的研究中药银杏叶与西药脑复康片对老年痴呆症小鼠学习记忆能力恢复效果的差异。方法 KM小鼠随机分为对照组、模型组、银杏叶组和脑复康组,各组20只。除对照组外,其余组采用腹腔注射D-半乳糖和灌胃AlCl3进行造模,连续60 d。银杏叶组和脑复康组自造模起给予相应的药物,连续60 d。试验结束后测定小鼠学习记忆能力,测定脑组织中乙酰胆碱酯酶活性、过氧化脂质(MDA)含量、超氧化岐化酶(SOD)活性、Na+、K+-ATPase、游离钙离子含量和进行脑神经元细胞计数。结果与模型组比较,银杏叶组动物潜伏期明显延长,错误次数降低(P0.05);银杏叶组动物脑组织SOD活性明显升高(P0.05),MDA含量、Ca+浓度含量、乙酰胆碱酯酶活性显著性降低(P0.05),与对照及脑复康组比较未见显著差异(P0.05);银杏叶组动物大脑海马锥体细胞数与模型组比较明显升高(P0.01),大脑皮质神经元细胞数与模型组比较无明显差异(P0.05)。结论中药银杏叶改善小鼠学习记忆障碍的作用与西药脑复康片相似。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠行为学及大脑皮层和海马Na+-K+ATP酶活性的影响

目的研究银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠行为学及大脑皮层和海马Na+-K+ATP酶活性的影响.方法腹腔注射佐链霉素55mg/kg建立糖尿病模型,以旷场分析法和Morris水迷宫法考察各组大鼠学习记忆能力,检测大脑皮层和海马的Na+-K+ATP酶活性.结果大鼠糖尿病6个月后,旷场分析示中央格停留时间延长、探洞次数较少,Morris水迷宫实验示逃避潜伏时间延长、搜寻平台策略成绩降低,大脑皮层和海马的Na+-K+ATP酶活性明显下降.EGb可明显升高Na+-K+ATP酶活性(P＜0.05或P＜0.01),缩短中央格停留时间、水迷宫实验逃避潜伏期时间(P＜0.05或P＜0.01),提高探洞次数和搜寻平台策略成绩(P＜0.05或P＜0.01).结论EGb可提高糖尿病大鼠大脑皮层和海马的Na+-K+ATP酶活性,改善学习记忆能力.     

山茶花提取物对脑缺血再灌注小鼠学习记忆损伤的改善作用

目的 探讨山茶花提取物对脑缺血再灌注诱导小鼠学习记忆损伤的保护机制.方法 双侧颈总动脉结扎法建立重复前脑缺血再灌注模型.小鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物对照组(EGB,35 mg·kg-1,ip)和山茶花提取物治疗组(ECJ,50,15,5 mg·kg-1,ip).用水迷宫检测小鼠学习记忆能力;用紫外分光光度计检测脑组织SOD活性和MDA含量;用RT-PCR技术检测凋亡蛋白抑制剂XIAPmRNA在小鼠CA1区的表达.结果 前脑重复缺血再灌注使小鼠的学习记忆能力显著下降(P＜0.01),同时伴随脑内SOD活性降低和MDA含量升高以及XIAPmRNA表达显著下调 (P＜0.01).5 mg·kg-1,15 mg·kg-1和50 mg·kg-1山茶花提取物及银杏提取物能显著提高缺血小鼠学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01),并提高脑组织SOD活性,并抑制XIAPmRNA表达的下调(模型组XIAPmRNA表达下调63.2%,P＜0.01;低、中、高剂量的山茶花提取物和银杏叶提取物分别使XIAPmRNA表达上调55.7%、58.9%、61.2%和57.4% ,P＜0.05或P＜0.01).结论 山茶花提取物能减轻缺血再灌注引起的脑损伤,改善小鼠学习记忆能力,该作用可能与其提高脑组织抗氧化和抗细胞凋亡能力有关.     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆和炎症因子mRNA表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对血管性痴呆(VD)大鼠模型学习记忆能力及TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子mRNA表达的影响.方法 将大鼠随机分为假手术组,正常组,模型组,银杏叶提取物高、中、低剂量组,采用双侧颈总动脉永久结扎法制备血管性痴呆大鼠模型,2周后采用Morris水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力,断头取脑后定量PCR检测海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA的变化.结果 模型组大鼠存在记忆障碍,而银杏叶提取物干预组大鼠学习记忆能力明显改善,与模型组比较有统计学意义(P＜0.05).模型组大鼠海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达增加;银杏叶提取物干预组与模型组相比炎症因子mRNA降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 银杏叶提取物明显改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力,抑制炎症反应.     

银杏叶制剂改善MID痴呆大鼠学习记忆障碍的实验研究

目的:探讨银杏叶制剂对多发性梗死性脑痴呆(MID)大鼠学习记忆能力的影响,为临床应用提供实验依据。方法:建立MID动物模型,对其进行游水迷宫、伤害性电刺激试验和海马区乙酰胆碱(Ach)含量测定。结果:用药各组大鼠游迷宫所需时间和伤害性电刺激出错次数显著少于模型组(P<0.01),除第1天记忆出错次数差异无显著性外(P>0.05),银杏叶治疗组在游水迷宫所需时间及出错次数上均明显优于西药治疗组(P<0.01,P<0.05)。MID大鼠海马区Ach含量显著降低(P<0.01),经药物治疗后其含量显著提高(P<0.01),且银杏叶治疗组优于西药组(P<0.01)。结论:银杏叶制剂能有效的改善MID大鼠学习记忆能力,同时明显提高海马区的Ach含量。     

电针三阴交对AD小鼠学习记忆能力及海马区Ach、AchE、ChAT的影响

目的 观察电针"三阴交穴"对SAMP8快速衰老模型小鼠学习记忆能力和脑组织海马区内乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响.方法 将快速老化SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组,并设同源SAMR1小鼠作为对照组,每组均为6只.电针组给予三阴交电针干预;对照组,模型组常规抓取,不进行针刺.采用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力;酶联免疫法(ELISA)检测小鼠海马部位的乙酰胆碱含量、乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶活性.结果 Morris水迷宫定位航行实验和空间探索实验显示:较SAMR1小鼠相比SAMP8小鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01),电针治疗后明显改善(P<0.05),差异有统计学意义.指标显示:模型组较对照组海马内AchE、ChAT活性明显降低,Ach含量显著减少(P<0.01),电针治疗后AchE、ChAT活性明显升高,且Ach含量明显增多(P<0.05),差异有统计学意义.结论 电针三阴交穴可以明显改善老年痴呆模型小鼠学习记忆能力并提高海马区乙酰胆碱含量,其作用可能是通过改善脑组织海马区乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶活性来实现的.     

急性低压低氧对小鼠学习记忆及海马ACh水平、磷酸化tau蛋白表达的影响

目的 探讨模拟高原急性低压低氧环境对小鼠学习记忆行为及乙酰胆碱水平(ACh)、磷酸化tau蛋白(P-tau)表达的影响.方法 将小鼠置于模拟海拔6000m的低压低氧舱内8h后,用Morris水迷宫测定小鼠的空间学习记忆能力;用比色法测定海马ACh水平和胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的变化;用免疫组织化学方法观察其海马区总tau蛋白(T-tau)和P-tau表达的变化.结果 与常压常氧组比较,低压低氧组小鼠寻找平台的潜伏期延长(P＜0.01),目标象限停留时间减少(P＜0.05),海马区ACh水平和ChAT水平显著下降(P＜0.05,P＜0.01)P-tau表达增加(P＜0.05).结论 急性低压低氧环境可使小鼠学习记忆能力下降,这可能与海马区ACh水平和ChAT减少以及P-tau表达增加有关.     

己酮可可碱促进学习记忆作用的实验研究

目的 探讨己酮可可碱对三种学习记忆障碍模型的作用.方法 观察己酮可可碱对自然衰老痴呆模型大鼠(Morris水迷宫法)、东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠(跳台法)和乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠(跳台法)的学习记忆的影响.结果 己酮可可碱大中小剂量组均能够不同程度缩短自然衰老痴呆模型大鼠定位航行实验的潜伏期(P＜0.01或P＜0.05),提高空间搜索实验的空间象限记忆频度(P＜0.05);缩短东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠的触电潜伏期(P＜0.01或P＜0.01),减少错误次数(P＜0.05);对乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠的记忆障碍也有一定的改善作用,但无统计学意义.结论 己酮可可碱具有改善学习记忆能力的作用.     

APP/PS1痴呆小鼠海马特异性过表达芳香化酶对空间学习记忆的影响及相关神经机制研究

目的 探讨海马芳香化酶(aromatase,AROM)对APP/PS1小鼠(AD小鼠)空间学习记忆、特异性病理及突触可塑性的影响及其机制.方法 采用Western blot检测不同月龄雄性WT小鼠与AD小鼠海马AROM和雄激素受体等的表达;构建AROM的过表达病毒载体(oAROM),于6月龄AD小鼠海马立体定位注射,3个月后(9月龄)采用Morris水迷宫检测空间学习记忆行为,免疫组化/免疫荧光检测Aβ表达,Western blot检测海马Aβ和突触相关蛋白、actin细胞骨架调节蛋白表达,透射电镜检测海马突触密度、突触后膜厚度的变化.结果 WT小鼠于10月龄时海马AROM表达开始下降(P＜0.01),而AD小鼠6月龄时AROM表达即显著下降(P＜0.01).与APP/PS1小鼠相比,oAROM小鼠在目标象限的停留时间(P＜0.05)、穿过平台次数显著增加(P＜0.05),海马Aβ生成相关蛋白减少(P＜0.01)而降解相关蛋白表达增加,突触密度(P＜0.01)、突触后膜厚度(P＜0.01)与突触蛋白表达显著增加,actin聚合蛋白Profilin-1表达显著上调(P＜0.01)而解聚蛋白Cofilin显著下降(P＜0.01).结论 海马特异性过表达AROM能够抑制Aβ沉积,改善痴呆小鼠海马的突触可塑性,进而改善痴呆小鼠的空间学习记忆障碍,提示海马AROM可能是预防AD的重要靶点.     

乌龙丹改善慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的分子机制探讨

目的 通过建立大鼠慢性脑缺血模型,观察NR1、NR2B在海马和皮层的表达水平,探讨乌龙丹改善慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的部分作用机制.方法 采用双侧颈总动脉永久性结扎制作大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后存活大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶组、乌龙丹高剂量组、乌龙丹低剂量组(n=12),Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,Western blot法检测大鼠海马和皮层NR1、NR2B的表达水平.结果 模型组大鼠学习记忆能力较假手术组和乌龙丹给药组明显降低(P＜0.05,或P＜0.01);模型组皮层及海马区NR1、NR2B表达水平与假手术组比较,比值显著降低(P＜0.01).乌龙丹高剂量组和银杏叶组皮层及海马与模型组比较NR1、NR2B表达均增高(P＜0.01);但与假手术组比较,NR1、NR2B表达水平比值降低,差异也具有统计学意义(P＜0.01).结论 乌龙丹改善大鼠慢性脑缺血学习记忆功能可能途径之一:一定程度上提高海马和皮层区NR1、NR2B的表达水平.     

银杏叶提取物对血管性痴呆小鼠海马生长抑素及胆囊收缩素表达的影响

目的观察银杏叶提取物(EGB)对血管性痴呆(VD)小鼠海马生长抑素(SS)和胆囊收缩素(CCK)表达的影响,探讨EGB对VD的改善作用。方法制备VD小鼠模型,利用Y-迷宫测试VD模型小鼠学习记忆能力及高、低EGB对痴呆的改善作用,实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测各组动物海马中SS和CCK mRNA的变化,免疫组织化学法研究高、低EGB对VD小鼠海马SS和CCK阳性神经元数量的影响。结果各实验组小鼠均比正常对照组小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多(P<0.05),高、低EGB治疗组迷宫学会次数与模型组比较明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),且高EGB治疗组较低EGB治疗组迷宫学习次数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。VD模型组小鼠海马SS和CCK mRNA转录水平与正常对照组相比显著下调,高、低EGB治疗组与VD模型组相比显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05);VD模型组小鼠海马CA1区SS和CCK阳性神经元数量与正常对照组相比显著减少,高、低EGB治疗组与VD模型组相比显著增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶提取物通过增加海马中SS和CCK的表达可一定程度上改善VD小鼠的学习记忆能力。     

益智仁对脑老化小鼠认知能力及相关信号蛋白表达的影响

目的 探讨益智仁(Alpinia oxyphylla fructus,AOF)对D-半乳糖致脑老化小鼠学习记忆能力的影响及机制.方法 给小鼠连续皮下注射D-半乳糖,建立脑老化动物模型,用被动回避实验、Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,用Western blot检测海马突触素(Syn)、促细胞分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、蛋白激酶C(PKC)的表达水平.结果 ①被动回避实验:脑老化组的潜伏期[(119.80±101.80)s]显著短于对照组[(279.30±31.64)s](P＜0.01),错误次数[(4.4±1.3)次]显著多于对照组[(1.8±0.9)次](P＜0.01);而AOF低、中、高剂量组的潜伏期[(170.25±68.31)s,(226.31±73.25)s,(263.20±70.55)s]显著长于脑老化组(P＜0.05,P＜0.01),中、高剂量组的错误次数[(2.8±1.2)次,(2.3±0.9)次]显著少于脑老化组(P＜0.05,P＜0.01).②水迷宫实验:脑老化组的逃避潜伏期显著长于对照组(P＜0.01),在原先放置平台象限的停留时间显著短于对照组(P＜0.01);而AOF低、中、高剂量组的逃避潜伏期显著短于脑老化组(P＜0.05),中、高剂量组在原先放置平台象限的停留时间显著长于脑老化组(P＜0.05,P＜0.01).③Western blot实验:与对照组相比,脑老化组海马Syn、MAPK、PKC的表达显著降低,而AOF组可显著提高Syn、MAPK、PKC的表达.结论 益智仁可显著改善脑老化小鼠的学习记忆能力,其机制可能与上调海马Syn、MAPK、PKC的表达有关.     

二氢麦角碱对血管性痴呆小鼠海马胆碱能系统的影响

目的探讨二氢麦角碱对血管性痴呆小鼠海马胆碱能系统的影响。方法通过双侧颈总动脉线结、连续3次缺血-再灌注,制作血管性痴呆动物模型,并设立假手术组、二氢麦角碱组;术后d29、d30分别测试学习和记忆成绩;应用动力学法测定小鼠海马AchE活性,原位杂交法测定海马CA1区ChAT mRNA水平,免疫组化测定海马CA1区AchR的表达。结果与假手术组比较,模型组学习和记忆成绩均降低（P〈0.05）,且海马AchE活性降低（P〈0.05）,CA1区ChAT mRNA和AchR水平也降低（P〈0.01）;而与模型组比较,二氢麦角碱组学习和记忆成绩均改善（P〈0.05）,且海马AchE活性增高（P〈0.05）,CA1区ChAT mRNA和AchR水平也增高（P〈0.01）。结论小鼠海马胆碱能系统功能降低可能参与了血管性痴呆的分子生物学发病机制;二氢麦角碱可以升高其胆碱能系统功能而改善临床症状。     

针刺对阿尔茨海默氏病SAMP8小鼠学习记忆能力及海马区胰岛素受体mRNA表达的影响

目的观察针刺足三里、百会穴对阿尔茨海默氏病（AD）转基因快速老化SAMP8小鼠的学习记忆能力及海马区胰岛素受体（InsR）mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法用Morris水迷宫进行筛选,将符合AD模型标准的SAMP8小鼠随机分为模型组、针刺治疗组（简称为针刺组）,每组10只,并随机选取同源、同龄的10只SAMR1小鼠作为正常对照组。针刺组针刺小鼠足三里、百会穴,留针30 min,每日1次,10 d为1个疗程,疗程之间间隔2 d,连续治疗3个疗程。通过水迷宫隐蔽平台试验、空间探索试验判断小鼠的学习记忆能力,并通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测左侧海马区InsR mRNA的相对表达量。结果隐蔽平台试验中,模型组平均逃避潜伏期（PLL）较正常对照组显著延长,有效区停留时间显著缩短（P〈0.05）;针刺组PLL较模型组显著缩短,有效区停留时间显著延长（P〈0.05）;平台停留次数3组间比较差异无统计意义（P〉0.05）。空间探索试验中,模型组原平台象限百分比较正常对照组显著降低（P〈0.01）,跨越次数显著增高（P〈0.05）;针刺组原平台象限百分比较模型组显著升高（P〈0.01）,跨越次数显著减少（P〈0.05）。模型组左侧海马区InsR mRNA相对表达量较正常对照组显著降低（P〈0.05）,针刺组较模型组显著升高（P〈0.05）。结论针刺足三里、百会穴可通过上调海马区InsR mRNA的表达,从而提高AD SAMP8小鼠的学习记忆能力。     

脑缺血再灌致学习记忆损伤小鼠模型的建立及益脑冲剂的保护作用

采用脑缺血再灌致小鼠学习记忆损伤造模法，并通过小鼠一次性回避性条件反射方法，观察了益脑冲剂对脑功能的保护作用。结果显示，脑缺血再灌可使小鼠学习记忆能力降低（Ｐ＜０．０１）。中药益脑冲剂各组对脑缺血再灌所致学习记忆损伤有明显的改善作用，与脑代谢活化剂都可喜的作用相似，给药各组与模型组之间差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。     

痴呆模型鼠海马突触素改变及其与学习记忆的关系

探讨痴呆模型鼠海马的突触素改变及其与学习记忆的关系。切断成年SD大鼠左侧穹窿海马伞(Fimbria-Fomix,FF),建立隔海马胆碱能系统损害的痴呆模型。损伤4周后,用Y型迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色和图象分析技术等方法对大鼠海马突触素进行定量分析。结果表明,损伤组学习记忆能力(3.82±0.64)明显低于正常组(8.81±0.32)(P<0.01);与正常组相比,损伤组损伤侧海马CA1区多形层、辐射层、腔隙分子层和齿状回分子层突触素免疫反应物的光密度明显降低,其光密度值分别是43.40±2.57;40.2l±3.22;12.37±1.87;26.63±2.36(P<0.01),并与其学习记忆能力呈显著正相关。本研究结果提示,痴呆模型鼠海马突触素与学习记忆的关系密切。     

老龄大鼠慢性脑灌注不足对海马区神经元的影响

目的　初步探讨海马CA1区神经细胞凋亡与丢失在血管性痴呆形成中的作用。方法　采用Pulsinelli四血管阻断 ( 4 vesselolclusion ,4VO)改良法建立血管性痴呆大鼠模型 ,穿梭箱系统检测大鼠的学习记忆能力。应用免疫组化法检测海马CA1区caspase 3蛋白的表达 ,TUNEL法测定神经细胞的凋亡。应用甲苯胺蓝染色计数CA1区残余大锥体细胞。结果　 4VO 3d组大鼠CA1区caspase 3蛋白的表达及TUNEL阳性细胞最多 ,随后逐渐减少 ,2周组与对照 (CO)组相比仍有非常显著差异 (P <0 0 1) ,而 4周组基本达稳定状态 ,与CO组相比无显著差异 (P >0 0 5 )。 4VO各组大鼠CA1区大锥体细胞丧失率随术后时间的延长逐渐增加 ,大鼠CA1区大锥体细胞丧失率与AAR比率呈非常显著负相关 (r =-0 979,P <0 0 1)。结论　海马CA1区神经细胞凋亡可导致大锥体细胞严重丢失 ,CA1区大锥体细胞的丢失是血管性痴呆形成的重要病理学基础之一。     

远志对双侧海马注射ApoE4致大鼠学习记忆障碍的影响

目的：探讨远志对双侧海马注射apoE4致大鼠学习记忆障碍的影响。方法：24只大鼠随机分为对照组，apoE4组和远志组。采用腹腔注射D-半乳糖并联合使用apoE4双侧注射海马复制阿尔茨海默病（AD）模型。各组动物以定位航行试验、空间探索试验为学习记忆能力评价指标。结果：ApoE4组和远志组较对照组逃避潜伏期明显延长，跨台次数明显减少（P〈0．01）；远志组与apoE4组比较，大鼠逃避潜伏期明显缩短、跨台次数明显增多（P〈0．01）。结论：远志能改善腹腔注射D-半乳糖并联合使用apoE4双侧注射海马AD模型大鼠的学习记忆功能。     

银杏叶提取物对亚硝酸钠小鼠记忆的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGB)对亚硝酸钠(NaNO2)小鼠记忆的影响。方法 采用跳台实验观察EGB对跳台潜伏期(SDL)和跳台错误次数的影响;应用毛细管微量热沉法和毛细管微量法分别检测血液指标纤维蛋白原(Fih)含量和红细胞压积(HCT)数值。结果 EGB25、50、100mg/kg可明显延长SDL,EGB50、100mg／kg组小鼠跳台错误次数明显减少。EGB25、50、100mg／kg均可明显恢复降低的Fib含量;EGB50mg/kg可明显升高NaNO2小鼠的HCT数值。结论 EGB对NaNO2造成的小鼠记忆障碍有明显的改善作用,其机制可能与改善血液流变状态有关。