表面增强激光解吸/离子化蛋白质芯片技术在肝细胞癌早期诊断研究中的应用

随着蛋白质组学研究技术的飞速发展,集样品分离、纯化、检测和数据分析为一体的表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片技术已成为蛋白质组学研究的有力工具,它可以快速、简便地直接检测各种体液及分泌物,具有标本用量少、高通量分析等特点,并在筛选、鉴定肿瘤标志物及临床疾病的诊断、防治方面发挥了重要作用。本文介绍了该技术的特点和分析步骤,以及该技术在肝细胞癌早期诊断中的应用情况,并对其前景进行展望。     

SELDI-TOF-MS技术在预测肿瘤化疗敏感性中的应用

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术是新一代蛋白质组研究技术,它使用特殊的增强表面直接捕获待测样本中的蛋白质分子,能够快速、敏感地发现并鉴定蛋白,提供一个高通量和高灵敏度的检测平台。最初主要应用于疾病早期诊断相关的蛋白质标志物。目前在预测肿瘤化疗敏感性方面的应用也逐渐增多。本文除对表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术做详尽的介绍外,重点阐述其在预测肿瘤化疗敏感性方面的应用,并对其优缺点和发展前景进行评估。     

肾康灵干预阿霉素肾病大鼠血蛋白质组的实验研究

目的 应用蛋白质组学筛选阿霉素肾病大鼠血清中差异表达的蛋白质,旨在观察频复发性肾病综合征的诊断标志物及肾康灵的作用靶点. 方法利用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱合CM10蛋白质芯片技术检测45组大鼠血蛋白质组质谱的表达,用Cipbergen Proteinchip Soft-ware 3.2.1和Biomarker...     

表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用

结直肠癌是威胁人类健康的常见肿瘤之一,目前缺乏敏感度、特异度高的早期诊断方法。蛋白质组学为结直肠癌许多研究领域拓开了新视野,表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是蛋白质芯片和质谱技术的结合,主要由蛋白质芯片、芯片阅读器和生物信息学3大部分组成,可直接分析患者血清、淋巴液、脑脊液、尿液、细胞分泌液等样品而无需复杂的样品制备,具有快速、简便、易行高通量平行分析等特点,是蛋白质组学的主要技术平台之一,目前已经初步应用于结直肠癌早期诊断、术后随访及标志物鉴定等方面的研究。作者综述了SELDI-TOF-MS的基本原理、技术特点及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。     

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术在大肠癌患者中肿瘤标记物的早期检测研究

目的进行大肠癌肿瘤标志物的早期检测,为大肠癌患者早期诊断提供依据。方法应用飞行时间质谱技术对80例大肠癌及41例健康人血清标本进行检测。结果大肠癌患者与健康对照样本检测到72个蛋白质的质核比(M/Z)峰值有统计学意义。获得分子量为3961.44,4286.32,6438.39,3162.36,4301.49,4478.96,6844.42Da这7个蛋白质组成的模板,可将大肠癌与正常人正确分组。准确率为94.21%(114/121);敏感度为92.50%(74/80);特异度为86.96%(40/46)。结论飞行时间质谱技术可用于大肠癌肿瘤标志物的早期检测。     

蛋白质组学在上皮性卵巢癌的研究进展

蛋白质组学从整体上,全面、动态、定量地分析正常及肿瘤标本中蛋白质种类和数量的改变,有助于阐明肿瘤相关蛋白质间的调控网络。卵巢癌是女性生殖器官恶性肿瘤中首位的致死性疾病,但卵巢位置隐匿,卵巢癌早期往往没有特异性症状,而现有的卵巢癌肿瘤标志物用于卵巢癌诊断价值有限,导致70%~75%的卵巢癌确诊时已是晚期,5年存活率低于30%,严重危害妇女健康。而蛋白质组学对上皮性卵巢癌具有广阔的应用前景,有助于卵巢癌的诊断、治疗等。     

基因组学和蛋白质组学在肺癌研究中的应用

基因组学和蛋白组学始终是近年来基础研究的热点所在,有关这方面的内容包括了基因芯片、组织芯片、蛋白芯片的液质液相层析质谱(LC-MS)、表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)等多个方面的研究。研究的内容从肺癌的分子诊断、早期发现、特异性标志物的发现,扩展到     

质谱成像技术与新型肿瘤标志物的研究进展

肿瘤标志物在肿瘤的早期诊断、分期、监测治疗以及预后评估等方面具有重要作用。近年来,随着筛选策略和技术的不断发展,新型肿瘤标志物不断涌现。质谱成像是一种研究生物组织或细胞的分子组成及分布的新型技术,可以直接从生物组织切片表面获得多种蛋白质或小分子代谢物的质荷比和空间分布信息,这一新型技术为寻找新的肿瘤标志物提供了新的手段。     

结核病患者血清蛋白质/多肽谱的初步研究

目的 了解结核病患者血清蛋白质/多肽的表达,为新型结核病血清学诊断方法的研究提供基础依据.方法 (1)应用WCX蛋白质芯片和表面增强激光解析-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对99例肺结核患者和18例肺外结核患者进行了血清蛋白质/多肽谱检测,采用ClinProTools分析软件进行比较分析.(2)以"结核"、"双向电泳"、"表面增强激光解析-电离飞行时间质谱"、"血清学"、"蛋白质组学"及相应英文为检索词在万方医学数据库、PUBMED中检索中、外文献进行文献复习.结果 WCX蛋白质芯片从血清中捕获到99种蛋白质/多肽,其中m/z为5 753.76的蛋白质在肺结核与肺外结核两组间差异有显著性,在肺外结核患者血清中表达上调,其平均质谱峰面积在肺结核患者和肺外结核患者中分别为15.42±4.86、28.29±14.08.结论 结核病的发生可产生大致相同的血清蛋白质/多肽谱,在不同类型结核结核病患者血清中可以找到共同的血清学诊断标志物.     

SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中的应用

随着蛋白质组学研究的不断深入,蛋白质研究技术广泛应用于各领域。新近发展起来的表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术为蛋白质的检测和研究提供了新的技术平台。投放至今虽短短几年,但其卓越的成果已广为医学科学界重视,尤其在恶性肿瘤的早期诊断、监控和预后研究上。现就其技术原理、优势和在肿瘤学研究中的现状予以综述。     

蛋白质组学在消化系统肿瘤中的研究进展

随着蛋白质组学相关技术的迅速发展，蛋白质组学已成为当今细胞生物学领域中极其活跃的学科。蛋白质组学的核心技术包括双相电泳、质谱分析、蛋白质组信息学。蛋白质组学从新的角度研究肿瘤，寻找肿瘤标记蛋白，进而阐明其表达水平的变化与肿瘤发生、发展不同阶段的相互关系，对肿瘤的早期诊断具有重要意义。作者就蛋白质组学研究相关技术、策略及其在消化系统肿瘤中的应用作简要综述。     

蛋白质组学的研究现状及其在2 型糖尿病中的应用

蛋白质组学是对基因编码蛋白质进行大规模分析的一门新兴学科。本文概述蛋白质组学的基本 技术：双相凝胶电泳、多维液相色谱、生物质谱技术及蛋白质芯片在2 型糖尿病（T2DM）中的应用,从而 探讨T2DM 中与炎症及脂代谢紊乱相关的生物蛋白：C 反应蛋白、α2- 巨球蛋白、载脂蛋白A1、Clusterin 及锌-α-2 糖蛋白的研究进展,发现早期诊断T2DM 新的特异性标志物及药物作用靶点。     

蛋白质组学在妇科恶性肿瘤研究中的应用

蛋白质组学技术能高通量对比健康和疾病状态时蛋白质表达谱的改变,有效地进行肿瘤标志物的筛选和鉴定,随着蛋白质组学研究方法的建立和发展,蛋白质组学技术在妇科肿瘤标志物的筛选、早期诊断和分类、病情监测、预后判断等方面有着重要意义。现在就蛋白质组学技术在乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等妇科恶性肿瘤研究中的应用进行综述。     

应用MALDI-TOF-MS分析大肠癌血浆相关蛋白差异表达

目的 通过对大肠癌患者血浆蛋白质组学表达差异的研究,以期寻找大肠癌早期诊断及新相关特异的性标志物.方法 采用弱阳离子(MB-WCX)磁珠结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF-MS)技术检测样品血浆蛋白质质谱,运用Ciphergen ProtemChip Software 3.2.1软件及Biomark Wizard 5.0软件进行数据分析筛选,并对差异表达显著的质谱峰于Swiss-Prot及TrEMBL蛋白数据库进行检索.结果 通过对比研究大肠癌组、大肠腺瘤组及正常对照组血浆差异表达质谱峰,共发现23个差异表达蛋白质谱峰,其中在大肠癌组中4个显著差异高表达(P＜0.05),荷质比(M/Z)分别为6 683、8 700、9 187、9 342;虽在大肠腺瘤组与正常组蛋白质谱峰表达无显著性差异(P＞0.05),但三组间荷质比为6 683、8 700蛋白表达呈一定递进性趋势;检索Swiss Prot蛋白质数据库结果:M/Z 6 683是成纤维细胞生长因子受体-l(FGFRl),其余均为未知蛋白,有待进一步鉴定.本研究通过表达差异蛋白建立诊断模型对大肠癌预测的准确率、敏感性、特异性分别为89.19％、83.33％、84％.结论 运用MALDI-TOF-MS技术分析大肠癌血浆蛋白质差异表达对大肠癌早期诊断以及发现或寻找新的肿瘤标志物可能具有一定的临床价值.     

蛋白质翻译后修饰的质谱鉴定方法和在精准医学研究中的应用

近年来,随着科学技术的发展,质谱法(MS)作为一种创新型分析技术应运而生。MS适用于大量样品的分析,其凭借高效、灵敏、准确、稳定以及便捷等特性,成为蛋白质组学应用的首要选择,在蛋白质分析领域中得到了广泛应用。蛋白质组学对于疾病的早期诊断、预后和监测疾病的发展至关重要,其中,蛋白质翻译后修饰(PTM)是蛋白质功能调控的重要方式,因此,关于PTM的检测在实验过程中非常重要。本文综述了泛素化、类泛素化、乙酰化、糖基化等PTM质谱检测以及本实验室建立的新型类泛素化质谱检测方法,并探讨了PTM质谱鉴定在精准医学研究领域的应用情况。     

差异蛋白质组学技术及其在肝癌标志物研究中的应用进展

摘要原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，死亡率居高不下，缺乏早期诊断是其中重要原因之一。差异蛋白质组学已经成为寻找新的肿瘤标记物的主要方法，随着科技的不断进步、创新及改变，一批新的技术应运而生，其中同位素标记相对和绝对定量技术（iTRAQ技术）结合色谱及质谱联用技术有很大发展潜力。本文就差异蛋白质组学的各项技术及其优缺点，以及在肝癌标志物中的应用做了以下综述。     

肺腺癌相关蛋白的筛选及鉴定

目的建立肺腺癌组织及配对癌旁组织的2-DE图谱,分析两者蛋白质表达的差异,进而寻找有诊断价值的相关蛋白。方法应用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对肺腺癌组织、配对癌旁组织进行蛋白质组学比较研究。结果获得了分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱。经过Im-ageMaster 2DPlatinum 5.0软件对图像分析后,获得差异大于3倍的蛋白点63个,12个点仅在肺腺癌组织中表达,5个点仅在配对癌旁组织中表达。质谱鉴定去冗余后确定了5种蛋白质,其中4种蛋白与肿瘤相关,分别为S100钙结合蛋白(S100-A11)、Ras相关蛋白Rab-14、微管辅助蛋白(Stathmin)、凝溶胶蛋白(gelsolin)。结论肺腺癌组织与配对癌旁组织的双向电泳结果有明显差异,这些差异蛋白可作为肺腺癌的候选肿瘤标志物。     

头颈癌蛋白质组学及肿瘤相关蛋白的研究进展

头颈癌是全球范围内第五大常见肿瘤,在欧美约占全部恶性肿瘤的10%,在我国则较为多见,占19.9%～30.2%。头颈癌是一大类疾病,它们有着许多相同或相似的特征。临床上70%～80%的患者就诊时已为局部晚期,对于这部分患者,手术和放射治疗的进步并未带来长期生存率的改善。因此,头颈癌治疗的关键在于有效的早期诊断。随着蛋白质组学及其技术的发展,有希望早期发现头颈癌的标志物。本文主要对头颈癌蛋白质组学研究及肿瘤相关蛋白的表达情况作一简述。     

Application of serum surface-enhanced laser desorption/ionization proteomic patterns in distinguishing lung cancer patients from healthy people

Screening and early diagnosis of lung cancer relies mainly on chest X-ray, low-dose computed tomography, bronchoscopy, sputumcytology, and measurement of tumor markers such as carcinoembryonic antigen ( CEA), cytokeratin-19 fragments ( Cyfra21-1 ), and neuron-specific enolase (NSE). However, all these methods lack adequate sensitivity and/or specificity.     

MALDI—TOF质谱技术筛选Ⅰ期肺鳞癌血清肿瘤标记物

目的：MALDI-TOF—MS技术筛选肺鳞癌特异性肿瘤标记物,以提高肺鳞癌早期诊断水平．方法：采集19例Ⅰ期肺鳞癌患者和19例年龄、性别、吸烟量等与之匹配的健康对照者血清,应用MALDI-TOF—MS技术结合MB-WCX蛋白芯片和AutoflexⅡ—C质谱分析仪检测各血清标本,经计算机软件数据处理以筛选肺鳞癌血清差异蛋白质波峰．结果：与正常人比较发现肺鳞癌显著异常表达的潜在标记物3个,Mr分别为3261．69,3192．07和2556．92（P〈0．01）,并据此建立了肺鳞癌分子诊断模型．另采集22例肺鳞癌和19例健康者血清盲检验证该诊断模型具有95．5％的敏感性和94．7％的特异性．结论：MALDI-TOF质谱技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,不仅能直接筛选出肺鳞癌患者血清中相对特异的潜在肿瘤标记物,而且可能具有较好的临床应用前景,同时为临床寻找新的肺鳞癌血清肿瘤标记物提供理论依据．