红细胞温自身抗体的血清学特点分析及配血对策

目的探索红细胞温自身抗体的血清学特点,寻求简便有效的输血治疗对策。方法对患者血样同时做血清抗体检测、直接抗球蛋白试验、乙醚放散试验(对单抗-IgG阳性红细胞)。如果接抗球蛋白试验或放散试验中检出特异性抗体,则使用不含该特异性抗原的红细胞进行吸收放散试验,以鉴别该抗体为类同种特异性自身抗体还是同种特异性抗体。同时对检出的抗体进行抗体效价测定和患者红细胞相应抗原的鉴定。结果在直抗阳性的自身免疫性溶血性贫血患者血样中,66.5%的血清中检出不规则抗体,其中大部分(69%)与谱红细胞反应未发现明显反应格局,其余检出各种抗体。包括同种抗体20例,类同种自身抗体22例,温盐水自身抗体5例,室温反应性冷自身抗体7例。另外有5例被确认为由某种药物引起直抗阳性。在存在类抗体的样本中,类抗体针对的红细胞特异性抗原可能存在于患者自身红细胞上。结论由于所有同种抗体和类同种抗体特异型大部分属于Rh系统,少数属于MNS和Kidd系统,因此通过提供Rh、MNS、Kidd血型系统抗原配合型红细胞的方法,可以替代传统的自身吸收法为患者提供相对安全的血液。     

抗体放散试验在直接抗人球蛋白试验阳性患者中的应用

目的探讨抗体放散试验在直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性患者输血前实验室检查中的意义,为临床输血安全提供保障。方法通过回顾性分析74例患者的DAT阳性强弱度、放散液和血清中抗体特异性比较、经稀释后的放散液中的抗体特异性,探讨放散试验在输血前检查中的应用。结果 74例DAT阳性反应强弱度为:W+(13.5%),1+(31.1%),2+(32.4%),3+(16.2%),4+(6.8%);放散后抗体鉴定32例为阴性,16例放散液检测到特异性同种抗体,和患者血清中的一致,并且所有患者均有输血史;26例放散液为全凝集,进行了稀释,其中4例检测到了同种抗体。结论抗体放散试验在输血前检查中并为常规试验,但对于DAT阳性的患者来说进行放散试验是很有必要的。     

抗-E、c及Jk~a的同种抗体及“类同种自身抗体”分析

目的通过对1例同时检出抗-E、c及Jk~a同种抗体及"类同种自身抗体"患者的抗体鉴定,分析"类同种自身抗体"的血清学特征。方法采用微柱凝胶法、聚凝胺法以及PEG增强实验进行患者血清的抗体鉴定,采用微柱凝胶卡和经典抗球蛋白法进行患者放散液的抗体鉴定。采用O型Rh表型为CCee、Kidd表型为Jk(a-b+)的献血者红细胞进行吸收放散试验,对吸收后放散液进行抗体鉴定。结果患者血清及放散液中检出抗-E、c及Jk~a同种抗体及"类同种自身抗体"。结论患者在输血免疫刺激后产生抗-E、c及Jk~a同种抗体的过程中同时产生了特异性较差"类同种自身抗体"。     

抗体检测在自身免疫溶血性贫血患者中的应用

目的探讨自身抗体对自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者不规则抗体检出的影响。方法用戴安娜（Diana）全自动血型仪对23例AIHA患者进行氯喹放散试验检测自身抗体掩盖的不规则抗体，用乙醚放散试验检测自身抗体血型特异性。结果23例患者中间接抗人球试验阳性者17例，氯喹放散后检出不规则抗体4例（抗E2例，抗E，c1例，抗M1例）。自身抗体具有血型特异性者于间接抗人球试验阳性者中检出6例（抗E4例，抗c2例），于间接抗人球试验阴性者中检出1例（抗E）。结论采用氯喹放散试验、乙醚放散试验等检测被自身抗体掩盖的不规则抗体及鉴定自身抗体的血型特异性对AIHA患者安全有效输血具有重要意义。     

输血引起Rh抗体7例分析

目的检测输血引起Rh血型抗体的频率并鉴定抗体特异性。方法采用凝聚胺介质试剂与抗球蛋白介质试剂分别筛查和鉴定红细胞血型不规则抗体,采用吸收放散试验鉴定抗体特异性,并检测抗体的Ig类型及效价。结果5 600例输血的患者共检测出Rh抗体7例,检出率为0.125%。抗体特异性为:抗-cE 2例,抗-E2例,抗-C、抗-c和抗-D各1例。结论检出的Rh抗体,以抗-E和抗-E相关抗体为主,输血引起的同种免疫是当前Rh抗体产生的主要原因。     

输血引起Rh抗体7例分析

目的检测输血引起Rh血型抗体的频率并鉴定抗体特异性。方法采用凝聚胺介质试剂与抗球蛋白介质试剂分别筛查和鉴定红细胞血型不规则抗体,采用吸收放散试验鉴定抗体特异性,并检测抗体的Ig类型及效价。结果5600例输血的患者共检测出Rh抗体7例,检出率为0．125％。抗体特异性为：抗-cE2例,抗-E2例,抗-C、抗-c和抗-D各1例。结论检出的Rh抗体,以抗-E和抗-E相关抗体为主,输血引起的同种免疫是当前Rh抗体产生的主要原因。     

多种免疫球蛋白参与Rho(D)血型抗体活性的研究

目的研究骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者体内效价高达２３０的抗Ｒｈｏ（Ｄ）活性抗体，弄清此抗体的免疫球蛋白组分，为多种免疫球蛋白参与Ｒｈ系统血型抗体活性提供客观实验依据。方法用配组红细胞在菠萝酶和抗人球蛋白介质中鉴定该患者血清抗体的特异性，用Ｒｈｏ（Ｄ）阳性红细胞测定其效价；再用Ｒｈｏ阳性红细胞吸附该血清中的抗Ｒｈｏ抗体，用枸橼酸放散法将抗体从红细胞上释放出来，获取精提液。通过免疫电泳、琼脂扩散、双抗体夹心酶联免疫吸附法检测该精提液中免疫球蛋白的种类和含量。５年１０个月后用全自动特种蛋白与药物分析仪复验－３０℃保存的样本。结果该患者血清中仅含有单一特异性的抗Ｒｈｏ抗体，其效价为２３０。用Ｒｈｏ阳性红细胞吸收和放散试验获取的精提液中仅含有抗Ｒｈｏ活性抗体。免疫生物化学的分析和鉴定结果表明该精提液中含有ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ五种免疫球蛋白和补体Ｃ３。结论该患者实验结果提示该患ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ与ＩｇＧ、ＩｇＭ一道参与了Ｒｈ系统血型抗体活性     

抗-M抗体合并抗-Jka抗体引起疑难配血1例

目的:探讨临床工作中不规则抗体导致的合血困难,提高临床输血的安全性,预防溶血性输血反应的发生.方法:采用血型血清学方法,对患者标本进行抗体筛查和鉴定试验、血清抗体效价等测定.结果:患者血清中检出IgM类抗-M抗体,37℃有活性,IgM抗-M抗体效价为4,抗-Jk^a抗体效价为8.结论:对有免疫史的患者容易产生不规则抗体,输血前检测要认真加以分析,避免漏检,保障患者输血安全有效.     

多种免疫球蛋白参与Rho（D）血型抗体活性的研究

研究骨髓增生异常综合征患者体内效价高达２＾３０的抗Ｒｈｏ活性抗体。弄清此抗体的免疫球蛋白组分，为多种免疫球蛋白参与Ｒｈ系统血型抗体活性提供客观实验依据。方法 用配组红细胞在菠萝酶和抗人球蛋白介质中鉴定该患者血清抗体的特异性，用Ｒｈｏ阳性红细胞测定其效价；再用Ｒｈｏ阳性红细胞吸附该血清中的抗Ｒｈｏ抗体，用枸橼酸放散法将抗体从红细胞上释放出来，获取精提液。     

高效价Rh系统抗体致新生儿溶血病研究

目的调查Rh系统抗体引起新生儿溶血病(HDN)患儿的抗体特异性和效价,探讨直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性在血清学检测中的重要性。方法对新生儿鉴定母婴血型,做HDN三项试验(DAT、游离抗体试验和放散试验)和间接抗人球蛋白试验(IAT),并检测母婴红细胞放散液中可致敏新生儿红细胞的血型抗体特异性和效价。结果 2例新生儿DAT均呈强阳性;患儿1IAT阳性、患儿2阴性。2例新生儿均检出高效价致敏红细胞的抗体,分别为:患儿1检出抗-Ce,其中抗-C效价为128,抗-e为64;患儿2检出抗-D,效价为256。结论 DAT阳性对确诊新生儿Rh溶血病具有决定性作用,对HDN试验的后续展开分析具有方向性作用。     

抗CCP、抗AKA和抗RA33抗体检测在类风湿性关节炎诊断中的应用

目的探讨环瓜氨酸多肽（CCP）抗体、抗角蛋白抗体（AKA）、类风湿因子（RF）和抗RA33抗体对类风湿性关节炎（RA）的临床应用价值。方法88例RA患者和50例其他自身免疫病患者分别采用ELISA法检测抗CCP和抗RA33抗体，免疫荧光法检测抗AKA抗体，速率散射比浊法检测类风湿因子（RF），观察各指标对RA的诊断价值。结果患者抗CCP抗体、抗AKA抗体、抗RA33抗体和RF的敏感度分别为68．2％，28．4％，39．8％和71．6％，特异度为92．0％，100％，94．0％和70．0％；抗CCP抗体的检测阳性率高于抗AKA抗体和抗RA33抗体（P〈0．01），与RF无统计学显著性差异（P=0．622）。三种抗体对RF阴性组RA诊断的阳性率为63．0％，37％，44．4％，与RF阳性组RA阳性率70．5％，24．6％，37．7％相比较，两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论抗CCP，抗AKA，抗RA33抗体均是RA诊断的特异性指标，对诊断RF阴性RA具有较高敏感度和特异度，将上述抗体与RF进行联合检测，有助于RA的早期诊断。     

Antibody therapeutics:

Recombinant monoclonal antibody (rMAb) therapy may be instituted to achieve one of two broad outcomes: i) killing of cells or organisms (e.g., cancer cells, bacteria); and ii) neutralisation of soluble molecules (e.g., cytokines in chronic disease or toxins in infection). The choice of rMAb isotype is a critical decision in the development of a therapeutic antibody as it will determine the biological activities triggered in vivo. It is not possible, however, to accurately predict the in vivo activity because multiple parameters impact on the functional outcome, for example, IgG subclass, IgG-Fc glycoform, epitope density, cellular Fc receptors polymorphisms and so on. The present understanding of the molecular interactions between IgG-Fc and effector ligands in vitro has allowed the generation of new antibody structures with altered/improved effector function profiles that may prove optimal for given disease indications. Thus, when maximal antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity activity is indicated a non-fucosylated IgG1 format may be optimal; when minimal activity is indicated an aglycosylated IgG2 may be the form of choice.     

Antibody microarray-based oncoproteomics

The driving force behind oncoproteomics is the belief that certain protein signatures or patterns exist that are associated with a particular malignancy. If so, the correlation of clinical parameters with defined protein expression patterns would allow us to predict disease progression and perhaps even postulate improved therapeutic modalities. The technological challenges to achieve these goals are significant, as the human proteome is not defined. No general methodological approach exists today, and human cancer can, furthermore, be divided into several disease subgroups. One potential solution to finding cancer-associated protein signatures is the emerging technology of affinity proteomics. This approach addresses some of the shortcomings of traditional proteomics and combines it with the power of microarrays. The present review focuses on the role of antibody microarrays in oncoproteomics and its potential to provide a truly proteome-wide analytical approach.     

Antibody microarray-based oncoproteomics

The driving force behind oncoproteomics is the belief that certain protein signatures or patterns exist that are associated with a particular malignancy. If so, the correlation of clinical parameters with defined protein expression patterns would allow us to predict disease progression and perhaps even postulate improved therapeutic modalities. The technological challenges to achieve these goals are significant, as the human proteome is not defined. No general methodological approach exists today, and human cancer can, furthermore, be divided into several disease subgroups. One potential solution to finding cancer-associated protein signatures is the emerging technology of affinity proteomics. This approach addresses some of the shortcomings of traditional proteomics and combines it with the power of microarrays. The present review focuses on the role of antibody microarrays in oncoproteomics and its potential to provide a truly proteome-wide analytical approach.     

Ultrasound-Enhanced Monoclonal Antibody Production

With the rapidly growing demand for monoclonal antibody (mAb)–based products, new technologies are urgently needed to increase mAb production while reducing manufacturing costs. To solve this problem, we report our research findings of using low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) to enhance mAb production. LIPUS with frequency of 1.5 MHz and pulse repetition frequency of 1 kHz, as well as duty cycle of 20%, was used to stimulate hybridoma cells to enhance the production of mAb, anti-CD4 (hybridoma GK1.5). The enzyme-linked immunosorbent assay results show a 60.42 ± 7.63% increase of mAb expression in hybridoma cells. The evidence of structural changes of the cellular outer membrane in both transmission electron microscopy and scanning electron microscopy images and the more than 20% lactate dehydrogenase release indicates that the increased mAb production is related to the increased cell permeability induced by LIPUS. This value-added ultrasound technology provides a potential cost-effective solution for pharmaceutical companies to manufacture mAb-based drugs. The technology, in turn, can reduce the drug manufacturing costs and decrease health care spending.     

HCV分片段抗原EIA与重组免疫印迹法分析检测HCV抗体的比较研究

【目的】探讨国产丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体试剂的敏感性和特异性,为丙型肝炎的早期诊断和替代昂贵的进口重组免疫印迹法确认试剂(HCV RIBA3.0)提供实验依据。【方法】用HCV分片段抗体试剂检测经确认的标本中HCV-C、NS3、NS4、NS5抗体并与HCV RIBA3.0比较。【结果】82份样品中80份判定为阳性,阳性率为97.56%,2份判定为可疑,为2.4%,40份阴性样品中有2份判定可疑,为5.00%。【结论】国产分片段抗体检测试剂检测HCV抗体,与美国第三代RIBA3.0试剂的检测符合率基本一致,有低价高效的临床实用价值。     

蛋白芯片技术联合检测抗dsDNA抗体、抗Smith抗体和抗Rib-P抗体对SLE诊断价值分析

目的 评价蛋白芯片技术联合检测抗dsDNA抗体、抗Smith抗体和抗Rib-P抗体对于系统性红斑狼疮(SLE)诊断的价值.方法 采用蛋白芯片技术对85例SLE患者、129例其他自身免疫性疾病患者和43例健康体检者血清中的抗dsDNA抗体、抗Smith抗体和抗Rib-P抗体进行检测.结果 SLE患者组血清中的抗dsDNA抗体、抗Smith抗体和抗Rib-P抗体的阳性率(50.59％,32.94％和37.65％)及其联合检测的阳性率(78.82％)明显高于疾病对照组(0.75％,2.33％,2.33％和5.43％),差异有统计学意义(x2分别为100.269,52.36,62.481和155.51,P均＜0.01).正常对照组均为阴性.SLE患者抗dsDNA抗体的敏感度50.59％,特异度99.22％;抗Smith抗体敏感度32.94％,特异度97.67％;抗Rib-P抗体的敏感度37.65％,特异度97.67％;三项自身抗体联合检测的敏感度78.82％,特异度94.57％.联合检测的敏感度明显高于抗dsDNA抗体、抗Smith抗体和抗Rib-P抗体的单项检测.结论 抗dsDNA抗体、抗Smith抗体、抗Rib-P抗体作为SLE重要的抗体,具有很高的特异度,在一张蛋白芯片上同时检测可互相补充,提高了SLE的诊断敏感度和诊断效率,减少了漏诊和误诊,对SLE的诊断、治疗和预后具有重要的意义.     

抗核抗体、抗核抗体谱及抗双链DNA抗体的联合检测系统性红斑狼疮的诊断价值

目的 探讨抗核抗体（ANA）、抗核抗体谱（ANAs）及抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）的联合检测对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值。方法 选择2012年1月至2014年1月间泉州市某市级医院收治的SLE患者150例作为SLE组,同期收治的其他风湿性疾病患者30例作为疾病对照组,门诊体检健康者30例作为正常对照组。应用间接免疫荧光法检测血清 ANA ,应用免疫印迹法检测血清ANAs和抗dsDNA抗体水平。结果 SLE组ANA、抗dsDNA抗体、抗AHA、抗nRNP、抗AnuA、抗Sm阳性率显著高于疾病对照组和健康对照组（ P ＜0．01）。S L E患者中仅5．33％的患者出现单项抗体阳性,其余94．67％的患者一次性检测出2项或以上抗体阳性。SLE患者治疗后ANA、抗dsDNA抗体、抗AHA、抗Sm和抗SS‐A阳性率均不同程度下降,其中ANA、抗dsDNA抗体、抗AHA好转率分别为23．33％、83．33％和63．33％。结论 SLE患者ANA、ANAs和抗ds‐DNA抗体阳性率较高,联合检测和动态观察 ANA、ANAs和抗 ds‐DNA抗体对SLE诊断和治疗具有一定意义。