神经型尼古丁乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病中的神经保护作用

老年性痴呆主要分为三种:一种叫阿尔茨海默病(AD),其最为常见,大约占68%;第二种叫血管性痴呆(VD),是一种由于血供不足引起的不同大脑区域损伤所致的渐进性认知障碍;第三种是以上两种病症并存,叫混合性痴呆。AD是一种主要在老年期发生的以进行性痴呆为主要特征的神经元退行性变     

神经型尼古丁乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病发病机制中的作用

阿尔茨海默病(AD)是继心血管疾病、癌症和脑卒中之后人类第4位死因的疾病,严重危害着老年人的身体健康和生活质量,病理学上以细胞外老年斑 (SPs)形成及神经细胞内神经原纤维缠结(NFTs)为主要特征.导致 AD 的原发因素尚不明确,其发病机制十分复杂,一般认为与遗传、环境、年龄、代谢、性别等因素有关.本文就AD发生发展过程中神经型尼古丁乙酰胆碱受体(nAChRs)的作用机制以及两者的关系进行综述和讨论.     

α3神经型尼古丁乙酰胆碱能受体在阿尔茨海默病中的抗炎作用

目的 探讨α3nAChRs在阿尔茨海默病(AD)中的抗炎作用.方法 应用Western印迹,ELISA及实时定量PCR检测各组细胞核因子(NF-κBp65)和炎性趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白及mRNA表达情况.结果 与对照组比较,淀粉样蛋白(Aβ)处理α3nAChRsiRNA SH-SY5Y细胞NF-κBp65、TNF-α蛋白及mRNA表达增加(P＜0.05);MCP-1、MIP-1α表达变化不明显.结论 Aβ引起SH-SY5Y α3nAChR siRNA细胞NF-κBp65、TNF-α蛋白及mRNA表达升高,α3nAChR可能具有一定抗炎作用.     

Notch信号通路阻断对SH-SY5Y细胞α3神经型尼古丁受体水平的影响

目的研究Notch信号通路阻断对SH-SY5Y细胞α3神经型尼古丁受体(nAChR)水平的影响。方法用Notch信号通路阻断剂DAPT阻断细胞Notch信号通路后用Real Time PCR和Western印迹方法分别检测细胞中α3神经型尼古丁受体mRNA和蛋白水平的变化。结果 Notch信号通路阻断之后α3神经型尼古丁受体蛋白和mRNA表达都增加。结论 DAPT能抑制SH-SY5Y细胞Notch信号转导通路,Notch信号转导通路的活化可能与神经细胞α3神经型尼古丁受体的正常分泌及胆碱能信号传递密切相关。Notch信号通路阻断也可能通过减少γ-分泌酶导致SHSY5Y细胞中Aβ1⁴2/43的表达量减少,最终通过反馈调节导致α3神经型尼古丁受体水平表达增加。     

SH-SY5Y神经细胞中α3尼古丁受体基因表达沉默对β分泌酶蛋白表达的影响

目的 研究α3神经型尼古丁受体(nAChR)基因沉默对β分泌酶(BACE)蛋白表达的影响.方法 稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒及空质粒的SH-SY5Y神经细胞与正常对照组细胞用Real time-PCR和Western印迹法检测α3 nAChR mRNA表达和蛋白水平表达,以评价RNA的干扰效率;用蛋白质印迹方法 分别检测细胞中β分泌酶两个亚型(BACE1和BACE2)蛋白表达水平的变化.结果 稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒的细胞克隆株,与空质粒和正常对照组相比BACE1蛋白表达水平增加,BACE2蛋白表达水平减少.结论 α3 nAChR可以通过增加BACE2蛋白表达水平及减少BACE1蛋白表达水平,影响Aβ生成从而减少Aβ的神经毒性作用,发挥神经保护作用.     

α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对小鼠海马组织突触相关蛋白的影响

目的探讨特异性激动小鼠α7神经型尼古丁受体(α7n AChR)水平对海马组织中突触相关蛋白表达的影响。方法选取6月龄非转基因C57雄性小鼠32只,随机分为对照组(Control),腹腔注射0.5、1.0 mg/kg、3.0 mg/kg PNU282987组各8只。采用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western印迹)法分别测定小鼠海马组织中囊泡相关蛋白突触素(Syn)、突触小体相关蛋白(SNAP)-25和突触后致密物(PSD)-95 mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,1.0 mg/kg PNU282987组、3.0 mg/kg PNU282987组中突触相关蛋白Syn、PSD-95、SNAP-25的mRNA和蛋白表达水平均显著增高。结论特异性激动小鼠α7n AChR能够使海马组织中突触相关蛋白水平表达增加。这可能提示了α7n AChR与突触密切相关,这可能与其神经保护作用有关。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体与气道黏液高分泌

气道黏液高分泌足慢性气道疾病如慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、肺囊性纤维化、支气管扩张等共同而重要的病理特征之一,与气道疾病的发生、发展转归有密切关系.过氧化物酶体增殖物激活受体γ是一类由致密分子构成依赖配体激活的核转录因子.近年研究认为,过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体能拮抗气道炎症反应,能对气道黏液分泌发挥调节作用.     

阿尔茨海默病与Aβ及其衍生物的关系研究进展

阿尔茨海默病(AD)神经病理学特征为中枢神经纹状体和新皮质产生大量神经炎性斑块(NPs)和神经纤维缠结(NFTs),痴呆是由于大脑患病处神经元及突触死亡所致,NPs为一复杂的细胞外结构,Aβ纤维蛋白淀粉样沉积形成核状,周围由活性星状细胞、神经胶质细胞和营养障碍的突触包绕,而NFTs则聚集在细胞内,主要由异常过度的高度磷酸化tau蛋白双螺旋细     

α7神经型尼古丁受体基因抑制对SH-SY5Y细胞Tau和配对螺旋样纤维蛋白1水平的影响

目的探讨α7神经型尼古丁受体(n AChR)基因沉默对SH-SY5Y细胞Tau和配对螺旋样纤维蛋白(PHF)1水平的影响及α7n AChR在阿尔茨海默病(AD)发病机制中的作用。方法 SH-SY5Y细胞转染α7 n AChR shRNA重组质粒,用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别测定细胞中α7 n AChR在mRNA和蛋白表达水平的变化;用Western印迹法检测细胞Tau和PHF1蛋白水平。结果α7 n AChR基因沉默组与空质粒组相比,α7 n AChR mRNA和蛋白质表达水平分别降低了94%(P0.01)和82%(P0.01);Tau蛋白水平升高了65%(P0.01);PHF1蛋白水平升高了58%(P0.05)。结论α7 n AChR基因表达抑制后Tau和PHF1蛋白水平明显升高,Tau蛋白和PHF1蛋白表达增加直接促进神经元纤维缠结的形成,这可能与AD的病理进程有一定关系。     

过氧化物酶体增殖物活化型受体γ在抑制大鼠心肌肥厚中的作用

目的　探讨过氧化物酶体增殖物活化型受体γ(peroxisomeproliferator activatedreceptorγ ,PPARγ)在大鼠心肌肥厚过程中的作用。方法　新生大鼠的原代心肌和非心肌培养细胞 ,以血管紧张素Ⅱ诱导建立体外心肌肥厚模型 ,并用不同浓度的PPARγ内、外源性激活物 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )和吡格列酮作用细胞。采用RT PCR法检测心肌肥厚特征性基因心钠肽和脑钠肽mRNA的表达 ,以MTT比色法和3 H TdR掺入实验检测非心肌细胞增殖情况 ,以3 H 亮氨酸掺入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并用软件分析心肌细胞表面积。结果　血管紧张素Ⅱ诱导后 ,心肌细胞表面积、心钠肽和脑钠肽mRNA的表达以及蛋白合成速率增加 ;非心肌细胞增殖活跃 ,但心钠肽和脑钠肽mRNA的表达没有显著变化。PPARγ激活物 15d PGJ2 和吡格列酮可以逆转这些变化 ,同时下调非心肌细胞的心钠肽和脑钠肽mRNA的表达 ,并呈一定的剂量依赖性。结论　PPARγ途径活化后参与抑制大鼠心肌肥厚过程     

过氧化物酶体增殖物活化受体-γ在血管疾病中的多效性作用

<正>过氧化物酶体增殖物活化受体γ(p e r o x i s o m e proliferator-activated receptor gamma,PPAR-γ)对脂质代谢、细胞分裂和凋亡等均具有调节作用。近年来,越来越多的研究表明PPAR-γ活化在血管疾病中发挥重要作用,有抗炎、抗动脉粥样硬化(therosclerosis,AS)、抗氧化、抗纤维化等作用,可能成为治疗血管疾病的新靶点[1]。本文就     

过氧化物酶体增殖物活化受体-γ在血管炎症中的作用

<正>动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是公认的一种炎症性疾病,其病理过程以动脉管壁持久的慢性炎症为特点。随着高血压、糖尿病和肥胖等危险因素的逐渐增多,控制血管炎症成为减少死亡率和改善公共健康的新的治疗靶点。而过氧化物酶体增殖物活化受体-γ(peroxisome proliferatoractivated receptor gamma,PPAR-γ)在这一过程中发挥了重要     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子-1α在脑缺血中的神经保护作用

过氧化物酶体增殖激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)γ辅助活化因子-1α(PPARγ coactivator-1α,PGC-1α)是PPARγ的转录辅助活化因子.PGC-1α能与许多不同转录因子结合,在不同组织和生物反应过程中发挥众多功能.最近的研究显示,PGC-1α信号转导通路具有神经保护作用.文章就PGC-1α在脑缺血中的神经保护作用及其可能机制进行了综述.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体噻唑烷二酮类在脑缺血中的神经保护作用

噻唑烷二酮类物质为过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)的合成配体.PPARγ对多种类型组织均有一定的保护作用,研究涉及的领域包括糖及脂类代谢、癌症、动脉粥样硬化等.目前,噻唑烷二酮类物质在中枢神经系统疾病中的作用备受关注,如脑梗死、多发性硬化、阿尔茨海默病等.文章综述了脑缺血后PPARγ配体噻唑烷二酮类对抑制神经胶质细胞增殖、促进血管生成以及对抗神经元凋亡的作用.     

SH-SY5Y细胞α7尼古丁受体基因抑制对APP代谢的影响

目的采用RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)中α7神经型尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)基因表达,了解对β淀粉样前体蛋白(APP)代谢中的γ-分泌酶两个重要组分早老蛋白(PS)及单过性跨膜蛋白(NCT)水平的影响。方法 SH-SY5Y细胞转染针对α7nAChR的小干扰RNA(siRNA),用实时PCR法和Western印迹法分别测定细胞中α7 nAChR、PS及NCT在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果转染α7 nAChR siRNA后,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平明显降低;PS蛋白mRNA及蛋白水平均升高,而NCT水平无明显变化。结论α7 nAChR基因表达抑制后γ-分泌酶组分之一PS的水平明显升高,这种改变可能与α7 nAChR基因表达抑制后β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生增多有关,可能与阿尔茨海默氏病(AD)的发病有一定的关系。     

γ-分泌酶组件NCT在痴呆小鼠中枢神经系统的分布及表达

目的 研究γ-分泌酶组件蛋白单过性跨膜蛋白(NCT)在APP/PS1双重转基因痴呆小鼠中枢神经系统(CNS)中的分布与表达及与阿尔茨海默病(AD)的关系.方法 对APP/PS1双重转基因AD模型种鼠交配后产下的子代进行基因分型,分别用免疫组化、免疫荧光双标及激光共聚焦等技术,检测NCT在APP/PS1双重转基因痴呆小鼠及同窝野生型小鼠CNS内的分布及表达.结果 NCT广泛分布于成年AD小鼠CNS各区域,包括大脑新皮质、海马、嗅脑、丘脑、纹状体、小脑、脑干和脊髓等;而神经元外Aβ的沉积选择性分布于CNS的大脑皮质和海马等区域;大脑皮质及海马内的NCT阳性神经元数量要多于Aβ阳性神经元,且神经元内的Aβ与NCT出现了共存;同时,大脑皮质和海马内的NCT与PS1分布趋势高度一致,且在神经元内出现了共存.痴呆型与同窝野生型新生小鼠大脑皮质内NCT阳性神经元排列致密;随着小鼠的发育,脑组织单位面积内NCT阳性神经元数量逐渐减少;但痴呆小鼠脑内NCT阳性神经元的细胞膜和细胞质均浓染;而同窝野生型小鼠脑内的NCT阳性神经元仅细胞膜周围染色较深,而胞质染色极浅甚至不着色.结论 NCT在痴呆小鼠和正常野生型小鼠脑内的分布及表达出现差异,可能与Aβ的生成和AD的发生相关.     

过氧化物酶体增殖因子活化受体γ与缺血性卒中

过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPARs)属于核受体超家族中的一员,参与许多生理调控如糖代谢、脂肪代谢、细胞生长及分化。PPAR-γ则与细胞葡萄糖摄取、抗动脉粥样硬化和免疫调控有关,PPAR-γ的活化有效减轻了神经变性和脑内的炎性反应。本文就PPAR-γ在缺血性脑卒中病理损伤过程中发挥的神经保护作用相关研究作一综述。     

SH-SY5Y神经细胞中尼古丁受体α3亚单位基因表达抑制与APP代谢的关系

目的 用RNA干扰技术抑制神经型尼古丁受体(nAChR) α3亚单位基因表达并观察对神经细胞淀粉样蛋白前体蛋白(APP)代谢的影响.方法 设计并体外合成α3 nAChR的特异性编码siRNA序列的寡核苷酸,退火后克隆至pSliencer 3.1-H1 neo质粒中,构建重组质粒α3 nAChR pSilencer 3.1-H1 neo.将α3 nAChR pSilencer 3.1-H1 neo转染SH-SY5Y细胞,用含G418的培养液筛选,挑选阳性克隆后采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测转染细胞中α3 nAChR mRNA 及蛋白表达水平的变化;并测定分泌型 APP、总 APP 蛋白表达的变化.结果 成功构建α3 nAChR siRNA表达质粒,转染后经G418筛选获得稳定转染重组质粒的细胞克隆株,与对照组相比,α3 nAChR mRNA 及蛋白表达量均降低(抑制率分别为98%和66%);分泌型APP表达下降,总APP水平比较表达水平无显著性差异.结论 α3 nAChR siRNA表达质粒能特异性抑制α3 nAChR 基因表达,α3 nAChR可能通过增加α-分泌酶对APP的切割发挥神经保护作用.     

胰岛素和胰岛素样生长因子-1及其受体在阿尔茨海默病发病中的作用

<正>至2012年为止,美国大约有540万阿尔茨海默病(AD)患者,并且每69 s就会产生1例AD患者,到2050年,这个时间可能缩短至33 s〔1〕。流行病学调查发现糖尿病患者的AD发病率较无糖尿病者明显升高〔2〕。Akiko等〔3〕研究证实糖尿病患者的认知功能与大脑内的胰岛素信号受损有关。在AD的离体实验及动物实验中均发现胰岛素受体(IR)和胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)分布异常〔4〕。AD患者的尸解发现大脑中IR、IGF-1R、胰     

SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体基因过表达对钙调蛋白表达的影响

目的构建稳定的α7神经型尼古丁受体(α7 nAChR)过表达的神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,研究α7 nAChR过表达对钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法设计α7 nAChR引物并扩增α7 nAChR特异性编码的核苷酸序列,退火后克隆至pc DNA 3.1质粒,构建α7 nAChR-pcDNA 3.1重组质粒。将α7 nAChR-pcDNA 3.1重组质粒转染SH-SY5Y细胞,用含G418的培养液筛选,挑选阳性克隆后采用实时荧光定量(Realtime)PCR和蛋白质印迹方法检测转染细胞中α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化,蛋白质印迹方法检测CaM表达水平的变化。结果构建的α7 nAChR mRNA过表达质粒成功转入SH-SY5Y细胞后,经G418筛选获得稳定转染细胞克隆株,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达量分别增加了533%和110%,CaM表达量增加了43%。结论成功构建了α7 nAChR mRNA过表达的SH-SY5Y细胞株,α7 nAChR表达上调增加了CaM表达水平,这可能与阿尔茨海默病的发病有一定的关系。