抗体依赖性细胞毒作用的~(51)Cr释放测定法及对肺结核患者的初步检测

本文探讨用~(51)Cr释放测定法检测人外周血单个核细胞 ADCC 活性试验的影响因素,并对比正常人和肺结核患者的 ADCC 活性。检测45名健康成人的细胞毒性(CT),正常值为48.22±12.58％,无性别差异。38 例活动性结核患者的 CT为 62.21±16.97％。初步结果表明结核患者的 ADCC 活性高于正常人。     

~(51)Cr释放法检测杀伤性T细胞的细胞毒作用和评价

本文报道了国产铬酸钠(Na_2~(51)CrO_4)标记P815细胞的条件,和用~(51)Cr释放法检测杀伤性T细胞(CTL)的细胞毒作用。~(51)Cr标记P815细胞的适宜条件是:2×10~5个P815细胞加入100μCi~(51)Cr,37℃恒温下温育2小时。效应细胞与靶细胞作用的条件是:效靶比100:1,作用时间4.5小时。C57小鼠脾脏CTL的特异杀伤作用在P815细胞致敏后第7天开始出现,第11天达高峰,以后开始下降。环磷酰胺50mg/kg可明显抑制小鼠CTL的细胞毒作用。     

抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用杀伤机制的扫描电镜研究

作者采用CBA鼠的脾细胞为效应细胞、抗体致敏的鸡红细胞为靶细胞,结合~51Cr释放试验在扫描电镜下观察了抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)的杀伤机制。发现在ADCC过程早期,效应细胞借其表面绒毛状突起与靶细胞膜紧密结合。随后,效应细胞的绒毛状突起插入靶细胞,靶细胞扭曲、变形、损伤。尤其注意到,在与效应细胞绒毛状突起结合的部位,靶细胞膜呈现“卷须样”变化,提示靶细胞的损伤有机械性因素参与。     

抗血吸虫免疫中的抗体依赖性嗜酸性细胞介导的细胞毒作用

抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)在肿瘤免疫和同种异体移植物排斥机制中得到重视以后,Butterworth等首先发现类似的ADCC也存在于抗寄生虫的保护性免疫应答中。在曼氏血吸虫病人血清存在下,人末梢血的多核白细胞可将血吸虫童虫杀死,进一步研究表明效应细胞是嗜酸性细胞(Eos)。之后,人们对有关寄生虫的ADCC进行了广泛深入的研究,靶子涉及到多种线虫和原虫,效应细胞也包括了巨噬细胞、中性白细胞和NK细胞等。然而,许多重要的发现是通过以Eos为主要的     

血红蛋白酶释放法检测巨噬细胞介导的抗体依赖性细胞毒效应

血红蛋白具有过氧化物酶的活性,它可以催化过氧化氢(H_2O_2)对邻苯二胺(O—pbenylenediamine OPD)等物质的氧化作用,并产生颜色反应,其颜色深浅和Hb含量呈正相关。临床上常用于检测血清中Hb的含量,最近国内外有人根据此原理以红细胞作为靶细胞,通过Hb的释放量检测K细胞的ADCC活性和巨噬细胞(Macrophage     

用~3H-TdR释放法测量细胞介导的细胞毒功能

本文用 ~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)标记多种靶细胞(YAC-1、P815、LAC-1、小鼠淋巴母细胞)与不同效应细胞培养4或18小时,再用胰酶和DNA 酶处理靶细胞,收集细胞,用液体闪烁微杯法测定小鼠特异性和非特异性淋巴细胞介导的细胞毒试验,均获得良好结果。与~(51)Cr释放相比,~3H-TdR 方法具有自然释放率低(<10％),特异性释放率高的特点。     

嗜中性粒细胞抑制LAK及NK细胞的细胞毒作用

用IL-2诱导出LAK,能产生对肿瘤靶细胞的破坏作用。NK细胞是LAK的主要前体细胞,二者细胞毒作用的特点相同。本文检测了外周血多形核中粒细胞(PMN)对LAK、NK 细胞毒作用的影响。体外低浓度IL-2诱导外周血淋巴细胞形成LAK 细胞,对M14瘤株进行释放~(51)Cr的细胞毒试验。在此试验中加入PMN,观察到LAK 的细胞毒作用明显受到抑制,且随     

天然杀伤(NK)细胞活性的测定——~(125)I—UdR及~(51)Cr释放试验的比较

自然杀伤(NK)细胞参与了机体免疫防御的第一道防线,在免疫监视系统中发挥了重要的作用。特别在抗肿瘤,抗病毒等疾病以及免疫调控的研究中NK细胞日益受到关注。有关NK细胞活性的测定国外多数用~(51)Cr标记靶细胞的方法,因其有敏感、简便、重复性好,流程短等优点。国内有人认为~(51)Cr产品比活性低,各批号不稳定难以获得理想的结果。此外,~(51)Cr释放法不适     

~(51)Cr法测定绵羊红细胞寿命

六价铬阴离子(Na_2 ~(51)CrO_4)可以透过红细胞膜与珠蛋白结合。各种年龄的红细胞均可用~(51)Cr标记,体外标记率有80％以上。但进入红细胞的~(51)Cr约有1％从红细胞逸出。红细胞破裂放出的铬呈三价不能在体内重行标记。总之用~(51)Cr标记红细胞,再测定     

~3H-TdR、~(51)Cr、~(125)I-UdR释放试验测定NK活性的比较研究

用~3H-TdR、~(51)Cr、~(125)I-UdR 分别标记YAC-1细胞,测定小鼠 NK 细胞活性 ,三种方法所获得的结果呈高度相关性,~3H-TdR 分别与~(51)Cr、~(125)I-UdR 相比以及~(51)Cr与~(125)I-UdR 相比的相关系数依次为 0.9917(P<0.001),0.9725(P<0.001),0.9478(P<0.005),表明三种释放试验均可用于检测细胞毒活性。用收集器收集残存的~(125)I-UdR 标记细胞,不仅其特异性释放率比常规测上清液的释放率要高10％左右,而且制样快速、简便。本文对三种方法的优缺点作了比较,认为~3H-TdR 释放试验作为检测细胞毒是目前国内切实可行的方法。     

应用改良~(125)Ⅰ—UdR释放试验测定杀伤T细胞的细胞毒作用

自Brunner等介绍以~(51)Cr标记靶细胞的同位素释放法测定杀伤T细胞(CTL)的细胞毒作用以来,~(51)Cr释放法已成为测定CTL杀伤能力的常规。但~(51)Cr标记靶细胞的自发释放(SR)率高(1～2%/小时),不适用于较长培育时间的细胞毒试验。近年来~(111)In-oxine标记靶细胞被介绍来代替~(51)Cr标记,其优点为SR低(0.25     

基于流式细胞术评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的方法学建立和应用

目的：建立基于流式细胞术的评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的检测方法。方法 PKH26和CFSE染色的P815细胞为靶细胞,与P815特异性抗体孵育形成抗原抗体复合物,加入外周血单个核细胞作为效应细胞,共同孵育后流式细胞术检测 CD3－CD14＋PKH26＋CFSE－细胞群的百分比,并确定最佳效靶比及效应细胞和靶细胞的孵育时间。运用上述方法对23例HCV慢性感染者和22例健康人的单核细胞介导的抗体依赖性细胞毒作用（ antibody depend-ent cellular cytotoxicity , ADCC）进行比较分析。结果可通过流式细胞技术检测CD3－CD14＋PKH26＋CFSE－细胞群来评价单核细胞介导的ADCC效应,最佳效靶比为10∶1,最佳杀伤孵育时间为4 h。慢性HCV感染者单核细胞介导的ADCC效应较健康对照明显降低（ P＝0．009）。结论本研究建立了基于流式细胞术的单核细胞介导的ADCC效应的检测方法,为病毒感染及药物研发中免疫学评价提供快速、敏感、安全的检测手段。     

用~3H-TdR标记的靶细胞检测细胞介导的细胞毒作用

测定淋巴细胞的细胞毒作用,是细胞免疫功能研究和抗肿瘤研究的一项重要指标。目前测定细胞毒作用已有多种方法,如~(51)Cr、~(125)I前标记法、~3H-TdR后标记法、比色法等。其中,比色法不适于测定细胞介导的细胞毒作用;应用~(51)Cr和~(125)I标记靶细胞,不仅受条件限制,而且均具有γ射线。~3H放射性防护的问题较~(51)Cr和~(125)I小得多;淋     

用~(51)Cr释放试验检测人淋巴细胞ADCC的影响因素探讨

本文探讨用~(51)Cr释放试验检测ADCC中影响靶细胞标记及自然释放的各种因素。实验表明标记率随着~(51)Cr原液比放射性的增高以及放射性强度的增高而增高。为保证一定的标记率并避免自然释放过高,选用100微居里的放射性强度,其铬含量不超过10微克为宜。标记细胞存放时间不宜超过一周,且应防止污染。如在自然释放管中加入未标记的CRBG可降低自然释放率。因此,控制好影响自然释放的因素,可使检测ADCC的~(51)Cr释放试验得到较为可靠和满意的结果。     

单链双特异性抗体(BHL-I)介导的细胞毒作用及其可能机制研究

目的：观察单链双特异性抗体（BHL-I）介导的PBL对靶细胞SKOV3的杀伤作用，并研究其细胞毒作用的可能机制。方法：MTT法检测在不同效靶比、不同作用时间、不同靶细胞（SKOV3、BEL-7402）、不同BHL-I浓度等条件下，BHL-I介导PBL对靶细胞的杀伤作用；RT-PCR检测杀伤过程中PBL的穿孔素（Perforin）、颗粒酶（GranzymeB）mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ含量变化。结果：BHL-I介导的PBL对SKOV3细胞毒作用明显高于对BEL-7402的，并且在效靶比10∶1、作用36小时、BHL-I浓度为25μg/ml时，PBL对靶细胞SKOV3的细胞毒作用最为显著；在IL-2存在下，BHL-I可引起Perforin、GranzymeB mRNA较高表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ含量升高，当作用时间为72小时时，这些细胞因子的表达有所下降。结论：BHL-I能介导PBL对表达有相应靶抗原的SKOV3细胞具有高效杀伤作用，其细胞毒作用可能与效应细胞表达Perforin、GranzymeB、TNF-α、IFN-γ等有关。     

中性粒细胞胞外网络(NET):中性粒细胞杀伤性武器

中性粒细胞是机体天然免疫系统的主要效应细胞。新近发现中性粒细胞释放出细胞核内物质到细胞外形成一种称之为中性粒细胞胞外网络的方式抵御微生物。与经典的吞噬和脱颗方式相比,NET具有高效、低能耗、对周边组织损伤小等特性,是中性粒细胞的杀伤性武器。本文就中性粒细胞NET结构、形成机制及功能等生物学特性的研究进展进行综述,设想NET可能成为感染和相关疾病治疗中新的作用靶点。     

抗体依赖的细胞介导的细胞毒效应在哮喘发病机制中的作用

目的: 进一步探讨支气管哮喘发病机制。方法: 建立小鼠哮喘模型,分离哮喘鼠和正常鼠脾脏各种免疫细胞,包括单核/巨噬细胞(M)、树突状细胞(DC)、B细胞、CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞,并以细胞增殖法和改良的MTT比色法^[1]检测了上述各种细胞的抗体依赖的细胞介导的细胞毒效应(ADCC)。结果: 哮喘小鼠M自然状态下ADCC作用弱于对照组(P＜0.05);哮喘小鼠B细胞自然状态下ADCC作用弱于对照组(P＜0.05);哮喘小鼠T细胞及其亚群自然状态下ADCC作用弱于对照组(P＜0.05);哮喘小鼠树突状细胞自然状态下ADCC作用与对照组无显著差异(P＜0.05)。结论: 在小鼠哮喘模型中,多种免疫细胞的ADCC作用减弱可能在支气管哮喘免疫功能紊乱中起作用。     

用~(51)Cr标记T淋巴细胞研究针刺对免疫的作用

放射性同位素~(61)Cr能迅速渗入细胞膜内,可标记具有免疫活性的T和B淋巴细胞、巨噬细胞、NK细胞、肿瘤细胞等;用~(61)Cr释放试验可检测免疫功能。至于将~(61)Cr应用于研究针灸、经络与免疫作用的关系,国内外尚未见报道。本文报道用~(61)Cr标记T淋巴细胞的方法,观察针刺对机体免疫作用的影响的研究结果。     

应用免疫抑制剂病人的天然杀伤细胞(NK)活性和细胞介导的细胞毒作用(ADCC)

应用免疫抑制剂治疗各种疾病,可使病人出现肿瘤高发倾向,这一观点已得到普遍承认。免疫抑制剂环胞菌素A(CyA)目前已广泛用于治疗器官移植排斥反应和包括胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)在内的某些自身免疫病,它的后果如何引起广泛注意。因     

干扰素加强人的自然胞毒作用及抗体依赖性细胞介导的胞毒作用

正常人的淋巴细胞借助于自然杀伤(NK)细胞对于肿瘤细胞有一定的胞毒活性。在对抗肿瘤靶细胞上,NK 细胞及介导抗体依赖性细胞介导的胞毒作用(ADCC)的效应细胞(K 细胞)二者间有不少相似之处,事实上这两种细胞可能相同。向啮齿动物体内接种病毒、免疫刺激剂、肿瘤细胞及其它 IF 诱生剂可导致 NK 细胞活力的增强。体内及体外实验均已证实。IF 在迅速增强小鼠 NK 活性上具有主要作用。IF 增强人的 NK 活性也有报告。本