顺铂与肾小管上皮细胞凋亡

顺铂剂量依赖的肾毒性而限制了其临床治疗肿瘤的效果。研究发现,顺铂通过线粒体途径和死亡受体途径诱导的肾小管上皮细胞凋亡在顺铂引起的肾毒性中发挥着重要作用。     

保元排毒丸对顺铂致肾小管上皮细胞凋亡的影响

抗癌药顺铂(CDDP)肾毒性的主要靶位是肾小管上皮细胞，我们通过中药保元排毒丸含药血清对顺铂致猪肾小管上皮细胞(LLC—PK1)凋亡的影响来探讨其预防和降低肾毒性的机制。     

百令提取液对顺铂肾损害的保护作用

顺铂是运用较广泛的抗肿瘤药物之一,主要经肾脏排泄,故肾损害较明显,并且顺铂的抗癌作用和肾毒性与剂量有关。因此,如何降低其肾毒性,是许多学者一直研究的课题。近年来,亦有不少报道应用各种药物减少顺铂的肾损害作用,但用单味中药制剂作相关的实验研究很少。本实验用百令提取液治疗顺铂所致的肾损害,旨在探讨该药的肾保护作用。     

普罗布考防治大鼠顺铂急性肾损伤的实验研究

目的：复制大鼠顺铂急性肾损伤模型,研究氧化应激与核转录因子Sp1及凋亡的关系;探讨普罗布考对顺铂急性肾损伤的保护作用及作用机制。方法：24只SD雄性大鼠被随机分为生理盐水对照组、顺铂模型组、普罗布考干预组、普罗布考对照组,每组6只;检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖甘酶（NAG）、血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、肾组织匀浆液丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,光镜观察肾脏病理改变;采用免疫组化染色检测肾组织Sp1蛋白表达;采用TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡。结果：与生理盐水对照组和普罗布考对照组相比,顺铂模型组大鼠血清BUN和Scr,尿NAG酶,肾脏组织匀浆MDA含量显著升高,肾组织匀浆GSH-Px活力显著下降（P〈0.01）;肾脏指数、肾小管损伤分数和肾小管上皮细胞凋亡百分比均明显增加（P〈0.01）;肾组织Sp1蛋白的表达上调。采用普罗布考干预后血清BUN和Scr,尿NAG酶,肾脏组织匀浆MDA含量显著下降（P〈0.05）;肾组织匀浆GSH-Px活力显著升高;肾脏指数、肾小管损伤分数和肾小管上皮细胞凋亡百分比均明显降低（P〈0.01）;肾组织Sp1蛋白的表达下调。结论：氧化应激和核转录因子Sp1在顺铂所致大鼠肾毒性中起一定作用;普罗布考对顺铂所致大鼠肾毒性有保护作用,其机制可能与抗氧化、抑制肾小管上皮细胞凋亡、下调肾组织Sp1蛋白表达有关。     

血管内皮生长因子C减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞毒性损伤

目的观察血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)毒性损伤模型中mRNA的表达变化,探究VEGF-C对顺铂诱导人肾小管上皮细胞毒性损伤的作用和介导其作用的相关分子机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系,用不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞24 h后,利用实时荧光定量RT-PCR法检测HK-2细胞VEGF-C mRNA的表达变化,CCK8法检测不同浓度的顺铂对HK-2细胞存活率的影响。分别用0、50、100、200 ng/rr的人重组VEGF-C因子预培养HK-2细胞4 h后,再加入50μmol/L的顺铂和一定浓度的VEGF-C继续培养HK-2细胞24 h,利用CCK8法检测细胞存活率的变化,明确VEGF-C对顺铂诱导的肾小管上皮细胞毒性损伤的作用。用不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30 min后,Western blot方法检测细胞p-Akt、Akt、p-Erk、Erk、p-p38及p38蛋白水平的变化。结果不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞后细胞VEGF-C mRNA水平的表达呈现先上升后下降的趋势。顺铂能引起HK-2细胞存活率减低,并呈现浓度依赖性。而外源性加入VEGF-C能减轻顺铂所导致的HK-2细胞毒性损伤,提高细胞的存活率,并且VEGF-C浓度为200 ng/ml时对HK-2细胞的保护作用最明显。不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30 min,随着VEGF-C浓度的增加,HK-2细胞p-Akt、pErk的表达也逐渐增加,而Akt、Erk、p-p38及p38表达不变。结论 VEGF-C能减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞毒性损伤,提高细胞的存活率,其作用机制可能与激活细胞内PI3K/Akt及MAPK/Erk信号通路有关。     

急性肾小管-间质损伤与微小病变型肾综急性肾损伤发生的相关性

目的:探讨急性肾小管-间质损伤是否为MCD患者易于发生AKI的病理因素,及其急性肾小管-间质损伤高发的临床因素。方法:回顾性分析MCD患者急性肾小管-间质损伤发生率及损伤程度,对比发生AKI与未发生AKI的MCD患者急性肾小管-间质损伤严重程度;进一步分析临床指标、可疑肾毒性药物的使用与急性肾小管-间质损伤的相关性。结果:MCD患者急性肾小管-间质损伤的发生率为95.6%;MCD患者发生AKI组急性肾小管-间质损伤程度重于未发生AKI组,差异具有统计学意义(P0.05);血清Alb水平与MCD患者急性肾小管-间质损伤程度呈负相关,而BUN、TG水平与MCD患者急性肾小管-间质损伤程度则呈正相关;使用可疑肾毒性药物组的急性肾小管-间质损伤显著重于未使用组,差异具有统计学意义(P0.001)。结论:MCD患者普遍存在急性肾小管-间质损伤这一病理改变可能是其AKI高发的病理因素,有效循环血容量不足及可疑肾毒性药物的使用是导致MCD患者急性肾小管-间质损伤及AKI高发的重要因素。     

熊果苷对顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护效应及机制

该研究旨在阐明熊果苷(arbutin)在顺铂(cisplatin)诱导的肾小管上皮细胞损伤中的保护作用及机制。采用细胞计数试剂-8检测肾小管上皮细胞的活力, 观察不同浓度熊果苷对肾小管上皮细胞的毒性作用和熊果苷起作用的适宜浓度。将肾小管上皮细胞分为对照组、熊果苷组、顺铂组、熊果苷+顺铂组, 检测细胞凋亡、炎症水平, 比较上述指标各组之间的差异。结果显示, 当浓度超过100 μmol/L时熊果苷对肾小管上皮细胞表现出保护作用;熊果苷干预显著降低了顺铂诱导的肾小管上皮细胞的凋亡、炎性相关分子磷酸化p65(p-p65)和白细胞介素18(interleukin-18, IL-18)的升高, 同时逆转了抗凋亡蛋白Bcl-2的降低。这提示熊果苷可通过抗凋亡、抗炎性反应减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞的损伤, 有望成为临床治疗急性肾损伤的潜在新药物。     

检测钙调磷酸酶抑制剂肾毒性损伤的生物标志物的研究进展

钙调磷酸酶抑制剂(calcineurin inhibitor,CNI)通过与淋巴细胞内亲环素结合后再与钙神经磷酸酶结合来发挥免疫抑制作用,因其能显著降低器官移植后的急性排斥反应和感染发生率,提高移植物的存活率,故为临床上最广泛应用的免疫抑制剂.但CNI同时能引起肾血管收缩物质(血管紧张素Ⅱ、儿茶酚胺、血栓素A2、血小板活化因子、内皮素)和血管扩张剂(前列腺素、一氧化氮)之间的平衡失调,激活肾素-血管紧张素系统增加TGF-β的表达等对肾脏造成毒性作用.在各种免疫抑制剂中,CNI的肾毒性作用比较显著,其代表有环孢素(CsA)和他克莫司(FK506).CNI肾损伤主要以血管病变为主,Naesens等[1]认为CNI肾损伤可以分为两类:①急性CNI肾损伤,为可逆性、血流动力学介导的肾功能障碍,肾脏结构在组织学上没有发生改变.可表现为肾小管空泡形成和血栓性微血管病.②慢性CNI肾损伤,为不可逆性损伤,肾脏组织学结构发生改变.可表现为肾小球损伤(肾小囊增厚和纤维化,局灶性节段性肾小球硬化症),脉管损伤(小动脉玻璃样变性),小管-间质损伤(肾小管萎缩,间质纤维化).由于肾移植患者长期使用免疫抑制剂,免疫抑制剂造成的肾毒性应引起临床的足够重视.目前血肌酐、尿素氮、尿蛋白等检测指标不能很好地预测免疫抑制剂造成的肾毒性损伤,因此,我们对用于检测肾毒性损伤的生物标志物的研究进展进行综述.     

顺铂诱发大鼠肾损伤的实验形态学研究

顺铂(CP)已成为临床上最为常用的抗癌药之一，但其严重的肾毒性限制临床应用的连续性，同时也影响了治疗效果。有关肾毒性生化研究已有大量报道，但在大剂量用药后对肾损伤的实验形态学研究资料较少。本文对CP诱导的肾损伤进行了病理学研究，并对它肾损伤的机理进行探讨。     

循环热灌注大剂量顺铂治疗胃肠道肿瘤腹水的临床研究

目的 探讨循环热灌注大剂量顺铂治疗胃肠道肿瘤腹水的近期疗效,并对其并发症进行分析.方法 29例胃肠道肿瘤腹水患者通过腹腔内穿刺置双管建立循环双通路,先行单向灌洗放出腹腔积液;再行循环热灌注,并于灌注液中加入大剂量顺铂,观察其疗效及并发症.结果 本组29例患者接受腹腔内循环热灌注大剂量顺铂2个疗程后评价疗效,均未出现肾脏毒性、腹膜炎、耳毒性、肠粘连和肠梗阻,其中完全缓解9例,部分缓解16例,稳定3例,无效1例,有效率为86.2%,16 例（55.2%）患者出现胃肠道反应,9例（31.0%）患者出现白细胞下降.结论 腹腔内循环热灌注大剂量顺铂化疗治疗胃肠道肿瘤腹水安全、微创、不良反应少而轻、近期疗效明显.     

环孢素A肾毒性机制的研究进展

环孢素A(CsA)做为免疫抑制剂 ,明显改善了器官和骨髓移植者的生活质量和生存率。随着该药使用时间的延长和应用范围的扩展 ,对其副作用的认识也逐渐增加[1,2 ] 。CsA最突出的副作用就是肾毒性 ,但其发病机制尤其是分子学机制目前尚不清楚。本文就这一方面的进展作一综述。一、CsA肾毒性的形态学改变1.肾小管病变 :近曲小管上皮细胞对CsA的毒性作用尤其敏感 ,在形态学上表现为细胞内等大的空泡变性和坏死 ,小管上皮细胞内可见包涵体及微小钙化 ,病变以皮髓质交界处为重。电镜研究发现 ,包涵体为巨大的线粒体。虽然在肾缺血损伤时肾小管上…     

microRNA与糖尿病肾病肾小管损伤关系的研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的主要微血管病变之一,也是终末期肾衰竭的最主要原因,但尚缺乏有效的治疗手段.研究发现,肾小管损伤与DN中肾脏功能的恶化关系密切,而microRNA通过调节炎症反应、氧化应激、肾小管间质纤维化、抑制肾小管上皮细胞的衰老等多种调控机制参与了DN发展中的肾小...     

保元排毒丸对顺铂致LLC-PK1细胞毒性的保护作用

目的:观察保元排毒丸对顺铂所致猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)损伤的影响及超氧化物岐化酶(SOD)和一氧化氮(NO)的变化.方法:LLC-PK1细胞分4组培养,空白血清组采用不含药血清进行培养,含药血清组以保元排毒丸含药血清进行培养,模型组以不同浓度的顺铂进行培养,模型 含药血清组是在不同浓度的顺铂基础上予以10%保元排毒丸含药血清进行培养.在培养12 h和24 h时以MTT法测定OD值,计算细胞存活率.培养24 h时,取细胞液测定SOD和NO含量.结果:与空白血清组相比含药血清组OD值明显升高(P＜0.01),模型 含药血清组细胞存活率明显高于模型组(P＜0.01),模型 含药血清组细胞液NO含量明显低于模型组(P＜0.01).结论:保元排毒丸能促进LLC-PK1细胞的增殖,并具有抗氧化功能,能预防或降低顺铂引起的肾毒性.     

草酸钙结晶-肾小管细胞损伤机制研究进展

草酸钙是肾结石中最常见的化学成分。肾钙盐结晶是草酸钙结石形成的关键步骤之一,而近年来研究发现肾钙盐结晶形成与肾小管上皮细胞损伤密切相关。本文就草酸钙结石形成和肾小管上皮细胞损伤相互作用机制方面进行综述。     

卡维地洛改善顺铂致肾小管上皮细胞凋亡

目的 观察顺铂致急性肾衰竭(ARF)中肾小管上皮细胞凋亡情况及卡维地洛(carvedilol)对其影响,并探讨其作用机制。方法 雄性Wistar大鼠随机分为盐水对照组、顺铂组、卡维地洛对照组、卡维地洛治疗组。测定BUN、Scr、尿乙酰氨基葡糖苷酶(NAG)、肾组织丙二醛(MDA)与超氧化物歧化酶(SOD)的含量。苏木素-伊红染色(HE)观察肾脏病理改变。原位缺口末端标记法(TUNEL)与DNA电泳观察肾小管上皮细胞的凋亡。Western印迹检测caspase-3的蛋白表达。结果 顺铂组大鼠BUN、Scr、尿NAG升高;肾脏病理改变加重;大量的肾小管上皮细胞凋亡; MDA含量增加,SOD活性降低;caspase-3的蛋白表达增加。上述指标在卡维地洛治疗组均得到改善,BUN从(58.33±19.93)降至(28.74±19.62)mmol/L;Scr从(425.56±97.96)降至(253.90±134.87)μmol/L;NAG从(224.77±75.86)降至(137.52±26.38)U/L;MDA从(18.13±7.01)降至(9.74±1.68)nmol/mg蛋白;SOD从(30.05±12.20)升至(64.67±20.64)U/mg蛋白;caspase-3的蛋白表达从1.94±0.73降至1.25±0.52;细胞凋亡从(42.5±12.6)%降至(23.7±8.4)%;肾组织病理损害也明显改善。结论 肾小管上皮细胞凋亡是顺铂致ARF的重要原因之一。卡维地洛能减轻顺铂的肾毒性,降低肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与减少活性氧(ROS)的产生,部分抑制了caspase依赖的凋亡途径有关。     

不同剂量异丙酚对顺铂致大鼠肝细胞毒性的影响

目的 评价不同剂量异丙酚对顺铂致大鼠肝细胞毒性的影响.方法 健康雄性SD大鼠80只,体重200 ～ 250 g,3月龄,采用随机数字表法,将其随机分为8组(n=10)∶对照组(C组)、顺铂7.5 mg/kg组(Cis组)、异丙酚180 mg/kg组(P组)、脂肪乳15 ml/kg组(Ⅰ组)、顺铂7.5 mg/kg+脂肪乳15ml/kg组(CisI组)、顺铂7.5 mg/kg+异丙酚60 mg/kg组(CisP1组)、顺铂7.5 mg/kg+异丙酚120 mg/kg组(CisP2组)、顺铂7.5 mg/kg+异丙酚180 kg/mg组(CisP3组).每组均按体重予腹腔注射,C组、Cis组、P组和Ⅰ组分别单次注射生理盐水、顺铂、异丙酚和脂肪乳剂.CisI组、CisP组、CisP2组和CisP3组于注射异丙酚或脂肪乳剂后1 min注射顺铂.注射顺铂后24 h,采集下腔静脉血,全自动生化分析仪检测血浆谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)活性,取肝组织,于光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与C组比较,Cis组、CisI组、CisP1-3组血浆ALT和AST活性升高(P＜0.05),肝组织病理学损伤加重;Cis组、CisP1-3组血浆ALT和AST活性依次降低(P＜0.05),肝组织病理学损伤减轻.结论 异丙酚可呈剂量依赖性地减轻顺铂致大鼠肝细胞毒性.     

胃癌顺铂耐药细胞株的建立和基因表达谱分析

目的 建立人胃癌顺铂耐药细胞株,探讨其基因表达谱与顺铂耐药的相关性.方法 采用浓度梯度递增法诱导胃癌SGC7901细胞株,建立对顺铂耐药的SGC7901/DDP细胞株.应用Affymetrix基因芯片HG-U133 Plus 2.0筛选SGC7901和SGC7901/DDP的耐药相关的差异基因.结果 建立可耐受1.0 mg/L顺铂浓度的耐药株SGC7901/DDP,耐药指数22.85.应用电镜观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,噻唑蓝(MTT)检测检测药物敏感性,流式细胞术分析细胞周期.利用基因芯片筛选得到在耐药细胞株和敏感株中表达差异大于10倍的基因共107条,其中JNK1和JNK2为与耐药相关的明显上调基因.Western blot证实JNK的磷酸化活性形式P-JNK在耐药株中表达明显升高.SP600125抑制P-JNK表达后耐药蛋白P-gp表达明显减低.结论 高通量的基因芯片筛选得到大量有意义的与顺铂耐药相关的差异基因,P-JNK可成为逆转耐药的新的靶点.     

氨基酸对抗顺铂所致急性肾功能衰竭的研究

目的探讨８种Ｌ氨基酸合剂的肾功能保护作用及机理。方法雄性ＳＤ鼠静脉注射２ｍｌ氨基酸合剂后接受１０ｍｇ／ｋｇ顺铂,随后氨基酸以２ｍｌ／ｈ维持３小时,测定尿钠、钾浓度、肾小球滤过率（ＧＦＲ）及肾小管细胞线粒体呼吸功能。结果顺铂注射后３０分钟,尿钠、钾浓度分别增加５６％及２６倍。３小时后状态４呼吸升高１倍,状态３呼吸、呼吸控制率及氰化物解偶联呼吸分别减少４６％、７４％及４７％。该氨基酸合剂能增加ＧＦＲ８５％,改善肾小管钠、钾排泄异常,肾小管细胞线粒体呼吸障碍显著改善。结论该氨基酸合剂有明显的对抗顺铂肾毒性作用,增加ＧＦＲ,其机理可能通过改善受损细胞线粒体呼吸功能。     

三种植物来源抗肿瘤药物在晚期食管癌中的临床评价和药物经济学分析

目的:探究三种植物来源抗肿瘤药物在晚期食管癌化疗中的临床作用特点和经济学效果.方法:采用回溯法筛选了71例晚期食管癌例,分成3组.Ⅰ组NP方案(长春瑞滨NVB+顺铂DDP);Ⅱ组TD方案(紫杉醇TAXOL+顺铂DDP);Ⅲ组EAP方案(多柔比星ADM+依托泊VP-16+顺铂DDP).运用药物流行病学的疗效和药物经济学的成本-效果分析方法进行研究.结果:3组患者疗效间差别无显著性意义(P0.05);3组患者总成本间有显著意义(P＜0.05);3组患者白细胞异常、神经毒性、KPS(≥)10增加人数间差别有显著性意义(P＜0.05);其他指标人间差别无显著性意义(P＞0.05);药物流行病学和药物经济学原理敏感度分析:Ⅲ组比Ⅰ组、Ⅱ组的C/E值明显高.结论:NP方案疗效最具经济学意义.     

冬虫夏草通过抗氧化抗炎抑制细胞凋亡改善顺铂肾损伤

目的:观察顺铂(cisplatin,CP)小鼠肾损伤后肾组织氧化应激、炎症及细胞凋亡情况以及冬虫夏草干预的影响,探讨冬虫夏草的肾保护作用机制。方法:用腹腔注射cisplatin的方法建立顺铂肾损伤模型,28只8周龄C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、CP组、冬虫夏草组、冬虫夏草+CP组,每组7只。72 h后处死小鼠,检测各组小鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr),肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),HE染色观察小鼠肾小管间质病理变化,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡情况; ELISA的方法测定组织中TNF-α、IL-1β、IL-6。结果:与对照组及冬虫夏草相比,CP组与冬虫夏草+CP组小鼠的BUN、Scr及肾组织MDA水平增高(P0.01),肾组织SOD降低(P0.01),肾小管病理半定量计分显示小管间质损伤明显加重(P0.01),TUNEL阳性细胞表达增多(P0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6明显增加(P0.01);与CP组相比较,冬虫夏草+CP组的血清BUN、Scr及肾组织MDA水平下降(P0.01),肾组织SOD上升(P0.05),肾小管病理半定量计分显示冬虫夏草+CP组较CP组小管间质损伤明显改善(P0.01),TUNEL阳性细胞表达明显减少(P0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6明显减少(P0.01)。结论:顺铂肾损伤肾组织中MDA明显增高,SOD活性降低,TNF-α、IL-1β、IL-6及凋亡细胞显著增加,提示顺铂至急性肾损伤与其诱导氧化应激、炎症及细胞凋亡有关。冬虫夏草干预后肾组织中MDA明显降低,SOD活性升高,TNF-α、IL-1β、IL-6及凋亡细胞显著减少,提示冬虫夏草可能通过抑制氧化应激、炎症及肾小管上皮细胞凋亡而达到肾保护作用。