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相似文献
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1.
用基因工程表达的抗原早期诊断鼻咽癌   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的为了建立鼻咽癌(NPC)早期诊断方法。方法以基因工程表达的、经纯化的EB病毒(Epstein-Barvirus,EBV)早期抗原(EA)成分EA-D和EA-R作为诊断抗原,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA),检查30例NPC病人及49例正常人血清中的EA/IgA抗体。结果用ELISA检测抗体较用细胞涂片免疫酶方法(IE)敏感。ELISA检测NPC病人血清中EA/lgA抗体,阳性率为100%,EA/lgA抗体效价均≥1∶100。而用IE法,平行检测30例NPC病人血清中EA/lgA抗体效价,结果6例为阴性(<1∶10),抗体阳性率为70%。ELISA明显地提高了NPC的检出率。以p138(EA-R)和p54(EA-D)分别或混合包被,检测对EBV特异的EA-D和EA-R的抗体。结论表明在NPC病人血清中存在对EA两种抗原的抗体,对EA-D的抗体滴度高于对EA-R的抗体。因此,以两种抗原混合包被作为诊断抗原建立的ELISA方法,为NPC的早期诊断提供更敏感、特异和简便的手段。  相似文献   

2.
为了建立纯化Epstein-Barr(EB)病毒壳抗原(EBV-VCA)的方法,用于酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清中的相关抗体,我们用重组昆虫病毒在感染的sf9细胞中表达EBV-VCA。感染的细胞经裂解后,层析纯化表达产物。用纯化的VCA作为抗原包被ELISA板或硝基纤维膜,检查血清中VCA/IgA和VCA/IgG抗体,为EBV感染的检测和NPC的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。  相似文献   

3.
黑色素与许多人类重要的致病菌的毒性有关,但对其免疫反应所知不多。作者用从C.Neoformans系24067细胞分离的黑色素进行ELISA、免疫荧光(IF)及血清学凝集反应来证明其致免疫性。首先将由C.Neoformans细胞纯化提取的黑色素按不同剂量分别免疫BALB/C、C57BL/6和T细胞缺陷BALB/C小鼠,并分别于免疫后不同时间取血。ELISA试验系将系列稀释的L多巴黑色素悬液包被96孔板,过夜,之后80℃处理30分钟,并用封闭液封闭,洗涤后加入稀释的血清孵育,二抗用碱性磷酸酶标记的…  相似文献   

4.
应用聚合酶链反应(PCR)技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列IS986基因的方法和用单克隆抗体TB15-C3经ELISA夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇,对10种抗酸杆菌,2种普通菌进行了检测。PCR仅对结核杆菌复合体扩增出245bp特异性条带,ELISA检测除人型结核杆菌、BCG阳性外,还与鸟型及瘰疬分枝杆菌反应阳性。PCR检测人型结核杆菌的敏感性为1pg,相当于13个左右细菌,ELIS  相似文献   

5.
ABC-ELISA检测胸水中抗结核菌抗体的临床意义周玉皆,蔡后荣,高育瑶ABC-ELISA为生物素-亲和素系统(ABC)与免疫酶联吸附方法相结合的新技术,本文以BCG作抗原包被,用该技术检测胸水中抗BCG-IgG抗体,观察它对结核性胸膜炎的诊断价值。...  相似文献   

6.
本文用ELISA间接法检测了一种恶性疟原虫保护性抗原重组复合基因表达产物诱导小鼠体液免疫的反应。该复合基因包含了编码MSA1、MSA2和RESA上的T和/或B细胞刺激位点的基因片段,同时加有IL-1和TT上的广谱T细胞刺激位点的基因片段。该复合基因在E.coli中的表达产物(简称复合抗原)在有和无佐剂的条件下免疫BALB/c小鼠后,均产生了明显的抗复合抗原的抗体,同时也产生了明显的抗可溶性裂殖子抗原的抗体。相反,用可溶性裂殖子抗原免疫的BALB/c小鼠则不能产生明显的抗复合抗原的抗体。另外,经复合抗原免疫的C57BL/6小鼠也能产生明显的抗复合抗原的抗体  相似文献   

7.
双抗原夹心ELISA检测抗结核杆菌抗体及初步应用鲁严,彭晓红,盛裕芬目前用ELISA检测血清中的抗结核杆菌抗体(TBAb)大多为二步法,孵育时间较长,我们建立了双抗原夹心快速ELISA检测TBAb获得较好结果,并已制成试剂盒。材料和方法临床确诊的活动...  相似文献   

8.
目的研制epstein-Bar(EB)病毒诊断试剂。方法将重组痘苗病毒表达的Epstein-Bar病毒(EBV)壳抗原(VCA)主要多肽gp125纯化,作为诊断抗原建立了酶联免疫吸附试验(ELISA),检测了48份鼻咽癌(NPC)病人血清及10份正常人血清中的VCA/IgA抗体。结果该方法与免疫荧光(IF)检测结果一致,但ELISA的平均几何滴度(GMT)是IF的12倍。结论以纯化的EB病毒壳抗原主要多肽gp125作为诊断抗原建立的检测方法,更适合于EBV相关疾病的血清学诊断和血清流行病学调查。  相似文献   

9.
为了建立纯化Epstein-Barr(EB)病毒壳抗原(EBV-VCA)的方法,用于酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人因清中的相关抗体,我们用重组昆虫病毒在感染的sf9细胞中表达EBV-VCA。感染的细胞经裂解后,层析纯化表达产物。用经的VCA作为抗原包虫被ELISA板或硝基纤维膜,检查血清中VCA/IgA和VCA/gG抗体,为EBV感染的的检测和NPC的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。  相似文献   

10.
检测肾综合征出血热循环免疫复合物酶联免疫测定(…   总被引:1,自引:0,他引:1  
以肾综合征出血热患者血清中提取的γ球蛋白与HFRS病毒抗原形成的免疫复俣物为模型,抗人μ链和γ链单克隆抗体为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的抗-HFRS病毒持异性MAb为批示抗体,建立了检测HFRS特异性循环IC的ELISA捕促法,并初步用于HFRS急性期患者血清标本的检测。  相似文献   

11.
应用聚合酶性反应(PCR)技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列IS986基因的方法和用单克隆抗体TB15-C3经ELISA夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇,对10种抗酸杆菌,2种普通菌进行了检测.PCR仅对结核杆菌复合体扩增出245hp特异性条带,ELISA检测除人型结核杆菌、BCG阳性外,还与鸟型及瘰疬分枝杆菌反应阳性.PCR检测人型结核杆菌的敏感性为1pg,相当于13个左右细菌,ELISA检测的被感性为15ng/ml.应用PCR及ELISA检测了96份结核临床标本.PCR的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率(P<0.05),PCR的检出率虽高于细菌培养的阳性率,但相差不显著(P>0.05).ELISA检测阳性率明显高于抗酸染色涂片、细菌培养和PCR的阳性率(P<0.001).ELISA的假阳性率高于PCR的假阳性率,但相差不显著(P>0.05).研究表明,PCR及ELISA均是特异、敏感、快速的诊断结核病的方法.但在使用中又各自有其特点.  相似文献   

12.
ELISA检测莱姆病特异性抗体IgG   总被引:1,自引:0,他引:1  
莱姆病 (Lymedisease)病原体为伯氏疏螺旋体 (Borreliaburgdorferi简称B .B) ,该螺旋体可侵害人体多个器官 ,建立特异、敏感的莱姆病诊断方法 ,是早发现、早治疗的必要手段。我们以全菌抗原加重组蛋白P39,用ELISA检测莱姆病特异抗体IgG方法进行了研究。血清标本 ,收集临床已确诊莱姆病患者血清 5 6例 ,健康体检者空腹血清 2 0例作为对照组。ELISA的操作步骤同常规方法 ,结果判定 :以正常对照A值的 x± 3s为正常上限 ,高于此限者判为莱姆病IgG抗体阳性。抗原包被浓度 :全菌抗原 6 0 0…  相似文献   

13.
EFFECTSOFAPATITECERAMICSONCELLGROWTHSANDDNASYNTHESESINHUMANOSTEOBLASTLIKECELLEFFECTSOFAPATITECERAMICSONCELLGROWTHSANDDNASYNTH...  相似文献   

14.
本文用ELISA间接法检测了一种恶性疟原虫保护抗原重组复合基因表达产物诱导小鼠体液免疫学的反应,该复合基因包含了编码MSA1,MSA2和RESA上的T和/或B细胞刺激位点的基因片段,同时加有IL-1和TT上的广谱T细胞刺激位点的基因片段,该复合基因在E.coli中的表达产物(简称复合抗原)在用和无佐剂的条件下免疫BALB/c小鼠后,均产生了明显的抗复合抗原的抗体,同时也产生了明显的抗可溶性裂殖子抗  相似文献   

15.
ELISA法测定EB病毒IgG/EA抗体在血清学诊断鼻咽癌中的意义   总被引:5,自引:0,他引:5  
近年研究表明 ,鼻咽癌 (NPC)的发展与EB病毒感染密切相关[1] 。本室应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定血清抗EB病毒早期抗原 (EA)的IgG抗体 (IgG EA)水平 ,与间接免疫酶染色法测定EB病毒壳抗原(VCA)IgA抗体进行比较 ,研究结果报道如下 :1 材料与方法1 1 血清样品来源  32 6例 2 7~ 6 0岁健康人为我院体检者 ,其中男性 2 33人 ,女性 93人。 134例为入院初诊鼻咽癌患者 ,年龄 31~ 5 5岁 ,其中男性 10 4人 ,女性 30人。1 2 血清IgA VCA滴度测定 采用上海生物制品研究所的IgA VCA免疫酶染色法试…  相似文献   

16.
抗核抗体 (ANA)是SLE发病学的至关重要的自身抗体。活化淋巴细胞染色质同系免疫能诱导哪些ANA生成以及能否引起SLE样综合征的发生是十分受关注的方面。我们从ConA活化BALB/C小鼠脾细胞中分离出染色质 ,进行同系免疫 ,检测抗核抗体种类和免疫鼠肾脏病理变化。一、抗核抗体种类用ELISA法检测活性染色质诱导IgG类抗dsDNA和抗组蛋白抗体生成 ,用间接免疫荧光法检测ANA核型。 1 用ELISA法检测ANA :只有活性染色质组可检测到IgG类抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体 ,而非活性组阴性 ;2 用间接F…  相似文献   

17.
SHEARSTRESSRESISTANCEOFENDOTHELIALCELLSLINEDONPRETREATEDPTFEVASCULARGRAFTSSHEARSTRESSRESISTANCEOFENDOTHELIALCELLSLINEDONPRETR...  相似文献   

18.
抗人VEGF165单链抗体的构建与表达   总被引:5,自引:3,他引:2  
为降低鼠源抗体对人体的免疫原性,构建表达了VmD11的单链抗体。方法用overlapPCR构建出单链抗体的基因,克隆入表达载体pKpL-3a,在大直菌opo2136中表达,采用抗原结合ELISA和竞争抑制ELISA测定活性。结果经SDS-PAGE检测,诱导后的细菌表达了26kD的蛋白;WesternBlot证实该蛋白为表达的单链抗体。经变性,复性后,该单链抗体可特异结合人VEGF165抗原,并与V  相似文献   

19.
ENA全称为Extractablenuclearanti gen,即可提取性核抗原 ,包括Sm、U1 RNP、SSA、SSB、Jo 1、Sc1 70、rRNP、Ku、PC NA、Mi 1、Mi 2、PM 1等。ENA抗体是抗核抗体中种类最多、最为重要的一族抗体谱 ,是自身免疫性结缔组织病中常见的自身抗体。本文拟从兔胸腺和猪脾中制备ENA丙酮粉 ,探索简便可行的浓缩ENA蛋白抗原的方法 ,以达到提高检测抗ENA抗体阳性率的目的 ,最终向基层医院推广。兔胸腺和猪脾冻存于 80℃超低温冰箱 ,首先 ,4℃下分别以磷酸盐缓冲液(PBS)和…  相似文献   

20.
ADULTHUMANENDOTHELIALCELLLININGPREVENTSEARLYPLATELETDEPOSITIONONVASCULARGRAFTSINVITROADULTHUMANENDOTHELIALCELLLININGPREVENTSE...  相似文献   

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