泽泻提取物HPCE指纹图谱研究

目的 建立中药泽泻提取物毛细管电泳指纹图谱。方法 采用毛细管区带电泳模式,压力进样：0.5Psi×10 s,分离电压30 kV,柱温25 ℃,DAD检测波长为202 nm,带宽8 nm,参比波长400 nm,带宽20 nm。运行缓冲液由0.1 mol·L^-1硼砂-0.1 mol·L^-1 SDS-甲醇(4∶6∶2)构成,检测结果用相似度评价软件分析其指纹图谱的相似度。结果 10批次泽泻提取物毛细管电泳指纹图谱的相似度均在0.9以上,表明其指纹图谱整体面貌基本一致。结论 所建立的泽泻提取物高效毛细管电泳指纹图谱稳定、可靠,可作为泽泻提取物的特征指纹图谱,该研究为泽泻提取物的定性鉴别及内在质量评价提供了新的参考依据。     

苦参的毛细管电泳数字化指纹图谱研究

目的 建立苦参的毛细管电泳指纹数字化图谱（CEFP），考察Jaccard相似度Sb评价苦参CEFP的可行性和特征。方法 采用胶束电动毛细管电泳法，以30mmol·L^-1硼砂＋10mmol·L^-1 SDS为背景电解质，运行电压12kV，紫外检测波长205nm，以10个不同产地药材的电泳图谱建立了苦参的对照CEFP。与双定性相似度SF和S′F、双定量相似度C％和P％相比较考察Jaccard相似度参数Sb的可行性和特征。结果 以萘普生为参照物峰，确定15个共有峰，建立了苦参CEFP，并用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3．0”软件挖掘苦参CEFP的指纹特征，结合双定性双定量相似度法客观、全面地评价了不同产地苦参的质量。结论 所建立的苦参毛细管电泳数字化指纹图谱具有较好的精密度和重现性，可为苦参质量控制提供新参考，Jaccard相似度Sb参数能够作为评价中药批间相似度一个较好的指标。     

甜瓜蒂的毛细管电泳数字化指纹图谱

目的采用毛细管区带电泳法建立甜瓜蒂指纹图谱。方法以的50 mmol.L-1硼砂(含体积分数为5%的乙腈溶液)为背景电解质,运行电压12 kV,紫外检测波长228 nm,以10个不同产地药材的电泳图谱建立了甜瓜蒂毛细管电泳指纹图谱。结果确立11个共有峰,用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统"全面挖掘了该CEFP的潜信息,建立了甜瓜蒂毛细管电泳数字化指纹图谱;同时用双定性相似度(SF和S′F)双定量相似度(C和P)评价了甜瓜蒂毛细管电泳数字化指纹图谱。结论所建立的毛细管电泳数字化指纹图谱可为甜瓜蒂鉴别和质量控制提供参考。     

斑蝥的毛细管电泳数字化指纹图谱研究

目的建立斑蝥药材的毛细管电泳指纹图谱（CEFP）。方法采用毛细管区带电泳法（CZE）,以50mmol·L^-1硼砂为背景电解质,运行电压12kV,检测波长265nm,重力进样20s（高度8cm）。用＂中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0＂软件计算不同批次的斑蝥药材CEFP的色谱指纹图谱指数等41个参数进行潜信息特征数字化评价。以双定性双定量相似度法评价了10批不同产地斑蝥药材及斑蝥不同部位质量。结果以尿苷峰为参照物峰,确定了10个共有峰,建立了斑蝥药材的数字化CEFP,获得了判别斑蝥药材质量的重要数字信息。结论所建立的数字化CEFP具有较好的精密度和重现性,为斑蝥药材质量控制提供了新方法。     

中药八角茴香的毛细管电泳指纹图谱以及莽草酸的含量测定

目的:获得八角茴香的毛细管电泳指纹图谱并对其中莽草酸的含量进行测定。方法:选用广西八角茴香为道地药材,莽草酸为对照物,采用毛细管电泳法(运行缓冲液:5mmol·L~(-1)四硼酸钠,60mmol·L~(-1)SDS;运行电压:12.5kV;电进样时间:3s;检测波长:213nm)分析了7个不同产地八角茴香提取物的成分及含量差异,特别是莽草酸含量差异,并利用模糊相似优先比算法评价了不同产地八角茴香与道地八角茴香的相似度。结果:获得了八角茴香的指纹图谱,检测到的9个相对位置稳定的共有峰可作为鉴别八角茴香的指标峰;测定了不同产地八角茴香中莽草酸的含量。结论:本研究获得的八角茴香的毛细管电泳指纹图谱有助于进行八角茴香的真伪鉴别和质量控制;对莽草酸含量的测定,可用以指导各地八角茴香的充分利用。     

泽泻醇提物与超临界CO_2萃取物的HPLC指纹图谱比较

目的:建立并比较泽泻醇提物与超临界CO2萃取物的高效液相色谱指纹图谱。方法:色谱柱为Inertsil ODS-SP(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(80∶20,V/V),检测波长为208 nm,流速为0.4 ml/min。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004A版)对10批样品的相似度进行评价。结果:泽泻醇提物指纹图谱的共有峰有13个,最大峰为14号峰;泽泻超临界CO2萃取物指纹图谱的共有峰有16个,最大峰为12号峰(23-乙酰泽泻醇B)。10批样品的相似度均>0.900。结论:该方法稳定性、精密度、重复性较好,可为泽泻醇提物与超临界CO2萃取物的鉴别及质量控制提供依据。     

苦参总黄酮HPLC指纹图谱研究

目的:建立苦参提取物黄酮类成分的HPLC指纹图谱,为苦参的质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为DIKMA C18柱(250mm×4.6mm,粒度5μm);流动相为甲醇-水(梯度洗脱);流速1ml·min-1;柱温30℃;检测波长280nm;进样量20μl。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对不同批次苦参总黄酮的HPLC图谱进行比较分析。结果:建立了苦参提取物黄酮类成分的HPLC指纹图谱,以苦参酮为参照峰,对10批苦参总黄酮成分进行指纹图谱分析,标定了13个共有峰,10批提取物的相似度均>0.9。结论:本研究所建立的分析方法具有良好的精密度和重现性,可为苦参提取物的品质评价和质量控制提供科学依据。     

香连丸中生物碱成分指纹图谱研究及样品考察

目的:建立香连丸中生物碱成分指纹图谱测定方法和香连丸指纹图谱的共有模式,比较、评价不同企业产品之间、相同企业不同批次产品之间的稳定性.方法:以乙腈-0.03 mol·L-1醋酸铵溶液(1 000 ml中加入氨水7 ml,三乙胺1 ml)(36:64)为流动相;柱温35℃,流速0.8 ml·min-1,检测波长270 nm,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(版本:2004A,国家药典委员会)相似度评价软件.结果:对58批香连丸进行指纹图谱比较,各厂家产品内外指纹图谱相似度均大于0.9.结论:各厂家产品相似度大于0.9,该制剂质量稳定.     

消乳散的UPLC指纹图谱

目的建立中药复方制剂消乳散的UPLC指纹图谱,对制剂进行质量控制。方法采用Kromat Universil XB C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm),以乙腈-质量分数为0.1%的磷酸水为流动相,进行梯度洗脱,柱温:30℃,流速:0.1 m L·min-1,检测波长:254 nm;建立消乳散的UPLC指纹图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件"对10批制剂进行相似度评价,并指认其特征峰。结果建立的消乳散UPLC指纹图谱共标示出16个共有峰,10批制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度的均值为0.989~0.998,均大于0.90,满足质量要求。结论上述建立的UPLC指纹图谱精密度、重复性和稳定性均良好,可以用于消乳散的质量评价,可为消乳散的整体质量控制提供科学依据。     

大黄碳酸氢钠片总蒽醌含量测定及指纹图谱研究

目的对大黄碳酸氢钠片中5种蒽醌类成分进行含量测定,建立其HPLC指纹图谱。方法采用DIKMA Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-1 mL·L^-1磷酸溶液(85∶15);流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:254 nm。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)对大黄碳酸氢钠片HPLC图谱进行分析。结果3个厂家的16批大黄碳酸氢钠片样品中5种蒽醌类化合物含量有显著差异。16批样品指纹图谱相似度均在0.990以上,指认共有峰9个。结论该方法简便、准确、重复性好,可为大黄碳酸氢钠片的质量控制和评价提供科学依据。     

骨刺片的质量标准研究

目的:修订骨刺片的质量标准。方法:采用TLC法对处方中马钱子、白芍、骨碎补、延胡索进行定性鉴别,并对乌头碱进行限量检查。采用反相高效液相色谱法,Phenomenex Gemmni C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.01 mol.L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol.L-1磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值至2.8)(21∶79)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长260 nm,测定骨刺片中士的宁和马钱子碱的含量。结果:薄层鉴别专属性强,分离效果好。含量测定士的宁、马钱子碱线性范围分别为0.061 11～6.111μg(r=0.999 7)、0.040 36～4.036μg(r=0.999 2);平均回收率分别为99.16%、99.61%,RSD分别为1.22%、1.84%(n=9)。结论:本方法灵敏、简便、准确,重现性好,可作为骨刺片的质量控制方法。     

流动相对灰树花多糖相对分子质量测定影响的考察

目的:考察流动相对高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定灰树花多糖（GFP）相对分子质量（Mr）的影响因素。方法:采用HPGPC法分别以不同的流动相、盐浓度、pH测定GFP的Mr,并对测定结果进行分析。结果:分别以纯水、0.02%NaN₃、0.1mol·L^-1NaNO₃和0.1 mol·L^-1NaCl溶液为流动相进行测定,重均相对分子质量（WAMr）分别为822410、177520、29112、25066道尔顿,不同的流动相GFP的Mr有明显不同,以0.02%NaN₃较为理想;在低盐浓度(0～0.025mol·L^-1)下,Mr变化明显,在0.1～0.2mol·L^-1硫酸钠溶液中趋于平稳;在pH 3～6时,Mr随pH增加而急剧增加,在pH 6～9范围内变化不明显。结论:不同流动相、盐浓度、pH对GFP的Mr测定结果有明显影响。     

蛇毒三肽pENW对血管内皮的保护作用及机制探讨

目的：体外实验评价pENW对血管内皮细胞氧化应激损伤和炎性损伤的保护作用,并对其作用机制进行探讨,以提供pENW可开发成为抗血栓药物的依据。方法：原代培养的血管内皮细胞以消化合并刮取法取自牛胸主动脉。H2O2（800μmol.L-1）和LPS（1 mg.L-1）分别用于模拟氧化应激损伤和炎性损伤,经典的G riess Reagent法用于检测一氧化氮的含量。LPS（100μg.L-1）用于刺激血管内皮细胞分泌一氧化氮。在考察pENW对血管内皮细胞的保护作用时,设空白对照组（给予等体积的磷酸盐缓冲溶液）、模型组（分别给予H2O2800μmol.L-1或LPS 1 mg.L-1进行造模）、阳性药给药组（在H2O2造模前给予依达拉奉10-5mol.L-1或在LPS造模前给予阿司匹林10-4mol.L-1）和不同剂量pENW给药组（造模前分别给予pENW 10-4,10-5,10-6和10-7mol.L-1）。在探讨病理条件下pENW对血管内皮细胞释放一氧化氮的调节作用时,设空白对照组（给予等体积的磷酸盐缓冲溶液）、模型组（给予LPS 100μg.L-1）、阳性对照组（造模前给予阿司匹林10-4mol.L-1）和不同剂量pENW给药组（造模前分别给予pENW 10-4,10-5,10-6和10-7mol.L-1）,而在进行正常生理条件下pENW调节血管内皮细胞一氧化氮释放作用的研究时,除不设模型组外,其余各组亦不给LPS。结果：pENW能剂量依赖性地减轻H2O2和LPS引起的血管内皮细胞损伤。在pENW10-4mol.L-1＋H2O2和pENW 10-4mol.L-1＋LPS组,细胞存活率分别升高至（97.6±40.4）%和（64.7±8.0）%;10-4mol.L-1的pENW使血管内皮细胞在正常生理条件下合成的一氧化氮由空白组的（15.50±2.82）升高至（48.68±10.81）μmol.L-1（P〈0.01）;但pENW能抑制LPS（100μg.L-1）引起的一氧化氮大量升高,且抑制作用呈剂量依赖性。结论：pENW对血管内皮细胞损伤具有保护作用,其作用与调节内皮细胞一氧化氮的释放有关。     

美洛昔康对铝负荷致大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的:观察美洛昔康对铝负荷致海马神经元损伤的保护作用。方法:离体培养新生SD大鼠海马神经元7d,分成空白对照组(200μmol·L-1NaCl)、铝模型组(200μmol·L-1AlCl3)、美洛昔康小、中、大剂量(10-8、10-7、10-6mol·L-1)组,给药24h后,检测各组神经元光密度值、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察神经元形态。结果:与空白对照组比较,铝模型组光密度值降低、LDH漏出率升高、SOD活性减弱、MDA含量升高(P<0.01),神经元形态发生明显损伤;与铝模型组比较,美洛昔康各剂量组光密度值升高、LDH漏出率降低、SOD活性增强、MDA含量降低(P<0.01或P<0.05),神经元形态出现明显改善。结论:美洛昔康对于铝负荷致离体海马神经元损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应和氧化应激有关。     

二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率测定方法研究

目的：研究二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集率的测定方法。方法：收集30例急性冠脉综合征（ACS）患者的血样,选择5,10,20μmol·L＾-1不同浓度的ADP测定血小板1,3,5min的聚集率和最大聚集率。结果：5μmol·L^-1ADP组不同时间点的血小板聚集率与10,20μmol·L^-1ADP组差异显著（P〈0．01）,10μmol·L^-1ADP组不同时间点的血小板聚集率与20μmol·L。ADP组差异无统计学意义。研究发现血小板聚集率有直方双曲线和波形图两组有代表性的图形。结论：对于普利生公司的LBY—NJ4四通道血小板聚集仪,10μmol·L^-1为最适ADP诱导剂浓度。初步推断患者的血小板聚集率的图形为直方双曲线,可能对氯吡格雷的反应较高,氯吡格雷能起到较好的抗血小板作用。     

紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用研究

目的:研究紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用。方法:以紫苏醇溶液为对照,采用MTT比色法检测不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol·L-1)紫苏醇亚微乳剂处理不同时间(24、48、72h)后对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制率及半数抑制量(IC50)值,并设立空白组进行比较。结果:与空白组比较,试验组与对照组在作用24h、浓度高于400μmol·L-1,48h、浓度高于100μmol·L-1,72h、浓度高于50μmol·L-1时均表现出明显抑制作用(P<0.05);后2组抑制作用比较无显著性差异;试验组与对照组对MCF-7细胞株的IC50值分别为353.9、377.9μmol·L-1。结论:紫苏醇制成亚微乳剂后与其溶液比较,对人乳腺癌细胞MCF-7具有相同的抑制作用。     

银杏叶提取物微丸的制备及其释放度研究

目的:制备银杏叶提取物微丸,并测定其体外释放度。方法:采用3种不同包衣材料(欧巴代Ⅱ、Eudragit L30D-55、Eu-dragit S100)对银杏叶提取物进行包衣,采用离心造粒法制备成相应的包衣微丸;将3种包衣微丸按预设比例混合制成混合包衣微丸;采用pH梯度改变介质方式(0.1mol.L-1盐酸、pH5.8PBS、pH7.2PBS)测定包衣微丸和混合包衣微丸的释放度。结果:3种不同包衣微丸分别在0.1mol.L-1盐酸、pH5.8PBS、pH7.2PBS中可以迅速释放;混合包衣微丸在pH梯度改变介质中持续释放,约8h释放完全。结论:该制备工艺可行,可为工业化生产提供理论依据。     

脑肠肽Ghrelin对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠脑主动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度上升的影响

目的研究脑肠肽Ghrelin对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）胞内钙离子浓度上升的作用,并初步探讨其机制。方法采用细胞培养的方法获得大鼠胸主动脉VSMCs,经Fluo-4-AM染色后,采用激光共聚焦显微镜技术分别检测加入AngⅡ后,1×10^-7mol·L^-1和1×10^-5mol·L^-1的Ghrelin对胞内钙荧光强度（FI）的影响,以及腺苷酸环化酶抑制剂Sq22536对Ghrelin作用的影响。结果①2×10^-8mol·L^-1的AngⅡ可以使得VSMCs胞内钙FI上升到静息状态的（165±76）％;②随后加入1×10^-7mol·L^-1的Ghrelin可以使FI下降到（117±34）％（P〈0．01vs①）;③加入1×10^-5mol·L^-1的Ghrelin可以使FI下降到（87±22）％（P〈0．01vs①,P〈0．05vs②）;④预先以1×10^-5mol·L^-1的Sq22536孵育,再加入2×10^-8mol·L^-1AngⅡ和1×10^-7mol·L^-1的Ghrelin,胞内FI为原来的（143±24）％（P〈0．01vs②）。结论Ghrelin能够降低AngⅡ引起的大鼠胸主动脉VSMCs胞内钙离子升高作用,其机制可能与激活胞内cAMP／PKA信号通路有关。     

高效液相色谱法测定骨筋速康片中士的宁和马钱子碱的含量

目的：建立骨筋速康片中士的宁和马钱子碱的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,AgilentZorbaxTMSB—C18分析柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为0．01mol·L^-1庚炕磺酸钠与0．02mol·L^-1磷酸二氢钾的等体积混合溶液（用10％磷酸调节pH值2．8）．乙腈（815：185）;流速1．0mL·min^-1;检测波长260nm。结果：士的宁和马钱子碱在0．06～0．14mg·mL^-1和0．03～0．07mg·mL^-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率士的宁为101．09％（RSD=0．66％）,马钱子碱为100．19％（RSD=0．68％.结论：本方法简便、准确、快速,可用于该制剂的质量控制。     

原子荧光光谱法同时测定药用玻璃容器中砷和锑的溶出量

目的:建立药用玻璃容器中砷、锑溶出量的测定方法。方法:采用断续流动进样方式,氢化物发生-原子荧光光谱法同时测定药用玻璃容器中砷、锑的溶出量。结果:砷在浓度范围为0～10.0μg.L-1内呈良好线性,r=0.999 9,检出限为0.009 0μg.L-1,平均回收率为95.08%;锑在浓度范围为0～10.0μg.L-1内呈良好线性,r=0.999 6,检出限为0.023 5μg.L-1,平均回收率为92.89%。结论:本法简便快捷,灵敏度高,专属性强,准确可靠,可作为药用玻璃容器的质量控制方法。