以叶片为外植体的多花黄精组织培养

以叶片为外植体建立多花黄精组织培养快速繁殖技术体系,通过添加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D和蔗糖的MS培养基中培养,筛选愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导、丛生芽生根诱导的最佳培养基。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),愈伤组织诱导率最高为53.89%,生长情况最好;愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),增殖倍数7.87,生长情况相对最好;丛生芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 4.0mg·L~(-1),出芽率最高为86.11%,生长情况最好,芽高最大为1.70cm;丛生芽生根诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg·L~(-1),生根率最高为66.67%,根数、根长和根粗最好,分别为31.0条、0.46cm和1.100mm。以叶片为外殖体可短时间获得大量多花黄精组培苗,解决种植生产上的种苗短缺问题。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),B组:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),C组:MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1),D组:MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L~(-1)中进行生根培养。     

走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

红掌幼叶诱导组织培养技术研究

红掌深受市场青睐,但其组织培养繁殖技术未成体系。本研究以红掌‘特伦萨’的嫩叶为外植体,MS为基础培养基,探究添加6-BA、2,4-D和NAA对愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导和丛生芽生根的影响。结果表明,愈伤组织诱导的最佳培养基是1/2MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.5mg/L;愈伤组织增殖的最佳培养基是1/2MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.2mg/L;丛生芽诱导的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L;丛生芽生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 0.2mg/L;生根后的幼苗,移栽成活率高达100%。以期为红掌种苗扩繁提供参考。     

不同激素配比对白及愈伤组织诱导、增殖和分化的影响

以白及为试材,以MS和1/2MS为基本培养基,研究了愈伤组织诱导、增殖和分化培养基中的最佳激素种类和浓度配比。结果表明:在MS中添加6-BA 1 mg·L~(-1)和2,4-D3mg·L~(-1)时白及愈伤的诱导率最高,达89.89%。2,4-D是诱导白及愈伤生成的关键激素,而在基本培养基中单添加6-BA时并不能诱导愈伤组织的生成,同时添加2,4-D和6-BA能有效促进愈伤的诱导,且愈伤诱导率随着2,4-D浓度的增加而逐渐增加,但优质愈伤率也随之降低。添加6-BA 0.1mg·L~(-1)和2,4-D 2mg·L~(-1)的增殖培养基中愈伤细胞的增殖率最高,30d的增殖倍数达7.457。在分化培养基中添加NAA和TDZ有利于白及愈伤组织分化,分化率随着二者浓度的增加而增加,且NAA的促分化效果优于TDZ。MS+2,4-D 2mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1)为最佳分化培养基,分化30d时其分化率为86.67%。     

不同生长调节剂对白刺花叶片愈伤组织诱导质量分析

以白刺花无菌苗叶片为试材,利用双因素正交实验设计,研究了不同生长调节剂对愈伤组织诱导效果的影响,以期筛选最佳的诱导培养基,为白刺花组培研究提供参考基础。结果表明:在MS培养基上,2,4-D与6-BA组合可诱导出较疏松型的愈伤组织,愈伤组织表面有瘤状突起且部分愈伤上有绿色芽点;2,4-D与KT组合也可诱导形成愈伤组织,但愈伤组织的生长及疏松度不及2,4-D与6-BA组合效果明显;NAA与6-BA,NAA与KT组合早期培养时在叶片边缘看到部分愈伤的生长,培养45d后愈伤开始褐化;在基本培养基研究筛选上,MB和B_5均能诱导愈伤组织,愈伤组织颜色稍显淡绿。2,4-D有利于白刺花愈伤组织的诱导,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖4%+琼脂0.7%,出愈率75.58%,愈伤组织出愈早,疏松,生长旺盛。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1)最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+香蕉泥100g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+香蕉泥100g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1),培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

富花青素紫色番茄组织培养再生体系的建立

以樱桃型紫色番茄"砚紫1号"种子为试材,通过无菌处理获得无菌苗,用无菌苗的幼嫩子叶为外植体,研究了诱导愈伤组织分化及生根情况,以期建立高效的离体培养再生体系。结果表明:紫色番茄无菌苗子叶在MS+IAA 0.1mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)培养基条件下的愈伤组织诱导状态最佳;将愈伤组织进行暗培养处理,可诱导愈伤产生不定芽,其中最佳的培养基条件是MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+6-BA 2.0mg·L~(-1);诱导再生的不定芽经过2周光培养接种至MS+NAA 0.05mg·L~(-1)培养基中,诱导生根良好,可获得完整的再生植株。     

不同浓度激素配比对重唇石斛组织培养的影响

以重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)成熟种子为外植体,MS为基本培养基,研究了植物生长调节素种类及浓度对重唇石斛继代增殖和生根的影响。结果表明:重唇石斛最佳的启动培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)。利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.2mg·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1),最佳的生根壮苗培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 2.0mg·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1),平均根长3.12cm,生根率达到90%以上。     

美国红枫的组织培养与快繁技术

以美国红枫腋芽茎段为外植体,采用组织培养方法,研究了不同激素配比对美国红枫无菌体系的建立、启动、增殖、壮苗培养、试管苗生根移栽的影响。结果表明:带腋芽茎段最佳消毒方式为以70%酒精浸泡30s,1%升汞消毒6min,成活率和抽芽率最高,分别达到75.22%和95.13%;NAA对启动培养的影响大于6-BA,接种于培养基MS+NAA 0.05mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)中的外植体诱导率最高,为62.80%,培养基及激素的最佳配比为NN69+2,4-D0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),诱导率达到80.21%;增殖培养阶段的最佳培养基为NN69+NAA 0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),增殖系数为4.2;MS+2,4-D 0.1mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)能有效促进小苗的生长;生根培养最适培养基MS+NAA 0.1mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1),生根率达99.8%,生根条数达7.9,根长达6.5cm;练苗后移栽到蛭石+珍珠岩(1∶1)基质中,移栽成活率为75.2%。     

均匀设计法优化人参叶片愈伤组织诱导培养基

以人参叶片为试材,MS为基本培养基,采用均匀设计和DPS软件分析的方法,研究了2,4-D、KT、NAA、6-BA等4种不同激素组合对人参愈伤组织诱导的影响,以期筛选出诱导人参叶片愈伤组织的最佳激素组合。结果表明:人参叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2mg·L-1+NAA 0.66mg·L~(-1)+KT 1.0mg·L~(-1)。验证试验表明,在添加最佳激素组合的MS培养基中接种新的叶片外植体,30d后愈伤组织诱导率为93%,单个叶片外植体上愈伤组织小块平均数达1.82.     

半夏组织培养体系的建立

以半夏块茎和顶芽为试材,对顶芽愈伤组织诱导、顶芽愈伤组织不定芽分化、块茎不定芽分化和不定芽诱导生根的最佳条件进行了研究.结果表明:半夏最佳顶芽愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳顶芽愈伤组织不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L;最佳半夏块茎不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳不定芽诱导生根培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L.     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L~(-1)+IBA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_(炉渣)∶V_(原土)∶V_(腐殖土)=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

金叶锦带组培技术

以金叶锦带的腋芽为外植体,采用组织培养法,通过在培养基中添加不同浓度激素,筛选最佳培养基,为金叶锦带的大面积推广提供技术支撑。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.6mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),诱导率达86.3%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+1.0 mg·L~(-1) GA3+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),增殖系数7.250 6;最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg·L~(-1) IBA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),生根率100.0%。     

不同激素对“五彩珍珠”番茄再生体系的影响

以"五彩珍珠"番茄为试材,选取6d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同激素浓度及配比对番茄愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响,以建立番茄再生体系。结果表明:诱导"五彩珍珠"番茄愈伤组织的最佳培养基为MS+0.4mg·L~(-1)IAA+2.0mg·L~(-1)6-BA,其子叶的诱导率为100%,下胚轴的诱导率为95%;不定芽分化的最佳培养基为MS+0.2mg·L~(-1) IAA+(1.0~3.0)mg·L~(-1) 6-BA;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.10mg·L~(-1)NAA。子叶为最佳外植体,其不定芽的分化率及生长情况均优于下胚轴。     

扶芳藤组织离体培养的研究

以扶芳藤带芽茎段为外植体,基本培养基为MS,附加不同浓度的6-BA、2,4-D、IBA和NAA.最佳愈伤组织诱导培养基为:MS 6-BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.05 mg/L;最佳芽诱导培养基为:MS 6-BA 1.4 mg/L;再生苗增殖的培养基为:MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1mg/L.生根采用试管外盆插生根的方法.     

红金银花茎段愈伤组织的诱导

以红金银花当年生幼嫩茎段为试材,采用正交实验设计,研究了红金银花愈伤组织诱导和增殖培养的影响因素。结果表明:6-BA、KT促进了愈伤组织的诱导,提高了出愈率;当NAA、KT分别为0.4、1.0mg·L~(-1)时最有利于愈伤组织的增殖培养。不同季节外植体愈伤组织诱导效果不同,春季采集的当年生的幼嫩茎段更有利于愈伤组织的诱导;MS培养基中添加6.5mg·L~(-1)琼脂比较适宜;红金银花愈伤组织诱导最适宜的培养基为MS+KT 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1);愈伤组织增殖培养最适宜的培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1)。     

山杏愈伤组织诱导及植株再生

以山杏成熟胚和胚乳为外植体,以MS为基本培养基进行组织培养,研究了基于山杏经愈伤组织途径建立的再生植株技术。结果表明:以胚乳为外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA)1.0mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;愈伤组织的继代及分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;以成熟胚诱导愈伤组织和丛生芽增殖分化培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L。     

苦瓜下胚轴的离体再生体系

为了建立高频的苦瓜离体再生体系,为苦瓜遗传转化提供技术基础,筛选了最适消毒方法和外植体类型。以MS培养基为基础培养基,添加不同浓度激素组合,筛选最适于苦瓜不定芽诱导、伸长和生根的培养基。最佳的消毒方法为:用水浸泡去壳的种子15 min,在超净工作台中用75%酒精浸泡30 s后再用4%NaClO浸泡6 min,用无菌水冲洗4～5遍,污染率为0,发芽率为98%;最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2.5 mg·L~(-1)6-BA+0.01 mg·L~(-1)IBA,愈伤组织密度为0.79 g·cm~(-3),不定芽的分化率为39%,最佳外植体为下胚轴(12 d),诱导率为41%;最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.005 mg·L~(-1)IBA;最佳的生根培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)IBA,移栽存活率为74%。初步建立了苦瓜离体再生体系。