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酵母源性葡萄糖耐量因子(GTF)含量测定方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
酵母源性葡萄糖耐量因子为铬和小分子蛋白的复合物。测定其含量应包括2个步骤:第一有效地从菌体中提取出GTF;第二检测GTF中有机铬的含量。文中以葡萄糖耐量因子(GTF)高产酵母菌株为研究对象,研究不同提取方法提取GTF的条件及效果,比较了2种消化方法对测定结果的影响,对GTF提取液的消化方式进行了改良,确定了GTF测定的最佳方法和参数。试验结果表明:0.1g左右的菌体悬浮于10mL0.1mol/L的氨水,在37℃、200r/min振荡提取3h,离心收集上清液进行微波消解。用火焰原子吸收光谱法分别测定上清液中铬的含量、提取后菌体中残余铬的含量以及菌体中总铬含量。测定结果显示残余铬的理论数据与测定实际结果比较吻合,表明该测定方法可有效的测定和评价酵母中GTF含量。 相似文献
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酵母源葡萄糖耐量因子(glucose tolerance factor,GTF)可有效调节糖代谢、提高胰岛素与受体的亲和力、改善脂肪代谢。但GTF中的铬的价态不清严重限制了它在辅助降糖保健食品的中应用。实验优化了氨水联合有机溶剂提取GTF的方法。通过两级分子筛联用对GTF进行纯化,得到纯度较高的GTF。采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)联用电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)技术对GTF中铬价态进行分析鉴定。结果表明,富铬酵母粉经0.1 mol/L氨水振荡提取4 h后,上清液再经30%乙醇静置20 min,离心收集上清液。该粗提液中铬含量为133μg,铬蛋白比为5.015;相比与氨水提取法(铬蛋白比0.804),氨水联合有机溶剂法的铬蛋白比提高了6倍,提取效率提高极大。GTF粗提液再经两级葡聚糖凝胶层析柱分离纯化,得到了一个与铬峰重合的蛋白峰。利用HPLC-ICP-MS对其进行铬价态分析,图谱显示GTF样品中铬出峰的时间为31~90 s,出峰时间与Cr(Ⅲ)的出峰时间一致,有且只有一个铬峰,GTF中的铬是以Cr(Ⅲ)形态存在,无Cr(Ⅵ)存在。该结果为GTF保健食品或安全膳食铬补充剂的开发提供了理论依据。 相似文献
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以高铬酵母菌粉为研究对象,采用温和的纯化方法,通过氨水提取高铬酵母菌粉中的酵母菌葡萄糖耐量因子(glucose tolerance factor,GTF),联用SuperdexTM75和Sephadex G25凝胶过滤层析对提取物进行粗分离,然后用反相高效液相色谱对提取物进行再分离,从而对GTF进行高效纯化研究。将GTF纯化品作用于胰岛素抵抗型3T3-L1脂肪细胞,通过检测细胞葡萄糖消耗量,分析GTF纯化品对细胞葡萄糖代谢调节活性。研究表明,GTF纯化品可以有效提高胰岛素抵抗型3T3-L1脂肪细胞葡萄糖的消耗。可见,经过多步柱层析纯化后,可以得到具有葡萄糖代谢调节活性的GTF纯化品 。 相似文献
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观察葡萄糖耐量因子(GTF)功能牛奶对糖耐量低减(IGT)小鼠的干预作用,为研究开发有效干预IGT的保健牛奶提供依据。方法 除空白对照组外,模型对照组、二甲双胍组、富铬酵母组、普通牛奶组和GTF功能牛奶低、中、高剂量组采用D-半乳糖腹腔注射法诱导IGT,造模14d后,同时灌胃给药42d,观察空腹血糖、糖负荷后2h血糖、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数。结果 GTF功能牛奶低、中、高剂量组糖负荷后2h血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),GTF功能牛奶中、高剂量组甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),GTF功能牛奶中、高剂量组糖负荷后2h血糖、甘油三酯、总胆固醇与富铬酵母组相比差异有统计学意义(P<0.05),GTF功能牛奶高剂量组空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数与富铬酵母组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GTF功能牛奶可降低IGT小鼠的血糖及血脂水平,改善胰岛素抵抗,且经过奶牛的生物转化作用,其生物活性进一步提高。 相似文献
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对富铬酵母的特点、生理功能作了简单论述,并且概述了富铬酵母中铬的含量分析及其性质分析的研究概况。 相似文献
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在1 mol/L硫酸-磷酸(1∶1混合)溶液中电解0.5 mol/L Fe2 (SO4)3溶液,使Pt电极上产生Fe2+,与经过消化氧化后样品中的6价铬发生氧化还原反应,采用永停法控制滴定终点,根据电解定律计算铬的含量.该方法测定结果与光度法一致,加标回收率在99%~103%之间,可用于富铬酵母中铬含量的测定. 相似文献
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植物内生菌抗菌活性物质研究进展 总被引:33,自引:0,他引:33
讨论了利用植物内生菌作为抗菌活性物质重要来源的基本机制 ,简要介绍了内生菌产生抗菌活性物质的研究进展 ,同时提出了利用内生菌筛选抗菌活性物质的策略。 相似文献
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应用先进材料学分析的手段并结合生物电镜技术,对酵母生物富铬过程中细胞的变化以及铬在细胞中分布进行探究,揭示酵母富铬机理。以不同剂量的铬处理酵母细胞,利用扫描电子显微镜、透射电子显微镜观察酵母细胞吸附Cr3+形成GTF过程中细胞形态变化;利用能谱分析仪-透射电子显微镜(EDS-TEM)、飞行时间二次离子质谱仪(TOF-SIMS)分析铬在酵母细胞中的分布;采用EDTA洗脱法和原生质体制备法对酵母细胞进行组分分离,用火焰原子吸收法测定其各部位的铬含量,印证能谱及质谱的测定结果。结果表明:随着培养基中Cr3+质量浓度的升高,酵母细胞形状由规则的椭圆形变成长轴拉长的椭圆形;并且在Cr3+质量浓度为500,800μg/mL时,表面出现沉淀,内部出现空泡。当Cr3+质量浓度为500μg/mL时,酵母细胞吸附的总铬和有机铬含量均最高,分别达到1 803.87μg/g·DCW(Dry Cell Weight)和1 133.91μg/g·DCW。其中吸附的总铬有14.43%集中在细胞壁,另外85.57%集中在原生质体,且原生质体吸附的铬中有73.29%以有机铬的形式存在,结合原生质体与细胞壁的质量比约为5∶1,可得铬在YSI-3.7细胞壁和原生质体空间分布均匀。EDS-TEM和TOF-SIMS的结果,进一步验证了这个结论。 相似文献
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利用效液相色谱技术,对通风发酵过程中的啤酒酵母细胞的胞外、胞内6种有机酸含量的动态变化进行了定性定量跟踪检测,研究结果表明,通风培养的酿酒酵母代谢产酸时,细胞胞外、胞内有机酸的动态变化存在差异性,胞外有机酸含量远大于胞内含量;酵母细胞对有机酸代谢存在着精确保守性和经济效能性,在发酵后期阶段(〉84h),大部分有机酸含量逐步降低;发酵终点时,胞外、胞内乳酸、苹果酸含量较高。摘要:利用高效液相色谱技术,对通风发酵过程中的啤酒酵母细胞的胞外、胞内6种有机酸含量的动态变化进行了定性定量跟踪检测.研究结果表明,通风培养的酿酒酵母代谢产酸时,细胞胞外、胞内有机酸的动态变化存在差异性,胞外有机酸含量远大于胞内含量;酵母细胞对有机酸代谢存在着精确保守性和经济效能性,在发酵后期阶段(〉84h),大部分有机酸含量逐步降低;发酵终点时,胞外、胞内乳酸、苹果酸含量较高。 相似文献