抗体药物研究进展

抗体作为药物用于疾病治疗已有很长历史，其间曾几经周折，但随着抗体立体结构的阐明和分子生物学技术的发展，人们可以利用DNA重组技术进行鼠抗体人源化改造、构建合成或半合成抗体库及噬菌体抗体库，从中获得人源抗体，甚至利用转基因小鼠获得人源抗体。同时人们也可以利用分子生物学技术改良抗体性能，使之有效地到达靶部位，或提高抗体的亲和力，或提高抗体的效应功能。因此，在对疾病发生机制进一步了解的基础上，治疗性抗体前景看好，它们将在人类疾病的治疗中发挥重要作用。     

抗体工程与病理学

结合抗肝癌基因工程抗体的制备，概述了抗体工程的工作内容及其与病理学的关系，抗体工程的主要目的之一是制备人的或接近人的，而能在病人体内应用的抗体，一方面它可以来源于单克隆抗体的改造，首先克隆出鼠抗体可变区的轻链及重链成为小抗体或重组成单链抗体及人鼠嵌合抗体等基因工程抗体。另一方面，也可以用免疫过的小鼠脾细胞或者人的淋巴细胞建立鼠、人抗体库，然后抗原从抗体库中筛选出鼠或人的各种类型抗体。鉴于抗体对靶细胞一般只起导向作用，要携带效应分子才发挥杀伤肿瘤细胞的作用或其它作用。常用的“弹头”有毒素及细胞因子等。所以必须将这种基因与抗体基因融合在一起才能表达有作用的融合蛋白。抗体工程还包括抗体的增效或抗体的成熟，以及对照人抗体的结构进行置换，使抗体人源化等。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

北京地区疑难交叉配血意外抗体特异性分析

意外抗体是指ABO血型系统以外的抗体，即非抗-A、抗-B血型抗体，包括同种抗体和自身抗体，是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病（HDN）重要的因素。由于人种、民族和地域不同，意外抗体的特异性和分布也不同，在发达国家已基本实现主要血型系统的同型输注，产生意外抗体的病例相对较少。目前国内仅要求ABO血型和RhD血型的同型输注，因此产生意外抗体的病例相对较多[1]。本室对2012年1月至2014年3月北京地区各医院抗体筛选阳性送本室进行疑难配血的标本进行抗体筛选和抗体鉴定，现将特异性抗体的分布情况进行分析，报告如下。     

HLA抗体的临床意义及检测技术的研究进展

HLA抗体发现迄今至少有35年，并被证实与多种移植失败密切相关。妊娠、输血、移植和细菌感染所致的交叉致敏等，都会产生各种抗体，这些抗体主要为抗HLA的抗体，少量为红细胞抗体和非HLA抗体。     

风湿性疾病的抗核抗体谱检测及意义

已知自身抗核抗体对不同风湿性疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。本文采用免疫印迹技术（IBT），从分子水平对245例各种风湿性疾病和38份正常人血清进行抗可提取性核抗原（ENA）抗体检测，并同时测定抗双链DNA抗体，抗核抗体作对照。结果表示，抗Sm,抗核糖体，抗双链DNA抗体是系统红斑狼疮的具有高度特异性的自身抗体；而抗Scl-70,抗Jo-1,抗SSB抗体则分别是进行性系统性硬化症，多发性肌炎，皮肌炎，干燥综合征的标记性抗体。抗核抗体在抗Sm抗体阴性的红斑狼疮患者中，阳性率显著高于抗双链DNA抗体，所以对这类患者的诊断有所帮助。     

不规则抗体筛检在临床输血中的意义

目的检测不规则抗体及抗体鉴定在临床输血中的意义。方法对本院输血前患者做不规则抗体筛检，抗体阳性者进一步鉴定。结果对3765例输血前标本进行抗体检测其阳性率为0．18％，其中抗-D2抗体2例，抗-E抗体3例，抗Ec抗体2例。结论对输血前患者进行不规则抗体筛选的临床意义在保证临床输血安全、减少溶血性输血反应中具有重要意义。     

术前艾滋病毒抗体、丙型肝炎抗体和梅毒螺旋体抗体检测的临床意义

目的探讨患者术前检测艾滋病毒抗体、丙型肝炎抗体和梅毒螺旋体抗体的临床意义。方法采用ELISA方法对4124例孕产妇及外科手术前患者做艾滋病毒抗体、丙型肝炎抗体、梅毒螺旋体抗体的检测。结果4124例检测样本中艾滋病毒感染阳性率为0．048％，丙型肝炎病毒感染阳性率为1．6％，梅毒螺旋体感染阳性率为0．58％。结论手术前及孕产妇做艾滋病毒抗体、丙型肝炎抗体和梅毒螺旋体抗体的检测，对避免院内感染和交叉感染，防止病毒进一步传播，有着重要的临床意义。     

人源性抗地高辛单链抗体（scFv）及diabody的获取

目的：从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗地高辛单链抗体（scFv），并构建双价抗体（diabody）．方法：以固相化的Dig对构建的大容量噬菌体抗体库进行筛选，4轮后挑取集落，用ELISA法鉴定其特异性，并对抗Dig阳性抗体基因进行DNA指纹分析及测序分析，选取活性好的抗体基因进行改造，构建diabody．结果：在抗体库的筛选过程中可见到明显的富集现象，获得4株可与Dig特异性结合的人源单链抗体，经DNA指纹分析及测序分析证明为不同抗体基因，     

自身抗体的检测在SLE患者中的诊断价值

目的探讨自身抗体在SLE的诊断价值，旨在寻找检测SLE的特异性血清学诊断。方法ANA、抗ds—DNA抗体用问接荧光免疫法检测，ENA用斑点法进行测定。结果ANA的阳性率为90％，特异性为35．5％；抗ds—DNA抗体阳性率为50％，特异性为100．0％；ENA检测包括3种抗体，抗RNP／Sm抗体阳性率为67％，特异性为91．9％；抗SSA抗体阳性率为80％，特异性为18．8％；抗SSB抗体阳性率为27％，特异性为73-3％。结论抗ds—DNA抗体与抗u1RNP／Sm抗体是SLE检测的标志性抗体。     

HLA—Ⅱ血清学分型与微量SSP法基因分型的比较分析

目的 验证微量序列特异性引物（SSP）技术进行HLA－Ⅱ类移植配型的准确性并探讨血清学分型错误发生的原因。方法 采用聚合酶链反应结合微量SSP技术（简称微量PCR－SSP法）以及单克隆抗体血清学分型技术对血清样品进行HLA分型并比较其结果。结果 （1）微量PCR－SSP法检测的110例样本中，99例检出HLA－DR的396个等位基因、11例检出HLA－DQ的22个等位基因，检出10％的单倍型个体；（2）两种方法对比研究发现单克隆抗体血清学分型检出错误和漏检率较高，其误差在DR和DQ分别为38．81％和50．75％；（3）错误发生和易混淆的抗原为：DR15／16、11／12、13／14、8、12和DQ5／6、8／9。结论 微量SSP法可以准确检定血清学易漏检和发生错误的抗原等位基因。     

HLA-Ⅱ血清学分型与微量SSP法基因分型的比较分析

目的验证微量序列特异性引物(SSP)技术进行HLA-Ⅱ类移植配型的准确性并探讨血清学分型错误发生的原因。方法采用聚合酶链反应结合微量SSP技术(简称微量PCR-SSP法)以及单克隆抗体血清学分型技术对血清样品进行HLA分型并比较其结果。结果(1)微量PCR-SSP法检测的110例样本中,99例检出HLA-DR的396个等位基因、11例检出HLA-DQ的22个等位基因,检出10%的单倍型个体;(2)两种方法对比研究发现单克隆抗体血清学分型检出错误或漏检率较高,其误差在DR和DQ分别为38.81%和50.75%;(3)错误发生和易混淆的抗原为:DR15/16、11/12、13/14、8、12和DQ5/6、8/9。结论微量SSP法可以准确检定血清学易漏检和发生错误的抗原等位基因。     

HLA与组织配型

HLA历史、HLA成就和HLA在器官移植组织配型中的技术应用早期重要的发现是由科学家们各自独立地作出的 ,但最有力地推动这一领域发展的是一种学术交流特有方式———“组织相容性专题讨论会 (InternationWorkshop)” ,在专题讨论会中 ,学者们通过演示各自实验室的研究技术和心得     

ABO血型反定型梯型微板法的探讨

目的建立梯型微板法ABO血型反定型检测方法。方法随机抽取A、B、O、AB型血样各10份,采用混合血样倍比稀释,确定凝集与非凝集灰区值,根据已确定的最佳条件和灰区值进行相关分析。结果结果重复性符合率100％,灵敏度可达到与试管法相同效价的检出能力,准确性达99．9％,脂血血样抗干扰试验一次判读正确率100％,溶血标本对结果判读无影响。结论梯形微板法能够很好地完成普通血样ABO反定型的检测,对弱凝集血样检测的灵敏度也很高。     

红色毛癣菌种内分型

目的：建立一种快速、简单可重复的红色毛癣菌种内分型方法。方法：PCR扩增红色毛癣菌核糖体的非转录间隔区(NTS)的两个串联重复亚单位TRS-1和TRS-2区，进行种内分型。结果：利用特殊的引物扩增63株红色毛癣菌TRS-1和TRS-2区，共产生8种特征性带型。结论：这种PCR方法产生的特征性的指纹图提供了一种快速、稳定、简便的分子生物学种内分型方法，可应用于红色毛癣菌感染的流行病学研究。     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。